MikroRNA-203 (miR-203), posiadający aktywność supresyjną lub promotorową guza, jest regulowany w dół lub w górę w różnych typach nowotworów. Celem Celem tego badania było zbadanie, czy zwiększona ekspresja miR-203 może być wykorzystana jako nieinwazyjny biomarker diagnostyczny i prognostyczny w nabłonkowego raka jajnika (EOC). Przeprowadzono ilościową reakcję PCR w czasie rzeczywistym w celu wykryć poziomy ekspresji miR-203 w tkankach EOC. Poziomy ekspresji miR-203 były znacząco wyższe w tkankach EOC w porównaniu do sąsiadujących tkanek tkanek nienowotworowych (p < 0,001). Wysoką ekspresję miR-203 zaobserwowano w 65,38% (102/156) EOC. Ponadto stwierdzono, że wysoka ekspresja miR-203 była ściśle skorelowana z zaawansowanym stadium FIGO (p < 0,001), wyższym stopniem histologicznym stopniem histologicznym (p = 0,02), zajęciem węzłów chłonnych (p < 0,001) i pozytywnym nawrotem (p < 0,001). (p < 0.001). Co więcej, wysoka ekspresja miR-203 była skorelowana z krótszym przeżyciem całkowitym (p < 0,001) i krótszym przeżyciem wolnym od progresji (p < 0,001) pacjentów z EOC. Co więcej, analiza wieloczynnikowa wykazała, że status ekspresji miR-203 był niezależnym czynnikiem prognostycznym zarówno dla przeżycia całkowitego, jak i przeżycia wolnego od progresji w EOC. Odkrycia te dostarczają przekonujących dowodów po raz pierwszy, że regulacja w górę miR-203 może służyć jako nowy molekularny do przewidywania agresywnej progresji nowotworu i niekorzystnych niekorzystne rokowanie u pacjentów z EOC. --- Ostatnie badania potwierdziły zwiększoną regulację miR-21 w surowicy i jego wartość diagnostyczną i prognostyczną w kilku ludzkich nowotworach złośliwych. W tym badaniu zbadaliśmy poziomy miR-21 w surowicy u pacjentek z nabłonkowym rakiem jajnika (EOC) i zbadaliśmy jego związek z czynnikami kliniczno-patologicznymi i rokowaniem. Wyniki Wyniki wykazały znacznie wyższe poziomy miR-21 w surowicy u pacjentek z EOC niż u zdrowej grupie kontrolnej. Ponadto, zwiększona ekspresja miR-21 w surowicy była skorelowana z zaawansowanym stadium FIGO, wysokim stopniem zaawansowania nowotworu i skróconym całkowitym czasem przeżycia. Wyniki te wskazują, że miR-21 w surowicy może służyć jako nowy marker diagnostyczny i prognostyczny oraz marker diagnostyczny i prognostyczny oraz może być stosowany jako cel terapeutyczny w leczeniu EOC. --- Nabłonkowy rak jajnika (EOC) jest główną przyczyną zgonów wśród nowotworów ginekologicznych. nowotworów ginekologicznych. Pomimo ogromnych wysiłków na rzecz poprawy wczesnego wykrywania i optymalizacji i optymalizacji schematów chemioterapii, wskaźnik 5-letniego przeżycia wynosi tylko 30% dla pacjentek z późnym stadium raka jajnika. Wysoka śmiertelność tej choroby jest wynika z późnej diagnozy w ponad 70% przypadków raka jajnika. Klasa małych niekodujących RNA lub mikroRNA, które regulują ekspresję genów na poziomie posttranskrypcyjnym. poziomie potranskrypcyjnym. Niektóre, ale nie wszystkie, dane wskazywały, że rodzina rodzina miR-200 była rozregulowana w różnych nowotworach złośliwych. W tym badaniu wykazaliśmy, że miR-200a i E-kadheryna były znacząco regulowane w górę w EOC w porównaniu do łagodnych nabłonkowych torbieli jajnika i prawidłowych tkanek jajnika. Jednakże, dalsza stratyfikacja podmiotu wykazała, że poziomy ekspresji miR-200a były znacząco obniżone w grupach późnego stadium (FIGO III+V) i stopnia 3 w porównaniu z wczesnym stadium (FIGO I+II) i grupami stopnia 1 do 2. Podobnie, stosunkowo niskie poziomy miR-200a zaobserwowano w węzłach chłonnych w porównaniu z grupą węzłów chłonnych. Stwierdzono, że ekspresja E-kadheryny była nieobecna w prawidłowej tkance tkance jajnika i często ulegała ekspresji w łagodnych nabłonkowych torbielach jajnika, z brakiem lub niskim poziomem obserwowanym w późnych stadiach raka jajnika. Zaobserwowano istotnie dodatnia korelacja między miR-200a i E-kadheryną w EOC. Dwufazowy dwufazowy wzór ekspresji sugeruje, że poziomy miR-200a mogą służyć jako nowe biomarkerów do wczesnego wykrywania EOC, a miR-200a i E-kadheryna są kandydatami do opracowania nowych metod leczenia raka jajnika. raka jajnika. --- TŁO: Istnieje krytyczna potrzeba ulepszenia markerów diagnostycznych dla surowiczego nabłonkowego raka jajnika o wysokim surowiczego nabłonkowego raka jajnika (SEOC). MikroRNA są stabilne w krążeniu i mogą być użyteczne jako biomarkery złośliwości. Zbadaliśmy czy poziomy mikroRNA w surowicy mogą różnicować kobiety z SEOC o wysokim stopniu złośliwości od dopasowanych wiekowo zdrowych ochotników. METODY: Aby zidentyfikować interesujące mikroRNA, profilowanie ekspresji mikroRNA zostało przeprowadzono na 4 liniach komórkowych SEOC i prawidłowych ludzkich komórkach nabłonka powierzchniowego jajnika komórek. Całkowity RNA został wyekstrahowany z 500 μl podwielokrotności surowicy pobranej od pacjentek z SEOC (n = 28) i dopasowanych wiekowo zdrowych dawczyń (n = 28). Poziomy mikroRNA w surowicy Poziomy mikroRNA w surowicy oceniano za pomocą ilościowego RT-PCR po wstępnej amplifikacji. WYNIKI: mikroRNA (miR)-182, miR-200a, miR-200b i miR-200c wykazywały wysoką nadekspresję w SEOC. nadekspresji w liniach komórkowych SEOC w stosunku do prawidłowych ludzkich komórek nabłonka powierzchniowego jajnika i zostały ocenione w RNA wyekstrahowanym z surowicy jako biomarkery kandydujące. miR-103, miR-92a i miR-638 miały stosunkowo niezmienną ekspresję we wszystkich liniach komórkowych jajnika i we wszystkich liniach komórkowych jajnika, a wraz z małonukleolarną C/D box 48 (RNU48) zostały oceniano w RNA wyekstrahowanym z surowicy jako kandydujące endogenne normalizatory. Nie zaobserwowano korelacji między poziomami w surowicy a wiekiem (zakres wieku 30-79 lat) dla żadnego z tych mikroRNA lub RNU48. Indywidualnie, miR-200a, miR-200b i miR-200c znormalizowane do objętości surowicy i miR-103 były znacząco wyższe w surowicy kohorty SEOC. surowicy kohorty SEOC (odpowiednio P < 0,05; 0,05; 0,0005), a w połączeniu kombinacja miR-200b + miR-200c znormalizowana do objętości surowicy i miR-103 była najlepszym klasyfikatorem predykcyjnym SEOC (ROC-AUC = 0,784). Ten model predykcyjny (miR-200b + miR-200c) został dodatkowo potwierdzony przez pozostawienie jednej walidacji krzyżowej (AUC = 0,784). WNIOSKI: Zidentyfikowaliśmy mikroRNA w surowicy zdolne do odróżnienia pacjentów z SEOC o wysokim stopniu złośliwości od dopasowanych wiekowo zdrowych osób z grupy kontrolnej. Dodanie tych mikroRNA do obecnych schematów testowania może poprawić diagnozę u kobiet z SEOC. --- mikroRNA (miR) to endogenne małe niekodujące RNA, które ulegają nieprawidłowej ekspresji w różnych nowotworach. miR-152 i miR-148a nie zostały kompleksowo zbadane w raku jajnika. kompleksowo badane w raku jajnika. Dlatego celem tego badania było określenie roli miR-152 i miR-148a w nabłonkowym raku jajnika. Całkowity RNA wyekstrahowano z tkanek 78 pacjentek z nabłonkowym rakiem jajnika, 17 prawidłowych tkanek nabłonka jajnika i dwóch linii komórkowych raka jajnika. Stosując ilościowego PCR w czasie rzeczywistym (qRT-PCR), a następnie metody 2-ΔΔCT do obliczenia wyników, stwierdziliśmy, że poziomy ekspresji miR-152 były znacząco obniżone w tkankach raka jajnika w porównaniu do prawidłowych tkanek nabłonka jajnika tkanek nabłonka jajnika (p<0,05). Jednakże, chociaż ekspresja miR-148a była u 65% pacjentek, nie stwierdzono statystycznie istotnej różnicy w ekspresji miR-148a. ekspresji. Stwierdzono silną korelację między ekspresją miR-152 i miR-148a (p<0,001, korelacja Pearsona). Związek między miR-152 lub miR-148a w raku jajnika a cechami kliniczno-patologicznymi, odpowiedzią na terapię i krótkoterminowymi wynikami leczenia. kliniczno-patologicznymi, odpowiedzią na terapię i przeżyciem krótkoterminowym. Wyniki wykazały, że nie istniała żadna korelacja. Ponadto stwierdziliśmy, że zarówno miR-152 i miR-148a były regulowane w dół w liniach komórkowych raka jajnika. Po miR-152 lub miR-148a zostały transfekowane do linii komórkowych raka jajnika, test proliferacji komórek test proliferacji komórek MTT wykazał, że proliferacja komórek została znacząco zahamowana. Podsumowując, miR-152 i miR-148a mogą być zaangażowane w raka jajnika poprzez deregulację proliferacji komórek. Mogą być nowymi biomarkerami do wczesnego wykrywania lub celami terapeutycznymi raka jajnika. raka jajnika. --- CEL: Określenie użyteczności miRNA w surowicy jako biomarkerów nabłonkowego raka jajnika. raka jajnika. METODY: Dwadzieścia osiem pacjentek z potwierdzonym histologicznie nabłonkowym rakiem jajnika z banku tkanek i surowicy. Surowica została pobrana przed do ostatecznej terapii. Do porównania wykorzystano piętnaście niedopasowanych, zdrowych grup kontrolnych. porównania. Surowicę uzyskano od wszystkich pacjentów. RNA ekstrahowano przy użyciu pochodną jednoetapowej metody Trizol. RNA z 9 próbek nowotworowych zostało porównano z 4 normalnymi próbkami za pomocą PCR w czasie rzeczywistym przy użyciu panelu TaqMan Array Human MicroRNA. Dwadzieścia jeden miRNA uległo różnej ekspresji między surowicą a surowicą pacjenta. PCR w czasie rzeczywistym dla 21 poszczególnych miRNA przeprowadzono na pozostałych 19 próbkach nowotworowych i 11 próbkach prawidłowych. WYNIKI: Zidentyfikowano osiem miRNA z pierwotnych dwudziestu jeden, które były znacząco różniły się ekspresją między próbkami nowotworowymi i prawidłowymi przy użyciu metodą porównawczą C(t). MiRNA-21, 92, 93, 126 i 29a były znacząco nadekspresją w surowicy pacjentów z rakiem w porównaniu z grupą kontrolną (p<.01). MiRNA-155, 127 i 99b wykazywały istotnie niższą ekspresję (p<.01). Dodatkowo, miRs-21, 92 i 93 uległy nadekspresji u 3 pacjentów z prawidłowym przedoperacyjnym CA-125. przedoperacyjnym CA-125. WNIOSEK: Wykazaliśmy, że ekstrakcja RNA i późniejsza identyfikacja miRNA z surowicy osób, u których zdiagnozowano raka jajnika, jest wykonalna. raka jajnika jest możliwa. Mikromacierz oparta na PCR w czasie rzeczywistym jest nowym i praktycznym i praktycznym środkiem do przeprowadzania wysokoprzepustowych badań próbek RNA w surowicy. miRNA-21, 92 i 93 są znanymi onkogenami o potencjale terapeutycznym i biomarkerowym. potencjał terapeutyczny i biomarkerowy. --- CEL: MikroRNA (miRNA) to liczna klasa małych niekodujących RNA, które działają jako regulatory genów. działają jako regulatory genów. Ostatnie badania sugerują, że deregulacja miRNA jest jest związana z inicjacją i progresją ludzkiego raka. Jednakże, informacje o miRNA związanym z rakiem są jednak w większości ograniczone do miRNA tkankowego. Celem Celem tego badania było znalezienie specyficznych profili miRNA pochodzących z surowicy raka jajnika w oparciu o badanie porównawcze z wykorzystaniem mikromacierzy miRNA surowicy, tkanek i wodobrzusza. METODY: Od 2 pacjentek z rakiem jajnika i zdrowej grupy kontrolnej, całkowite RNA zostało wyizolowano odpowiednio z surowicy, tkanek i wodobrzusza, a następnie przeanalizowano za pomocą mikromacierzy. mikromacierzy. W ramach badania porównawczego każdej mikromacierzy miRNA, wyodrębniliśmy kilka miRNA wykazujących spójną tendencję regulacyjną we wszystkich 3 próbek i największy zakres zmian w surowicy jako potencjalne biomarkery. Dostępność biomarkerów została potwierdzona za pomocą qRT-PCR u 18 pacjentów i 12 kontroli. kontrolnych. WYNIKI: Spośród 2222 rodzajów całkowitych miRNA zidentyfikowanych w analizie mikromacierzy analizie mikromacierzy, 95 miRNA uległo obniżeniu, a 88 miRNA było w surowicy, tkankach i wodobrzuszu pacjentów z rakiem. Wśród miRNA, które wykazywały stałą tendencję do regulacji we wszystkich próbkach i wykazały ponad 2-krotną różnicę w surowicy, 5 miRNA (miR-132, miR-26a, let-7b, miR-145 i miR-143) określono jako 5 najbardziej znacząco w surowicy pacjentek z rakiem jajnika w odniesieniu do miRNA w grupie kontrolnej. kontrolnych. Cztery miRNA (miR-132, miR-26a, let-7b i miR-145) z 5 wybranych miRNA wybranych miRNA były znacząco podekspresyjne w surowicy pacjentek z rakiem jajnika w qRT-PCR. w qRT-PCR. WNIOSKI: MiR-132, miR-26a, let-7b i miR-145 w surowicy można uznać za potencjalnych kandydatów na nowe biomarkery w surowiczym raku jajnika. Ponadto, surowica miRNA w surowicy jest obiecującym i użytecznym narzędziem do rozróżniania kontroli i pacjentów z surowiczym rakiem jajnika. --- MikroRNA (miRNA) to około 22-nukleotydowe niekodujące RNA, które negatywnie regulują ekspresję genów kodujących białka w sposób specyficzny dla sekwencji poprzez hamowanie translacji lub degradację mRNA. Nasze ostatnie badania wykazały, że miRNA wykazują zmiany genomowe z dużą częstotliwością, a ich ekspresja jest znacznie rozregulowana w raku jajnika, co silnie sugeruje, że miRNA są zaangażowane w inicjację i progresję tej choroby. W niniejszym przeprowadziliśmy mikromacierz miRNA w celu zidentyfikowania miRNA związanych z odpowiedzią na chemioterapię w raku jajnika i odpowiedzią na chemioterapię w raku jajnika i stwierdziliśmy, że ekspresja let-7i była znacząco zmniejszona u pacjentek opornych na chemioterapię (n = 69, P = 0,003). Wynik ten został dodatkowo potwierdzony przez pętlę macierzystą odwrotnej transkrypcji w czasie rzeczywistym (n = 62, P = 0,015). Zarówno utrata funkcji (przez syntetyczny inhibitor inhibitor let-7i) i zysk funkcji (przez retrowirusową nadekspresję let-7i) wykazały, że zmniejszona ekspresja let-7i znacząco zwiększała oporność komórek raka jajnika i piersi na lek chemioterapeutyczny, cis-platynę. Wreszcie, przy użyciu mikromacierzy miRNA, stwierdziliśmy, że zmniejszona ekspresja let-7i była istotnie związana z krótszym czasem przeżycia wolnym od progresji u pacjentek z późnym stadium raka jajnika (n = 72, P = 0,042). To zostało dodatkowo potwierdzone w tym samym zestawie próbek przez pętlę macierzystą w czasie rzeczywistym odwrotnej transkrypcji-PCR (n = 62, P = 0,001) i w niezależnym zestawie próbek przez hybrydyzację in situ (n = 53, P = 0,049). Podsumowując, nasze wyniki silnie sugerują, że let-7i może być stosowany jako cel terapeutyczny do modulowania chemioterapii opartej na platynie i jako biomarker do przewidywania odpowiedzi na chemioterapię i przeżycia u pacjentek z rakiem jajnika. --- CELE: Let-7 to rodzina małych niekodujących RNA regulujących ekspresję wielu genów, które kontrolują ważne aktywności komórkowe. Wykazano, że Let-7 in vitro uwrażliwia komórki nowotworowe na platynę, ale indukuje oporność raka jajnika na paklitaksel. oporność na paklitaksel. Niniejsze badanie ma na celu zbadanie wpływu ekspresji let-7a na wyniki przeżycia pacjentek z nabłonkowym rakiem jajnika (EOC) leczonych różnymi chemioterapiami. METODY: Ekspresję let-7a zmierzono za pomocą qRT-PCR w guzach jajnika u 178 EOC, które otrzymały chemioterapię opartą na platynie z lub bez paklitakselem po operacji. Przeprowadzono analizę przeżycia w celu oceny wpływu let-7a i chemioterapii na wyniki leczenia. WYNIKI: Ekspresja let-7a była wykrywalna w próbkach EOC, ale ekspresja nie była związana ze stadium choroby, stopniem zaawansowania nowotworu, histologią i wynikami usuwania guza WYNIKI. Pacjenci, którzy odpowiedzieli na platynę z paklitakselem, mieli znacząco niższy poziom let-7a niż ci, którzy tego nie zrobili. Analizy przeżycia wykazały, że pacjenci z z wysokim let-7a mieli lepsze przeżycie w porównaniu do tych z niskim let-7a, gdy byli leczeni platyną bez paklitakselu. Współczynniki ryzyka (HR) dla zgonu i i progresji choroby wynosiły 0,52 (95% CI: 0,29-0,96) i 0,48 (0,26-0,89) dla wysokiego poziomu let-7a w porównaniu z niskim let-7a, odpowiednio. Jednakże, gdy pacjenci byli leczeni platyną i paklitakselem, wysoki poziom let-7a wiązał się z gorszym przeżyciem wolnym od progresji i przeżyciem całkowitym. HR dla zgonu i progresji choroby wyniosły odpowiednio 3,87 (95% CI: 1,28-11,66) i 3,48 (95% CI: 1,25-9,67) dla wysokiego poziomu let-7a, gdy w porównaniu z niskim poziomem let-7a. Dalsze badania wykazały, że wśród pacjentów z niskim poziomem let-7a, pacjenci leczeni paklitakselem oprócz platyny przeżyli lepiej niż te leczone bez paklitakselu [skorygowane współczynniki-HR wynosiły 0,31 (95% CI: 0,15-0,66) dla zgonu i 0,40 (95% CI: 0,22-0,75) dla choroby], podczas gdy wśród z wysokim poziomem let-7a, oba rodzaje leczenia nie powodowały różnicy w przeżyciu pacjentów. przeżycia pacjentów. WNIOSKI: Badanie sugeruje, że korzystny wpływ dodania paklitakselu na przeżycie chorych na EOC był istotnie związany z poziomem let-7a i że miRNA, takie jak let-7a, mogą być użytecznym markerem do wyboru chemioterapeutyków w leczeniu EOC. w leczeniu EOC.
Które miRNA mogą być wykorzystywane jako potencjalne biomarkery nabłonkowego raka jajnika?
miR-200a, miR-100, miR-141, miR-200b, miR-200c, miR-203, miR-510, miR-509-5p, miR-132, miR-26a, let-7b, miR-145, miR-182, miR-152, miR-148a, let-7a, let-7i, miR-21, miR-92 i miR-93 mogą być wykorzystane jako potencjalne biomarkery nabłonkowego raka jajnika.