Dasatinib (BMS-354825) jest inhibitorem kinazy tyrozynowej Src/ABL obecnie zatwierdzonym do leczenia przewlekłej białaczki szpikowej. do leczenia przewlekłej białaczki szpikowej. Dasatinib ma zwiększoną siłę działania wobec ABL w porównaniu z obecną terapią imatynibem i jest skuteczny w wielu przypadkach, w których choroba jest oporna na imatynib. Dasatynib hamuje również wiele kinazy tyrozynowe z rodziny Src. W niniejszym badaniu wykazaliśmy, że dasatynib jest w stanie blokować funkcję normalnych ludzkich limfocytów T in vitro w klinicznie istotnych stężeniach. klinicznie istotnych stężeniach. Funkcje komórek T, w tym proliferacja, aktywacja i produkcja cytokin były równomiernie hamowane w obecności dazatynibu. dazatynibu. Wykazaliśmy również zahamowanie sygnalizacji TCR poprzez kinazę LCK z rodziny Src i przewidzieliśmy, że hamowanie LCK i innych kinaz zaangażowanych w sygnalizację komórek T przez dasatynib jest odpowiedzialne za tłumienie funkcji komórek T. funkcji komórek T. Odkrycia te budzą obawy o potencjalne hamowanie komórek T u pacjentów przyjmujących dasatynib i sugerują możliwość jego zastosowania w w leczeniu zaburzeń immunologicznych, w których pośredniczą komórki T. --- Regulacyjne limfocyty T CD4+CD25+ (Treg) mogą wpływać na różne odpowiedzi immunologiczne. Niewiele wiadomo na temat wpływu inhibitora kinazy Abl/Src dasatynibu na limfocyty Treg Treg, które regulują odpowiedź immunologiczną przeciwko nowotworom/białaczce. Niniejsze badanie wykazało, że dasatynib hamował proliferację limfocytów Treg i CD4+CD25- T w sposób zależny od dawki, co było związane ze zmniejszoną produkcją odpowiednich cytokin. produkcją odpowiednich cytokin. Leczenie limfocytów Treg dazatynibem hamowało zdolność supresyjną limfocytów Treg. Mechanizmy tego hamowania obejmowały zatrzymanie komórek w fazie G0/G1 cyklu komórkowego, regulację w dół czynnika transkrypcyjnego forkhead box P3, indukowanego glukokortykoidami receptora czynnika martwicy nowotworu receptora czynnika martwicy nowotworów i białka 4 związanego z cytotoksycznymi limfocytami T, jak również hamowanie zdarzeń sygnalizacyjnych przez Src i czynnik jądrowy kappaB. Dasatynib wykazał hamujący wpływ na proliferację i funkcję zarówno Tregs, jak i CD4+CD25- T w terapeutycznie istotnych stężeniach leku. Kliniczne podawanie dasatynibu może wpływać nie tylko na efekt przeszczep przeciwko białaczce, ale także choroba przeszczep przeciwko gospodarzowi u pacjentów otrzymujących dasatynib po allogenicznym przeszczepie komórek macierzystych i/lub infuzji limfocytów dawcy limfocytów dawcy, ponieważ funkcja zarówno limfocytów Treg, jak i efektorowych limfocytów T jest są hamowane w podobny sposób przez dasatynib. --- CEL: Zbadanie hamującego wpływu dazatynibu na proliferację, funkcję i zdarzenia sygnalizacyjne na komórkach CD8+T. MATERIAŁY I METODY: Zastosowano ester bursztynoimidylowy dioctanu karboksyfluoresceiny i 5-bromo-2-deoksyurydynę. 5-bromo-2-deoksyurydynę zastosowano do wykrycia proliferacji i cyklu komórkowego komórek CD8+T traktowanych odpowiednio dazatynibem. Częstotliwość i funkcja wirusowych i specyficznych dla antygenu białaczkowego komórek CD8+T od zdrowych dawców mierzono za pomocą barwienie tetramerem i test ELISPOT. Analizę Western blotting przeprowadzono w celu wykrycia receptora komórek T (TCR), czynnika jądrowego kappa B (NF-kappaB) i Src w komórkach T leczonych dasatynibem lub imatynibem. WYNIKI: Dasatynib hamował proliferację limfocytów T CD8+ w sposób zależny od dawki. sposób, co było związane z niższym wydzielaniem interferonu-gamma i granzymu granzymu B, a także z zatrzymaniem komórek CD8+T w fazie G0/G1 cyklu komórkowego. cyklu komórkowego. Zahamowanie komórek CD8+T wykazano w próbkach krwi pobranych od pacjenta pod wpływem dasatynibu w porównaniu ze stanem komórek T bez dasatynibu. dasatynibu. Western blotting potwierdził, że w efektach tych pośredniczyła obniżenie poziomu fosforylacji cząsteczek z TCR i sygnalizacji kaskady transdukcji sygnału NF-kappaB. Dasatynib okazał się silniejszy niż imatynib na zdarzenia sygnalizacyjne Src i TCR w komórkach T Jurkat. WNIOSEK: Nasze badanie wykazało, że dasatynib upośledzał proliferację i funkcję komórek CD8+T poprzez zdarzenia sygnalizacyjne TCR i NF-kappaB bez indukowania apoptozy. apoptozy. Dlatego dasatynib może zmieniać efekt przeszczep przeciwko białaczce i chorobę chorobę przeszczep przeciwko gospodarzowi po allogenicznym przeszczepie komórek macierzystych podtrzymywanym przez komórki komórki CD8+T. Dasatynib może być również stosowany jako nowy środek immunosupresyjny. --- Dasatynib jest doustnym małocząsteczkowym inhibitorem kinaz tyrozynowych z rodziny Abl i Src (SFK), w tym p56(Lck) (Lck). (SFK), w tym p56(Lck) (Lck). Biorąc pod uwagę kluczowe znaczenie Lck w przekazywaniu sygnałów z kompleksu sygnalizacyjnego receptora komórek T (TCR) i silną zdolność silną zdolność dasatynibu do hamowania aktywności Lck, postawiliśmy hipotezę, że ten środek może zapewnić nową drogę immunomodulacji poprzez ukierunkowane hamowanie sygnalizacji indukowanej antygenem. W tym miejscu pokazujemy, że dasatynib hamuje transdukcję sygnału za pośrednictwem TCR transdukcję sygnału, proliferację komórkową, produkcję cytokin i odpowiedzi limfocytów T in vivo. odpowiedzi komórek T in vivo. Jednak hamowanie, w którym pośredniczy dasatynib, nie indukuje apoptozy, ponieważ efekt jest odwracalny lub może zostać przezwyciężony przez sygnały omijające TCR, takie jak ester forbolu. Transdukcja sygnału i odpowiedzi proliferacyjne odpowiedzi za pośrednictwem IL-2 pozostają zasadniczo niezakłócone, co sugeruje, że dazatynib wykazuje swoistość dla sygnalizacji TCR. Ponadto, dasatynib w połączeniu z cyklosporyną A lub rapamycyną prowadziło do znacznie silniejszego hamowania aktywacji limfocytów T aktywacji limfocytów T, co sugeruje, że ukierunkowane hamowanie Lck może być użytecznym dodatkiem w celu zwiększenia immunomodulacji. W połączeniu z obecnie dostępnymi środkami immunomodulującymi, hamowanie SFK może potencjalnie zwiększyć skuteczność immunomodulacyjną, jednocześnie minimalizując toksyczność poszczególnych środków. --- CEL: Podwójny inhibitor kinazy BCR-ABL/SRC, dasatynib, został wprowadzony do kliniki w celu leczenia przewlekłej białaczki szpikowej i ostrej białaczki limfoblastycznej Ph+. Ponieważ wiadomo, że kinazy SRC odgrywają ważną rolę w fizjologicznej aktywacji limfocytów T aktywacji limfocytów T, przeanalizowaliśmy immunobiologiczny wpływ dasatynibu na funkcję limfocytów T funkcję. Wpływ dazatynibu na wiele funkcji efektorowych komórek T był zbadano w klinicznie istotnych dawkach (1-100 nmol / l); obiecujący inhibitor kinazy tyrozynowej inhibitor kinazy tyrozynowej staurosporynę zastosowano jako komparator. PROJEKT EKSPERYMENTALNY: Oczyszczone ludzkie komórki CD3 + i specyficzne dla wirusa komórki T CD8 + od zdrowych dawców krwi badano bezpośrednio ex vivo; specyficzne dla antygenu potwierdzono w zdefiniowanych klonach komórek T. Wyniki funkcjonalne obejmowały produkcję cytokin (interleukina-2, IFN gamma i czynnik martwicy nowotworów alfa), degranulację (mobilizacja CD107a/b), aktywację (regulacja w górę CD69), proliferacja (rozcieńczenie estru bursztynoimidylowego dioctanu karboksyfluoresceiny), indukcja apoptozy/nekrozy i transdukcja sygnału. WYNIKI: Zarówno dazatynib, jak i staurosporyna hamowały aktywację limfocytów T, proliferację, produkcję cytokin i degranulację w sposób zależny od dawki. sposób. Mechanistycznie, było to pośredniczone przez blokadę wczesnych zdarzeń transdukcji sygnału transdukcji sygnału i nie było spowodowane utratą żywotności komórek T. Ogólnie rzecz biorąc, komórki T wydawały się być bardziej wrażliwe na te efekty niż limfocyty T CD8+, a naiwne limfocyty T T bardziej wrażliwe niż podgrupy komórek T pamięci. Hamujące działanie dazatynibu były tak głębokie, że wszystkie funkcje efektorowe komórek T zostały wyłączone przy terapeutycznie istotnych stężeniach. WNIOSEK: Wyniki te wskazują, że należy zachować ostrożność przy stosowaniu tego leku w warunkach klinicznych. leku w warunkach klinicznych i zapewniają uzasadnienie do zbadania potencjału dasatynibu jako środka immunosupresyjnego w dziedzinie transplantacji i choroby autoimmunologiczne wywołane przez komórki T. --- Dasatynib, podwójny inhibitor kinazy tyrozynowej, jest znany z modulowania lub tłumienia aktywacji komórek T. aktywację i proliferację komórek T. Przedstawiamy serię 8 pacjentów, u których u których rozwinęła się przewlekła limfocytoza obwodowa, zidentyfikowana jako komórki natural killer lub natural killer/T-cells na podstawie ich morfologii dużych ziarnistych limfocytów i profilach immunofenotypowych CD16(+), CD56(+), CD3(-) lub CD3(+), spośród 18 pacjentów leczonych dazatynibem. pacjentów otrzymujących terapię dazatynibem. Wszystkie przypadki, w których wystąpiła limfocytoza limfocytów osiągnęły optymalną odpowiedź molekularną (8/8 w dużych pacjentów z dużymi ziarnistymi limfocytami(+) vs. 3/10 pacjentów z dużymi ziarnistymi limfocytami(-) pacjentów, p=0,002). Test uwalniania (51)Cr wykazał, że cytotoksyczność komórek cytotoksyczność została zwiększona w przypadku dużych ziarnistych limfocytów limfocytów w porównaniu z normalnymi zdrowymi dawcami oraz że cytotoksyczność komórek NK cytotoksyczność u osób reagujących na dazatynib była wyższa niż u osób niereagujących. Podsumowując Podsumowując, niniejsze badanie sugeruje, że naturalni zabójcy lub naturalni zabójcy / komórki T rozwija się w związku z terapią dazatynibem i że limfocytoza dużych ziarnistych limfocytów terapią dazatynibem i że duże ziarniste limfocyty mogą mieć terapeutyczny terapeutyczny wpływ na komórki białaczkowe Ph(+). --- CEL: Dasatinib (BMS-354825) jest małocząsteczkowym inhibitorem kinazy tyrozynowej Src/Abl zatwierdzonym do leczenia przewlekłej białaczki szpikowej. zatwierdzony do leczenia przewlekłej białaczki szpikowej i ostrej białaczki limfoblastycznej ostrej białaczki limfoblastycznej z chromosomem Philadelphia. Członkowie rodziny kinaz Src są zaangażowani w indukcję wrodzonej i adaptacyjnej odporności. odporności. Celem tego badania była ocena hamującego działania dazatynibu na swoistą antygenowo funkcję limfocytów T CD8(+) i CD4(+), jak również na cytokiny komórek cytotoksyczność komórek NK. MATERIAŁY I METODY: Aby ocenić hamowanie przez dasatynib proliferacji limfocytów T specyficznych dla antygenu, transgeniczne limfocyty T CD4(+) i CD8(+) specyficzne dla albuminy jaja kurzego. Endogenne odpowiedzi limfocytów T CD4(+) i CD8(+) określono po immunizacji myszy leczonych dazatynibem lub kontrolnych myszy z niereplikującym się rekombinowanym wirusem. Usunięcie komórek RMA-S, a komórek RMA-S, grasiczaka z niedoborem głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC) klasy I, wrażliwego na lizę komórek NK. komórek NK, analizowano u myszy poddawanych leczeniu dasatynibem. WYNIKI: Dasatynib hamował specyficzną dla antygenu proliferację mysich CD4(+) i transgenicznych limfocytów T CD8(+) in vitro i in vivo. Endogenne specyficzne dla antygenu odpowiedzi przywoławcze komórek pomocniczych T i indukcja cytotoksyczności za pośrednictwem komórek T po immunizacji niereplikującym się rekombinowanym wirusem były również zahamowane. Podobnie jak zdolność komórek NK do eliminacji komórek z niedoborem MHC klasy I in vivo. WNIOSKI: Odkrycia te sugerują, że dasatynib ma potencjał do modulowania odpowiedź immunologiczną gospodarza w dawkach klinicznych i podkreśla zakres zastosowań poza celem zastosowania, np. terapeutyczna immunosupresja w kontekście autoimmunologicznej patogenezy i allogenicznych przeszczepów tkanek.
Czy dasatynib promuje lub hamuje proliferację komórek T?
Dasatynib hamuje proliferację limfocytów T