UZASADNIENIE: Strukturalna i funkcjonalna integralność śródbłonka ma kluczowe znaczenie dla w utrzymaniu homeostazy naczyniowej i zapobieganiu miażdżycy. Pacjenci z toczniem rumieniowatym układowym (SLE) mają zwiększone ryzyko rozwoju dysfunkcji śródbłonka i przedwczesnej dysfunkcji śródbłonka i przedwczesnej choroby sercowo-naczyniowej. Neutrofile (NET) jest zwiększone w toczniu rumieniowatym układowym i zaproponowano, aby przyczyniać się do uszkodzenia śródbłonka, ale mechanizm pozostaje niejasny. CEL: Określenie mechanizmu, za pomocą którego zwiększone tworzenie NET przez granulocyty przez granulocyty o niskiej gęstości (LDG) w SLE przyczynia się do uszkodzenia śródbłonka i śródbłonka. WYNIKI: Przypuszczalna rola metaloproteinaz macierzy (MMP) uwalnianych przez NET w zmianie funkcjonalnej integralności śródbłonka. MMP-9 eksternalizowana przez LDG tocznia podczas tworzenia NET specyficznie upośledzała mysi aorty zależną od śródbłonka wazorelaksację i indukowaną apoptozę komórek śródbłonka. apoptozę komórek śródbłonka. Dysfunkcja śródbłonka korelowała z aktywacją śródbłonkowej MMP-2 przez MMP-9 obecną w NET, podczas gdy hamowanie aktywacji MMP-2 przywracało przywróciło funkcję zależną od śródbłonka i zmniejszyło cytotoksyczność naczyniową indukowaną przez NET. Ponadto w surowicy SLE zidentyfikowano kompleksy immunogenne złożone z MMP-9 i anty-MMP-9. w surowicy SLE. Kompleksy te, jak również autoprzeciwciała anty-MMP-9, indukowały NETozę i zwiększały aktywność MMP-9. WNIOSKI: Obserwacje te wskazują na aktywację śródbłonkowej MMP-2 przez MMP-9 zawartego w NET jako ważnego gracza w dysfunkcji śródbłonka i MMP-9 jako nowy autoantygen w tru. Wyniki te dodatkowo potwierdzają, że nieprawidłowe tworzenie NET odgrywa patogenną rolę w tru. --- CEL: Zbadanie wpływu wariantu polimorficznego genu metaloproteinazy macierzy metaloproteinazy-3 (MMP-3) na rozwój i przebieg przewlekłej niewydolności serca (CHF) u pacjentów z chorobą wieńcową. niewydolności serca (CHF) u pacjentów z chorobą wieńcową. PRZEDMIOT I METODY: Łącznie 277 pacjentów z klasą czynnościową (NYHA) New York Heart Association (NYHA) w klasie czynnościowej (FC) II-IV CHF. Polimorfizm genetyczny MMP-3 -1171 5A/6A badano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy. Grupa kontrolna obejmowała 136 pacjentów (średni wiek 53,6 ± 4,8 lat) bez objawów chorób układu sercowo-naczyniowego. chorób układu sercowo-naczyniowego. WYNIKI: Częstość allelu 5A i genotypu 5A/5A polimorficznego locus 1171 5A/6A w genie MMP-3 okazała się wyższa u pacjentów z CHF niż w grupie kontrolnej. niż w grupie kontrolnej. Tak więc, zmienność allelu 5A (iloraz szans (iloraz szans (OR), 1,39; 95% przedział ufności (CI): 1,033 do 1,869; p = 0,03) i genotypu 5A/5A (p = 0,03). genotyp 5A/5A (OR, 2,15; 95% CI: 1,131 do 4,070; p = 0,02) był związany ze zwiększonym ryzykiem CHF. ze zwiększonym ryzykiem CHF. Istniały znaczące różnice w częstości alleli alleli i genotypów MMP-3 w odniesieniu do FC CHF. Częstość występowania genotypu 5A/5A była istotnie wyższa u pacjentów z CHF NYHA FC IV niż u pacjentów z CHF NYHA FC II. niż u pacjentów z CHF NYHA FC II (32,8% w porównaniu z 15,2%; p = 0,039). Częstotliwość allelu 5A była istotnie wyższa u pacjentów z CHF IV NYHA FC niż u osób z CHF NYHA FC II (odpowiednio 55,5% i 39,3%; p = 0,019). 0.019). Zatem nosicielstwo allelu 5A i genotypu 5A/5A polimorfizmu 1171 5A/6A w genie MMP-3 jest czynnikiem ryzyka ciężkiej CHF. WNIOSEK: Oznaczenie polimorfizmu MMP-3 -1171 5A/6A może być do wczesnego przewidywania ryzyka rozwoju i ciężkiego przebiegu CHF. rozwoju i ciężkiego przebiegu CHF. --- Metaloproteinazy macierzy zewnątrzkomórkowej (MMP) to rodzina endopeptydaz które do aktywności proteolitycznej wymagają jonów cynku w miejscu aktywnym. Istnieje jest sześciu członków rodziny MMP: matrylizyny, kolagenazy, stromelizyny, żelatynazy, MMP błonowe i inne MMP. Aktywność MMP jest regulowana na poziomie transkrypcji genów, stabilności mRNA, aktywacji proteolitycznej zymogenów, inhibicji aktywnego enzymu i degradacji MMP. Tkankowe inhibitory metaloproteinaz (TIMP) są głównymi wewnątrzkomórkowymi inhibitorami MMP. Komórki gospodarza mogą być stymulowane przez komórki nowotworowe do produkcji MMP przez wydzielane interleukiny, interferony, czynniki wzrostu i induktor metaloproteinazy macierzy zewnątrzkomórkowej (EMMPRIN). MMP są wytwarzane przez komórki nowotworowe, fibroblasty, makrofagi, komórki tuczne, neutrofile polimorfojądrowe (PMN) i komórki śródbłonka (EC). MMP wpływają na wiele etapów rozwoju guza, ułatwiając jego wzrost poprzez promowanie proliferacji, inwazji i migracji komórek nowotworowych, tworzenie nowych naczyń krwionośnych oraz blokowanie apoptozy komórek nowotworowych. MMP mogą promować rozwój guza na kilka sposobów. Degradacja ECM powoduje uwalnianie peptydowych czynników wzrostu. Czynniki wzrostu związane z białkami powierzchniowymi lub wiążącymi mogą być również uwalniane przez MMP. uwolnione przez MMP. MMP mogą pośrednio regulować sygnalizację integryn lub rozszczepiać E-kadheryny, ułatwiając migrację komórek. MMP wspierają przerzuty indukując przemianę przejście nabłonkowe do mezenchymalnego (EMT). MMP wspierają również migrację transendotelialną migrację przezśródbłonkową. MMP wspierają angiogenezę poprzez uwalnianie czynników proangiogennych i degradację ECM w celu wsparcia migracji ECs. Receptory czynników wzrostu na powierzchni komórek są również rozszczepiane przez MMP, co skutkuje zahamowaniem rozwoju guza, podobnie jak uwalnianie czynników antyangiogennych z ECM. --- Metaloproteinaza macierzy-9 (MMP-9) jest wydzielaną glikoproteiną odgrywającą ważną rolę w kształtowaniu macierzy zewnątrzkomórkowej. w kształtowaniu macierzy zewnątrzkomórkowej, a szczegółowe zrozumienie mechanizmu wydzielania mechanizmu wydzielania może pomóc w identyfikacji metod korygowania chorób wynikających z z dysregulacji wydzielania. MMP-9 wydaje się podążać kanoniczną ścieżką wydzielniczą przez cykl kontroli jakości w retikulum endoplazmatycznym (ER) przed transportem prawidłowo sfałdowanego białka do aparatu Golgiego i dalej w celu wydzielania. Poprzez test komplementacji ustaliliśmy, że LMAN1, dobrze zbadana lektyna-nośnik dobrze zbadane białko nośnikowe lektyny, wchodzi w interakcje ze zdolnym do wydzielania N-glikozylowaną MMP-9 w ER, podczas gdy pozbawiona N-glikozylacji MMP-9 z upośledzoną sekrecją nie. W przeciwieństwie do tego, koimmunoprecypitacja wykazała interakcję białkową między LMAN1 i zaburzoną sekrecją MMP-9 z niedoborem N-glikozylacji. Wydzielanie MMP-9 było zmniejszone w linii komórkowej LMAN1 w porównaniu do komórek kontrolnych, potwierdzając funkcjonalną rolę LMAN1. LMAN1. Obserwacje te potwierdzają rolę LMAN1 jako białka nośnikowego lektyny pośredniczącego w wydajnym wydzielaniu MMP-9. --- Informacje o autorze: (1)Department of Biotechnology and Bioinformatics, School of Life Sciences, University of Hyderabad, Hyderabad, Indie; Institute of Tropical Medicine and International Health, Charité Universitätsmedizin Berlin, Berlin, Niemcy; Department of Medicine, Komfo Anoyke Teaching Hospital, School of Medical School of Medical Sciences, Kwame Nkrumah University of Science and Technology, Kumasi, Ghana. (2)Department of Biotechnology and Bioinformatics, School of Life Sciences, University of Hyderabad, Hyderabad, Indie; Institute of Tropical Medicine and International Health, Charité Universitätsmedizin Berlin, Berlin, Niemcy; Department of Medicine, Komfo Anoyke Teaching Hospital, School of Medical Nauk Medycznych, Uniwersytet Nauki i Technologii Kwame Nkrumah, Kumasi, Ghana prakashbabuphanithi@gmail.com. --- Żelatynaza B/matrycowa metaloproteinaza-9 (MMP-9) (EC 3.4.24.35) rozszczepia wiele substratów i jest wytwarzana jako zymogen proMMP-9. substraty i jest wytwarzana przez większość typów komórek jako zymogen, proMMP-9, w kompleksie z tkankowym inhibitorem metaloproteinaz-1 (TIMP-1). z tkankowym inhibitorem metaloproteinaz-1 (TIMP-1). Naturalny proMMP-9 występuje w postaci monomerów, homomultimerów i heterokompleksów, ale nasza wiedza na temat na temat ogólnej struktury monomerów i multimerów proMMP-9 jest ograniczona. My zbadaliśmy biochemiczne, biofizyczne i funkcjonalne właściwości zymogenu i aktywowanych form monomerów i multimerów MMP-9. W przeciwieństwie do konwencjonalnym pojęciem dimerycznej natury homomultimerów MMP-9, wykazujemy że są to trimery wrażliwe na redukcję. Na podstawie informacji z elektroforezy, AFM i TEM, wygenerowaliśmy model struktury 3D trimeru proMMP-9 trimeru. Co ciekawe, trimery proMMP-9 miały 50-krotnie wyższe powinowactwo do TIMP-1 niż monomery. TIMP-1 niż monomery. In vivo odkrycie to znalazło odzwierciedlenie w wyższym stopniu hamowania angiogenezy TIMP-1 indukowanej przez trimery w porównaniu z monomerami. Nasze wyniki pokazują, że trimery proMMP-9 stanowią nowy strukturalny i funkcjonalny funkcjonalną jednostkę, która jest różnie regulowana przez TIMP-1.
Co jest potrzebne, aby białka MMP były funkcjonalne?
Metaloproteinazy macierzy zewnątrzkomórkowej (MMP) to rodzina neutralnych endopeptydaz zależnych od cynku.