Wstęp: Mięsak Ewinga jest agresywnym nowotworem złośliwym kości i tkanek miękkich u dzieci i młodych dorosłych. tkanek miękkich u dzieci i młodych dorosłych. Pomimo postępów w nowoczesnej terapii, Przerzuty występują i powodują wysoką śmiertelność. Wewnątrzkomórkowe cząsteczki Yap, Akt, mTOR i Erk są członkami szlaków sygnałowych, które regulują proliferację komórek nowotworowych. komórek nowotworowych. CEL I METODY: Zbadaliśmy immunohistochemiczną ekspresję tych białek białek w 36 próbkach guza od dorosłych i pediatrycznych pacjentów z guzami mięsaka Ewinga. Ewinga. Wiek pacjentów, płeć, umiejscowienie guza, wielkość guza, stadium kliniczne i przeżycie (całkowite i wolne od choroby). Mikromacierze tkankowe zostały wybarwione przeciwciałami przeciwko białkom Yap, Akt, mTOR i Erk. WYNIKI: Guzy wykazywały zmienną ekspresję Yap, Akt, mTOR i Erk (od ujemnej, niskiej do wysokiej), z od ujemnej, niskiej do wysokiej), przy czym wysoki poziom ekspresji występował odpowiednio u 31%, 53%, 77% i 0%. Immunohistochemiczna ekspresja Akt była związana z gorszym przeżyciem całkowitym i wolnym od choroby (p<0,05). Pozostałe biomarkery nie nie wykazały żadnej różnicy w przeżyciu między niską a wysoką ekspresją. WNIOSEK: Chociaż białka Yap, Akt, mTOR i Erk ulegają ekspresji w mięsaku Ewinga, to mięsaku Ewinga, tylko ekspresja Akt jest związana z gorszym rokowaniem. gorszym rokowaniem. Potrzebne są większe badania, aby zweryfikować te wyniki i zaplanować terapię celowaną, szczególnie przeciwko Akt. --- TŁO: Inaktywacja szlaku Hippo prowadzi do nadekspresji białek TAZ (PDZ-binding PDZ)/YAP (yes-associated protein) i jest związana z gorszymi wynikami prognostycznymi w różnych nowotworach, w tym w raku wątrobowokomórkowym (HCC). gorszymi wynikami prognostycznymi w różnych nowotworach, w tym w raku wątrobowokomórkowym (HCC). Chociaż istnieje kilka doniesień o ukierunkowaniu mikroRNA (miR) na YAP, miR dla TAZ pozostaje niejasne. Celem tego badania jest identyfikacja miR ukierunkowanych na ekspresję TAZ w HCC. METODY: Ekspresja mikroRNA została przeanalizowana przy użyciu Human miFinder 384HC miScript miR PCR i porównano ją między liniami komórkowymi o niskiej i wysokiej ekspresji TAZ. liniami komórkowymi. Następnie wyodrębniliśmy miR-9-3p jako miR supresorowy guza ukierunkowany na TAZ. Zbadaliśmy funkcjonalną rolę miR-9-3p przy użyciu mimetyków i inhibitorów miR-9-3p w liniach komórkowych HCC. w liniach komórkowych HCC). WYNIKI: W liniach komórkowych HCC i próbkach klinicznych HCC stwierdzono odwrotną korelacja między ekspresją miR-9-3p i TAZ. Ekspresja TAZ była indukowana przez leczenie inhibitorem miR-9-3p i była obniżana przez leczenie mimetykiem miR-9-3p mimic. Leczenie mimetykiem miR-9-3p hamowało zdolność proliferacyjną komórek z obniżonej fosforylacji Erk1/2, AKT i β-kateniny w HLF. Odwrotnie, leczenie inhibitorem miR-9-3p przyspieszyło wzrost komórek w porównaniu z kontrolą w HuH1. WNIOSKI: MikroRNA-9-3p został zidentyfikowany jako miR supresor guza ukierunkowany na ekspresję TAZ w komórkach HCC. --- Geranylgeranylacja białek (GGylation) jest ważnym procesem biochemicznym dla wielu komórkowych cząsteczek sygnalizacyjnych. wielu komórkowych cząsteczek sygnalizacyjnych. Poprzednie badania wykazały, że GGylacja jest niezbędna dla przeżycia komórek w wielu typach nowotworów. Jednak mechanizm molekularny mechanizm pośredniczący w efekcie przeżycia komórek pozostaje nieuchwytny. W niniejszym raporcie że szlak Hippo pośredniczy w zależnej od GGylacji proliferacji i migracji komórek raka piersi. migrację w komórkach raka piersi. Blokada GGylacji zwiększyła fosforylację Mst1/2 i Lats1 oraz hamowała aktywność YAP i TAZ oraz transkrypcję zależną od szlaku Hippo-YAP/TAZ. oraz transkrypcję zależną od szlaku Hippo-YAP/TAZ. Wpływ blokady GGylacji na hamowanie proliferacji komórek raka piersi proliferacji i migracji komórek raka piersi jest zależny od szlaku sygnalizacji Hippo-YAP/TAZ, w której YAP wydaje się regulować proliferację komórek i TAZ reguluje migrację komórek. Ponadto, zależna od GGylacji proliferacja komórek jest skorelowana z aktywnością YAP/TAZ w komórkach raka piersi. Wreszcie, Gγ i RhoA są białkami GGylowanymi, które mogą przekazywać sygnały GGylacji do Hippo-YAP/TAZ. sygnały do szlaku Hippo-YAP/TAZ. Podsumowując, nasze badania wykazały, że szlak Hippo-YAP/TAZ jest niezbędny dla zależnej od GGylacji proliferacji i migracji komórek nowotworowych. --- YAP (Yes-associated protein) i TAZ (transcriptional coactivator with motywem wiążącym PDZ) są głównymi efektorami szlaku Hippo, który wpływa na homeostazę tkanek, wielkość narządów i rozwój nowotworów. Nieprawidłowa hiperaktywacja YAP/TAZ powoduje przerost tkanek i nowotworzenie, podczas gdy ich inaktywacja upośledza rozwój i regenerację tkanek. Dynamiczna i precyzyjna kontrola aktywności YAP/TAZ jest zatem ważna dla zapewnienia właściwej fizjologicznej regulacji i homeostazy komórek. Tutaj pokazujemy, że aktywacja YAP/TAZ powoduje aktywację ich negatywnych regulatorów, LATS1/2 (duży supresor nowotworów 1/2), tworząc pętlę ujemnego sprzężenia zwrotnego szlaku szlaku Hippo zarówno w hodowanych komórkach, jak i tkankach myszy. YAP/TAZ w kompleksie z czynnikiem transkrypcyjnym TEAD (członek rodziny domen TEA) bezpośrednio indukują ekspresję LATS2. Ponadto YAP/TAZ stymulują również aktywność kinazy LATS1/2 poprzez indukcję NF2 (neurofibromina 2). Ta regulacja sprzężenia zwrotnego jest odpowiedzialna za przejściową aktywację YAP po stymulacji kwasem lizofosfatydowym (LPA) i hamowanie migracji komórek indukowanej przez YAP. Tak więc, ta Pętla sprzężenia zwrotnego za pośrednictwem LATS zapewnia skuteczny mechanizm ustalania solidność i homeostazę regulacji YAP/TAZ. --- Szlak sygnałowy Hippo zbiega się z YAP w celu regulacji wzrostu, różnicowanie i regenerację. Poprzednie badania z nadekspresją białek wykazały, że YAP jest fosforylowany przez swoją kinazę upstream, Lats1/2, na wielu miejscach, w tym w ewolucyjnie konserwowanym miejscu wiążącym 14-3-3, którego fosforylacja którego fosforylacja, jak się uważa, hamuje YAP poprzez wykluczenie go z jądra. Rzeczywiście, jądrowa lokalizacja YAP lub zmniejszona fosforylacja YAP w tym miejscu miejscu (S168 u Drosophila, S127 u ludzi i S112 u myszy) jest szeroko stosowana w obecnej literaturze jako surogat aktywacji YAP, mimo że fizjologiczne znaczenie tego zdarzenia fosforylacji w regulacji endogennego Aktywność YAP nie została zdefiniowana. Tutaj odpowiadamy na to pytanie, wprowadzając mutację knock-in Yap(S112A) w endogennym locus Yap. Myszy Yap(S112A) są zaskakująco normalne pomimo jądrowej lokalizacji zmutowanego białka YAP in vivo i głębokich defektów translokacji cytoplazmatycznej in vitro. Co ciekawe, zmutowane myszy Yap(S112A) wykazują kompensacyjny spadek poziomu białka YAP z powodu zwiększonej fosforylacji w specyficznym dla ssaków miejscu miejscu fosfodegronowym na YAP. Odkrycia te ujawniają solidny mechanizm homeostatyczny który utrzymuje fizjologiczne poziomy aktywności YAP i ostrzega przed domniemanym wykorzystaniem samej lokalizacji YAP jako surogatu aktywności YAP. --- Szlak Hippo jest ważną siecią sygnalizacyjną kontrolującą rozmiar narządów i głównym mechanizmem regulacyjnym główny mechanizm regulacyjny hamowania kontaktu komórkowego. Białko związane z tak (YAP) i koaktywator transkrypcji z motywem wiążącym PDZ (TAZ) są jego celami i końcowymi efektorami. i końcowymi efektorami: zahamowanie szlaku promuje translokację YAP/TAZ translokację do jądra, gdzie wchodzą w interakcje z domeną transkrypcyjną czynniki transkrypcyjne i koaktywują ekspresję genów docelowych, promując proliferację komórek. genów docelowych, promując proliferację komórek. Defekty w tym szlaku mogą powodować fenotypów nadmiernego wzrostu z powodu deregulacji proliferacji komórek macierzystych i apoptozy. apoptozy; członkowie szlaku są bezpośrednio zaangażowani w rozwój raka. Farmakologiczna regulacja tego szlaku może być przydatna w profilaktyce raka profilaktyce, leczeniu i medycynie regeneracyjnej; obecnie kilka związków może selektywnie modulować szlak związków może selektywnie modulować ten szlak. W niniejszym przeglądzie przedstawiamy przegląd szlaku Hippo, sekwencję i analizę strukturalną YAP/TAZ, znane farmakologiczne modulatory szlaku, w szczególności te ukierunkowane na YAP/TAZ-TEAD. --- Białko związane z tak (YAP), koaktywator transkrypcji, jest głównym efektorem efektorem szlaku Hippo, który odgrywa kluczową rolę w kontroli wielkości narządów i rozwoju nowotworów. i rozwoju nowotworów. Jednakże, w jaki sposób YAP jest regulowany przez zewnątrzkomórkowe bodźce w procesie nowotworzenia pozostaje nie do końca poznany. Netrin-1, wydzielane białko związane z lamininą, wykazuje aktywność protoonkogenną w nowotworach. w nowotworach. Niemniej jednak, sygnalizacja pośrednicząca w jego onkogennych efekty nie są dobrze zdefiniowane. Tutaj pokazujemy, że netryna-1 poprzez swoje transmembranowe receptory receptory, usunięte w raku jelita grubego i nieskoordynowany-5 homolog, reguluje ekspresję YAP, zwiększając poziom YAP w jądrze i promując proliferację i migrację komórek rakowych. proliferację i migrację komórek nowotworowych. Inaktywacja netryny-1, usuniętej w raka jelita grubego lub nieskoordynowanego-5 homologa B (UNC5B) zmniejsza poziom białka YAP YAP, znosząc progresję komórek nowotworowych przez netrynę-1, podczas gdy knockdown ssaków STE20-podobnej kinazy białkowej 1/2 (MST1/2) lub dużego supresora nowotworu kinazy 1/2 (Lats1/2), dwóch zestawów kinaz rdzeniowych szlaku Hippo, nie ma wpływu na blokowanie indukowanej przez netrynę-1 regulacji YAP. Netryna-1 stymuluje fosfatazę 1A do defosforylacji YAP, co prowadzi do zmniejszonej ubikwitynacji i degradacji, zwiększając akumulację i sygnalizację YAP. Stąd, nasze odkrycia potwierdzają, że netryna-1 wywiera aktywność onkogenną poprzez sygnalizację YAP zapewniając mechanizm łączący sygnały zewnątrzkomórkowe z jądrowym onkogenem YAP. onkogenem YAP.
Wymień procesy, które znajdują się pod kontrolą białka YAP.
Białko związane z tak (YAP), koaktywator transkrypcji, jest głównym efektorem szlaku Hippo, który odgrywa kluczową rolę w kontroli wielkości narządów, poliferacji komórek i rozwoju nowotworów oraz homeostazie i różnicowaniu tkanek.