Ludzki Scribble (Scrib) jest ewolucyjnie konserwowanym białkiem polaryzacji komórek, ale jego potencjalna rola w nowotworach u ludzi jest kontrowersyjna. Tutaj pokazujemy, że Scrib ulega niemal powszechnej nadekspresji w hodowanych liniach komórek nowotworowych i genetycznie genetycznie odmiennych seriach pacjentów z rakiem w porównaniu z dopasowanymi normalnymi tkankami in vivo. Zamiast asocjacji błonowej obserwowanej w normalnych nabłonkach, Scrib związany z nowotworem Scrib jest nieprawidłowo zlokalizowany i znajduje się głównie w cytozolu. Małe zakłócające RNA w modelowych komórkach gruczolakoraka płuc A549 hamowało migrację komórek w testach gojenia ran. migrację w testach gojenia się ran, hamowało inwazję komórek nowotworowych na Wkładki pokryte Matrigelem i regulowały w dół ekspresję ruchliwości komórek markerów i mediatorów przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego. Dane te ujawniają wcześniej nierozpoznane wykorzystanie Scrib do nieprawidłowej ruchliwości komórek nowotworowych i inwazji, potencjalnie przyczyniając się do progresji choroby u ludzi. --- Podjednostka γ głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC) klasy II, CD74, ulega nadekspresji w znacznym odsetku guzów piersi z przerzutami, ale mechanistyczne podstawy i biologiczne znaczenie tego zjawiska nie są w pełni poznane. nie są w pełni zrozumiałe. Tutaj pokazujemy, że gdy CD74 ulega nadekspresji w ludzkim nowotworowych i nienowotworowych komórkach nabłonkowych, wchodzi w interakcje i zakłóca funkcję Scribble, produktu dobrze znanego genu supresorowego nowotworu. Ponadto, przy użyciu linii komórek nabłonkowych wyrażających CD74 pod kontrolą promotora indukowanego tetracykliną i ilościowej spektrometrii mas o wysokiej rozdzielczości spektrometrii masowej, wykazujemy, że w wyniku nadekspresji CD74, wzór fosforylacji wzór fosforylacji C-końcowej części Scribble ulega specyficznym zmianom. Towarzyszy temu translokacja białka z miejsc kontaktów komórka-komórka w błonie plazmatycznej do cytoplazmy, co prawdopodobnie prawdopodobnie skutecznie zwiększa ruchliwość i inwazyjność komórek nowotworowych. --- Ekspresja małych, niekodujących RNA lub mikroRNA (miR), jest często ulega deregulacji w nowotworach u ludzi, ale sposób, w jaki te szlaki wpływają na postęp choroby jest nadal w dużej mierze nieuchwytny. Tutaj donosimy o miR, miR-296, który jest stopniowo tracony podczas progresji nowotworu i koreluje z przerzutami w raku jelita grubego, piersi, płuc, żołądka, przytarczyc, wątroby i dróg żółciowych. nowotworach. Funkcjonalnie, miR-296 kontroluje globalną sygnaturę genów ruchliwości komórek w komórek nabłonkowych poprzez transkrypcyjną represję modułu plastyczności komórek, Scribble (ang. moduł plastyczności komórek, Scribble (Scrib). Z kolei utrata miR-296 powoduje nieprawidłowo zwiększoną i nieprawidłową lokalizację Scrib w ludzkich nowotworach, co skutkuje przesadną przypadkowej migracji komórek i inwazyjności komórek nowotworowych. Ponowna ekspresja miR-296 w komórkach MDA-MB231 hamuje wzrost guza in vivo. Wreszcie, poziomy miR-296 lub Scrib przewidują nawrót nowotworu u pacjentów z rakiem wątrobowokomórkowym. Dane te identyfikują miR-296 jako globalny represor nowotworowości i odkrywają wcześniej Scrib w progresji nowotworów u ludzi. --- Drosophila Discs large (Dlg), Scribble (Scrib) i Lethal giant larvae (Lgl) działają wspólnie jako regulatory w porozumieniu jako regulatory polaryzacji nabłonka, a ludzkie homologi Drosophila dlg, scrib i lgl są genami związanymi z rakiem. LLGL1, LLGL2 i LLGL3/STXBP5, kodujące odpowiednio LGL1, LGL2 i LGL3/Tomosyn, są ludzkimi homologami ludzkimi homologami genu lgl Drosophila. Tutaj zidentyfikowaliśmy i scharakteryzowaliśmy LLGL4 (znany również jako STXBP5L) gen kodujący białko LGL4, przy użyciu bioinformatycznych. Niescharakteryzowany ludzki cDNA KIAA1006 (AB023223) został wyprowadzony z ludzkiego genu LLGL4. LLGL4 mRNA ulegało ekspresji w nerkach, hipokampie mózgu, a także również w rakowiaku płuc i guzach zarodkowych. Gen LLGL4, składający się z 28 eksonów, został zmapowany do ludzkiego chromosomu 3q13.33. Mysz A830015P08Rik cDNA (NM_172440.1) był skróconym o 3'częściowym cDNA Llgl4. Sekwencja nukleotydów pełnej długości mysiego cDNA Llgl4 została określona in silico przez złożenie A830015P08Rik cDNA, BU609516 EST i dwóch ostatnich eksonów genu Llgl4 w obrębie mysiego klonu genomowego klon genomu RP24-174G4 (AC118742.3). Ludzki LGL4 wykazał 95,8% całkowitej identyczności aminokwasowej identyczność z mysim Lgl4 i 68,4% całkowitej identyczności aminokwasowej z ludzkim LGL3. Domena LGLH1 (kodon 1-11 LGL4), domena LGLH2 (kodon 52-98) i domena LGLH3 (kodon 994-1054) zostały zidentyfikowane jako nowe regiony konserwatywne wśród członków rodziny LGL członków rodziny LGL. LGL1 i LGL2 składają się z domen LGLH1, LGLH2, LGLH3 i pięciu powtórzeń WD40 WD40, podczas gdy LGL3 i LGL4 składają się z domen LGLH1, LGLH2, LGLH3, pięciu powtórzeń WD40 i C-końcowej domeny SNARE wiążącej syntaksynę. Jest to pierwszy raport na temat identyfikacji i charakterystyki ludzkich LLGL4 i mysich Llgl4 genów. --- Informacje o autorze: (1)Cell Cycle and Cancer Genetics, Research Division, Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria Australia. Centre, Melbourne, Victoria, Australia. (2)1] Cell Cycle and Cancer Genetics, Research Division, Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria, Australia. Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria, Australia [2] The Sir Peter MacCallum Department of Onkologii, Melbourne, Victoria, Australia. (3) Cell Signaling and Cell Death Division, The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, Parkville, Victoria of Medical Research, Parkville, Victoria, Australia. (4)1] Sir Peter MacCallum Department of Oncology, Melbourne, Victoria, Australia [2] Translational Research Laboratory, Cancer Therapeutics Program, Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria, Australia. (5)1] Cell Cycle and Cancer Genetics, Research Division, Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria, Australia. Peter MacCallum Cancer Centre, Melbourne, Victoria, Australia [2] The Sir Peter MacCallum Department of Oncology, Melbourne, Victoria, Australia [3] Department of Pathology, University of Melbourne, Parkville, Victoria, Australia of Melbourne, Parkville, Victoria, Australia [4] Department of Molecular Biology i Biochemii, Uniwersytet w Melbourne, Parkville, Wiktoria, Australia. --- Utrata polaryzacji komórkowej jest cechą charakterystyczną nowotworów nabłonkowych. możliwość, że regulatory polarności odgrywają rolę w hamowaniu nowotworzenia. Kompleks Scribble jest jednym z co najmniej trzech oddziałujących ze sobą kompleksów białkowych. kompleksów białkowych, które odgrywają kluczową rolę w ustalaniu i utrzymywaniu nabłonkowego. W ludzkich nowotworach jelita grubego, piersi i endometrium ekspresja białka członka kompleksu Scribble SCRIB jest często nieprawidłowo zlokalizowana i deregulowana. Tutaj, donosimy, że Scrib jest niezbędny dla homeostazy prostaty u myszy. Scrib inicjowała przerost prostaty, podczas gdy ukierunkowana bialleliczna utrata Scrib predysponowała myszy do śródnabłonkowej neoplazji prostaty. Mechanizm, wykazano, że Scrib negatywnie reguluje kaskadę MAPK w celu tłumienia nowotworzenia. Dalsza analiza wykazała, że specyficzna dla prostaty utrata Scrib u myszy u myszy w połączeniu z ekspresją onkogennej mutacji Kras sprzyjała progresję raka prostaty, która odzwierciedla ludzką chorobę. Znaczenie kliniczne znaczenie pracy na myszach zostało podkreślone przez naszą obserwację że deregulacja SCRIB silnie korelowała ze słabym przeżyciem w ludzkim raku prostaty. raka prostaty u ludzi. Dane te sugerują, że sieć polaryzacji może stanowić nową drogę dla interwencji terapeutycznej. --- Aktywujące mutacje w genach szlaku Ras-mitogen-aktywowana kinaza białkowa (MAPK) występują w około 30% wszystkich nowotworów u ludzi; jednak sama mutacja Ras rzadko wystarcza do wywołania rozwoju nowotworu. Scribble jest regulator polaryzacji niedawno wyizolowany z ekranu Drosophila dla zdarzeń, które współpracują z mutacją Ras w celu promowania progresji guza i inwazji komórek. U ssaków ssaków, Scribble reguluje ukierunkowaną migrację komórek i gojenie się ran in vivo; jednak nie zidentyfikowano roli Scribble u ssaków w transformacji onkogennej. transformacji onkogennej. Tutaj pokazujemy, że w ludzkich komórkach nabłonkowych wykazujących ekspresję onkogenów Ras lub Raf, utrata Scribble promuje inwazję komórek przez macierz zewnątrzkomórkową macierz zewnątrzkomórkową w systemie hodowli organotypowej. Co więcej, pokazujemy, że mechanizm w którym to się dzieje, polega na regulacji sygnalizacji MAPK przez Scribble. Tłumienie Tłumienie sygnalizacji MAPK jest wysoce konserwatywną funkcją Scribble, ponieważ zapobiega również defektom rozwoju skrzydeł Drosophila, w których pośredniczy Raf. Nasze dane zidentyfikować Scribble jako ważnego mediatora sygnalizacji MAPK i zapewnić molekularną podstawę dla obserwacji, że ekspresja Scribble jest zmniejszona w wielu inwazyjnych nowotworach u ludzi. --- Po latach szeroko zakrojonych odkryć naukowych wiele dowiedzieliśmy się o sieciach które regulują homeostazę nabłonka. Utrata ekspresji lub funkcjonalnej lub funkcjonalnej aktywności białek adhezji i polarności komórek (w tym PAR, okruchów (CRB) i kompleksów scribble (SCRIB)) jest ściśle związana z zaawansowanymi stadiami progresji nowotworu i inwazyjnością. zaawansowanym stadium progresji nowotworu i inwazyjnością. Jednak kluczowe role tych białek w ze szlakami Hippo i kinazy wątrobowej B1 (LKB1) -AMPK oraz w funkcjonowaniu i proliferacji funkcji nabłonka i proliferacji wskazują, że mogą one być również związane z wczesnymi etapami nowotworzenia. z wczesnymi etapami nowotworzenia. Na przykład, deregulacja adhezji i polaryzacji może powodować nieprawidłowe podziały komórek i zwiększoną samoodnowy dorosłych nabłonkowych komórek macierzystych. W tym przeglądzie podkreślamy niektóre postępy w zrozumieniu, w jaki sposób utrata polarności komórek nabłonkowych przyczynia się do powstawania nowotworów. --- Utrata białek polaryzacji komórek, takich jak Scribble, indukuje nowotwory u Drosophila poprzez promowanie niekontrolowanej proliferacji. U ssaków rola, jaką białka polarności białka odgrywają podczas nowotworzenia nie jest dobrze poznana. Tutaj wykazaliśmy że pozbawienie Scribble w nabłonku sutka zaburza polarność komórek, blokuje trójwymiarową morfogenezę, hamuje apoptozę i indukuje dysplazję in vivo, która po długim okresie utajenia przekształca się w nowotwór. Utrata Scribble współpracuje z onkogenami, takimi jak c-myc, przekształcając komórki nabłonkowe i indukując nowotwory in vivo poprzez blokowanie aktywacji szlaku apoptozy. Podobnie jak zubożenie, nieprawidłowa lokalizacja Scribble z połączenia komórka-komórka była wystarczająca do promowania transformacji komórek. Co ciekawe, spontaniczne guzy sutka u myszy i ludzi u myszy i ludzi posiadają zarówno obniżoną, jak i nieprawidłową lokalizację Scribble. W ten sposób wykazać, że scribble hamuje powstawanie raka piersi i że deregulacja szlaków biegunowości promuje wzrost dysplastyczny i nowotworowy u ssaków poprzez zaburzając morfogenezę i hamując śmierć komórek.
Czy deregulacja SCRIB promuje raka?
Tak, deregulacja bazgrołów promuje raka.