Białko Dishevelled pośredniczy w kilku różnych procesach biologicznych. Co ciekawe, w tych samych tkankach, w których Xenopus Dishevelled (Xdsh) kontroluje los komórek poprzez kanoniczną sygnalizację Wnt, kontroluje również polarność komórek poprzez kaskadę planarnej polaryzacji komórek kręgowców (PCP) [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 i 9]. Związek między subkomórkową lokalizacją Dishevelled i jego a jego aktywnością sygnalizacyjną pozostaje niejasny; zgłoszono sprzeczne wyniki w zależności od badanego organizmu i typu komórek [8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 i 20]. Podeszliśmy do tej kwestii, opracowując nowe odczynniki do sekwestracji białka Dishevelled typu dzikiego albo w błonie komórkowej lub z dala od błony komórkowej. Usunięcie Dishevelled z błony komórkowej zakłóca konwergentne rozszerzenie, zapobiegając aktywacji Rho/Rac i mediolateralnej polaryzacji komórek. polaryzacji komórek. Manipulując subkomórkową lokalizacją K-->M (dsh1), pokazujemy, że mutacja ta hamuje aktywację Rac przez Dishevelled, niezależnie od jego subkomórkowej lokalizacji. Dane te pokazują, że lokalizacja błonowa Dishevelled jest warunkiem wstępnym dla sygnalizacji PCP u kręgowców. Jednakże, zarówno jak i cytoplazmatyczne Dishevelled mogą silnie aktywować kanoniczną sygnalizację Wnt. kanoniczną sygnalizację Wnt, co sugeruje, że lokalne stężenie białka Dishevelled ale nie jego przestrzenna lokalizacja, ma kluczowe znaczenie dla kanonicznej sygnalizacji Wnt sygnalizacji. Wyniki te sugerują, że w zarodkach kręgowców lokalizacja subkomórkowa lokalizacja jest niewystarczająca, aby wyjaśnić specyficzność szlaku Dishevelled w kanonicznych kaskadach sygnałowych Wnt i PCP. --- Wiadomo, że sygnalizacja Wnt jest ważna dla różnych embrionalnych i postnatalnych zdarzeń komórkowych. komórkowych i jest regulowana przez białka Dishevelled i Axin. Chociaż Dishevelled jest aktywowany przez Wnt i zaangażowany w transdukcję sygnału, to nie jest nie jest jasne, w jaki sposób sygnalizacja za pośrednictwem Dishevelled jest wyłączana. Donosimy, że białko wiążące nukleotydy guaninowe białko wiążące nukleotydy guaniny beta 2 (Gnb2; Gbeta2) związane z aksyną i Gbeta2 hamowało aktywność reporterową zależną od Wnt. Hamowanie obejmowało zmniejszenie poziomu Dishevelled, a pośredniczona przez Gbeta2gamma2 redukcja Dishevelled było przeciwdziałane przez zwiększoną ekspresję aksyny. Zgodnie z tymi efektami w komórkach komórkach HEK293T, wstrzyknięcie Gbeta2gamma2 do zarodków Xenopus hamowało tworzenie wtórnych osi indukowanych przez XWnt8 lub Dishevelled, ale nie przez beta-kateninę. Domena DEP Dishevelled jest niezbędna zarówno do interakcji z Gbeta2gamma2 i późniejszej degradacji Dishevelled przez szlak lizosomalny. szlakiem lizosomalnym. Sygnalizacja indukowana przez Gbeta2gamma2 jest wymagana, ponieważ mutant Gbeta2, Gbeta2 (W332A) o niższej aktywności sygnalizacyjnej, miał zmniejszoną zdolność do obniżenia poziomu Dishevelled. Aktywacja sygnalizacji Wnt przez jedną z dwóch metod dwie metody, zwiększona sygnalizacja Frizzled lub przejściowa transfekcja Wnt, również prowadziła do zwiększonej degradacji Dishevelled, a indukowana utrata Dishevelled jest zależna od Gbeta1 i Gbeta2. Inne badania z użyciem czynników zakłócających Działanie PLC i sygnalizacja wapniowa sugerują, że utrata Dishevelled jest mediowana przez następujący szlak: Wnt/Frizzled-->Gbetagamma-->PLC-->Ca(+2)/PKC sygnalizacja. Łącznie dowody sugerują nowy mechanizm ujemnego sprzężenia zwrotnego, w którym w którym Gbeta2gamma2 hamuje sygnalizację Wnt poprzez degradację Dishevelled. --- Białka Dishevelled (DVL), z których trzy zostały zidentyfikowane u ludzi, są są wysoce konserwatywnymi składnikami kanonicznych i niekanonicznych szlaków sygnałowych Wnt i niekanonicznych szlaków sygnałowych Wnt. Te wielofunkcyjne białka, pierwotnie odkryte u muszki owocowej muszki owocowej, poprzez swoje różne domeny pośredniczą w złożonej transdukcji sygnału: DIX (dishevelled, axin) i PDZ (postsynaptic density 95, discs large, zonula occludens-1) służą do kanonicznej sygnalizacji beta-kateniny, podczas gdy domeny PDZ i DEP (dishevelled, Egl-10, pleckstrin) służą do niekanonicznej sygnalizacji. W sygnalizacji kanonicznej lub beta-kateniny DVL tworzy duże superkompleksy molekularne w błonie plazmatycznej składające się z Wnt-Fz-LRP5/6-DVL-AXIN. To promuje demontaż mechanizmów niszczenia beta-kateniny, akumulację beta-kateniny i w konsekwencji aktywację sygnalizacji Wnt. Dlatego DVL są są uważane za kluczowe regulatory, które ratują cytoplazmatyczną beta-kateninę przed degradacji. Potencjalne znaczenie medyczne DVL dotyczy zarówno ludzkich chorobach zwyrodnieniowych i nowotworach. Wykazano, że nadekspresja DVL wzmacnia aktywację sygnalizacji Wnt i obecnie jest oczywiste, że regulacja w górę DVL jest zaangażowana w kilka rodzajów raka.
Który szlak sygnałowy aktywuje białka dishevelled?
Dishevelled (Xdsh) kontroluje los komórek poprzez kanoniczną sygnalizację Wnt