CEL: Śledzenie i analiza dwóch fałszywie dodatnich przypadków z nieinwazyjnych badań prenatalnych pod kątem potencjalnej aneuploidii płodu. METODY: Dwa przypadki, w których stwierdzono odpowiednio XO (+++) i T18 (1/20) XO(+), zostały przeanalizowane za pomocą konwencjonalnego kariotypowania, fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ (FISH) hybrydyzacji fluorescencyjnej in situ (FISH) i masowo równoległego sekwencjonowania genomowego (MPS). WYNIKI: Pierwszy płód, u którego podejrzewano XO(+++), został zweryfikowany jako mający zespół superkobiecy (47,XXX/46,XX) z powodu ograniczonego mozaicyzmu łożyskowego przez kariotypowanie komórek płynu owodniowego, analizę FISH łożyska i masowo równoległego sekwencjonowania (MPS) tkanki płodowej. Drugi płód, u którego podejrzewano trisomię 18 (1/20) XO(+), został zweryfikowany pod kątem zespołu Turnera za pomocą kariotypowania, FISH i analizy MPS komórek krwi pępowinowej. Kariotyp wynosił 45,X[48]/46, X, der(X) del(X) (p11.21) del(X) (q13.3)[62]. WNIOSEK: Nieinwazyjne badania prenatalne niosą ze sobą ryzyko fałszywie dodatniej diagnozy chromosomów płciowych płodu i trisomii 18. Połączone techniki cytogenetyczne i techniki molekularne są wymagane w celu zapewnienia dokładnej diagnozy. --- CEL: Nieinwazyjne badania prenatalne (NIPT) z wykorzystaniem bezkomórkowego DNA płodu w osoczu matki zostały opracowane w celu wykrywania aneuploidii płodu. DNA płodu w osoczu matki zostało opracowane w celu wykrywania aneuploidii płodu. Badania kliniczne wykazały wysoką czułość i swoistość dla trisomii 21 (T21) zarówno w populacjach wysokiego, jak i średniego ryzyka. Chociaż jego ogromny potencjał dla medycyny prenatalnej jest oczywisty, więcej informacji dotyczących konsekwencji wdrożenia NIPT w krajowym programie badań prenatalnych. PROJEKT BADANIA: Opracowano model analizy decyzyjnej w celu porównania kosztów i wyników kosztów i wyników obecnej praktyki klinicznej w Holandii przy użyciu konwencjonalnych badań przesiewowych, z dwiema alternatywami: wdrożenie NIPT jako opcjonalnego wtórny test przesiewowy dla tych ciąż powikłanych wysokim ryzykiem dla T21 oraz wdrożenie NIPT jako podstawowego badania przesiewowego, zastępującego konwencjonalne badania przesiewowe. badania przesiewowe. Prawdopodobieństwo oszacowano na podstawie systematycznego przeglądu literatury międzynarodowej. Koszty zostały określone z perspektywy opieki zdrowotnej. Dane przeanalizowano w celu uzyskania wyników, kosztów całkowitych, kosztów względnych i inkrementalne współczynniki efektywności kosztowej (ICER) dla różnych strategii. Analiza wrażliwości została wykorzystana do oceny wpływu założeń na wyniki modelu. wyniki. WYNIKI: Wdrożenie NIPT jako opcjonalnego dodatkowego lub podstawowego testu przesiewowego T21 o 36% (z 46,8% do 63,5%) i 54% (z 46,8% do 72,0%). 46,8% do 72,0%), jednocześnie zmniejszając średnie ryzyko poronienia związanego z procedurą poronienia o 44% (z 0,0168% do 0,0094% na kobietę w ciąży) i 62% (z 0,0168% do 0,0094% na kobietę w ciąży). 0,0168% do 0,0064% na kobietę ciężarną). Żadna ze strategii wyraźnie dominowała: obecna praktyka kliniczna jest najmniej kosztowna, podczas gdy Wdrożenie NIPT spowoduje wzrost całkowitych kosztów programu o 21% (z 257,09 EUR do 0,64% na kobietę w ciąży). (z 257,09 EUR do 311,74 EUR na kobietę w ciąży), co prowadzi do ICER w wysokości 94 EUR na wykryty przypadek T21, gdy jest wykorzystywany jako opcjonalny dodatkowy test przesiewowy i o 157% (z 257,09 EUR do 660,94 EUR na kobietę w ciąży), co prowadzi do ICER w wysokości 460 EUR na wykryty przypadek T21, gdy jest stosowany jako podstawowy test przesiewowy. Wdrożenie NIPT jako testu segregacyjnego spowodowało jednak najniższe oczekiwane najniższe oczekiwane koszty względne na zdiagnozowany przypadek T21 (141 EUR). WNIOSEK: NIPT powinien zostać wdrożony w krajowej opiece zdrowotnej jako opcjonalny wtórny test przesiewowy dla ciąż powikłanych wysokim ryzykiem T21. T21. --- Wstęp: Identyfikacja płodowych jądrzastych krwinek czerwonych (NRBC) w krążeniu matki w krążeniu matki może ułatwić nieinwazyjną diagnostykę prenatalną, ale nadal istnieją trudności techniczne. Wzrost liczby krążących NRBC może jednak wskazywać na aneuploidię płodu lub powikłania ciąży. MATERIAŁY I METODY: Liczbę NRBC określono z 20 ml krwi obwodowej u 351 kobiet w drugiej ciąży. krwi obwodowej u 351 kobiet w drugim trymestrze ciąży po izolacji metodą magnetycznego sortowania komórek (MACS) z przeciwciałem anty-CD71 i identyfikacji za pomocą May-Grunwald/Giemsa. WYNIKI: Średnio osiem NRBC (zakres 1-12) zidentyfikowano wśród 282 kobiet z chromosomalnie prawidłowymi płodami. W przypadkach, o których wiadomo, że są nosicielami płodów aneuploidalnych średnia liczba wynosiła 35 (zakres 7-113), ale gdy płód miał trisomię 21 (n = 17), zidentyfikowano średnio zidentyfikowano średnio 71 NRBC. Wśród 26 nosicieli beta-talasemii zidentyfikowano 42 NRBC (zakres 22-158). W ciążach z nieprawidłowymi wynikami Dopplera w obu tętnicach macicznych (n = 20), wyizolowano 15 NRBC (zakres 2-75). WNIOSEK: Określenie liczby NRBC w krążeniu matczynym może stanowić dodatkowy etap badań przesiewowych w kierunku aneuploidii płodu, o ile pod uwagę stan anemiczny matki. Jednakże, więcej przypadków z nieprawidłowymi wynikami Dopplera musi zostać zbadanych, zanim ten test zostanie wykorzystany do w przewidywaniu powikłań ciąży. --- Nieinwazyjne badania prenatalne (NIPT) w kierunku aneuploidii przy użyciu bezkomórkowego DNA w osoczu matki w osoczu matki rewolucjonizuje prenatalne badania przesiewowe i diagnostykę. Dokonujemy przeglądu NIPT w kontekście ustalonych badań przesiewowych i technologii inwazyjnych, zakresu wykrywanych nieprawidłowości cytogenetycznych i zakres wykrywanych nieprawidłowości cytogenetycznych, koszty, doradztwo i kwestie etyczne. kwestie etyczne. Obecne podejścia NIPT obejmują sekwencjonowanie całego genomu, ukierunkowane sekwencjonowanie sekwencjonowanie i ocenę różnic w polimorfizmie pojedynczego nukleotydu (SNP) między matką a płodem. Badania kliniczne wykazały skuteczność NIPT w przypadku zespołów Downa i Edwardsa oraz prawdopodobnie zespołu Patau u kobiet z grupy wysokiego ryzyka. Powszechny NIPT nie jest opłacalny, ale stosowanie NIPT warunkowo u kobiet uznanych za o umiarkowanym lub wysokim ryzyku w konwencjonalnych badaniach przesiewowych jest opłacalne. Wynik pozytywny NIPT muszą zostać potwierdzone przy użyciu technik inwazyjnych. Ustalone badania przesiewowe, USG płodu i procedury inwazyjne z badaniem mikromacierzy pozwalają na wykrywanie szerokiego zakresu dodatkowych nieprawidłowości, których nie można jeszcze wykryć za pomocą NIPT. NIPT. Podejścia NIPT, które wykorzystują informacje SNP, potencjalnie umożliwiają identyfikację rodzica pochodzenia w przypadku braku równowagi, triploidii, disomii jednorodzicielskiej i pokrewieństwa oraz i pokrewieństwa, a także oddzielną ocenę bliźniąt dwujajowych. Wzbogacenie frakcji płodu wzbogacenie frakcji płodowej, ulepszone sekwencjonowanie i wybrana analiza najbardziej sekwencji powinny zaowocować testami na dodatkowe nieprawidłowości chromosomalne. nieprawidłowości chromosomowych. Zapewnienie odpowiedniego doradztwa prenatalnego stanowi poważne wyzwanie, biorąc pod uwagę szeroki zakres wyzwanie, biorąc pod uwagę szeroki zakres dostępnych obecnie opcji badań prenatalnych. --- Nieinwazyjne badania prenatalne (NIPT) aneuploidii płodu przy użyciu bezkomórkowego DNA płodu stają się częścią rutynowej praktyki klinicznej. DNA płodu staje się częścią rutynowej praktyki klinicznej. Pakiet RAPIDR (Reliable Accurate Prenatal non-Invasive Diagnosis R package) to łatwy w użyciu pakiet open-source R który implementuje kilka opublikowanych metod analizy NIPT. Dane wejściowe do RAPIDR jest zestaw plików wyrównania sekwencji w formacie BAM, a dane wyjściowe są wezwania do aneuploidii, w tym trisomii 13, 18, 21 i monosomii X, jak również a także płeć płodu. RAPIDR został szeroko przetestowany z dużym zestawem próbek w ramach projektu projektu RAPID w Wielkiej Brytanii. Pakiet zawiera kroki kontroli jakości, aby aby był solidny do użytku w warunkach klinicznych. DOSTĘPNOŚĆ I WDROŻENIE: RAPIDR jest zaimplementowany w R i może być swobodnie pobrać za pośrednictwem CRAN stąd: http://cran.r-project.org/web/packages/RAPIDR/index.html. KONTAKT: kitty.lo@ucl.ac.uk INFORMACJE UZUPEŁNIAJĄCE: Dane uzupełniające są dostępne na stronie Bioinformatics online. --- Prenatalne wykrywanie aneuploidii płodu jest jednym z głównych celów diagnostyki prenatalnej. diagnostyki prenatalnej. Dzięki rozwojowi zaawansowanego sprzętu sprzętu ultrasonograficznego i postępów w biologii molekularnej w ostatniej dekadzie jest znaczący postęp w metodach badań przesiewowych w kierunku aneuploidii płodu, chociaż metody inwazyjne pozostają złotym standardem wykrywania aneuploidii. Nieinwazyjna diagnostyka prenatalna ma znaczący wpływ na medycynę, ponieważ jest ukierunkowana na rozwój bezpieczniejszych i skuteczniejszych metod, aby uniknąć ryzyka utraty płodu związanego z z obecnie stosowanymi metodami inwazyjnymi. Identyfikacja kwasów rybonukleinowych specyficznych dla płodu kwasów rybonukleinowych, cyfrowej reakcji łańcuchowej polimerazy i sekwencjonowania nowej generacji dają realną szansę na nieinwazyjną diagnostykę prenatalną aneuploidii płodu. aneuploidii płodu. Chociaż wszystkie te metody mają zarówno zalety, jak i ograniczenia, niektóre z nich są coraz bliżej wdrożenia klinicznego. W niniejszym przeglądzie autorzy podkreślają najnowsze postępy w metodach nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej aneuploidii. prenatalnej diagnostyki aneuploidii. --- CEL: Zgłoszenie drugorzędnych lub dodatkowych ustaleń wynikających z wprowadzenia nieinwazyjnych badań prenatalnych (NIPT) w kierunku aneuploidii poprzez sekwencjonowanie całego genomu jako usługi klinicznej. sekwencjonowania całego genomu jako usługi klinicznej. METODY: Przeanalizowano pięć przypadków z dodatkowymi wynikami. WYNIKI: W przypadku 1, NIPT ujawniło dużą duplikację w chromosomie 18p, co w DNA amniocytów, z ostatecznym kariotypem wykazującym mozaikową tetrasomię 18p. tetrasomię 18p. W przypadku 2 podejrzewano delecję w proksymalnym długim ramieniu chromosomu 18 pochodzenia matczynego i potwierdzona przez arrayCGH DNA białych krwinek matki. DNA białych krwinek matki. W przypadku 3 NIPT był ujemny dla trisomii 21 i 18. Dogłębna analiza analizy pod kątem delecji/duplikacji zażądano, gdy w rutynowej płodu wykryto podczas rutynowego skanowania. Stwierdzono delecję w proksymalnym długim ramieniu chromosomu 3 została znaleziona i potwierdzona kariotypowaniem. W przypadku 4, NIPT prawidłowo z potrójną trisomią obejmującą chromosomy X, 7 i 21. X, 7 i 21. W przypadku 5 NIPT prawidłowo wykrył nieznaną wcześniej mozaikowość matczyną mozaicyzm dla 45X. WNIOSEK: Nieinwazyjne badania prenatalne są w stanie wykryć szeroki zakres mozaicyzmu płodu, łożyska i matki. płodu, łożyska i nieprawidłowości chromosomalnych u matki. Ma to istotne implikacje dla poradnictwa dla pacjentów w przypadku wykrycia nieprawidłowości za pomocą NIPT. --- TŁO: Nowo wprowadzone bezkomórkowe sekwencjonowanie DNA płodu oparte na nieinwazyjnym prenatalne (DNA-NIPT) wykrywa zespół Downa z czułością 99% na wczesnym etapie ciąży bez ryzyka poronienia. Zwrócono uwagę na implikacje dla zdrowia publicznego; niewiele wiadomo z perspektywy konsumentów. Niniejsze jakościowe miało na celu zbadanie motywacji kobiet do korzystania i postrzegania DNA-NIPT w Hongkongu. METODY I WYNIKI: Pogłębione wywiady przeprowadzono z 45 kobietami, które poddały się DNA-NIPT. poddały się badaniu DNA-NIPT, rekrutowanych w drodze celowego doboru próby na podstawie cech społeczno-demograficznych społeczno-demograficznych i klinicznych. Próba obejmowała 31 kobiet zidentyfikowanych jako wysokiego ryzyka na podstawie badań przesiewowych w kierunku zespołu Downa w surowicy i USG (SU-DSS). Tematyczna analiza narracyjna zbadała świadome podejmowanie decyzji o teście i zidentyfikowano korzyści i potrzeby. Kobiety przedstawiły szereg powodów, dla których dostępu do DNA-NIPT: zmniejszenie niepewności związanej z ryzykiem wyników opartych na prawdopodobieństwie z SU-DSS, podejmowanie DNA-NIPT jako kompleksowego w celu przeciwdziałania ryzyku związanemu z rodzeniem dzieci, zwłaszcza w zaawansowanym wieku, postrzegana dokładność predykcyjna i brak ryzyka uszkodzenia płodu. Konta kobiet uznanych za obarczone wysokim lub niskim ryzykiem różnią się pod wieloma względami. Kobiety z grupy wysokiego ryzyka uzyskały dostęp do DNA-NIPT, aby uzyskać jaśniejsze wyobrażenie o swoim ryzyku. Ta grupa postrzegała SU-DSS jako niepotrzebną i mylącą procedurę ze względu na jej zmienne, zależne od protokołu wskaźniki wykrywalności. Te kobiety, które nie zostały uznane za wysokiego ryzyka, w przeciwieństwie do nich, podjęły się DNA-NIPT dla psychologicznej pewności i zmniejszenia lęku nawet po otrzymaniu negatywnego wyniku SU-DSS. WNIOSKI: DNA-NIPT został pozytywnie oceniony przez kobiety, które wybrały tę metodę tę metodę badań przesiewowych zamiast rutynowych, tańszych opcji testowania. Biorąc pod uwagę postrzeganą użyteczność, pracownicy służby zdrowia powinni rozważyć, czy DNA-NIPT powinien być oferowany jako część w ramach powszechnej rutynowej opieki kobietom z wysokim ryzykiem aneuploidii płodu. Jeśli Jeśli tak jest, to dalszy rozwój wytycznych i zapewnienie jakości aby zapewnić usługi dostosowane do potrzeb pacjentów. --- Otyłość jest ogólnoświatową epidemią i może mieć głęboki wpływ na ryzyko ciąży. ryzyko. Otyłe pacjentki są zwykle starsze i są narażone na zwiększone ryzyko strukturalnych anomalii płodu i aneuploidii. anomalii strukturalnych płodu i aneuploidii, co sprawia, że opcje badań przesiewowych są niezwykle ważne dla tych kobiet. Wskaźniki niepowodzeń badań przesiewowych przezierności karkowej (NT) w pierwszym trymestrze ciąży wzrasta wraz z otyłością, podczas gdy zdolność do wykrywania miękkich markerów spada, ograniczając opcje badań przesiewowych opartych na ultradźwiękach. Otyłość zmniejsza również szanse na ukończenie ankiety anatomicznej i zwiększa ryzyko rezydualne niewykrytych anomalii. Dodatkowo, nieinwazyjne badania prenatalne (NIPT) są mniej jest mniej prawdopodobne, aby zapewnić pouczające wyniki u otyłych pacjentów. Zrozumienie ograniczeń i dokładności diagnostycznej badań przesiewowych w kierunku aneuploidii i anomalii u otyłych pacjentów może pomóc klinicystom w doradzaniu pacjentom w zakresie opcji badań przesiewowych. opcje. --- CELE: Ocena wykonalności nieinwazyjnych badań prenatalnych (NIPT) matczynych próbek osocza pobranych od ciężarnych Chinek we wczesnej ciąży, między 8 + 0 a 12 + 6 tygodniem ciąży. METODY: W tym badaniu pilotażowym 212 kobiet z ciążami wysokiego ryzyka zostało rekrutowanych w jednym chińskim szpitalu. Aneuploidie płodu związane z chromosomami 21, 18, 13, X i Y zostały wykryte przez masowe równoległe sekwencjonowanie próbek DNA z osocza matki. Inwazyjna diagnostyka prenatalna za pomocą pobranie próbki kosmówki lub amniopunkcję, a następnie kariotypowanie zaoferowano wszystkim kobietom w celu potwierdzenia zarówno pozytywnych, jak i negatywnych wyników NIPT. Frakcja DNA płodu została również w ciążach męskich przez względny procent sekwencji chromosomu Y. sekwencji chromosomu Y. Wszystkie ciąże z potwierdzonym ujemnym wynikiem NIPT obserwowano aż do porodu, a noworodki oceniano klinicznie pod kątem noworodki były oceniane klinicznie pod kątem jakichkolwiek objawów choroby chromosomalnej. WYNIKI: Autosomalne aneuploidie trisomii 21 (n = 2), 18 (n = 1) i 13 (n = 1) zostały wykryte przez NIPT i potwierdzone przez amniopunkcję i kariotypowanie. Były jedna fałszywie dodatnia próbka 45,X i dwie fałszywie ujemne próbki związane z kariotypami płodu kariotypami płodu 47,XXY i 45,X[16]/47,XXX[14]. W 100 ciążach męskich, mediana frakcji płodowego DNA wynosiła 8,54% i występowała tendencja do rosnącej frakcji płodowej od 8 + 0 do 12 + 6 tygodnia ciąży. Większość (95%) ciąż miała frakcję płodowego DNA > 4%, co jest ogólnie limitem dla dokładnego wykrywania aneuploidii przez NIPT. We wczesnym okresie ciąży ciążowego występowała słaba odwrotna zależność (R(2) = 0,186) między frakcją DNA płodu a masą ciała matki. a masą ciała matki. WNIOSKI: NIPT jest wysoce wiarygodny i dokładny, gdy jest stosowany do matczynego DNA DNA pobranych od kobiet w ciąży w pierwszym trymestrze między 8 + 0 a 12 + 6 tygodniem. 12 + 6 tygodni. --- TŁO: Nieinwazyjne badania prenatalne (NIPT) za pomocą masowo równoległego sekwencjonowania sekwencjonowania jest przydatnym testem klinicznym do wykrywania powszechnych aneuploidii płodu. aneuploidii płodu. Podczas gdy dokładność wykrywania aneuploidii może zbliżyć się do 100%, wyniki niezgodne z płodem są czasami zgłaszane. W tym badaniu zbadaliśmy podstawę niezgodnego wyniku NIPT T21 dodatniego i T18 ujemnego związanego z płodem T18 potwierdzonym kariotypowaniem. METODY: Masowe równoległe sekwencjonowanie zastosowano do wykrycia płodowego DNA w krążącym osoczu matki. krążącym w osoczu matki. Zbadano pochodzenie rodzicielskie i charakter aneuploidii płodu i łożyska. aneuploidii badano za pomocą ilościowego fluorescencyjnego PCR krótkich sekwencji tandemowych tandemowych (STR) oraz sekwencjonowanie zmienności liczby kopii (CNV). WYNIKI: Nie było dowodów na mozaicyzm matczyny T21, mikrochimeryzm T21 lub znikającego bliźniaka, aby wyjaśnić niezgodny wynik NIPT. Jednak badanie biopsji łożyska wykazało zarówno mozaicyzm T21, jak i T18, w tym jeden ograniczony region ze znacznie wyższym odsetkiem komórek T21. Na podstawie frakcji płodowego DNA i średnich poziomów mozaicyzmu, efektywne frakcje płodowego DNA T21 i T18 powinny być wystarczające do wykrycia obu trisomii. trisomii. WNIOSKI: W tej ciąży spekulujemy, że ograniczony region (regiony) łożyska z wyższymi proporcjami komórek T21 preferencyjnie uwalniały płodowe DNA do krążenia matki. Badanie to podkreśla mozaicyzm łożyskowy jako jako istotny czynnik ryzyka niezgodnych wyników NIPT. --- CEL: Zbadanie wartości sekwencjonowania nowej generacji dla nieinwazyjnych badań prenatalnych nieinwazyjnych badań prenatalnych aneuploidii chromosomalnych płodu. METODY: Osocze od 4004 kobiet z ciążą pojedynczą w wieku ciążowym między 12-35(+5) tygodniem zostało pobrane przed amniopunkcją między 19 kwietnia 2011 i 31 grudnia 2013. Próbki podzielono na trzy grupy: (1) Wysokie ryzyko zespołu Downa na podstawie biochemicznych badań przesiewowych; (2) Zaawansowany wiek matki; (3) Nieprawidłowości w badaniu ultrasonograficznym lub innymi metodami. DNA osocza wyekstrahowane z z powyższych próbek było sekwencjonowane przy niskim pokryciu. Pozytywne wyniki zostały zweryfikowane z kariotypami płodów. W przypadku wyników negatywnych płody były monitorowane telefonicznie przez co najmniej sześć miesięcy po urodzeniu. WYNIKI: Spośród 4003 próbek poddanych nieinwazyjnej diagnostyce prenatalnej, 66 (1,65%) miało wynik pozytywny. W grupie 1 stwierdzono 22 przypadki trisomii 21 (T21), 3 przypadki trisomii 18 (T18), 1 przypadek trisomii 13 (T13), 8 przypadków 45,X i 2 przypadki innych nieprawidłowości chromosomowych. wykryto inne nieprawidłowości chromosomalne. W grupie 2 wykryto 13 przypadków T21, 2 przypadki T18, 1 przypadek T13, 5 przypadków 45,X, 2 przypadki 47,XXN i 1 przypadek wykryto inne nieprawidłowości chromosomalne. W grupie 3, 1 przypadek T21, 1 przypadek T18, 1 przypadek T13 i 3 przypadki 47,XXN. W przypadku 55 próbek poddanych diagnostyce prenatalnej, wykryto 30 przypadków T21 i 4 przypadki T18. co było zgodne z wynikami nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej. nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej. Dla 13 przypadków wskazanych jako 45,X, 3 zostały zweryfikowane przez analizę kariotypu, 2 zostały zweryfikowane jako mozaika. kariotypu, 2 zweryfikowano jako mozaicyzm (45,X/46,XN), 8 jako 46,XN (wyniki fałszywie dodatnie). pozytywne). W przypadku 5 przypadków wskazanych jako 47,XXN, 2 zostały zweryfikowane przez analizę kariotypu kariotypu, pozostałe 3 to 46,XN (wyniki fałszywie dodatnie). Kariotypy 3 przypadków podejrzanych o inne nieprawidłowości chromosomalne zostały zweryfikowane jako 46,XN (wyniki fałszywie pozytywny). Do 1 maja 2014 r. telefoniczna obserwacja osób z negatywnymi wynikami badań przesiewowych z negatywnymi wynikami badań przesiewowych zidentyfikowano tylko chłopca z nieprawidłowościami twarzy i opóźnieniem rozwoju, który był podobny do swojej starszej siostry, połączonym kariotypowaniem i analiza fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ zweryfikowały kariotyp chłopca jako 46,XY,XY. chłopca jako 46,XY, rec(14)dup(14q)inv(14)(p12q14)pat. WNIOSEK: Nasze wyniki wskazują, że sekwencjonowanie DNA wolnego od osocza może szybko szybko wykryć aneuploidie chromosomalne płodu. Metoda jest nieinwazyjna, a wyniki są wysoce zgodne z kariotypem. wyniki są wysoce spójne z analizą kariotypu pod względem dokładności i dokładności i swoistości. Testy nieinwazyjne mogą być stosowane jako skuteczne uzupełnienie konwencjonalnych metod diagnostyki prenatalnej, co może znacznie zmniejszyć liczbę niepotrzebnych inwazyjną diagnostykę prenatalną. Jednakże, czułość i dokładność wykrywania aneuploidii innych niż chromosom 13/18/21 nadal wymagają poprawy. --- CEL: Celem tego badania była ocena świadomości, potencjalnego przyjęcia, i obecnego wykorzystania analizy nieinwazyjnych badań prenatalnych (NIPT) dla powszechnych aneuploidii płodu wśród położników. METODY: 36-punktowa ankieta internetowa została zaprojektowana w celu oceny obecnej praktyki badań przesiewowych w kierunku aneuploidii płodu oraz wiedzy i wykorzystania NIPT do wykrywania trisomii płodu. trisomii płodu. Praktykujący położnicy w Stanach Zjednoczonych zostali zaproszeni pocztą elektroniczną do udziału w ankiecie. do udziału w badaniu. WYNIKI: Spośród 101 położników, którzy wypełnili ankietę (27% akademickich, 73% prywatna praktyka), 97% oferuje badania przesiewowe pacjentkom wysokiego ryzyka, a 91% oferuje pacjentkom z grupy średniego ryzyka. W odniesieniu do obecnych testów przesiewowych trzy najważniejsze zalety były następujące: rekomendacja przez stowarzyszenia zawodowe, brak ryzyka dla ciąży i długa historia/doświadczenie z testem, podczas gdy trzy największe ograniczenia natomiast trzy najważniejsze ograniczenia były następujące: niepokój pacjenta, ryzyko dalszych inwazyjne testy i wysoka liczba wyników fałszywie dodatnich. NIPT był używany przez 32% respondentów, a 22% respondentów, a 22% było zaznajomionych z NIPT i powiązanymi danymi klinicznymi. Większość lekarzy przewidywała, że zaoferuje NIPT kobietom z grupy wysokiego ryzyka (86,1%). kobietom z grupy wysokiego ryzyka (86,1%) i kobietom z grupy średniego ryzyka (76,2%) w ciągu 12 miesięcy. WNIOSEK: Lekarze położnicy planują zwiększyć wykorzystanie NIPT i oczekują, że większość że większość pacjentek wysokiego i średniego ryzyka otrzyma NIPT jako opcję. NIPT jako opcja. --- CELE: Celem pracy było przedstawienie wstępnych wyników nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej powszechnych aneuploidii chromosomów 21, 18 i 13 na podstawie płodowego DNA w surowicy matki u pacjentek z grupy wysokiego ryzyka oraz porównanie wyników z rutynowym kariotypowaniem. wyników z rutynowym kariotypowaniem. MATERIAŁ I METODY: Przed zabiegiem inwazyjnym, 10 ml krwi obwodowej od 10 pacjentek w celu wyizolowania bezkomórkowego płodowego DNA i wykonania nieinwazyjnej nieinwazyjnego testu trisomii płodu (NIFTY dostarczonego przez Beijing Genomics Institute, BGI, Shenzen, Chiny). WYNIKI: Trzy z 10 próbek wykazały nieprawidłowy kariotyp w tradycyjnym kariotypowaniu. kariotypowania. Było 9 rozstrzygających wyników NIFTY. NIFTY wykrył 1 z 2 trisomii 18. Ilość bezkomórkowego DNA płodu w osoczu matki w drugiej sondzie z trisomią 18 drugiej sondzie z trisomią 18 była niezadowalająca dla rozstrzygającego wyniku NIFTY. W 1 przypadku tradycyjne kariotypowanie ujawniło mozaicyzm niemożliwy do wykrycia za pomocą NIFTY --- Częstość występowania liczbowych aberracji chromosomowych wynosi około 5% podczas całej ciąży i około 0,2% u żywo urodzonych dzieci. ciąży i około 0,2% u żywo urodzonych niemowląt. Najczęściej obserwowanymi aberracjami liczbowymi u żywo urodzonych dzieci są trisomie chromosomów 13, 18, 21, X i Y oraz monosomia chromosomu X. monosomia chromosomu X. Szacuje się, że około 70-80% noworodków z aneuploidiami rodzą kobiety, u których nie występowały oczywiste czynniki ryzyka. czynników ryzyka, dlatego też, zgodnie z niedawną rekomendacją PTG, diagnostyka prenatalna prenatalna zwiększająca wykrywalność aneuploidii płodu powinna być oferowana całej populacji kobiet. całej populacji kobiet. Ze względu na ryzyko powikłań związanych z z badaniami inwazyjnymi oraz dużą liczbę niepotrzebnie wykonywanych badań tego typu, postuluje się, aby diagnostyka inwazyjna była stosowana w ściśle określonych przypadkach, a nieinwazyjna przypadkach, a diagnostyka nieinwazyjna powinna mieć charakter przesiewowy Diagnostyka nieinwazyjna obejmuje: 1) szczegółową ultrasonografię wykonywaną w 11-13 (+6 dni) hbd oraz w 18-24 hbd; 2) badania biochemiczne: PAPP-A (test w I trymestrze ciąży (test pierwszego trymestru) i test potrójny (test drugiego trymestru) oraz rzadziej wykonywane: test podwójny, poczwórny i zintegrowany. Wysoka wykrywalność aberracji aberracji chromosomowych w testach nieinwazyjnych (co najmniej 75%, przy nie więcej niż 5% ryzyku uzyskania wyników fałszywie dodatnich) oraz brak strat ciąż związanych z procedurą stanowią zaletę nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej. --- Ciężarna kobieta, która była nosicielką zrównoważonej translokacji chromosomowej [46,XX, t(1;6) (p31;q14)] i która miała sześć poronień, odmówiła przeprowadzenia inwazyjnych testów ale zgodziła się na nieinwazyjną diagnostykę prenatalną poprzez analizę komórek płodu we krwi matki. Przeciwciało monoklonalne (Mab) przeciwko łańcuchom zeta (z) i gamma (gamma) zarodkowej i płodowej hemoglobiny zostały użyte do identyfikacji płodowych erytrocytów płodowych (FNRBC). Nie wykryto żadnych FNRBC w 7 tygodniu, jeden anty-z-dodatni FNRBC wykryto w 11 tygodniu, a 12 anty-gamma-dodatnich FNRBC wykryto w 20 tygodniu. Fluorescencyjną hybrydyzację in situ przeprowadzono przy użyciu sond dla chromosomów X, Y, 1 i 6 w celu identyfikacji płci płodu i obecności niezrównoważonych chromosomów. niezrównoważonej translokacji chromosomowej. Wstępna diagnoza prenatalna została płodu płci żeńskiej z dysomią chromosomów 1 i 6. Dziecko płci żeńskiej z kariotypem 46,XX urodziło się o czasie. Jest to pierwsza próba wykluczenia translokacji chromosomowej przy użyciu komórek płodowych wyizolowanych z krwi matki. Istnieje jest zaletą stosowania komórek płodowych izolowanych z krwi matki do nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej. nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej u par, u których w przeszłości wystąpiły liczne poronień z powodu translokacji rodzicielskiej i które odmawiają przeprowadzenia testów inwazyjnych w ciąży, która trwa do drugiego trymestru. --- Osocze krwi kobiet w ciąży zawiera krążący bezkomórkowy płodowy DNA (ccffDNA), pochodzące z łożyska. Wykorzystanie tego DNA do nieinwazyjnego wykrywania aneuploidii płodu przy użyciu masowo równoległego sekwencjonowania (MPS) przez syntezę zostało udowodnione wcześniej. Wydajność sekwencjonowania może, jednak zależeć od platformy MPS i dlatego zbadaliśmy możliwość możliwość multipleksowego MPS-by-ligation, przy użyciu systemu Applied Biosystems SOLiD(™) 4. DNA wyizolowane z próbek osocza od 52 kobiet w ciąży, noszących normalnych lub aneuploidalnych płodów, było sekwencjonowane w multipleksowych seriach 4, 8 lub 16 próbek jednocześnie. próbek jednocześnie. Odczyty sekwencji zostały zmapowane do ludzkiego genomu referencyjnego do ludzkiego genomu referencyjnego i określone ilościowo zgodnie z ich lokalizacją genomową. W przypadku płodu płodu, oczekuje się, że liczba odczytów nieprawidłowego chromosomu będzie wyższa lub niższa niż w normalnych próbkach referencyjnych. Aby statystycznie określić statystycznie, wyniki Z na chromosom zostały obliczone zgodnie z wcześniejszym opisem, przy czym progi dla aneuploidii ustawione na > +3,0 i < -3,0 dla chromosomalnej nadreprezentacji lub niedostatecznej reprezentacji. Wszystkie próbki z aneuploidii płodowych dały Z poza progami dla nieprawidłowych chromosomów, bez wyników fałszywie ujemnych lub dodatnich. wyników fałszywie ujemnych lub dodatnich. Pełnowymiarowe aneuploidie płodowe mogą być zatem niezawodnie wykrywane w osoczu matki przy użyciu podejścia multipleksowego MPS-by-ligation. Ponadto wyniki uzyskane z próbki z ciąży z 45,X w cytotrofoblastach w warstwie komórek cytotrofoblastycznych i 46,XX w mezenchymalnych komórkach rdzenia pokazują że ccffDNA pochodzi z warstwy komórek cytotrofoblastycznych. Rozbieżności między strukturą genetyczną tej warstwy komórek a samym płodem są dobrze znane. płodu są dobrze znane, dlatego należy zachować ostrożność przy przekładaniu wyników na sam płód. płodu. --- Niedawna premiera nowych, nieinwazyjnych testów prenatalnych na aneuploidię płodu z wykorzystaniem bezkomórkowego DNA płodu (cffDNA) zostało okrzyknięte rewolucją w badaniach prenatalnych prenatalnych i wywołało znaczne zainteresowanie komercyjne w tej dziedzinie. Trwające badania badania zapowiadają pojawienie się szerokiej gamy testów cffDNA. Nie jest jednak jeszcze nie jest jeszcze jasne, w jaki sposób testy te zostaną zintegrowane z ugruntowanymi strategiami badań prenatalnych w USA. prenatalnych w USA, ponieważ czas takich testów i stopień, w jakim nowe nieinwazyjne testy w jakim nowe nieinwazyjne testy uzupełnią lub zastąpią istniejące badania przesiewowe i narzędzia diagnostyczne. narzędzia diagnostyczne pozostają niepewne. Twierdzimy, że istnieje pilna potrzeba, aby decydentów, organów regulacyjnych i stowarzyszeń zawodowych, aby zapewnić wytyczne dotyczące najbardziej efektywny i etyczny sposób wprowadzenia takich testów do praktyki klinicznej w USA. do praktyki klinicznej w USA. --- W 17(+4) tygodniu wyniki nieinwazyjnych badań prenatalnych (NIPT) 24-letniej matki wykazały wysokie ryzyko monosomii X (45, X). matki wykazały wysokie ryzyko monosomii X (45, X). Nieprawidłowo ukształtowana głowa i wady w prenatalnym badaniu ultrasonograficznym w 19(+3) tygodniu. Amniopunkcja przeprowadzona w 19(+3) tygodniu zidentyfikowała kariotyp 47, XX, +18, który sugerowało, że NIPT nie wykrył trisomii 18 (T18) w tym przypadku. Z Dalsze masowo równoległe sekwencjonowanie (MPS) krwi matki, płodu i tkanek łożyska tkanki łożyska, znaleźliśmy ograniczony mozaicyzm łożyskowy (CPM) z płodem bez mozaiki T18 i wieloklonalnym łożyskiem z wysoką częstością występowania 45, X i niskim poziomem komórek komórek T18. Badania FISH i SNP-array z tkanki łożyska potwierdziły rozbieżność genetyczną między płodem a łożyskiem. Ponieważ głównym źródłem DNA wolnego od komórek płodowych, które ocenia NIPT, pochodzi głównie z komórek trofoblastu. komórek trofoblastu, poziom mozaicyzmu łożyskowego T18 może powodować fałszywie ujemny wynik NIPT. NIPT w tym rzadkim przypadku podwójnej aneuploidii. --- Ten dokument został zarchiwizowany, ponieważ zawiera nieaktualne informacje. Nie nie powinny być wykorzystywane do celów klinicznych, a jedynie do badań historycznych. Najnowsze wytyczne można znaleźć na stronie internetowej czasopisma.
Czy aneuploidię płodu można wykryć za pomocą nieinwazyjnych badań prenatalnych?
Tak, nieinwazyjny test prenatalny bezkomórkowego DNA płodu jest wykorzystywany do badań przesiewowych w kierunku aneuploidii płodu.