WPROWADZENIE: Receptor farnezoidu X (FXR) jest rosnącym celem dla chorób metabolicznych i zapalnych. i chorób zapalnych. Jako receptor jądrowy, FXR wykazuje wiele efekty fizjologiczne w kontroli transkrypcji kilku genów. Dlatego też syntetycznych ligandów FXR wymaga skomplikowanych systemów testowych in vitro w celu scharakteryzować nowe ligandy i oszacować ich aktywność in vivo. OBSZAR OBJĘTY PRACĄ: Niniejsza praca gromadzi i opisuje opublikowane systemy testowe in vitro dla ligandów FXR, w tym testy funkcjonalne oparte na komórkach, a także testy wiązania testy wiązania. Ocenia również informacje, które mogą być dostarczone przez te testy. OPINIA EKSPERTA: Badania przesiewowe in vitro ligandów FXR powszechnie opierają się na testach genów reporterowych. reporterowych. Dodatkowo, opisano niektóre testy rekrutacji koaktywatorów i w celu scharakteryzowania związków o silnym działaniu wzorzec genów docelowych genów docelowych jest oceniany za pomocą qPCR. W porównaniu do innych receptorów jądrowych, takich jak PPARs różnorodność systemów testowych jest dość niska dla FXR i może ostatecznie nie być wystarczająca do wystarczającego scharakteryzowania kandydatów na leki ukierunkowane na FXR. --- Receptor farnezoidu X (FXR) jest receptorem jądrowym kwasu żółciowego opisanym w badaniach myszy jako supresor nowotworu dla rozwoju gruczolakoraków okrężnicy. gruczolakoraka jelita grubego. Niniejsze badanie bada regulację FXR w rozwoju ludzkiego raka jelita grubego. rozwoju ludzkiego raka okrężnicy. Zastosowaliśmy immunohistochemię FXR w normalnej tkance tkance (n = 238), polipach (n = 32) i gruczolakorakach w stadium I-IV (n = 43, 39, 68 i 9) okrężnicy; RT-ilościowa PCR, macierz białek w fazie odwróconej i analiza Analiza Western blot w 15 liniach komórkowych raka okrężnicy; metylacja promotora NR1H4 i ekspresja mRNA w próbkach raka okrężnicy z The Cancer Genome Atlas; inhibicja metylotransferazy DNA inhibicja metylotransferazy DNA; immunoprecypitacja metylo-DNA (MeDIP); sekwencjonowanie bisiarczynowe sekwencjonowanie; oraz V-Ki-ras2 Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog (KRAS) w celu zbadania regulacji FXR w rozwoju raka okrężnicy. Immunohistochemia i ilościowa RT-PCR ujawniły, że ekspresja i FXR była zmniejszona w zmianach przedrakowych i wyciszona w większości guzów w stadium I-IV. guzów w stadium I-IV. Ekspresja FXR ujemnie korelowała z fosfatydyloinozytolo-4, 5-bisfosforanem 3 kinazy i sygnalizacją przejściem nabłonkowo-mezenchymalnym. Promotor NR1H4 jest metylowany w ~12% przypadków raka jelita grubego. próbek raka jelita grubego w The Cancer Genome Atlas, a wzorce metylacji segregują się z podtypami nowotworów. Zahamowanie metylacji DNA i wyciszenie KRAS zarówno zwiększały ekspresję FXR. Ekspresja FXR jest obniżona na wczesnym etapie raka jelita grubego, a zarówno metylacja DNA, jak i sygnalizacja KRAS mogą być czynnikami przyczyniającymi się do wyciszenia FXR. FXR potencjalnie hamuje przejście nabłonkowo-mezenchymalne i inne onkogenne kaskady sygnalizacyjne, a także przywrócenie aktywności FXR poprzez blokowanie mechanizmów wyciszania lub zwiększenie resztkową aktywność FXR, stanowi obiecujące opcje terapeutyczne dla leczenia raka jelita grubego. --- Dehydrogenazy alkoholowe klasy I (ADH1s) są enzymami ograniczającymi szybkość metabolizmu etanolu i witaminy A (retinolu) w wątrobie. Ponieważ poprzednie badania wykazały, że ludzkie enzymy ADH1 mogą uczestniczyć w metabolizmie kwasów żółciowych, my zbadaliśmy, czy aktywowany kwasem żółciowym receptor jądrowy farnesoid X (FXR) reguluje geny ADH1. W ludzkich hepatocytach, zarówno endogenny zarówno endogenny ligand FXR kwas chenodeoksycholowy, jak i syntetyczny agonista specyficzny dla FXR GW4064 zwiększały ADH1 mRNA, białko i aktywność. Co więcej, nadekspresja konstytutywnie aktywna forma FXR indukowała ekspresję ADH1A i ADH1B, podczas gdy wyciszenie FXR zniosło wpływ agonistów FXR na ekspresję i aktywność ADH1. aktywność. Badania przejściowej transfekcji i testy elektroforetycznego przesunięcia ruchliwości ujawniły funkcjonalne elementy odpowiedzi FXR w proksymalnych promotorach ADH1A i ADH1B. wskazując tym samym, że oba geny są bezpośrednimi celami FXR. Te odkrycia dostarczają pierwszych dowodów na bezpośrednie połączenie sygnalizacji kwasów żółciowych i metabolizmu alkoholu. --- Receptor wątrobowy X-α (LXRα), członek nadrodziny receptorów jądrowych czynników transkrypcyjnych aktywowanych ligandem, reguluje syntezę kwasów tłuszczowych de novo co prowadzi do stymulacji stłuszczenia wątroby. Chociaż resweratrol ma korzystny korzystny wpływ na choroby metaboliczne, nie wiadomo, czy resweratrol wpływa na LXRα-zależną ekspresję genów lipogennych. W tym badaniu zbadano wpływ resweratrolu w lipogenezie, w której pośredniczy LXRα i mechanizm molekularny leżący u jej podstaw. Resweratrol hamował zdolność LXRα do aktywacji elementu regulacyjnego sterolu białka wiążącego sterol-1c (SREBP-1c), a tym samym hamował ekspresję genów docelowych w hepatocytach hepatocytach. Ponadto resweratrol zmniejszał aktywność wiązania DNA LXRα-RXRα i transaktywację lucyferazy LXRE. Wiadomo, że resweratrol aktywuje Sirtuinę 1 (Sirt1) i kinazę białkową aktywowaną AMP (AMPK), chociaż jego dokładny mechanizm działania pozostaje kontrowersyjny. Stwierdziliśmy, że zdolność resweratrolu do represji ekspresji SREBP-1c indukowanej przez T0901317 nie była zależna od AMPK i Sirt1. Powszechnie wiadomo, że stłuszczenie wątroby jest związane z sygnałami przeciwutleniaczami i sygnalizacją redoks. Nasze dane pokazują, że ekspresja Sestrin2 (Sesn2), która jest nowym genem przeciwutleniającym, była znacząco obniżona w wątroby myszy karmionych dietą wysokotłuszczową. Co więcej, resweratrol zwiększał ekspresję Sesn2 ale nie Sesn1 i Sesn3. Nadekspresja Sesn2 tłumiła ekspresję SREBP-1c aktywowanego przez LXRα i aktywność lucyferazy LXRE. Wreszcie, Sesn2 knockdown przy użyciu siRNA zniósł efekt resweratrolu w indukowanej przez LXRα transaktywacji genu lucyferazy FAS transaktywacji genu lucyferazy. Wnioskujemy, że resweratrol wpływa na indukcję genu Sesn2 i przyczynia się do hamowania lipogenezy wątrobowej, w której pośredniczy LXRα. lipogenezę wątrobową. --- Cholangiocyty, komórki wyściełające przewody żółciowe, aktywnie regulują ilość cholesterolu i kwasów żółciowych poprzez ekspresję enzymów i kanałów. cholesterolu i kwasów żółciowych w żółci poprzez ekspresję enzymów i kanałów zaangażowanych w transport i metabolizm cholesterolu i kwasów żółciowych. W niniejszym raporcie opisujemy molekularne mechanizmy regulujące biosyntezę kwasów żółciowych w cholangiocytach. cholangiocytach. Wśród enzymów cytochromu p450 (Cyp) zaangażowanych w biosyntezę kwasów żółciowych biosyntezę kwasów żółciowych, 27-hydroksylaza sterolowa (Cyp27), która jest enzymem ograniczającym szybkość dla kwaśnego szlaku biosyntezy kwasów żółciowych wyrażanego w cholangiocytach. Ekspresja innych enzymów Cyp dla podstawowej biosyntezy kwasów żółciowych była ledwo wykryta. wykryta. Ekspresja Cyp27 była negatywnie regulowana przez hydrofobowy kwas żółciowy przez receptor farnesoidu X (FXR), receptor jądrowy aktywowany przez ligandy kwasów żółciowych. ligandami kwasów żółciowych. Aktywowany FXR wywierał negatywny wpływ poprzez indukowanie ekspresję czynnika wzrostu fibroblastów 15/19 (FGF15/19). Podobnie do jego represyjnej funkcji wobec ekspresji 7α-hydroksylazy cholesterolu (Cyp7a1) w hepatocytach, wydzielany FGF15/19 hepatocytów, wydzielany FGF15/19 wywołał represję Cyp27 w cholangiocytach poprzez interakcję z jego receptorem czynnika wzrostu fibroblastów 4 (FGFR4). Udział FXR i FGFR4 w indukowanej kwasami żółciowymi represji Cyp27 zostały potwierdzone in vivo przy użyciu mysich modeli knockout. Różni się od sygnalizacja w hepatocytach, w której sygnalizacja represji indukowana przez FGF15/19 jest mediowana przez c-Jun N-końcową kinazę (JNK), represja Cyp27 indukowana przez FGF15/19 w cholangiocytach pośredniczyła kinaza p38. Tak więc, wyniki wspólnie sugerują, że cholangiocyty mogą być w stanie aktywnie regulować biosyntezę kwasów żółciowych biosyntezę kwasów żółciowych w cholangiocytach, a nawet hepatocytach poprzez wydzielanie FGF15/19. My sugerujemy obecność wewnątrzwątrobowej pętli sprzężenia zwrotnego za pośrednictwem cholangiocytów w oprócz pętli sprzężenia zwrotnego jelitowo-wątrobowego przeciwko biosyntezie kwasów żółciowych w wątrobie. wątrobie. --- Receptor farnezoidu X (FXR) należy do nadrodziny receptorów jądrowych aktywowanych ligandem. nadrodziny i funkcjonuje jako czynnik transkrypcyjny regulujący transkrypcję wielu genów zaangażowanych w homeostazę kwasów żółciowych, lipoprotein i metabolizm glukozy. W niniejszym badaniu zidentyfikowaliśmy RECK, zakotwiczony w błonie inhibitor zakotwiczony w błonie inhibitor metaloproteinaz macierzy, jako nowy gen docelowy FXR w wątrobie myszy. Stwierdziliśmy, że agonista FXR znacznie zwiększył wątrobową ekspresję mRNA i białka RECK mRNA i ekspresję białka in vivo i in vitro. FXR regulował transkrypcję RECK poprzez bezpośrednie wiązanie z elementem odpowiedzi FXR zlokalizowanym w intronie 1 mysiego genu RECK. Co więcej, agonista FXR odwrócił w wątrobie myszy karmionych metioniną i choliną. dietą z niedoborem metioniny i choliny. Podsumowując, nasze dane sugerują, że RECK jest nowym transkrypcyjnym celem FXR w wątrobie myszy i dostarczają wskazówek do lepszego zrozumienia funkcji FXR w wątrobie. --- Receptor farnezoidu X (FXR) jest receptorem jądrowym, który działa jako czujnik kwasów żółciowych kontrolujący homeostazę kwasów żółciowych. Zbadaliśmy rolę FXR w w regulacji metabolizmu kości. Zidentyfikowaliśmy ekspresję FXR w komórkach kalwarii i szpiku kostnego. szpiku kostnego, która stopniowo wzrastała podczas różnicowania osteoblastycznego in vitro. in vitro. U samców myszy, delecja FXR (FXR(-/-)) in vivo spowodowała znaczne zmniejszenie gęstości mineralnej kości o 4,3% do 6,6% u myszy w wieku od 8 do 20 tygodniach życia w porównaniu z myszami FXR(+/+). Analiza histologiczna odcinka lędźwiowego kręgosłupa wykazała, że niedobór FXR zmniejszył szybkość tworzenia kości, jak również objętość i grubość kości beleczkowej. Ponadto, odporna na winian fosfataza kwaśna (TRACP) kości udowych wykazały, że zarówno liczba osteoklastów, jak i powierzchnia osteoklastów były niższe. liczba i powierzchnia osteoklastów były znacznie zwiększone u myszy FXR(-/-) w porównaniu z myszami FXR(+/+). Na poziomie komórkowym indukcja aktywności fosfatazy alkalicznej aktywność fosfatazy alkalicznej (ALP) była stępiona w pierwotnych komórkach kalwarii u myszy FXR(-/-) w porównaniu z myszami FXR(+/+) w połączeniu ze znaczną redukcją kolagenu typu I kolagenu a1 (Col1a1), ALP i genu czynnika transkrypcyjnego związanego z runtem 2 (Runx2) ekspresji. Hodowle makrofagów pochodzących ze szpiku kostnego myszy FXR(-/-) wykazywały zwiększoną liczbę formacji osteoklastów i ekspresję białka czynnika jądrowego aktywowanych limfocytów T, cytoplazmatycznego 1 (NFATc1). U samic FXR(-/-) myszy, chociaż gęstość mineralna kości (BMD) nie różniła się znacząco od u myszy FXR(+/+), utrata kości była przyspieszona po owariektomii w porównaniu z myszami FXR(+/+). z myszami FXR(+/+). In vitro, aktywacja FXR przez kwasy żółciowe (chenodeoxycholic kwas [CDCA] lub 6-ECDCA) lub agonistów FXR (GW4064 lub Fexaramine) znacząco zwiększone różnicowanie osteoblastyczne poprzez regulację w górę Runx2 i wzmocnioną kinazę regulowaną sygnałem zewnątrzkomórkowym (ERK) i sygnalizację β-kateniny. Agoniści FXR hamowali również różnicowanie osteoklastów z makrofagów szpiku kostnego. makrofagów szpiku kostnego. Wreszcie, podawanie diety farnesolowej (FOH 1%) marginalnie zapobiegało utracie masy kostnej wywołanej owariektomią (OVX) i zwiększało przyrost masy kostnej u rosnących myszy C57BL/6J. Podsumowując, wyniki te sugerują, że FXR pozytywnie reguluje metabolizm kości poprzez oba ramiona szlaków przebudowy kości, tj, tworzenie i resorpcję kości. --- Skuteczność leczenia farmakologicznego w pierwotnych nowotworach wątroby jest ograniczona przez skuteczność mechanizmów chemiooporności już obecnych w hepatocytach. hepatocytach. Rola receptora jądrowego FXR jest niejasna. Chociaż w w nieleczonych guzach wątroby jego ekspresja jest zmniejszona, oporność na leki przeciwnowotworowe jest wysoka. na leki przeciwnowotworowe jest wysoka. Co więcej, leczenie cisplatyną reguluje w górę FXR. FXR. Celem tego badania było zbadanie, czy FXR jest zaangażowany w stymulowanie chemoprotekcji/chemooporności w zdrowych i nowotworowych komórkach wątroby. W ludzkich hepatocytach, aktywacja FXR agonistą GW4064 skutkowała znaczącą ochronę przed toksycznością indukowaną cisplatyną. W ludzkich komórkach hepatoma Alexander, ze znikomą endogenną ekspresją FXR, GW4064 również chronił przed toksycznością indukowaną cisplatyną, ale tylko wtedy, gdy były one wcześniej transfekowane FXR/RXR. Badanie 109 genów potencjalnie zaangażowanych w chemooporność ujawniło, że tylko ABCB4, TCEA2, CCL14, CCL15 i KRT13 były regulowane w górę przez aktywację FXR zarówno w ludzkich hepatocytach, jak i komórkach hepatoma z ekspresją FXR/RXR. komórkach hepatoma. W obu modelach, cisplatyna, nawet przy braku agonistów FXR, takich jak kwasy żółciowe i GW4064, była w stanie regulować w górę geny docelowe FXR, co było spowodowane pośredniczoną przez FXR transaktywacją elementów odpowiedzi w regionie promotora region. Chemoprotekcja zależna od FXR była również skuteczna przeciwko innym związkom uszkadzającym DNA, takim jak uszkadzających DNA, takich jak doksorubicyna, mitomycyna C i dichromian potasu, ale nie przeciwko dichromian potasu, ale nie wobec leków niegenotoksycznych, takich jak kolchicyna, paklitaksel, acetaminofen, artesunat i sorafenib. Podsumowując, zależna i i niezależna aktywacja FXR stymuluje mechanizmy zdolne do zwiększenia chemoprotekcję hepatocytów przed związkami genotoksycznymi i zmniejszać odpowiedź komórek nowotworowych wątroby na niektóre terapie farmakologiczne. --- Trombomodulina (TM) służy jako cząsteczka wazoprotekcyjna na powierzchni komórek śródbłonka naczyniowego (VEC) w celu utrzymania mikrośrodowiska śródbłonka. komórek śródbłonka naczyniowego (VEC) w celu utrzymania mikrośrodowiska śródbłonka poprzez hamowanie proliferacji komórek, adhezji i odpowiedzi zapalnych. Receptor farnezoidu X (FXR), receptor jądrowy (NR) i pierwotnie uważany za czynnik transkrypcyjny aktywowany kwasami żółciowymi, nie tylko reguluje metabolizm homeostazę, ale także wpływa na transport cholesterolu, napięcie naczyniowe i stan zapalny. stan zapalny. Ostatnie badania wykazały, że ekspresja TM jest regulowana w górę przez kilka NR. Nie wiadomo jednak, czy istnieje związek między FXR a TM. Nasze badania wykazały, że ekspresja i aktywność TM były regulowane w górę przez aktywację FXR w VEC. aktywację FXR w VEC. Testy reporterowe wykazały, że aktywacja FXR znacząco zwiększyła aktywność transkrypcyjną promotora ludzkiego genu TM. Elektroforetyczne i testy immunoprecypitacji chromatyny wykazały, że FXR indukował ekspresję TM poprzez wiązanie się z nowym elementem reagującym na FXR (FXRE), motywem DNA IR8 (-503 AGGTCCtcccaaagTGCCCT-484) w regionie promotora genu TM. genu TM. Wyniki te sugerują, że FXR może służyć jako nowy molekularny cel do manipulowania ekspresją i aktywnością TM w VEC, co może być pomocne w projektowaniu strategii terapeutycznych w leczeniu powiązanych chorób poprzez celowanie w szlak FXR/TM. --- Metabolizm kwasów żółciowych jest ściśle powiązany z kontrolą homeostazy energetycznej oraz metabolizmem glukozy i lipidów. Receptor jądrowy farnezoidu X (FXR) (FXR) odgrywa główną rolę w jelitowo-wątrobowym obiegu kwasów żółciowych, ale wpływ składników odżywczych na homeostazę kwasów żółciowych jest słabo scharakteryzowany. Aktywne metabolicznie hepatocyty radzą sobie ze wzrostem wewnątrzkomórkowego stężenia glukozy kierując glukozę na szlaki magazynowania (glikogen) lub utleniania (glikoliza). (glikoliza), a także do bocznika fosforanu pentozy i biosyntezy heksozaminy. szlak biosyntezy heksozaminy. Tutaj zbadaliśmy, czy glukoza nieutleniający szlak biosyntezy heksozaminy moduluje aktywność FXR. Nasze wyniki pokazują, że FXR oddziałuje i jest O-GlcNAcylowany przez transferazę O-GlcNAc w jego N-końcowej domenie AF1. Zwiększona O-GlcNAcylacja FXR zwiększa ekspresję genu FXR i stabilność białka w sposób specyficzny dla typu komórki. Wysokie stężenia glukozy zwiększyły O-GlcNAcylację FXR, a tym samym jego stabilność białka i aktywność transkrypcyjną poprzez inaktywację kompleksów korepresorowych, które wiążą się w sposób zależny od ligandu z FXR i zwiększone wiązanie FXR z chromatyną. Wreszcie, eksperymenty in vivo z karmieniem na czczo pokazują, że FXR ulega O-GlcNAcylacji w warunkach żywieniowych związanych ze zwiększoną bezpośrednią ekspresją genów docelowych FXR FXR i zmniejszoną zawartością kwasów żółciowych w wątrobie. WNIOSEK: Aktywność FXR jest regulowana przez przepływ glukozy w hepatocytach poprzez bezpośrednią modyfikację potranslacyjną katalizowaną przez biosyntezę glukozy szlak biosyntezy heksozaminy. --- Receptory wątroby X, LXR, są aktywowanymi ligandami czynnikami transkrypcyjnymi, które należą do do nadrodziny receptorów jądrowych grupy H (NR). W tym badaniu, LXR (HrLXR) cDNA został sklonowany z wątrobotrzustki ascidian Halocynthia roretzi i scharakteryzowane w celu zbadania funkcjonalnej ochrony przodków LXR w strunowców. Analiza filogenetyczna HrLXR wykazała, że należy on do grupy LXR, która różni się od LXR kręgowców. Ilościowa analiza PCR w czasie rzeczywistym ujawniła, że mRNA HrLXR ulegało ekspresji głównie w skrzelach i wysoce wyrażone w niezapłodnionych jajach, a następnie a następnie zmniejszała się w późniejszych stadiach embrionalnych i larwalnych. Nieoczekiwanie, HrLXR nie był aktywowany przez GW3965, podczas gdy syntetyczny ligand dla receptora farnezoidu X, GW4064, aktywował HrLXR. Aktywacja ta została zniesiona przez usunięcie 51 aminokwasów z N-końca. W systemie dwuhybrydowym ssaków, HrLXR oddziaływał z HrRXR w obecności GW4064 lub kwasu 9-cis retinowego. Wstrzyknięcie Wstrzyknięcie GW3965 i GW4064 in vivo zwiększyło kasetę wiążącą ATP członka 4 podrodziny G i poziomy mRNA HrLXR w wątrobie i skrzelach. Wyniki te sugerują, że ekspresja mRNA i właściwości transkrypcyjne HrLXR różnią się od właściwości LXR kręgowców, chociaż HrLXR jest prawdopodobnie reaguje na pokrewny ligand NR, GW4064. --- Kwasy żółciowe są metabolitami cholesterolu, które były szeroko badane w ostatnich dziesięcioleciach. ostatnich dziesięcioleciach. Oprócz pełnienia pierwotnej roli w trawieniu i rozpuszczaniu tłuszczu solubilizacji tłuszczów, kwasy żółciowe zostały ostatnio opisane jako cząsteczki sygnalizacyjne zaangażowane w wiele funkcji fizjologicznych, takich jak metabolizm glukozy i energii. metabolizm. Te szlaki sygnałowe obejmują aktywację receptora jądrowego receptora jądrowego farnezoidu X (FXRα) lub receptora sprzężonego z białkiem G TGR5. W tym przeglądzie skupimy się na nowej roli FXRα, sugerując ważne funkcje receptora steroidowego X. funkcje receptora w metabolizmie steroidów. Opisano, że FXRα ulega ekspresji w nadnerczach i jądrach, gdzie wydaje się kontrolować produkcję steroidów. produkcję steroidów. FXRα uczestniczy również w katabolizmie steroidów w wątrobie i zakłóca szlaki sygnałowe steroidów w tkankach docelowych poprzez z receptorami steroidowymi. W tym przeglądzie omawiamy potencjalne wpływ kwasu żółciowego (BA), poprzez jego interakcje z metabolizmem steroidów, na metabolizm glukozy, funkcje seksualne oraz nowotwory prostaty i piersi. Chociaż kilka z opublikowanych raportów opiera się na badaniach in vitro, podkreślają one potrzebę potrzebę zrozumienia interakcji, które mogą wpływać na zdrowie. Efekt ten jest ponieważ poziomy BA są zwiększone w kilku stanach patofizjologicznych związanych z uszkodzeniami wątroby. patofizjologicznych związanych z uszkodzeniami wątroby. Dodatkowo, receptory BA są celem klinicznie za pomocą środków terapeutycznych w leczeniu chorób wątroby, cukrzycy i nowotworów. --- Przeciwutleniacz tempol zmniejsza otyłość u myszy. Tutaj pokazujemy, że tempol zmienia mikrobiom jelitowy poprzez preferencyjne zmniejszenie rodzaju Lactobacillus i jego aktywność hydrolazy soli żółciowych (BSH), prowadząc do akumulacji jelitowej kwasu tauro-β-muricholowego (T-β-MCA). T-β-MCA jest antagonistą receptora jądrowego farnesoid X (FXR) antagonistą receptora jądrowego, który bierze udział w regulacji kwasu żółciowego, metabolizm lipidów i glukozy. Jego zwiększone poziomy podczas leczenia tempolem hamują sygnalizację FXR w jelicie. Specyficzne dla jelit karmionych dietą wysokotłuszczową Fxr-null (Fxr(ΔIE)) wykazują mniejszą otyłość wywołaną dietą, podobną do myszy typu dzikiego leczone tempolem. Ponadto leczenie tempolem nie zmniejsza przyrost masy ciała u myszy Fxr (ΔIE), co sugeruje, że jelitowy FXR pośredniczy w przeciw otyłości tempolu. Badania te wykazują biochemiczny związek między mikrobiomem, sygnalizacją receptorów jądrowych i zaburzeniami metabolicznymi oraz sugerują, że hamowanie FXR w jelicie może być celem dla leków przeciw otyłości. leków przeciw otyłości. --- α-1-kwaśna glikoproteina/orosomucoids (ORMs) są członkami rodziny białek lipokaliny rodziny białek. Kodowane przez 3 polimorficzne geny u myszy (2 u człowieka, 1 u szczura), ORM ulegają ekspresji w hepatocytach i funkcjonują jako białka ostrej fazy wydzielane w osoczu w stresujących warunkach. Oprócz roli nanonośnika, ORM są zaangażowane w kilka procesów patofizjologicznych, takich jak immunosupresja, kardioprotekcja i choroby zapalne jelit. Jądrowy receptor kwasów żółciowych farnesoid X receptor (FXR) reguluje homeostazę kwasów żółciowych oraz metabolizm lipidów i glukozy i jest ważnym modulatorem funkcji jelitowo-wątrobowych. funkcji. Tutaj donosimy, że wątrobowa delecja FXR u myszy wpływa na ekspresję kilku członków rodziny lipokalin, wśród których ORM są zidentyfikowane jako bezpośrednie geny docelowe FXR. Rzeczywiście, element odpowiedzi FXR przed mysiego promotora Orm1, do którego FXR może się wiązać i aktywować ekspresję ORM w wątrobie, ale nie w jelicie krętym. może wiązać się i aktywować ekspresję ORM in vitro i in vivo. Jednakże, ORM są regulowane w sposób specyficzny dla gatunku, ponieważ klaster ORM jest regulowany przez FXR ani w ludzkich, ani w szczurzych liniach komórkowych. Zgodnie z tymi danymi, analiza sekwencjonowania immunoprecypitacji chromatyny analiza sekwencjonowania immunoprecypitacji genomowych miejsc wiązania FXR nie wykazała wykryć żadnego elementu odpowiedzi FXR w pobliżu ludzkiego lub szczurzego klastra genów ORM klastra. Tak więc, kwasy żółciowe i ich receptor jądrowy FXR są regulatorami ekspresji ORM. regulatorami ekspresji ORM, z potencjalnymi implikacjami dla specyficznej dla gatunku kontroli metabolicznej i zapalnej przez FXR, ponieważ ekspresja genów prozapalnych w białej tkance tłuszczowej najądrza była zależna od aktywacji FXR w wątrobie. --- Receptor farnezoidu X (FXR, Nr1h4) i mały partner heterodimeru (SHP, Nr0b2) są receptorami jądrowymi receptory jądrowe, które mają kluczowe znaczenie dla homeostazy wątroby. Indukcja SHP służy jako główny mechanizm FXR w hamowaniu ekspresji genów. Zarówno FXR(-/-) jak i myszy SHP(-/-) rozwijają spontanicznego raka wątrobowokomórkowego (HCC). SHP jest jednym z najsilniej indukowanych genów przez FXR w wątrobie i jest supresorem nowotworu. dlatego postawiliśmy hipotezę, że niedobór SHP przyczynia się do rozwoju HCC w wątrobie FXR. w wątrobach myszy FXR(-/-), a zatem zwiększona ekspresja SHP u myszy FXR(-/-) zmniejsza nowotworzenie wątroby. Aby przetestować tę wygenerowaliśmy myszy FXR(-/-) z nadekspresją SHP w hepatocytach (FXR(-/-)/SHP(Tg)) i określiliśmy udział SHP w rozwoju HCC u myszy FXR(-/-) myszy. Nadekspresja SHP specyficzna dla hepatocytów nie wpłynęła na częstość występowania i wielkość guza wątroby u myszy FXR(-/-). częstość występowania lub rozmiar u myszy FXR(-/-). Jednak nadekspresja SHP prowadziła do niższego stopnia dysplazji, zmniejszonej proliferacji komórek wskaźnikowych i zwiększonej apoptozę. Wszystkie myszy z guzem miały podwyższony poziom kwasów żółciowych w surowicy i IL-6 co było związane z aktywacją wątrobowego STAT3. Podsumowując, SHP częściowo chroni myszy FXR(-/-) przed powstawaniem HCC poprzez zmniejszenie złośliwości guza. złośliwość guza. Jednak zaburzona homeostaza kwasów żółciowych przez niedobór FXR prowadzi do zapalenia i urazów, co ostatecznie prowadzi do niekontrolowanej proliferacji komórek i nowotworzenia. proliferacji i nowotworzenia w wątrobie.
Czy receptor farnesoidu X (FXR) jest receptorem jądrowym?
Tak, receptor farnesoidu X (FXR) jest receptorem jądrowym.