Białka argonautowe są efektorami interferencji RNA, które funkcjonują w kontekście cytoplazmatycznych kompleksów rybonukleoproteinowych w celu regulacji ekspresji genów. Ciała przetwarzające (PB) i granule stresu (SG) są dwoma głównymi typami kompleksów rybonukleoproteinowych. kompleksów rybonukleoproteinowych, z którymi związane są argonauty. Ukierunkowanie Argonauty do tych struktur wydaje się być regulowane przez różne czynniki. W W niniejszym badaniu wykazaliśmy, że aktywność białka szoku cieplnego (Hsp) 90 jest wymagana do skutecznego kierowania hAgo2 do PB i SG. Co więcej, farmakologiczne hamowanie Hsp90 było związane ze zmniejszonym mikroRNA i krótkimi interferencjami Wyciszanie genów zależne od RNA. Ani Dicer, ani jego kofaktor wiążący TAR RNA (TRBP) wiąże się z PB lub SG, ale co ciekawe, aktywator białka aktywatora białek kinazy białkowej aktywowanej dwuniciowym RNA (PACT), innego kofaktora Dicer jest rekrutowany do SG. Tworzenie PBs i rekrutacja hAgo2 do SGs nie były zależne od ekspresji PACT (lub TRBP). Łącznie nasze dane sugerują że Hsp90 jest krytycznym modulatorem funkcji argonauty. Co więcej, proponujemy że Ago2 i PACT tworzą kompleks, który funkcjonuje na poziomie SG. --- Wcześniej odkryliśmy, że leczenie komórek inhibitorem Hsp90 geldanamycyną (GA) prowadzi do znacznego zmniejszenia liczby ciałek ciał (P-bodies), a także zmienia rozmiar i subkomórkową lokalizację granulek stresowych. Odkrycia te sugerują, że aktywność opiekuńcza Hsp90 jest jest zaangażowana w tworzenie ciałek P i granulek stresowych. Aby zweryfikować te obserwacje, zbadaliśmy, czy inny inhibitor Hsp90, radikol (RA) wpływał na ciałka P i granulki stresu. Leczenie RA zmniejszyło poziom białka klienckiego Hsp90 Argonaute 2 i liczbę ciałek P. Chociaż granulki nadal gromadziły się w komórkach traktowanych RA po szoku cieplnym, były mniejsze i bardziej rozproszone w cytoplazmie niż w komórkach nieleczonych. Ponadto eIF4E i transporter eIF4E zostały selektywnie odłączone od granulek stresu w komórkach traktowanych RA. komórkach traktowanych RA. Obserwacje te były porównywalne do tych uzyskanych po leczenie GA w naszej poprzedniej pracy. Tak więc, doszliśmy do wniosku, że zniesienie Hsp90 wpływa na tworzenie ciałek P i integralność granulek stresowych. i integralność granulek stresowych.
Które białko jest wymagane do rekrutacji Argonaute 2 do granulek stresowych i ciałek P?
Hsp90 reguluje funkcję argonauty 2 i jego rekrutację do granulek stresowych i ciałek P.