Szlak sygnałowy Wnt jest ważny dla rozwoju i kancerogenezy. Zmiany w tym szlaku, takie jak mutacje w genie gruczolakowatej polipowatości coli (APC) i mutacje aktywujące beta-kateninę, mogą skutkować stabilizację beta-kateniny i późniejszą translokację do jądra, gdzie następuje transkrypcja genów. geny są transkrybowane. Niedawno stwierdzono, że receptor Wnt, FzE3, jest w raku przełyku, podczas gdy niereceptorowy antagonista Wnt, wydzielane białko związane z frizzled (hsFRP) było regulowane w dół w niektórych nowotworach. raka. Odkrycia te sugerują, że FzE3 jest potencjalnym onkogenem, podczas gdy hsFRP jest potencjalnym genem supresorowym nowotworu. Naszym celem było zbadanie, czy FzE3 i hsFRP były zmienione w raku żołądka. Dwanaście przypadków raka żołądka, w tym 7 przypadków typu jelitowego, 4 przypadki typu rozproszonego i 1 przypadek typu mieszanego, badano. FzE3 i hsFRP mRNA ulegały ekspresji w większości sparowanych prawidłowych tkanek żołądka. tkankach żołądka. FzE3 ulegał nadmiernej ekspresji w 9 przypadkach (75%) tkanek raka żołądka tkanek raka żołądka, podczas gdy hsFRP był regulowany w dół w 2 przypadkach (16%). Barwienie jądrowe beta-kateniny zidentyfikowano w 3 przypadkach (27%), a cyklina D1 uległa ekspresji w 5 przypadkach (41%) próbek raka. Wszystkie te przypadki były związane z podwyższoną regulacją FzE3 lub obniżoną regulacją hsFRP. Nasze wyniki sugerują, że zmiany FzE3 lub hsFRP były częste w raku żołądka. Zapewniają one alternatywne mechanizmy prowadzące do aktywacji szlaku sygnałowego Wnt w raku żołądka. raka żołądka. --- Upośledzenie osteoblastów występuje podczas infiltracji komórek szpiczaka mnogiego do szpiku kostnego. szpiku kostnego. Kanoniczna aktywacja sygnalizacji Wnt w komórkach osteoprogenitorowych jest zaangażowana w tworzenie osteoblastów poprzez stabilizację defosforylowanej beta-kateniny i jej translokację jądrową. Wpływ komórek szpiczaka mnogiego na sygnalizację Wnt w ludzkich komórkach mezenchymalnych/osteoprogenitorowych jest niejasny. U 60 przebadanych pacjentów ze szpiczakiem mnogim stwierdzono, że wśród inhibitorów Wnt, Dickkopf-1 i wydzielane białko związane z frizzled-3 były produkowane przez komórki szpiczaka mnogiego. przez komórki szpiczaka mnogiego. Jednakże, chociaż komórki szpiczaka mnogiego lub osocze szpiku kostnego szpiku kostnego wpływały na ekspresję genów w kanonicznej sygnalizacji Wnt i hamowały stabilizację beta-kateniny w mysich komórkach osteoprogenitorowych, to nie udało się zablokować kanonicznego szlaku Wnt w ludzkich komórkach mezenchymalnych lub komórkach osteoprogenitorowych. Konsekwentnie, stymulacja Wnt3a w ludzkich komórkach osteoprogenitorowych nie stępiła hamującego wpływu komórek szpiczaka mnogiego na tworzenie osteoblastów. tworzenie osteoblastów. W konsekwencji, pomimo wyższego poziomu antagonistów Wnt w szpiku kostnym u pacjentów z osteolitycznym szpiczakiem mnogim w porównaniu z pacjentami nieosteolitycznymi, barwienie immunologiczne beta-kateniny nie różniło się istotnie. Nasze wyniki potwierdzają związek między produkcją antagonistów Wnt przez komórki Wnt przez komórki szpiczaka mnogiego i obecnością zmian kostnych u pacjentów ze szpiczakiem mnogim. pacjentów ze szpiczakiem mnogim, ale pokazują, że komórki szpiczaka nie hamują kanonicznej sygnalizacji Wnt w ludzkim mikrośrodowisku kostnym. kanonicznej sygnalizacji Wnt w ludzkim mikrośrodowisku kostnym. --- Rozszyfrowanie molekularnych podstaw raka ma kluczowe znaczenie dla opracowania nowych strategii diagnostycznych i terapeutycznych. Aby lepiej zrozumieć wczesne molekularne molekularne mięsaka kościopochodnego (OGS), zainicjowaliśmy program mający na celu zidentyfikować potencjalne geny supresorowe nowotworu. Profilowanie ekspresji całkowitego RNA z dziesięciu normalnych linii komórkowych kości i jedenastu linii komórkowych pochodzących z OGS za pomocą mikromacierzy wykazało 135-krotnie niższą ekspresję FRZB/sFRP3 mRNA w komórkach OGS w porównaniu do komórek kostnych; stwierdzono, że ta regulacja w dół ekspresji mRNA Frzb / sFRP3 jest niezależna od surowicy. Następnie, czternaście próbek biopsji OGS wykazało dziewięciokrotną dziewięciokrotnie niższą ekspresję mRNA Frzb/sFRP3 w porównaniu do ekspresji w ośmiu normalnych próbkach kości, jak określono za pomocą mikromacierzy. Poziom białka FRZB /sFRP3 był również również na bardzo niskim poziomie w 4/4 badanych liniach komórkowych OGS. Kwantyfikacja za pomocą RT-PCR wykazała około 70% i około 90% utratę mRNA Frzb/sFRP3 w próbkach z biopsji OGS i liniach komórkowych pochodzących z OGS w porównaniu do ekspresji w kości (p<0,0001). Hybrydyzacja eksperymenty hybrydyzacji mikromacierzy cDNA zawierającej sparowane próbki prawidłowe i nowotworowe z dziewiętnastu różnych narządów nie wykazały żadnej znaczącej różnicy w poziomie Frzb/sFRP. poziomie ekspresji mRNA Frzb/sFRP3 między tkankami prawidłowymi i odpowiadającymi im tkankami nowotworowymi. tkanki nowotworowe. Egzogenna ekspresja mRNA FRZB/sFRP3 w dwóch liniach komórkowych pochodzących z OGS pozbawionych endogennej ekspresji mRNA wytwarzała obfite mRNA z egzogennego genu, eliminując egzogennego genu, eliminując degradację jako możliwość bardzo niskiego poziomu FRZB/sFRP3 w próbkach OGS. Wyniki eksperymentów opartych na PCR sugerują że gen FRZB/sFRP3 nie ulega delecji w liniach komórkowych OGS, jednak kariotypowanie wykazuje poważne nieprawidłowości obejmujące chromosom 2 (lokalizacja genu FRZB) w pięciu z dwunastu linii komórkowych pochodzących z OGS. Łącznie dane te sugerują potencjał przeciwnowotworowy FRZB/sFRP3 w OGS. --- Zdolność Frzb / wydzielanego białka związanego z Frizzled 3 (sFRP3) do hamowania sygnalizacji Wnt i lokalizacja Frzb / sFRP3 na chromosomie 2q do regionu często usuwanego w nowotworach doprowadziło niektórych badaczy do postawienia hipotezy, że Frzb/sFRP3 jest genem supresorowym nowotworu. Tutaj zbadaliśmy efekty biologiczne Frzb/sFRP3 na niezależnym od androgenów modelu komórkowym raka prostaty. Wykazaliśmy że ekspresja Frzb/sFRP3 w komórkach PC-3 skutkowała zmniejszonym tworzeniem kolonii w miękkim agarze i dramatycznym w miękkim agarze i dramatycznym zahamowaniem wzrostu guza w mysim modelu ksenoprzeszczepu. modelu mysim. Gdy zbadano morfologię komórkową, komórki PC-3 wykazujące ekspresję Frzb/sFRP3 wykazywały wzrost tworzenia kontaktów komórka-komórka, czemu towarzyszyła wyraźna indukcja markerów nabłonkowych E-kadheryny i keratyny-8 oraz w dół markerów mezenchymalnych N-kadheryny, fibronektyny i wimentyny. Zjawisko to sugeruje odwrócenie przejścia nabłonkowego do mezenchymalnego i mniej inwazyjny fenotyp. mniej inwazyjny fenotyp. Rzeczywiście, dalsze badania in vitro z testem Matrigel Matrigel wykazały, że Frzb/sFRP3 zmniejsza zdolność inwazyjną komórek PC-3. Te zmiany w biologii komórek PC-3 są związane ze zmniejszeniem ekspresji ekspresji i aktywności zarówno metaloproteinazy macierzy (MMP)-2 i MMP-9, jak i a także spadkiem aktywacji AKT, poziomu cytozolowej beta-kateniny, aktywności transkrypcyjnej czynnika T-komórkowego oraz ekspresji Slug i Twist. Ponadto, transfekcja PC-3 dominującą ujemną lipoproteiną o niskiej gęstości białkiem związanym z receptorem o niskiej gęstości 5 (DN-LRP5) wykazała podobne efekty biologiczne jak Frzb/sFRP5. efekty biologiczne jak transfekcja Frzb/sFRP3. Łącznie dane te sugerują, że Frzb/sFRP3 i DN-LRP5 wykazują aktywność przeciwnowotworową poprzez odwrócenie przejście nabłonkowo-mezenchymalne i hamowanie aktywności MMP w podgrupie raka prostaty. podgrupie raka prostaty. --- Wydzielane białka związane z frizzled (sFRP) są wydzielanymi glikoproteinami zaangażowanymi we wzrost nowotworów. we wzrost nowotworów. Cztery hormony syntetyzowane w sercu, a mianowicie rozszerzające naczynia krwionośne, przedsionkowy peptyd natriuretyczny (ANP), peptyd kaliuretyczny (KP) i długo działający peptyd natriuretyczny (LANP), mają działanie przeciwnowotworowe zarówno in vitro, jak i in vivo. i in vivo. Te hormony serca zostały ocenione pod kątem ich zdolności do hamowania sFRP-3, który jest związany z inwazyjnością guza, w ludzkim raku trzustki, raka jelita grubego i linii komórkowych gruczolakoraka nerki. Rozszerzacz naczyń, KP, ANP i LANP maksymalnie zmniejszały stężenie sFRP-3 o 83%, 83%, 84% i 83%, odpowiednio (każdy przy P<0,0001), w ludzkich komórkach gruczolakoraka jelita grubego. W ludzkich komórkach raka trzustki stężenie sFRP-3 było maksymalnie zmniejszone o 77%, 77%, 77% i 78% (każdy przy P<0,0001) wtórnie do leczenie odpowiednio rozszerzaczem naczyń, KP, ANP i LANP. W ludzkim komórek gruczolakoraka nerki, sFRP-3 był maksymalnie zmniejszony przez rozszerzacz naczyń, KP, ANP i LANP odpowiednio o 68%, 66%, 68% i 66% (każdy przy P<0,0001). Wyniki Wyniki wskazują, że te cztery hormony sercowe są znaczącymi inhibitorami (do do 84%) sFRP-3 w różnych ludzkich komórkach nowotworowych. Ponadto, dane te sugerują, że metaboliczne ukierunkowanie sFRP-3 przez hormony sercowe przyczynia się do ich przeciwnowotworowego mechanizmu działania.
Wydzielane białko związane z frizzled 3 (sFPR3) jest zmienione w ludzkich nowotworach.
Czy jego poziom wzrasta czy maleje?
SFRP są regulowane w dół w kilku nowotworach i jest to często skorelowane ze złym rokowaniem, jak wykazano w przypadku raka piersi, jelita grubego i wielu innych nowotworów. (PMID: 21494614) Przeprowadziliśmy mikromacierz tkankową i stwierdziliśmy, że poziom białka sFRP3 był wysoki w prawidłowych nerkach, niski w tkankach pierwotnego raka nerki i wysoki w tkankach raka nerki z przerzutami. (PMID: 20160027)