Cyklofiliny są szeroko wyrażonymi enzymami, które katalizują interkonwersję wiązań peptydowych cis i trans prolin. Naturalne produkty immunosupresyjne immunosupresyjne cyklosporyna A i sangwinaryna A hamują aktywność enzymatyczną cyklofilin. cyklofiliny. Modyfikacja chemiczna zarówno cyklosporyny, jak i sanglifehryny wytworzyła wiele analogów, które hamują cyklofiliny in vitro, ale mają zmniejszone właściwości immunosupresyjne. Trzy nieimmunosupresyjne inhibitory cyklofilin (alisporivir, SCY-635 i NIM811) wykazały skuteczność kliniczną w leczeniu zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C. Dodatkowi kandydaci są na różnych etapach rozwoju przedklinicznego w leczeniu zapalenia wątroby typu C lub mięśnia sercowego. zapalenia wątroby typu C lub uszkodzenia reperfuzyjnego mięśnia sercowego. Ostatnie publikacje sugerują, że inhibitory cyklofiliny mogą mieć zastosowanie w leczeniu różnych infekcji wirusowych i stanów zapalnych. infekcji wirusowych, wskazań zapalnych i nowotworów. W niniejszym przeglądzie udokumentowaliśmy zależności struktura-aktywność nieimmunosupresyjnych cyklosporyn i sanglifehrin w rozwoju klinicznym i przedklinicznym. Aspekty farmakokinetycznych i biologii chemicznej tych kandydatów na leki. opisano. --- Cyklosporyna A, immunosupresor, hamuje aktywność peptydylo-prolylo-cis/trans-izomerazę cyklofilin, a powstały kompleks hamuje aktywność fosfatazy kalcyneuryny. kompleks hamuje aktywność fosfatazy kalcyneuryny. Oba enzymy zostały wykryto w obwodowych zakończeniach nerwowych wyizolowanych z narządu elektrycznego Torpedo Torpedo i wykazano, że wpływa na nie 10 mikrometrów cyklosporyny A. Wśród badanych właściwości cholinergicznych badanych właściwości, wychwyt choliny był specyficznie hamowany przez cyklosporynę A do maksymalnie 40%. Cyklosporyna A zmniejszała szybkość transportu choliny, ale ale nie wiązanie nietransportowalnego analogu choliny hemicholinium-3, wskazując, że nie miało to wpływu na liczbę transporterów błonowych. Poprzez zastosowanie dwóch innych immunosupresorów, FK506, który również hamuje kalcyneurynę, i rapamycyny, która tego nie robi, odkryto dwa różne mechanizmy hamowania wychwytu choliny. zostały odkryte. FK506 hamował szybkość transportu choliny, podczas gdy rapamycyna zmniejszała powinowactwo do choliny. Homolog Torpedo transportera choliny CHT1 o wysokim powinowactwie został sklonowany, a jego aktywność została odtworzono w oocytach Xenopus. Wychwyt choliny przez oocyty wyrażające tCHT1 był hamowany przez wszystkie trzy immunosupresory, a także przez mikroiniekcję specyficznej domeny autoinhibitorowej kalcyneuryny A457-481, wskazując, że fosfataza kalcyneuryna reguluje aktywność CHT1 i może być wspólnym celem cyklosporyny i FK506. Rapamycyna, która zmieniła powinowactwo transportera transportera, mogła działać poprzez immunofilinę na izomeryzację krytycznych prolin krytycznych prolin, które znajdują się w sekwencji tCHT1. --- Czujnik kinazy histydynowej A (KinA) z Bacillus subtilis uruchamia fosforylację, która aktywuje sporulację. Antykinaza KipI zapobiega sporulacji poprzez wiązanie KinA i hamowanie reakcji autofosforylacji. Wykorzystując zmienność kontrastu neutronowego, mutagenezę i dane fluorescencyjne, pokazujemy że dwa monomery KipI wiążą się poprzez swoje domeny C w konserwowanej prolinie w dimeryzacji KinA i domenie fosfotransferu histydyny (DHp). Nasza krystaliczna struktura domeny C KipI ujawnia, że motyw wiążący ma charakterystyczny hydrofobowy rowek utworzony przez pięcioniciowy antyrównoległy arkusz beta; a charakterystyczny dla rodziny cyklofilin białek, które wiążą proliny i często działają jako izomerazy cis-trans peptydylo-prolylowe. Proponujemy, aby domena DHp KinA przekazuje sygnały konformacyjne w celu regulacji aktywności kinazy poprzez tę interakcję, w której pośredniczy prolina. Biorąc pod uwagę, że zarówno homologi KinA, jak i KipI są rozpowszechnione w królestwie bakterii, mechanizm ten ma szerokie znaczenie w transdukcji sygnału bakteryjnego. --- Cyklofiliny są białkami o wszechobecnej ekspresji, które wiążą się z prolinami i mogą katalizować izomeryzację cis/trans reszt prolinowych. Istnieje 17 przypisanych członków rodziny cyklofilin u ludzi, ulegających wszechobecnej ekspresji i zlokalizowanych w cytoplazmie, jądrze lub mitochondriach. Co zaskakujące, wszystkie osiem zlokalizowanych jądrowo cyklofilin jest związanych z kompleksami spliceosomalnymi. kompleksami spliceosomalnymi. Jednak ich szczególne funkcje w tym kontekście są nieznane. Dlatego zaadaptowaliśmy trzy ustalone testy dla in vitro splicingu pre-mRNA w celu zbadania funkcjonalnej roli cyklofilin jądrowych w kontekście ludzkiego spliceosomu. kontekście ludzkiego spliceosomu. Odkryliśmy, że cztery z ośmiu związanych ze spliceosomem wywierają silny wpływ na splicing in vitro. Efekty te są zależne od dawki i, co niezwykłe, unikalnie charakterystyczne dla każdej cyklofiliny. każdej cyklofiliny. Używając zarówno jakościowych, jak i ilościowych środków, pokazujemy, że co najmniej połowa jądrowych cyklofilin co najmniej połowa jądrowych cyklofilin może działać jako czynniki regulujące funkcji spliceosomu in vitro. Niniejsza praca dostarcza pierwszych wymiernych dowody na to, że cyklofiliny jądrowe są czynnikami splicingowymi i zapewniają nowe podejście do przyszłych prac nad opartą na małych cząsteczkach modulacją splicingu pre-mRNA splicingu.
Czy cyklofiliny są białkami wiążącymi się z prolinami?
Cyklofiliny są białkami o wszechobecnej ekspresji, które wiążą się z prolinami.