Gen TRIM37 koduje białko peroksysomalne o nieznanej funkcji. Mutacje w genie TRIM37 leżą u podstaw nanizmu mulibreya, rzadkiego autosomalnego recesywnie dziedziczonego zaburzenia z ciężką niewydolnością wzrostu o początku prenatalnym, zwężeniem osierdzia, hepatomegalią i charakterystycznymi cechami dysmorficznymi. Jedenaście mutacji zidentyfikowano jedenaście mutacji związanych z mulibreizmem. Tutaj scharakteryzowaliśmy TRIM37 poprzez mapowanie miejsca inicjacji transkrypcji i regionu promotora, jak również a także analizując warianty splicingu. Poprzez analizę wydłużania starterów zlokalizowano kilka miejsc inicjacji transkrypcji zlokalizowano w regionie między -246 i -373 względem kodonu ATG dla inicjacji translacji. Podstawowa aktywność promotora została zmapowana w obrębie 600 nukleotydów przed miejscem inicjacji translacji przy użyciu konstruktów reporterowych promotor-lucyferaza. Istnieje kilka alternatywnych wariantów TRIM37 istnieje w bazach danych. Większość z nich przewiduje niefunkcjonalne produktów białkowych, ulega ekspresji na niskim poziomie, a zatem prawdopodobnie jest celem dla rozpadu mRNA za pośrednictwem nonsensu. Nowy wariant splicingu, TRIM37b, z alternatywnym kodonem terminacji i alternatywnym kodonem zakończenia i regionem 3'nieulegającym translacji (UTR) transkrybowanym z eksonu eksonu 16 kb w dół od eksonu 24, przewiduje identyczny produkt białkowy z wcześniej zidentyfikowanym transkryptem TRIM37a. Jak wykazała analiza Northern blot analiza i ilościowa PCR w czasie rzeczywistym, oba transkrypty są wysoce wyrażone w jądrach, podczas gdy w innych tkankach TRIM37a jest widoczny. 3'UTR genu PPM1E w przeciwnej nici pokrywa się z TRIM37b. Dane te sugerują, że ekspresja TRIM37 jest regulowana przez kilka mechanizmów: poprzez nonsensowny nadzór nad niefunkcjonalnych transkryptów, a także poprzez sekwencje regulatorowe 3'UTR i/lub naturalnie występujące antysensowne RNA, szczególnie w jądrach. --- Nanizm Mulibreya (MUL) jest zaburzeniem monogenowym z prenatalną typowymi cechami klinicznymi, kardiopatią i tendencją do zespołu metabolicznego. zespołu metabolicznego. Jest on spowodowany recesywnymi mutacjami w genie TRIM37 kodującym peroksysomalne białko TRIM37 o aktywności ligazy ubikwityny. W W niniejszej pracy przeanalizowano częstość występowania i patologię nowotworów złośliwych i łagodnych przeanalizowano w krajowej kohorcie 89 fińskich pacjentów z MUL w wieku 0,7-76 lat. Pacjenci poddano ocenie klinicznej i radiologicznej oraz analizie histologicznej i immunohistochemicznej. histologiczne i immunohistochemiczne na próbkach uzyskanych z biopsji, operacji lub autopsji. z biopsji, operacji lub autopsji. Wyniki pokazują, że pacjenci z MUL mają zaburzoną architekturę zaburzoną architekturę z tkankami ektopowymi i wysoką częstotliwością zarówno łagodnych, jak i nowotworów złośliwych w kilku narządach wewnętrznych. Łącznie wykryto 210 zmian nowotworowych wykryto u 66/89 pacjentów (74%). Piętnaście nowotworów złośliwych wystąpiło u 13 pacjentów (15%), siedem z nich w nerce (pięć guzów Wilmsa), trzy w tarczycy tarczycy, dwa nowotwory ginekologiczne, jeden rakowiak żołądkowo-jelitowy, jeden nowotwór nerwowo-przysadkowy. rakowiaka przewodu pokarmowego, jedną histiocytozę z komórek Langerhansa w układzie nerwowo-przysadkowym i jeden przypadek ostrej białaczki limfoblastycznej. białaczki limfoblastycznej (ALL). Guzy wykryte radiologicznie w wątrobie i innych narządach innych narządach obejmowały głównie silnie rozszerzone naczynia krwionośne (peliosis), unaczynione torbiele i zmiany guzkowe. Zmiany wykazywały silną ekspresję markerów komórek śródbłonka CD34 i CD31, a także markera miocytów alfa-aktyny mięśni gładkich (alfa-SMA). Nasze odkrycia pokazują, że MUL jest związany z częstymi nowotworami złośliwymi i łagodnymi zmianami gruczolakowatymi i naczyniowymi, a także a także zaburzonym rozwojem narządów. --- Nanizm Mulibreya jest rzadkim zaburzeniem wzrostu o początku prenatalnym spowodowanym mutacjami w genie TRIM37. w genie TRIM37, który koduje białko RING-B-box-coiled-coil. Mechanizmy mechanizmy patogenetyczne nanizmu mulibreya są nieznane. Użyliśmy przejściowo transfekowane komórki i przeciwciała podniesione przeciwko przewidywanemu białku TRIM37 w celu scharakteryzować produkt genu TRIM37 i określić jego wewnątrzkomórkową lokalizację. lokalizację wewnątrzkomórkową. Wykazaliśmy, że ludzki cDNA TRIM37 koduje białko peroksysomalne o pozornej masie cząsteczkowej 130 kD. Lokalizacja peroksysomalna jest w zmutowanym białku reprezentującym główną fińską mutację TRIM37, ale jest zachowana w białku reprezentującym mniejszą fińską mutację. Kolokalizacja endogennego TRIM37 z markerami peroksysomalnymi została zaobserwowana przez podwójne barwienie immunofluorescencyjne w liniach komórkowych HepG2 i ludzkich mięśni gładkich jelit. linii komórkowych. W wycinkach tkanek ludzkich TRIM37 wykazuje ziarnisty wzór cytoplazmatyczny. cytoplazmatyczny. Endogenny TRIM37 nie jest importowany do peroksysomów w peroksynie 1 (PEX1(-/-)) i peroksynie 5 (PEX5(-/-)) zmutowanych fibroblastów, ale jest importowany normalnie w fibroblastach z niedoborem peroksyny 7 (PEX7 (-/-)), dając dalsze dowody na peroksysomalną lokalizację TRIM37. Fibroblasty pochodzące od pacjentów z mulibrey nanism brakuje immunoreaktywności C-końcowego TRIM37, ale barwią się normalnie dla zarówno matrycę peroksysomalną, jak i markery błonowe, co sugeruje pozornie normalną biogenezę peroksysomów w fibroblastach pacjentów. Podsumowując, te molekularne dowody jednoznacznie wskazują, że TRIM37 znajduje się w peroksysomach, a Nanizm Mulibreya można zatem sklasyfikować jako nowe zaburzenie peroksysomalne. --- Mulibrey nanism (muscle-liver-brain-eye nanism; MUL) jest autosomalną recesywną chorobą dziedziczoną autosomalnie recesywnie, charakteryzującą się poważnymi opóźnieniami wzrostu w okresie prenatalnym. spowodowanym mutacjami w genie TRIM37. Ostatnie badania nad subkomórkową lokalizacją ujawniły, że białko TRIM37 (KIAA0898) znajduje się w peroksysomach. peroksysomach. Dlatego też MUL został sklasyfikowany jako nowe zaburzenie peroksysomalne. Do tej pory zgłoszono cztery mutacje, z których wszystkie prowadzą do przesunięcia ramki i skróconych białek. W tym badaniu przeprowadzono badanie przesiewowe mutacji dla regionu kodującego regionu kodującego genu TRIM37 w tureckiej rodzinie za pomocą RT-PCR i bezpośredniego sekwencjonowania cDNA. bezpośrednie sekwencjonowanie cDNA. Zidentyfikowaliśmy nową mutację skutkującą powodującą przesunięcie ramki w obrębie rodziny. Wreszcie, donosimy o obecności nowych wariantów splicingowych obserwowanych w komórkach limfoblastoidalnych i tkance mięśniowej osób zdrowych i pacjentów. osób zdrowych i pacjentów. --- Nanizm Mulibreya jest autosomalnym recesywnym zaburzeniem wzrostu spowodowanym mutacjami w genie TRIM37, kodującym białko o nieznanej funkcji. genie TRIM37 kodującym białko o nieznanej funkcji. U ponad połowy pacjentek pacjentek z nanizmem Mulibreya rozwija łagodne guzy mezenchymalne pochodzenia pochodzenia zrębu jajnika. W niniejszej pracy scharakteryzowaliśmy guzy ginekologiczne pacjentek z nanizmem Mulibreya. Oprócz guzów z grupy włókniakomięsaka, u 18% (4/22) pacjentek zaobserwowano nowotwory nabłonkowe, w tym 2 jajniki. nabłonkowe, w tym 2 gruczolakowłókniaki jajnika, 1 słabo zróżnicowany gruczolakorak jajnika i 1 gruczolakorak gruczolakorak jajnika i 1 gruczolakorak endometrium. Aby zbadać możliwy udział zmian TRIM37 w patogenezie sporadycznych włókniakomięsaków, przeanalizowaliśmy cDNA TRIM37 pod kątem mutacji i alternatywnie splicowanych transkryptów oraz ekspresję TRIM37 we włókniakomięsakach kobiet bez nanizmu Mulibreya. Nie stwierdzono wykryto mutacji w otwartej ramce odczytu TRIM37. Znaleziono dwa alternatywnie warianty, jeden pozbawiony eksonu 23 i jeden eksonu 2. TRIM37del2 został znaleziono również w prawidłowym jajniku, ale w części sporadycznych włókniakomięsaków, wariant TRIM37del2:TRIM37 był zwiększony. W prawidłowym jajniku TRIM37 był zlokalizowany w cytoplazmie cytoplazmie komórek zrębu, zwłaszcza komórek theca otaczających rozwijające się pęcherzyki. otaczających rozwijające się pęcherzyki. Transkrypt TRIM37 znaleziono we wszystkich badanych sporadycznych włókniakomięsakach, ale 80% (20/25) guzów wykazywało zmniejszoną lub nieobecną ekspresję białka TRIM37 białka. Alleliczną utratę w locus TRIM37 (17q22-23) zaobserwowano w 6% sporadycznych włókniakomięsaków. sporadycznych włókniakomięsaków. Prawie połowa sporadycznych włókniakomięsaków wykazywała metylację promotora CpG, co sugeruje obniżenie regulacji promotora jako jeden z mechanizmów obniżonej ekspresji TRIM37. mechanizm zmniejszonej ekspresji TRIM37. Podsumowując, dziedziczna bialleliczna inaktywacja TRIM37 (Mulibrey nanism) predysponuje zarówno do mezenchymalnych, jak i nabłonkowych nowotworów jajnika. i nabłonkowych guzów jajnika, a dysregulacja TRIM37 może być również zaangażowana w patogenezę sporadycznych nowotworów jajnika. patogenezie sporadycznych włókniakomięsaków. --- Nanizm Mulibreya jest autosomalnym recesywnym prenatalnym zaburzeniem wzrostu o nieznanej patogenezie. nieznanej patogenezie. Głównymi cechami klinicznymi są przed- i poporodowa niewydolność charakterystyczne dysmorficzne cechy czaszkowo-twarzowe, choroby serca i hepatomegalia. powiększenie wątroby. Pięć mutacji skracających w genie TRIM37 zostało wcześniej u pacjentów z nanizmem Mulibreya. Białko TRIM37 koduje nowe białko o nieznanej funkcji. o nieznanej funkcji. Zawiera ono trójdzielny motyw (TRIM, oznaczany również jako RING-B-box-Coiled-coil lub domenę RBCC) i domenę TRAF (czynnik związany z receptorem martwicy nowotworu czynnik związany z receptorem nowotworowym). TRIM37 lokalizuje się w peroksysomach klasyfikując nanizm Mulibreya jako zaburzenie peroksysomalne. Tutaj scharakteryzowaliśmy scharakteryzowaliśmy strukturę genomową genu TRIM37, który ma 24 eksony obejmujące około 109 kb genomowego DNA. Ponadto opisaliśmy sześć nowych mutacji mutacji związanych z chorobą, z których pięć przewiduje skrócenie białka: c.745C>T (p.Gln249X), c.1411C>T (p.Arg471X), c.2056C>T (p.Arg686X) i delecję genomową 8,6 kb (p.Arg686X). kb (c.1314+507_1668-207del skutkujące p.Arg439fsX4). Szósta mutacja Szósta mutacja (c.965G>T) jest pierwszą mutacją typu missense (p.Gly322Val) związaną z nanizmem Mulibreya. Ma ona wpływ na domenę TRAF TRIM37 i skutkuje zmienioną lokalizacją subkomórkową zmutowanego białka TRIM37, co dodatkowo sugeruje, że jest ona patogenna. --- Nanizm Mulibreya (MUL) jest autosomalną chorobą recesywną spowodowaną mutacjami w genie TRIM37 genie TRIM37 kodującym peroksysomalne białko TRIM37 o nieznanej funkcji. W W tej pracy przeanalizowaliśmy charakterystykę kliniczną 85 fińskich pacjentów z MUL. MUL, z których większość była homozygotyczna dla fińskiej głównej mutacji TRIM37. Pacjenci pacjentów od urodzenia do momentu postawienia diagnozy w wieku 0,02-52 lat (mediana 2,1 roku) zostały przeanalizowane retrospektywnie. Wszyscy z wyjątkiem czterech pacjentów (95%) miało prenatalną niewydolność wzrostu bez poporodowego po urodzeniu. Średni wynik odchylenia standardowego długości (SDS) wynosił -3,1 i -4,0 odpowiednio przy urodzeniu i diagnozie. W okresie niemowlęcym występowały trudności z karmieniem, i infekcje dróg oddechowych były najczęstszymi problemami. Zastoinowa niewydolność serca serca i zwężenie osierdzia zdiagnozowano w okresie niemowlęcym odpowiednio u 12% i 6% pacjentów. pacjentów. W momencie rozpoznania charakterystyczne cechy charakterystyczne cechy czaszkowo-twarzowe: skąposzczęka, trójkątność twarzy, wysokie i szerokie czoło oraz niski grzbiet nosa. czoło i niski grzbiet nosa były widoczne u ponad 90% pacjentów. Ponadto Ponadto praktycznie wszyscy pacjenci byli zgrabni i mieli cienkie kończyny. Inne osobliwy, wysoki głos (96%), żółtawe plamki na dnie oczu (79%), skaleczenia na oczach (79%). oczu (79%), znamiona skórne (65%), hepatomegalię (45%) i dysplazję włóknistą kości długich (25%). dysplazja włóknista kości długich (25%). Jedyną nieprawidłowością neurologiczną była łagodna hipotoniczność mięśni (68%). jedyną nieprawidłowością neurologiczną. Cechy kliniczne fińskich pacjentów z MUL stanowiły odrębną jednostkę. Najbardziej spójnymi ustaleniami były brak wzrostu i charakterystyczne cechy czaszkowo-twarzowe. Jednak objawy narządowe różniły się znacznie we wczesnym dzieciństwie. Na podstawie tych ustaleń proponujemy nowe kryteria diagnostyczne dla MUL. --- Nanizm Mulibreya (MUL) jest rzadkim autosomalnym zaburzeniem recesywnym z ciężkim pierwotnym opóźnieniem wzrostu i zajęciem wielu narządów, spowodowanym mutacjami w TRIM37. TRIM37. Wczesne wykrycie kliniczne jest ważne, ponieważ u ponad 50% pacjentów pacjentów rozwija zastoinową niewydolność serca. Przedstawiamy przypadek 12-letniego pacjenta, u którego w okresie niemowlęcym z ciężkim opóźnieniem wzrostu, cechami dysmorficznymi i rozszczepem podniebienia. rozszczepem podniebienia. Rozpoznanie kliniczne MUL ustalono w wieku 5 lat. Pośmiertna diagnostyka molekularna potwierdziła MUL jako nową delecję 1-bp (c.1233delA) w eksonie 14 regionu kodującego TRIM37. Badanie serca w wieku w wieku 6 lat ujawniło zaciskające zapalenie osierdzia ze znacznym wzrostem ciśnienia napełniania przedsionków ciśnienia napełniania przedsionków, następową hepatomegalię i enteropatię z utratą białka. enteropatię. Ponieważ rodzice nie zgodzili się na perikardektomię, operację odłożono do w wieku 12 lat, kiedy zastoinowa niewydolność serca uległa pogorszeniu. Pomimo perikardektomii, chłopiec zmarł z powodu utrzymującej się niewydolności prawego serca. WNIOSKI: Nasz raport podkreśla konieczność wczesnej diagnostyki klinicznej nanizmu Mulibreya. Mulibreya. Wymagane jest dokładne badanie kardiologiczne w celu wykrycia zwężające zapalenie osierdzia, które jest głównym czynnikiem śmiertelności u tych pacjentów. pacjentów. Perikardektomia powinna być wykonana wcześnie, aby uniknąć następstw utrzymującej się zastoinowej niewydolności serca.
Czy mutacja genu TRIM37 powoduje nanizm Mulibreya?
Tak, nanizm Mulibreya jest spowodowany recesywnymi mutacjami w genie TRIM37 kodującym peroksysomalne białko TRIM37 o aktywności ligazy ubikwityny.