¿Cómo hacer Una tinción de gram?
Examinar el resultado
Prepara el microscopio óptico. Identifica las bacterias Gram positivas y Gram negativas. Busca imágenes referenciales. Identifica bacterias Gram positivas por su forma. Identifica bacterias Gram negativas. Evalúa los resultados mixtos. Desecha los materiales.
Coloca el portaobjetos bajo el microscopio óptico. Las bacterias varían en gran medida en tamaño, así que la magnificación total requerida variará de 400x a 1000x. En el extremo más alto de estas magnificaciones, se recomienda usar una lente objetiva con aceite de inmersión para una mayor claridad. Coloca una gota de aceite de inmersión en el portaobjetos, evitando el movimiento durante la aplicación para evitar las burbujas. Mueve el revólver del microscopio de forma que la lente objetiva se posicione en su lugar con un clic, tocando el aceite. El aceite de inmersión solo puede usarse en lentes diseñadas especialmente, no en una lente "seca". Examina el portaobjetos bajo el microscopio óptico. Las bacterias Gram positivas se verán violetas debido al cristal violeta atrapado en sus gruesas paredes celulares. Las bacterias Gram negativas se verán rosadas o rojas, ya que el violeta se enjuagó a través de las delgadas paredes celulares y luego ingresó a ellas el colorante secundario rosado.  Si la muestra es demasiado gruesa, puedes obtener falsos positivos. Tiñe una nueva muestra si todos tus resultados son Gram positivos, para asegurarte de que el resultado sea correcto. Si el decolorante se escurrió por mucho tiempo, puedes obtener falsos negativos. Tiñe una nueva muestra si todos tus resultados son Gram negativos para revisar los resultados dos veces. Si no estás seguro de lo que es una bacteria, busca en colecciones de imágenes referenciales clasificadas por forma y resultado de la tinción de Gram. Puedes encontrar bases de datos en línea en la Base de Datos Nacional de Patógenos Microbianos de los EE. UU., Bacterias en fotos y muchos otros sitios. Para facilitar más la identificación, los ejemplos comunes o importantes para el diagnóstico están clasificados a continuación por estado de Gram y forma. Las bacterias se clasifican más a fondo por su forma bajo el microscopio, más comúnmente como cocos (esféricas) o varas (cilíndricas). Estas son algunas bacterias Gram positivas (teñidas de violeta) comunes clasificadas por forma:   Los cocos Gram positivos generalmente son ya sea estafilococos (que significa cocos en grupos) o estreptococos (que significa cocos en cadenas).  Las varas Gram positivas incluyen los bacilos y las bacterias Clostridium, Corynebacterium y Listeria. Las varas de la especie Actinomyces a menudo tienen ramas o filamentos. Las bacterias Gram negativas (teñidas de rosado) a menudo se clasifican en tres grupos. Los cocos son las bacterias esféricas, las varas son las bacterias largas y delgadas, y las varas cocoides están en un punto intermedio.   Los cocos Gram negativos son más comúnmente la especie Neisseria.  Las varas Gram negativas incluyen las bacterias E. coli, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, Serratia, Proteus, Salmonella, Shigella, Pseudomonas y muchas otras. La bacteria Vibrio cholerae puede aparecer como varas normales o varas curvas.   Las varas Gram negativas "cocoides" (o "cocobacilos") incluyen la Bordetella, Brucella, Haemophilus y Pasteurella. Algunas bacterias son difíciles de teñir con precisión debido a la fragilidad de sus paredes celulares o a cuán cerosas sean. Pueden tener una mezcla de una tinción violeta o rosada en la misma célula o entre diferentes células en la misma muestra. Cualquier muestra de bacteria que tenga más de 24 horas puede tener este problema, pero algunas especies son difíciles de teñir a cualquier edad. Pueden requerir pruebas más especializadas para reducir el número de posibilidades para su identificación, como la tinción de Ziehl-Neelsen, la observación del crecimiento de cultivos, el agar TSI o pruebas genéticas.  Las especies Actinomyces, Arthobacter, Corynebacterium, Mycobacterium y  Propionibacterium se consideran bacterias Gram positivas, pero a menudo aparecen teñidas de forma no concluyente.  Las bacterias pequeñas y delgadas, como las especies Treponema, Chlamydia y Rickettsia, son difíciles de teñir correctamente. Los procedimientos para la eliminación de desechos varían entre laboratorios y según los materiales usados. Normalmente, el líquido en la bandeja para tinción se desecha como residuo peligroso en botellas selladas. Sumerge los portaobjetos en una solución con un 10 % de lejía y luego deséchalos en recipientes para instrumentos afilados.
Examining the Result