Ocena trafionych chemotypów z badań przesiewowych o wysokiej przepustowości zidentyfikowała nową serię 2,4-dipodstawionych tieno[2,3-c]pirydyn jako inhibitorów kinazy COT. Modyfikacje strukturalne badające SAR w pozycjach 2 i 4 dały w rezultacie o zwiększonej sile działania i aktywności komórkowej. --- Tumor progression loci-2 (Tpl2) (Cot/MAP3K8) jest kinazą serynowo-treoninową w rodzinie MAP3K bezpośrednio przed MEK. Ostatnie badania z wykorzystaniem myszy z nokautem Tpl2 wskazały na ważną rolę Tpl2 w indukowanej przez lipopolisacharyd (LPS) indukowanej produkcji czynnika martwicy nowotworów alfa (TNF-alfa) i innych cytokin prozapalnych zaangażowanych w choroby takie jak reumatoidalne zapalenie stawów. Początkowe tropy 4-anilino-6-aminochinolino-3-węglitrylu wykazywały słabą selektywność dla Tpl2 w stosunku do kinazy receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Wykorzystując modelowanie molekularne modelowanie molekularne i dane krystalograficzne domeny kinazy EGFR z i bez specyficznym dla kinazy EGFR inhibitorem 4-anilinochinazoliny (erlotynib, Tarceva), postawiliśmy hipotezę postawiliśmy hipotezę, że możemy zmniejszyć hamowanie kinazy EGFR poprzez podstawienie w pozycji C-8 naszego 4-anilino-6-aminochinolino-3-karbonitrylu. The 8-podstawione 4-anilino-6-aminochinolino-3-węglitryle zostały przygotowane z odpowiednich 2-podstawionych 4-nitroanilin. Modyfikacje pozycji C-6 i C-8 doprowadziły do identyfikacji związków o zwiększonym hamowaniu uwalniania uwalniania TNF-alfa ze szczurzej i ludzkiej krwi stymulowanej LPS, a te analogi były również wysoce selektywne dla kinazy Tpl2 w stosunku do kinazy EGFR. Dalsze modyfikacje oparte na strukturze i aktywności doprowadziły do identyfikacji 8-bromo-4-(3-chloro-4-fluorofenyloamino)-6-[(1-metylo-1H-imidazol-4-ylo)metyloamino]chinolino-3-karbonitrylu, który wykazał skuteczność in vitro, jak również in vivo w hamowaniu indukowanej przez LPS produkcji TNF-alfa. --- Synteza i badania struktura-aktywność serii 6-podstawionych-4-anilino-[1,7]-naftyrydyno-3-węglitryli jako inhibitorów kinazy kinazy Tpl2. Opisane tutaj wczesne prace eksploracyjne mogą doprowadzić do do odkrycia związków o znaczącym potencjale terapeutycznym w leczeniu reumatoidalnego zapalenia stawów i innych chorób zapalnych. --- Ukierunkowanie na szlaki sygnałowe, w których pośredniczy czynnik martwicy nowotworów (TNF-α), może być obiecującą strategią rozwoju środków obiecującą strategią rozwoju środków chemoprewencyjnych, ponieważ za pośrednictwem TNF-α ekspresja cyklooksygenazy (COX)-2 odgrywa kluczową rolę w stanach zapalnych i kancerogenezie. kancerogenezie. Luteolina [2-(3,4-dihydroksyfenylo)-5,7-dihydroksy-4-chromenon] wywiera działanie przeciwnowotworowe, chociaż niewiele wiadomo na temat podstawowych mechanizmów molekularnych i specyficznych celów mechanizmach molekularnych i specyficznych celach tego związku. W niniejszym badanie wykazało, że luteolina hamowała ekspresję COX-2 indukowaną przez TNF-α poprzez w dół regulując transaktywację czynnika jądrowego-κB i aktywatora białko-1. Ponadto luteolina hamowała indukowaną przez TNF-α fosforylację kinazy białkowej aktywowanej mitogenem / kinazy regulowanej sygnałem zewnątrzkomórkowym (ERK) kinazy 1/ERK/p90(RSK), kinazy białkowej aktywowanej mitogenem 4/c-Jun N-końcowa kinaza/c-Jun i Akt/p70(S6K). Nie miało to jednak wpływu na fosforylację p38. Ten wpływ luteoliny na szlaki sygnałowe, w których pośredniczy TNF-α szlaki i ekspresja COX-2 są podobne do tych osiąganych przez blokowanie guza progresja locus 2 kinazy serynowo-treoninowej (TPL2) przy użyciu farmakologicznych inhibitory i małe interferujące RNA. Luteolina hamowała aktywność TPL2 in vitro oraz w testach kinazy immunoprecypitacyjnej TPL2, wiążąc się bezpośrednio w sposób sposób konkurencyjny wobec ATP. Ogólnie rzecz biorąc, wyniki te wskazują, że luteolina wywiera silne działanie chemoprewencyjne, którego głównym celem jest TPL2. --- Aktywacja kinaz białkowych aktywowanych mitogenami (MAPK) jest krytycznie zaangażowana w zdarzenia zapalne poprzez pośredniczenie w produkcji różnych cytokin zapalnych. cytokin zapalnych. Tpl2 (tumor progression locus 2) -MEK (MAPK/ERK kinaza)-ERK (kinaza regulowana sygnałem zewnątrzkomórkowym) odgrywa istotną rolę w produkcji odgrywa istotną rolę w produkcji czynnika martwicy nowotworów alfa (TNFalfa) w makrofagach stymulowanych lipopolisacharydem (LPS). Tutaj badaliśmy molekularne mechanizmy molekularne mechanizmy produkcji TNFalfa za pośrednictwem Tpl2 przy użyciu silnego inhibitora kinazy Tpl2 inhibitora kinazy Tpl2, 1,7-naftyrydyno-3-karbonitrylu i komórek RAW264.7 stymulowanych LPS. komórek. Inhibitor ten był skuteczny w hamowaniu aktywności kinazy Tpl2 in vitro i powodował znaczne zmniejszenie produkcji TNFalfa poprzez specyficzną fosforylacji MEK i ERK, ale nie fosforylacji p38 i c-Jun N-końcowej kinazy c-Jun (JNK). Inhibitor p38, SB203580, również hamował produkcję TNFalfa w sposób zależny od dawki. Chociaż poziom mRNA TNFalfa nie został zmieniony przez żaden z inhibitorów żaden z inhibitorów, inhibitor Tpl2 zwiększył poziom jądrowego mRNA TNFalfa, jednocześnie zmniejszając poziom w cytoplazmie. Białko związane z końcówką (TAP), kluczowa cząsteczka kluczowa cząsteczka w transporcie nukleocytoplazmatycznym mRNA TNFalfa, była regulowana w górę przez LPS, ale wzrost ten był osłabiony przez inhibitor Tpl2. We wszystkich przypadkach, SB203580 był bez efektu w obecności LPS. Wyniki te sugerują, że indukowana przez LPS produkcja TNFalfa za pośrednictwem szlaku sygnałowego Tpl2-MEK-ERK jest regulowana przez zmianę poziomu TAP na poziomie transportu nukleocytoplazmatycznego. Wyniki te poprawiają zrozumienie mechanizmów regulacyjnych TNFalfa i mogą zapewnić nową strategię terapeutyczną przeciwko chorobom zapalnym. --- Tpl2 (cot/MAP3K8) jest kinazą upstream MEK w szlaku ERK. Odgrywa ona ważną rolę w produkcji i sygnalizacji czynnika martwicy nowotworów alfa (TNF-alfa). sygnalizacji. Odkryliśmy, że 8-halo-4-(3-chloro-4-fluoro-phenylamino)-6-[(1H-[1,2,3]triazol-4-ylmethyl)-amino]-quinoline-3-carbonitriles (4) są silnymi inhibitorami tego enzymu. W celu poprawy hamowania produkcji TNF-alfa w ludzkiej krwi stymulowanej LPS, seria analogów z a z różnymi podstawieniami wokół grupy triazolowej. Odkryliśmy, że cykliczna grupa aminowa dołączona do pierścienia triazolowego może znacznie zwiększyć siłę działania, rozpuszczalność w wodzie i przepuszczalność błony komórkowej. Optymalizacja tych cyklicznych grup aminowych doprowadziła do identyfikacji 8-chloro-4-(3-chloro-4-fluorofenyloamino)-6-((1-(1-etylopiperydyn-4-ylo)-1H-1,2,3-triazol-4-ylo)metyloamino)chinolino-3-karbonitrylu (34). W modelu zapalenia szczurów stymulowanym LPS, związek 34 wykazał dobrą skuteczność w hamowaniu produkcji TNF-alfa. --- COT (Tpl2 u myszy) jest serynowo-treoninową kinazą MAP3, która reguluje produkcję TNF-alfa i innych cytokin prozapalnych, takich jak IL-1beta, poprzez szlak kinazy ERK/kinazy MAP. Ponieważ TNF-alfa i IL-1beta są klinicznie potwierdzonymi klinicznie potwierdzonymi celami interwencji terapeutycznej w reumatoidalnym zapaleniu stawów (RZS), blokowanie COT stanowi potencjalną drogę do poprawy choroby. Poniżej opisujemy identyfikację aktywnego komórkowo selektywnego małocząsteczkowego inhibitora kinazy COT kinaza.
Jakie są znane inhibitory białka TPL2/MAP3K8?
Pochodne [1,7]naftyrydyno-3-karbonitrylu i chinolino-3-karbonitrylu były pierwszymi inhibitorami kinazy Tumor Progression Loci-2 (Tpl2). Wiadomo również, że 4-alkiloamino-[1,7]naftyrydyno-3-karbonitryle hamują funkcję Tpl2, a także pochodne chinolino-3-karbonitrylu, tieno[3,2-d]pirymidyny i 2,4-dipodstawione tieno[2,3-c]pirydyny, indazole, 4-alkiloamino-[1,7]naftyrydyno-3-węglitryle i ogólnie cząsteczki należące do szerokiej kategorii chinolino-3-węglitryli, indazoli i tienopirymidyn.