Niszczenie kości jest powszechną cechą zapalnego zapalenia stawów i jest wywoływane przez osteoklasty, jedyne wyspecjalizowane komórki przeprowadzające resorpcję kości. Nieprawidłowa ekspresja receptora aktywującego ligand jądrowego czynnika kappa β (RANKL), induktora różnicowania osteoklastów, została powiązana z patologią kości patologią kości i fibroblastów błony maziowej w reumatoidalnym zapaleniu stawów (RZS). W niniejszym kwestionujemy obecną koncepcję, zgodnie z którą wzrost ekspresji RANKL reguluje osteoklastogenezę i niszczenie kości w autoimmunologicznym zapaleniu stawów. autoimmunologicznym zapaleniu stawów. Wyizolowaliśmy ludzkie fibroblasty z RZS, artropatii pirofosforanowej (PPA) i pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów (OA) i przeanalizowaliśmy ich profil ekspresji RANKL/OPG oraz zdolność wydzielanych przez nie czynników do indukowania osteoklastogenezy. Określiliśmy 10-krotny wzrost mRNA i białka RANKL w fibroblastach wyizolowanych od pacjentów z RZS w porównaniu do pacjentów z PPA i OA. Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) od zdrowych ochotników hodowano w obecności RA, PPA i pożywki kondycjonowanej fibroblastów maziowych OA. Różnicowanie osteoklastów oceniano poprzez ekspresję kwaśnej fosfatazy opornej na winian (TRAP), receptora witronektyny (VNR), tworzenie pierścienia F-aktyny i testy resorpcji kości. Tworzenie TRAP(+), VNR(+) wielojądrzastych komórek, zdolnych do tworzenia pierścienia F-aktyny i resorpcji lakunarnej w pożywce kondycjonowanej fibroblastami błony maziowej w obecności osteoprotegeryny (OPG), antagonisty RANKL. Osteoklasty nie tworzyły się w tych hodowlach pod nieobecność czynnika stymulującego kolonie makrofagów (M-CSF). czynnika stymulującego tworzenie kolonii makrofagów (M-CSF). Nasze dane sugerują, że pożywka kondycjonowana czystych hodowli fibroblastów błony maziowej zawiera mediatory stanu zapalnego, które mogą indukować osteoklasty w ludzkich PBMC niezależnie od RANKL. Ponadto hamowanie szlaku TNF lub IL-6 nie było wystarczające do zniesienia osteoklastogennych sygnałów sygnałów pochodzących z fibroblastów mazi stawowej. Podsumowując, nasze dane wyraźnie pokazują, że w zapaleniu stawów istnieją alternatywne szlaki osteoklastogenne zapalenie stawów i umieść fibroblast maziowy jako kluczową komórkę regulatorową w kości i destrukcji kości i stawów, co jest cechą charakterystyczną autoimmunologicznego zapalenia stawów. --- Osteoprotegeryna (OPG) jest wydzielaną glikoproteiną i członkiem nadrodziny receptorów czynnika martwicy nowotworu receptora czynnika martwicy nowotworów. Zwykle działa w przebudowie kości, hamując osteoklastogenezę poprzez interakcję z aktywatorem receptora czynnika jądrowego κB (RANKL). Transglutaminaza-2 (Tgase-2) jest grupą wielofunkcyjnych enzymów, które odgrywają rolę w przerzutach komórek nowotworowych i tworzeniu kości. kości. Jednak związek między OPG i Tgase-2 nie został zbadany. Dlatego zbadaliśmy udział 12-O-tetradekanoiloforbolu 13-octanu w ekspresji OPG w komórkach kostniakomięsaka MG-63. Interleukina-1β w sposób zależny od czasu indukowała ekspresję OPG i Tgase-2 w lizatach komórkowych i mediach komórek MG-63. komórek MG-63 metodą Western blot. Dodatkowe pasmo 110 kda znaleziono w mediach komórek MG-63. 13-octan 12-O-tetradekanoiloforbolu również indukował ekspresję OPG i ekspresję Tgase-2. Jednak pasma 110 kda nie znaleziono w mediach komórek MG-63 traktowanych TPA. komórek MG-63. Cystamina, inhibitor Tgase-2, zależnie od dawki hamowała ekspresję ekspresję OPG w komórkach MG-63. Wyciszenie genu Tgase-2 również znacząco znacząco hamowało ekspresję OPG w komórkach MG-63. Następnie zbadaliśmy, czy pasmo 110 kda OPG zawiera wiązanie izopeptydowe, wskazujące na działanie Tgase-2 za pomocą przeciwciała monoklonalnego specyficznego dla wiązania izopeptydowego. Jednakże nie mogliśmy znaleźć wiązania izopeptydowego przy 110 kda, ale 77 kda, które uważa się za być pozycją pasma Tgase-2. Sugeruje to, że 110 kda nie jest bezpośrednim produktem produkt działania Tgase-2. Podsumowując, OPG i Tgase-2 są indukowane przez IL-1β lub TPA w komórkach MG-63, a Tgase-2 jest zaangażowana w ekspresję OPG w komórkach MG-63. --- TŁO: Oporność na apoptozę jest głównym problemem w raku jajnika (OC) i koreluje ze złym rokowaniem. Osteoprotegeryna (OPG) jest rozpuszczalnym, wydzielanym czynnikiem czynnikiem, który działa jako receptor wabik dla aktywatora receptora ligandu NF-κB (RANKL) i ligandu indukującego apoptozę związanego z czynnikiem martwicy nowotworów (TRAIL). OPG osłabia apoptozę indukowaną TRAIL w różnych komórkach nowotworowych, w tym w komórkach OC. komórkach nowotworowych, w tym komórkach OC. Ochrona przed TRAIL, w której pośredniczy OPG, została przypisuje się jego funkcji receptora wabika. Jednakże, OPG aktywuje integrynę/ogniskową kinazę adhezyjną (FAK) w komórkach śródbłonka. W komórkach OC aktywacja integryny/FAK hamuje apoptozę indukowaną przez TRAIL. Na podstawie tych obserwacje, postawiliśmy hipotezę, że OPG może osłabiać apoptozę indukowaną TRAIL w komórkach OC poprzez sygnalizację integryny/FAK. METODY: Eksperymenty in vitro, w tym immunobloty, testy tworzenia kolonii, i pomiary apoptozy zostały wykorzystane do oceny wpływu OPG na apoptozę indukowaną TRAIL. WYNIKI: Egzogenne OPG chroniło przed apoptozą indukowaną przez TRAIL w sposób niezależny od wiązania TRAIL w sposób niezależny od wiązania TRAIL, a ochrona OPG była zależna od sygnalizacji αvβ3 i αvβ5 integryny/FAK. zależne od sygnalizacji. Co więcej, aktywacja sygnalizacji integryny / FAK za pośrednictwem OPG spowodowała aktywację Akt. Zahamowanie zarówno sygnalizacji integryny/FAK, jak i Akt znacząco hamowało pośredniczone przez OPG osłabienie apoptozy indukowanej przez TRAIL. apoptozę. Chociaż OPG również stymulowało fosforylację ERK1/2, zahamowanie sygnalizacji ERK1/2 nie wpłynęło znacząco na ochronę przed OPG. WNIOSKI: Nasze badania po raz pierwszy dostarczają dowodów na to, że OPG może osłabiać apoptozę indukowaną TRAIL w sposób niezależny od wiązania TRAIL poprzez aktywację sygnalizacji integryna/FAK/Akt w komórkach OC. --- Wykazano, że impulsowe pole elektromagnetyczne (PEMF) zwiększa gęstość mineralną kości u pacjentów z osteoporozą. u pacjentów z osteoporozą i zapobiega utracie masy kostnej u szczurów po usunięciu jajników. Jednak mechanizmy, dzięki którym PEMF wywołuje te korzystne reakcje biologiczne wciąż nie są w pełni poznane. Aktywator receptora czynnika jądrowego κB (RANKL) i osteoprotegeryna (OPG) są cytokinami wydzielanymi głównie przez osteoblasty i odgrywają rolę w utracie kości. przez osteoblasty i odgrywają kluczową rolę w różnicowaniu i funkcjonalnej aktywacji osteoklastów. aktywacji osteoklastów. Celem tego badania było zbadanie wpływu PEMF na ekspresję RANKL i OPG u szczurów po usunięciu jajników. Trzydzieści 3-miesięczne samice szczurów Sprague-Dawley podzielono losowo na trzy grupy: kontrola bez operacji (Sham), kontrola po owariektomii (OVX) i owariektomia z leczeniem PEMF (PEMF). Po 12-tygodniowych interwencjach wyniki wykazały, że PEMF zwiększył poziom 17β-estradiolu w surowicy, obniżył poziom fosfatazy fosfatazy w surowicy, zwiększył gęstość mineralną kości i zahamował pogarszanie się mikroarchitektury i wytrzymałości kości. mikroarchitektury i wytrzymałości kości u szczurów OVX. Ponadto, PEMF może tłumić ekspresję RANKL i poprawiać ekspresję OPG w komórkach szpiku kostnego szczurów OVX szczurów. Podsumowując, badanie to sugeruje, że PEMF może zapobiegać wywołanej owariektomią utracie kości poprzez regulację ekspresji RANKL i OPG. --- Łuski danio pręgowanego składają się z tworzących kości osteoblastów, resorbujących kości osteoklastów i zwapniałej macierzy kostnej. Aby wyjaśnić podstawowy mechanizm molekularny mechanizm efektów indukowanych przez dynamiczne i statyczne przyspieszenie, my zbadaliśmy skalę genów markerowych specyficznych dla osteoblastów i osteoklastów z udziałem cząsteczek komunikacyjnych osteoblast-osteoklast. Osteoblasty RANKL, który wiąże się z receptorem powierzchniowym osteoklastów, RANK, i stymuluje resorpcję kości. stymuluje resorpcję kości. Z drugiej strony, OPG jest wydzielany przez osteoblasty jako receptor wabika dla RANKL, zapobiega wiązaniu RANKL z RANK, a tym samym zapobiega resorpcji kości. zapobiega resorpcji kości. Dlatego też szlak RANK-RANKL-OPG przyczynia się do regulacji osteoklastogenezy przez osteoblasty. Z kolei semaforyna 4D, ulega ekspresji na osteoklastach, a wiązanie z jej receptorem Plexin-B1 na osteoblastach osteoblastach powoduje zahamowanie tworzenia kości. W niniejszym badaniu stwierdziliśmy, że zarówno dynamiczne, jak i statyczne przyspieszenie przy 3,0 × g zmniejszyło stosunek RANKL / OPG i zwiększało funkcjonalne mRNA specyficzne dla osteoblastów, takie jak fosfataza alkaliczna fosfataza, podczas gdy przyspieszenie statyczne wzrosło, a przyspieszenie dynamiczne zmniejszyło mRNA specyficzne dla osteoklastów, takie jak katepsyna K. Przyspieszenie statyczne zwiększało ekspresję mRNA semaforyny 4D, podczas gdy przyspieszenie dynamiczne nie miało wpływu. Wyniki niniejszego badania wskazują, że osteoklasty mają dominującą kontrolę nad metabolizmem kości poprzez ekspresję semaforyny 4D indukowaną przez przyspieszenie statyczne przy 3,0×g.
Czy RANKL jest wydzielany z komórek?
Receptor aktywujący ligand czynnika jądrowego κB (RANKL) jest cytokiną wydzielaną głównie przez osteoblasty.