Białko wiążące Ku70 5 (Kub5)-Hera (K-H)/RPRD1B utrzymuje integralność genetyczną poprzez jednocześnie minimalizując trwałe pętle R i promując naprawę podwójnych pęknięć nici DNA (DSB). pęknięć nici DNA (DSB). Zastosowaliśmy tandemowe oczyszczanie powinowactwa - spektrometrię masową, koimmunoprecypitację i chromatografię żelowo-filtracyjną do zdefiniowania kompleksów białkowych wyższego rzędu kompleksów białkowych zawierających białko rusztowania K-H, aby uzyskać wgląd w jego funkcje komórkowe. funkcje komórkowe. Potwierdziliśmy znanych partnerów białkowych (Ku70, RNA Pol II, p15RS) i odkryliśmy kilka nowych powiązanych białek, które funkcjonują w metabolizmie RNA metabolizmie RNA (topoizomeraza 1 i helikazy RNA), procesach naprawy/replikacji DNA (PARP1, MSH2, Ku, DNA-PKcs, białka MCM, PCNA i DNA Pol δ) oraz w procesach metabolizmu białek, w tym w translacji. procesów metabolicznych białek, w tym translacji. Warto zauważyć, że takie podejście pozwoliło nam do zbadania nieprzewidzianego zaangażowania K-H w naprawę niedopasowań DNA (MMR) gdzie zubożenie K-H doprowadziło do jednoczesnego niedoboru MMR i pogorszenia globalnej stabilności mikrosatelitarnej. stabilność mikrosatelitów. Mechanistycznie, niedobór MMR w komórkach pozbawionych K-H był konsekwencją zmniejszonej stabilności podstawowych białek MMR (MLH1 i PMS2) spowodowanej podwyższoną podstawową proteolizą zależną od kaspazy. Leczenie inhibitorem pan-kaspazy przywróciło utratę białek MMR. Odkrycia te stanowią nowy mechanizm nabywania niedoboru MMR/zmian mikrosatelitarnych. Znaczna część nowotworów okrężnicy, endometrium i jajnika wykazuje ekspresję k-h/liczbę kopii i może mieć poważne fenotypy mutatorów z nasilonymi nowotworami złośliwymi, które są obecnie pomijane na podstawie sporadycznych badań przesiewowych MSI+.
Co wiadomo na temat interakcji Kub5-Hera/RPRD1B?
Białko wiążące Ku70 5 (Kub5)-Hera (K-H)/RPRD1B utrzymuje integralność genetyczną poprzez jednoczesne minimalizowanie trwałych pętli R i promowanie naprawy podwójnych pęknięć nici DNA (DSB). Tak więc interakcja Kub5-Hera/RPRD1B odgrywa nową rolę w zachowaniu stabilności genetycznej poprzez regulację naprawy niedopasowań DNA.