Zapalenie jamy ustnej protezy związane z Candida ma wysoki wskaźnik nawrotów. Biofilmy Candida na akrylu protezy są bardziej odporne na leki przeciwgrzybicze niż drożdżaki planktoniczne. drożdżaki planktoniczne. Histatyny, rodzina podstawowych peptydów wydzielanych przez główne gruczoły ślinowe gruczoły ślinowe u ludzi, zwłaszcza histatyna 5, mają znaczące właściwości przeciwgrzybicze. właściwości przeciwgrzybicze. Zbadaliśmy aktywność przeciwgrzybiczą histatyny 5 przeciwko planktonicznym lub biofilmu Candida albicans i Candida glabrata. Biofilmy Candida zostały rozwinięte na krążkach z poli(metakrylanu metylu) i traktowane histatyną 5 (0,01-100 mikroM) lub flukonazolem (1-200 mikroM). Aktywność metaboliczną biofilmów mierzono za pomocą testu redukcji XTT. Aktywność grzybobójcza histatyny 5 przeciwko planktonicznej Candida badano za pomocą testu mikrorozcieńczeń. Biofilm i planktoniczne C. albicans GDH18, UTR-14 i 6122/06 były wysoce podatne na histatynę 5, z 50% RMA (stężenie środka powodujące 50% zmniejszenie aktywności metabolicznej; biofilm) wynoszącym 4,6 +/- 2,2, 6,9 +/- 3,7 i 1,7 +/- 1,5 mikroM, i IC(50) (komórki planktoniczne) 3,0 +/- 0,5, 2,6 +/- 0,1 i 4,8 +/- 0,5, odpowiednio. Biofilmy C. glabrata GDH1407 i 6115/06 były mniej podatne na histatynę 5, z 50% RMA wynoszącym odpowiednio 31,2 +/- 4,8 i 62,5 +/- 0,7 microM, odpowiednio. Planktoniczna C. glabrata była niewrażliwa na histatynę 5 (IC(50) > 100 mikroM). Candida związana z biofilmem była wysoce oporna na flukonazol w zakresie 1-200 mikroM; np. przy 100 mikroM zaobserwowano tylko około 20% inhibicję dla C. albicans. zahamowanie zaobserwowano dla C. albicans i około 30% zahamowanie dla C. glabrata. Wyniki te wskazują, że histatyna 5 wykazuje aktywność przeciwgrzybiczą przeciwko biofilmom C. albicans i C. glabrata rozwiniętym na akrylu protezy. C. glabrata jest znacznie mniej wrażliwa na histatynę 5 niż C. albicans. --- Zbadano grzybobójcze działanie histatyny-5 na 26 izolatów jamy ustnej należących do 5 niealbicans gatunków Candida. Pięćdziesiąt mikroM histatyny-5 zabiło ponad 95% izolatów Candida tropicalis i Candida guilliermondii oraz ponad ponad 90% izolatów Candida parapsilosis i Candida krusei. Jednakże Candida glabrata był mniej wrażliwy na peptyd (średnio 62,9%). Nasze wyniki, wzięte razem, wykazały, że histatyna-5 posiadała aktywność grzybobójczą przeciwko Candida gatunków innych niż C. glabrata. --- Candida albicans i Candida glabrata to dominujące grzyby związane z kandydozą jamy ustnej. kandydozą jamy ustnej. Histatyna 5 (Hst 5) jest małym kationowym ludzkim peptydem ślinowym o wysoką aktywność grzybobójczą wobec C. albicans, jednak wiele szczepów C. glabrata jest opornych. Ponieważ Hst 5 wymaga wiązania grzyba ze ścianą komórkową składniki przed translokacją wewnątrzkomórkową, zmniejszone wiązanie Hst 5 z C. glabrata może być przyczyną jego niewrażliwości. C. glabrata ma wyższe poziomy powierzchniowe poziomy β-1,3-glukanów w porównaniu z C. albicans; jednak te różnice nie wyjaśniały zmniejszonego wychwytu i zabijania Hst 5 u C. glabrata. Podobnie, macierz biofilmu C. glabrata zawierała znacznie wyższe poziomy β-1,3-glukanów w porównaniu z C. albicans, ale nie zmniejszyło to odsetka komórek grzybów Hst 5 w biofilmie. Hst 5 dostaje się do komórek C. albicans przez transportery poliaminowe Dur3p i Dur31p, które nie są scharakteryzowane w C. glabrata. Szczepy C. glabrata wyrażające CaDur3 i CaDur31 miały dwukrotnie wyższą zabijanie i wychwyt Hst 5. Tak więc, ani powierzchnia komórki C. glabrata, ani biofilm macierzy β-1,3-glukanu wpływały na toksyczność Hst 5; raczej kluczowym etapem ograniczającym szybkość etapem ograniczającym jest zmniejszony wychwyt, który można przezwyciężyć poprzez ekspresję białek C. albicans Dur w C. glabrata. --- Częstość występowania rozsianej kandydozy wzrasta. Zajęcie wątroby jest wątroby jest częste, ale rzadko diagnozowane. Autorzy opisują przypadek rozsianej kandydozy Candida glabrata z przerzutami do wątroby. Obecność zmian w wątrobie zdiagnozowano za pomocą tomografii komputerowej i badania parazytologicznego treści ropnia wątroby uzyskanej przez nakłucie-aspirację kierowaną tomografią komputerową. Wynik wynik był korzystny po zastosowaniu amfoterycyny-B (skumulowana dawka 1 g) i flucytozyny. flucytozyny. Aspekty zajęcia wątroby w rozsianej kandydozie są wraz z rolą Candida glabrata w patologii tego typu. --- Niniejsze badanie pokazuje, że szereg podstawowych peptydów przeciwgrzybiczych, w tym ludzka histatyna ślinowa 5, zaprojektowany analog histatyny oznaczony dhvar4 i peptyd peptyd ze skóry żaby, PGLa, są aktywne przeciwko opornym na amfoterycynę B Candida albicans, Candida krusei i Aspergillus fumigatus oraz przeciwko izolatu Candida glabrata opornego na flukonazol. --- Histatyny to grupa małych, kationowych, przeciwgrzybiczych peptydów obecnych w ludzkiej ślinie. ślinie. Poprzednia analiza modelowania molekularnego sugerowała podobieństwo strukturalne między sekwencjami dipeptydowymi Phe14-His15 i His18-His19 w histatynie-5 (Hsn-5; 24-aminokwasowy polipeptyd) i sekwencją mikonazolu (jednego z przeciwgrzybiczych środków terapeutycznych opartych na azolach), co sugeruje, że mechanizmy zabijania Candida albicans przez te dwie cząsteczki mogą być podobne. Aby dalej rozwinąć tę obserwację, wyprodukowaliśmy dwa warianty Hsn-5, w których sekwencje dipeptydowe Phe14-His15 lub His18-His19 zostały zastąpione przez Ala-Ala (F14A/H15A i H18A/H19A) w celu wyeliminowania pierścieni fenylowych i imidazolowych łańcuchów bocznych łańcuchów bocznych i oceniono ich aktywność kandydobójczą wobec C. albicans. Ponadto Ponadto przetestowaliśmy oporne na azole szczepy C. albicans i Candida glabrata pod kątem ich wrażliwości na Hsn-5. Analiza oczyszczonych rekombinowanych białek dla ich aktywności kandydobójczej wykazała, że oba warianty były znacznie mniej skuteczne (stężenia molowe wymagane do zabicia połowy maksymalnej liczby komórek [ED50], około 67 i około 149 mikroM odpowiednio dla F14A/H15A i H18A/H19A) niż niezmieniony Hsn-5 (ED50, około 8 mikroM) w zabijaniu C. albicans, co sugeruje, że dwie sekwencje dipeptydowe sekwencje dipeptydowe są ważne dla aktywności kandydobójczej Hsn-5. Ocena aktywności kandydobójczej Hsn-5 z dobrze scharakteryzowanymi opornymi na azole szczepami C. albicans i C. glabrata sugeruje jednak, że sposób działania histatyn przeciwko Candida różni się od sposobu działania środki przeciwgrzybicze na bazie azoli, ponieważ Hsn-5 zabija zarówno szczepy wrażliwe na azole, jak i szczepy oporne na azole równie dobrze.
W jaki sposób Hst5 (histatyna 5) wpływa na infekcje Candida glabrata?
Ludzkie histatyny ślinowe, w tym histatyna 5 (Hst 5), są małymi białkami kationowymi, które są głównym źródłem grzybobójczej aktywności śliny