Nadekspresja białka grupy polycomb enhancer of zeste homologue 2 (EZH2) została stwierdzona w wielu nowotworach złośliwych, w tym w raku prostaty. (EZH2) stwierdzono w kilku nowotworach złośliwych, w tym w raku prostaty, z agresywnym fenotypem. agresywnym fenotypem. Amplifikacja genu została wcześniej w kilku nowotworach złośliwych, ale nie w raku prostaty. Naszym celem była ocena liczby kopii genu i zmian ekspresji EZH2 w raku prostaty. raka prostaty. Liczba kopii EZH2 w liniach komórkowych (LNCaP, DU145, PC-3, 22Rv1), ksenograftach (n = 10) i guzach klinicznych (n = 191) badano za pomocą fluorescencji w hybrydyzacji in situ. Wszystkie linie komórkowe wykazywały wzrost EZH2. Osiem z dziesięciu ksenograftów wykazało zwiększoną liczbę kopii genu, w tym jeden przypadek wysoki poziom amplifikacji (>lub=5 kopii genu i stosunek EZH2/centromer >lub=2). >lub=2). 34/125 (27%) nieleczonych raków prostaty wykazywało zwiększoną liczbę kopii, ale tylko jeden przypadek ale tylko jeden przypadek amplifikacji niskiego poziomu (> lub = 5 kopii genu i stosunek EZH2/centromer <2), podczas gdy połowa (25/46) raków opornych na hormonoterapię wykazywała zwiększoną liczbę kopii. wykazała zwiększoną liczbę kopii, w tym siedem przypadków amplifikacji niskiego poziomu i trzy przypadki amplifikacji amplifikacji i trzy przypadki amplifikacji wysokiego poziomu (P < 0,0001). Ekspresja EZH2 była znacząco (P = 0,0009) wyższa w raku prostaty opornym na hormony raka prostaty w porównaniu z łagodnym rozrostem gruczołu krokowego lub nieleczonym rakiem raka, zgodnie z ilościowym testem RT-PCR w czasie rzeczywistym. Stwierdzono również ekspresję białka EZH2 była wyższa w guzach opornych na hormony niż w guzach niż w guzach nieleczonych hormonalnie za pomocą immunohistochemii. Amplifikacja genu EZH2 była znacząco (P < 0,05) związana ze zwiększoną ekspresją białka EZH2. Dane Dane pokazują, że amplifikacja genu EZH2 jest rzadka we wczesnym raku prostaty, podczas gdy część guzów w późnym stadium zawiera amplifikację genu prowadzącą do nadekspresji białka EZH2. do nadekspresji genu, co wskazuje na znaczenie EZH2 w progresji raka prostaty. progresji raka prostaty. --- Inhibitor wiązania DNA/białko różnicowania 4 (ID4) jest dominująco ujemny. regulator transkrypcji pętli helisy jest epigenetycznie wyciszony z powodu hipermetylacji promotora w wielu nowotworach, w tym prostaty. Jednak mechanizm mechanizm związany z epigenetycznym wyciszaniem ID4 nie jest jednak znany. Tutaj, wykazujemy, że metylacja promotora ID4 jest inicjowana przez zależną od EZH2 tri-metylację histonu 3 przy lizynie 27 (H3K27me3). ID4 wyrażające (LNCaP) i bez ekspresji (DU145 i C81) linie komórkowe raka prostaty zostały użyte do zbadania wzbogacenia EZH2, H3K27me3 i DNMT1 na promotorze ID4 przez immunoprecypitację chromatyny (Chromatin immunoprecypitacji chromatyny (ChIP). Wzbogacenie EZH2, H3K27Me3 i DNMT1 w liniach komórkowych DU145 i C81 w porównaniu do linii komórkowej LNCaP wyrażającej ID4. Zablokowanie EZH2 w linii komórkowej DU145 doprowadziło do ponownej ekspresji ID4 i zmniejszenia wzbogacenia EZH2, H3K27Me3 i DNMT1, wykazując, że ID4 jest regulowany w sposób zależny od EZH2. sposób. Dane ChIP na próbkach tkanek raka prostaty i liniach komórkowych sugerowały EZH2 i znaczniki H3K27Me3 na promotorze ID4. Podsumowując, nasze dane wskazują na mechanizm zależny od PRC2 w wyciszaniu promotora ID4 w raku prostaty poprzez rekrutację EZH2 i odpowiedni wzrost H3K27Me3. Zwiększona EZH2, ale zmniejszona ekspresja ID4 w raku prostaty silnie wspiera ten model. model. --- Enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) odgrywa kluczową rolę w embrionalnych i somatycznych komórkach macierzystych. komórkach macierzystych dla ich proliferacji i różnicowania. Jednakże, rola i EZH2 w komórkach macierzystych raka prostaty (PCSCs) pozostają jednak nieznane. nieznane. Niniejsze badanie miało na celu zbadanie wpływu EZH2 na PCSC. PCSCs zostały wyizolowane z linii komórkowej ludzkiego raka prostaty LNcap za pomocą fluorescencji aktywowanego fluorescencją sortowania komórek (FACS). Ekspresję EZH2 porównano między PCSC i nie-PCSC. Związek między funkcją EZH2 a wzrostem PCSC został za pomocą siRNA za pomocą knock-down EZH2. Wzrost komórek był badano za pomocą MTT, cykl komórkowy i apoptozę PCSC badano za pomocą analizy cytometrycznej flow analizę cytometryczną. Na koniec określono poziom miRNA szlaku upstream za pomocą testu reporterowego lucyferazy, a regulatory cyklu szlaku downstream zostały zbadane za pomocą reakcji łańcuchowej odwrotnej transkryptazy-polimerazy. Wyniki wykazały, że linia komórkowa LNcap składała się z większej liczby komórek CD44+/CD133+ w porównaniu z linią komórkową PC-3. EZH2 był regulowany w górę w PCSC w porównaniu z komórkami innymi niż PCSC. Wyciszenie EZH2 hamowało wzrost komórek i cykl komórkowy oraz promowało postęp apoptozy. Co więcej, EZH2 był bezpośrednim celem miR-101 w PCSCs, a poziomy mRNA EZH2 były odwrotnie skorelowane z ekspresją miR-101 a cyklina E2 (regulator cyklu komórkowego) była tłumiona przez siEZH2. Podsumowując Podsumowując, EZH2 jest niezbędny dla wzrostu PCSC, częściowo poprzez negatywną regulację przez miR-101 i pozytywną regulację cykliny E2. --- EZH2 jest częścią kompleksu represyjnego PRC2, który ulega nadekspresji w wielu typach nowotworów. wielu typach nowotworów i jest zaangażowany w inicjację i progresję raka prostaty. progresji. Tutaj zidentyfikowaliśmy EZH2 jako cel onkogenu MYC w raku prostaty i pokazujemy, że MYC koordynuje regulację EZH2 poprzez środki transkrypcyjne i posttranskrypcyjne. środki potranskrypcyjne. Chociaż wcześniejsze badania nad rakiem prostaty ujawniły szereg możliwych mechanizmów regulacji EZH2 w górę, zmiany te nie mogą tłumaczyć nadekspresji EZH2 w wielu pierwotnych rakach prostaty, ani w większości przypadków PIN o wysokim stopniu złośliwości. Donosimy, że regulacja Myc w prostacie myszy prostaty u myszy powoduje nadekspresję mRNA i białka EZH2, co zbiega się z miR-26a i miR-26b, znanymi regulatorami EZH2 w niektórych typach komórek innych niż prostata. typach komórek, choć nie w innych. Ponadto, w ludzkich komórkach raka prostaty, Myc negatywnie reguluje miR-26a i miR-26b poprzez bezpośrednie wiązanie z ich macierzystymi promotorami genów Pol Pol II, a wymuszona nadekspresja miR-26a i miR-26b w komórkach raka gruczołu krokowego komórek raka prostaty powoduje obniżenie poziomu EZH2 i zahamowanie proliferacji. proliferacji. W ludzkich próbkach klinicznych miR-26a i miR-26b są regulowane w dół w większości pierwotnych nowotworów prostaty. Jako oddzielny mechanizm regulacji mRNA EZH2 stwierdzamy, że Myc wiąże się bezpośrednio z promotorem EZH2 i aktywuje jego transkrypcję. i aktywuje transkrypcję promotora EZH2. Wyniki te łączą dwie główne ścieżki w raku prostaty poprzez zapewnienie dwóch dodatkowych i komplementarnych mechanizmów regulowanych przez Myc, za pomocą których EZH2 występuje i jest egzekwowana podczas kancerogenezy prostaty. Ponadto wyniki wskazują na mechanizmy napędzane przez EZH2, za pomocą których Myc może stymulować inicjację nowotworu prostaty i progresję choroby. --- CEL: EZH2 jest członkiem grupy genów polycomb i jest ważny w regulacji cyklu komórkowego. regulacji cyklu komórkowego. Zwiększona ekspresja EZH2 została wcześniej powiązana z inwazyjnym wzrostem i agresywnym zachowaniem klinicznym w raku prostaty i piersi. i raka piersi, ale związek z proliferacją komórek nowotworowych nie został zbadany w ludzkich guzach. Celem tego badania było potwierdzenie wcześniejszych ustaleń w populacji, w tym guzów, które nie były wcześniej badane. wcześniej nie badane. PACJENCI I METODY: W naszym badaniu obejmującym prawie 700 pacjentów zbadaliśmy ekspresję EZH2 i jej związek z proliferacją komórek nowotworowych i innymi markerami nowotworowymi markerami nowotworowymi, cechami klinicznymi i rokowaniem w czerniaku skóry i nowotworach endometrium, prostaty i piersi. WYNIKI: Silna ekspresja EZH2 była związana ze zwiększoną proliferacją komórek nowotworowych proliferacją komórek nowotworowych we wszystkich czterech typach nowotworów. Znaleziono również powiązania między EZH2 i ważnymi zmiennymi kliniczno-patologicznymi. Ekspresja EZH2 wykazała znaczący wpływ prognostyczny w czerniaku, prostacie i raku endometrium w jednoczynnikowych analizach przeżycia i ujawniła niezależne znaczenie prognostyczne w raku endometrium i prostaty. WNIOSKI Nasze odkrycia wskazują na EZH2 jako nowy i niezależny marker prognostyczny w raku endometrium i potwierdzają wcześniejsze ustalenia dotyczące raka prostaty i piersi. Ponadto ekspresja EZH2 była związana z cechami agresywnego czerniaka skóry. Fakt, że fakt, że EZH2 może identyfikować zwiększoną proliferację komórek nowotworowych i agresywne w kilku nowotworach może mieć praktyczne znaczenie, ponieważ białka z grupy polycomb zostały zasugerowane jako kandydaci do terapii celowanej. EKSPRESJA EZH2 powinna być zatem dalej badana jako możliwy czynnik predykcyjny. czynnik predykcyjny. --- TŁO: Białko EZH2 z grupy Polycomb jest zaangażowane w progresję raka prostaty. progresji. EZH2 promuje proliferację i inwazyjność komórek raka prostaty. Opisujemy związek między funkcją EZH2 a polimeryzacją aktyny w komórkach raka prostaty. komórkach raka prostaty. METODY: Oceniono jądrową i cytoplazmatyczną ekspresję EZH2 w łagodnych i złośliwych próbkach tkanki prostaty. oceniono próbki tkanek prostaty. Związek między funkcją EZH2 a a polimeryzacją aktyny w komórkach raka prostaty zbadano za pomocą EZH2 za pomocą siRNA. Wpływ knock-down EZH2 na dynamikę polimeryzacji aktyny dynamikę polimeryzacji aktyny analizowano biochemicznie przy użyciu analizy immunoblot frakcji lizatu komórkowego frakcji lizatu komórkowego i morfologicznie przy użyciu immunocytochemii. WYNIKI: Cytoplazmatyczna EZH2 ulega ekspresji na niskim poziomie w łagodnych komórkach nabłonka prostaty komórek nabłonkowych prostaty i ulega nadekspresji w komórkach raka prostaty. Poziomy ekspresji cytoplazmatycznej EZH2 korelują z jądrową ekspresją EZH2 w próbkach raka prostaty próbki. Znokautowanie EZH2 w komórkach raka prostaty PC3 zwiększa ilość polimeryzacji polimeryzacji F-aktyny, wielkość komórek i tworzenie filamentów bogatych w aktynę. WNIOSKI: Cytoplazmatyczna EZH2 ulega nadekspresji w komórkach raka prostaty. FUNKCJA EZH2 sprzyja zmniejszeniu puli nierozpuszczalnej F-aktyny w inwazyjnych komórkach raka prostaty. komórkach raka prostaty. EZH2 może regulować dynamikę polimeryzacji aktyny, a tym samym tym samym promować ruchliwość i inwazyjność komórek raka prostaty. --- Rak prostaty jest główną przyczyną zgonów związanych z rakiem u mężczyzn i zajmuje drugie miejsce po raku płuc. na drugim miejscu po raku płuc. Chociaż istnieją skuteczne metody leczenia chirurgicznego i radioterapii istnieją w przypadku klinicznie zlokalizowanego raka prostaty, rak prostaty z przerzutami pozostaje zasadniczo nieuleczalny. Tutaj pokazujemy, poprzez profilowanie ekspresji genów, że białko grupy polycomb enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) jest ulega nadekspresji w opornym na hormony raku prostaty z przerzutami. Mały interferujące dupleksy RNA (siRNA) skierowane przeciwko EZH2 zmniejszają ilość białka białka EZH2 obecnego w komórkach prostaty, a także hamują proliferację komórek in in vitro. Ektopowa ekspresja EZH2 w komórkach prostaty indukuje transkrypcję represję określonej kohorty genów. Wyciszanie genów, w którym pośredniczy EZH2 wymaga domeny SET i jest osłabiane przez hamowanie aktywności deacetylazy histonów aktywność. Ilości zarówno informacyjnego RNA EZH2, jak i białka EZH2 są zwiększone w przerzutowym raku prostaty. przerzutowego raka prostaty; ponadto, klinicznie zlokalizowane raki prostaty które wyrażają wyższe stężenia EZH2 wykazują gorsze rokowanie. Zatem, rozregulowana ekspresja EZH2 może być zaangażowana w progresję raka prostaty. raka prostaty, a także być markerem, który odróżnia łagodnego raka prostaty od tych zagrożonych śmiertelną progresją. --- TŁO: Represor transkrypcyjny EZH2 jest zaangażowany w kontrolę proliferacji komórek proliferacji w embrionalnych, immortalizowanych i transformowanych komórkach. Ekspresja EZH2 w raku prostaty koreluje z progresją do opornej na hormony i z przerzutami, ale nie wiadomo, czy EZH2 odgrywa szczególną rolę w nabywaniu zaawansowanego fenomenu raka prostaty. nabyciu zaawansowanego fenotypu raka prostaty. METODY: Stosując knockdown siRNA, zbadaliśmy rolę EZH2 w utrzymaniu proliferacji komórek raka prostaty. proliferacji i inwazyjności komórek raka prostaty. Używając komórek LNCaP z indukowalną nadekspresją EZH2, zbadaliśmy, czy regulacja EZH2 w górę promuje agresywny fenotyp. WYNIKI: Zablokowanie endogennego EZH2 zmniejszyło proliferację komórek komórek raka prostaty reagujących na androgeny i niezależnych od androgenów. EZH2 hamowała również inwazję komórek raka prostaty. Jednakże, nadekspresja EZH2 w komórkach raka reagujących na androgeny nie wpłynęła znacząco ani na proliferację, ani na inwazyjność. proliferację ani inwazyjność. WNIOSKI: EZH2 promuje proliferację i inwazję komórek raka prostaty, co może tłumaczyć korelację między poziomami ekspresji EZH2 a niekorzystnym rokowaniem raka prostaty. niekorzystnym rokowaniem w raku prostaty. --- Metylotransferaza histonowa EZH2 znajduje się w centrum uwagi epigenetyki nowotworów już od dekady. epigenetyki nowotworów już od dekady, odkąd po raz pierwszy odkryto, że wykazuje ona podwyższoną ekspresję w przerzutowym raku prostaty. Nadal przyciąga wiele uwagi uwagę naukowców ze względu na jego istotną rolę w procesie rozwoju raka rozwoju nowotworu i jego potencjał jako skutecznego celu terapeutycznego. W związku z tym tutaj dokonujemy przeglądu rozregulowania EZH2 w raku prostaty, jego funkcji, regulatory upstream, efektory downstream i aktualny stan metod celowania w EZH2 podejścia. Niniejszy przegląd stanowi zatem kompleksowy przegląd EZH2 w kontekście raka prostaty. --- Białko grupy polycomb enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) jest powiązane z agresywnym rakiem prostaty i może być odpowiednim celem w specyficznej immunoterapii. W tym badaniu próbowaliśmy zidentyfikować peptydy pochodzące od EZH2 które mają potencjał do generowania reaktywnych na raka cytotoksycznych limfocytów T (CTL) u pacjentów z rakiem prostaty z ludzkim antygenem leukocytarnym (HLA) -A2+. Dwanaście Peptydy pochodzące od EZH2 zostały przygotowane w oparciu o motyw wiążący HLA-A2. Te Kandydaci na peptydy zostali najpierw sprawdzeni pod kątem ich zdolności do rozpoznawania przez immunoglobulinę G (IgG), a następnie przez ich zdolność do indukowania specyficznych dla peptydów cytotoksycznych limfocytów T (CTL). W rezultacie pięć peptydów EZH2 rozpoznawanych przez IgG (EZH2 120-128, EZH2 165-174, EZH2 569-577, EZH2 665-674 i EZH2 699-708) były często wykrywane w osoczu pacjentów z rakiem prostaty. Wśród nich, peptydy EZH2 120-128 i EZH2 165-174 skutecznie indukowały ograniczone do HLA-A2 i reaktywne na raka CTL od pacjentów z rakiem prostaty. Cytotoksyczność była zależała głównie od specyficznych dla peptydu EZH2 i ograniczonych do HLA-A2 limfocytów T CD8+. Wyniki te wskazują, że peptydy EZH2 120-128 i EZH2 165-174 mogą być być obiecującymi kandydatami w immunoterapii peptydowej dla pacjentów z rakiem prostaty HLA-A2+. pacjentów z rakiem prostaty. --- TŁO: c-Myc, EZH2 i p27 zostały zdefiniowane jako modulujące zachowanie raka prostaty z działaniem pro- lub przeciwnowotworowym i miały zdolność do przewidywania progresji raka prostaty, ale badania ich współekspresji wartości prognostycznej są rzadkie. Niniejsze badanie miało na celu zbadanie prognostycznej prognostycznych u pacjentów z rakiem prostaty średniego ryzyka po operacji. raka prostaty po operacji. METODY: Poziomy ekspresji c-Myc, EZH2 i p27 u 129 pacjentów ze z rakiem prostaty średniego ryzyka oceniano za pomocą immunohistochemii w sposób w sposób półilościowy. Profile ekspresji tych trzech markerów zostały przeanalizowano i zbadano pod kątem związku z nawrotem biochemicznym. WYNIKI: W sumie w pięćdziesięciu ze 129 przypadków wystąpił nawrót biochemiczny podczas mediana czasu obserwacji 31 miesięcy (zakres, 6 - 60 miesięcy). Spośród tych nawrotów pacjentów, jeden przypadek bez i 10 przypadków z jakimkolwiek pojedynczym pozytywnym markerem 39 przypadków wykryto z dowolnymi dwoma lub wszystkimi trzema dodatnimi markerami (22 (22 przypadki z dowolnymi dwoma i 17 przypadków ze wszystkimi trzema dodatnimi markerami). Analiza przeżycia analiza wykazała, że pacjenci z nadekspresją c-Myc lub EZH2 i niższą ekspresją p27 wykazywali istotnie wyższy wskaźnik nawrotów biochemicznych. Późniejsza analiza wieloczynnikowa wykazała, że stany ekspresji c-Myc, EZH2 i p27 wykazały potencjał w przewidywaniu nawrotu choroby. W szczególności, połączenie trzech markerów razem jako "wskaźnik złożony" (0 lub 1, vs. 2 lub 3 pozytywnych markerów) zapewniało silną wartość prognostyczną (HR 6,57, 95% CI 3,02 - 14.31, P < 0.001). Istniała znacząca różnica między podgrupami pacjentów z 0 lub 1 oraz tymi z 2 lub 3 dodatnimi markerami ekspresji markerów, a wskaźnik złożony trzech markerów był niezależnym czynnikiem ryzyka dla nawrotu u pacjentów z rakiem prostaty średniego ryzyka po operacji. operacji. WNIOSEK: Złożony wskaźnik c-Myc, EZH2 i p27 może być ceniony jako silny parametr prognostyczny dla pacjentów z rakiem prostaty średniego ryzyka po operacji operacji, a pooperacyjna terapia adiuwantowa może być odpowiednio dostosowana. --- Białka polikombinowe BMI-1, EZH2 i SIRT1 są charakterystycznymi składnikami kompleksów represorowych odpowiednio odpowiednio kompleksów represorowych PRC1, PRC2 i PRC4, które modyfikują chromatynę. chromatynę. Co więcej, EZH2 może wpływać na metylację DNA poprzez bezpośrednią interakcję z metylotransferazami DNA. Ekspresja EZH2 wzrasta podczas progresji raka prostaty podczas progresji raka prostaty, podczas gdy BMI-1 i SIRT1 nie są dobrze zbadane. Podobnie jak ekspresja EZH2 ekspresja, zmiany metylacji DNA nasilają się w wyższych stadiach raka prostaty. raka prostaty, co rodzi pytanie, czy te zmiany epigenetyczne są ze sobą powiązane. Ekspresja EZH2, BMI-1, SIRT1 i metylotransferaz DNA DNMT1 i DNMT3B mierzona metodą qRT-PCR w 47 pierwotnych rakach prostaty została porównana z APC, ASC, GSTP1, hipermetylacją RARB2 i RASSF1A oraz hipometylacją LINE-1. SIRT1 i DNMT3B ulegały nadekspresji w tkankach nowotworowych w stosunku do łagodnych, podczas gdy BMI-1 był raczej regulowany w dół, a DNMT1 znacznie się zmniejszył. Niemniej jednak, nowotwory z wyższą ekspresją DNMT1 i BMI-1 miały gorszą charakterystykę kliniczną. kliniczną, podobnie jak te z podwyższonym poziomem EZH2. W szczególności, powyżej mediany DNMT1 przewidywała gorsze rokowanie. Nadekspresja EZH2 i SIRT1 była dobrze skorelowana z podwyższonym MKI67. Immunohistochemia potwierdziła ograniczoną EZH2 i heterogenną nadekspresję DNMT3B i wyjaśniła spadek BMI-1 przez wyraźną heterogenność DNMT3B. przez wyraźną heterogeniczność wśród komórek nowotworowych. Nadekspresja EZH2, szczególnie wśród wszystkich badanych czynników, była związana z częstszą hipermetylacją, w szczególności GSTP1 i RARB2, a także z hipometylacją LINE-1 hipometylacją. Nasze dane ujawniają złożone zmiany w składzie kompleksów represorów polycomb w raku prostaty. Heterogenicznie wyrażone BMI-1 i i nieznacznie podwyższony poziom EZH2 mogą charakteryzować mniej złośliwe nowotwory, podczas gdy bardziej agresywne przypadki agresywne przypadki wyrażają oba na wyższych poziomach. SIRT1 wydaje się być ogólnie podwyższony w rakach prostaty. Co ciekawe, nasze dane sugerują bezpośredni wpływ EZH2 na zmienione wzorce metylacji DNA w raku prostaty. --- Enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) jest podjednostką kompleksu Polycomb-Repressive Complex 2 (PRC2). Kompleks 2 (PRC2), który katalizuje trimetylację histonu H3 na Lys 27 (H3K27) i bierze udział w represji genów. EZH2 ulega amplifikacji i nadekspresji w różnych nowotworach, w tym raku prostaty i piersi. Nadekspresja EZH2 jest związana z inwazją i progresją nowotworów złośliwych, szczególnie z progresją raka prostaty. Tutaj dokonujemy przeglądu strukturę i biologiczną funkcję EZH2, szczególnie koncentrując się na jego aktywności w procesie nowotworzenia. --- TŁO: Kilka badań powiązań dostarczyło dowodów na istnienie genu agresywności raka prostaty na chromosomie 7q. Niniejszy raport szczegółowo przedstawia wyniki pierwszego badania przesiewowego mutacji i badania asocjacyjnego EZH2 (zlokalizowanego w 7q35) jako potencjalnego genu kandydującego do rozwoju agresywnego raka prostaty. METODY: W 10 rodzinach z powiązaniem chromosomu 7q31-33 z agresywnym rakiem prostaty rakiem prostaty, zsekwencjonowaliśmy region promotora i wszystkie 20 eksonów EZH2. My genotypowaliśmy 11 wariantów u 287 pacjentów z rakiem prostaty i 96 osób z grupy kontrolnej. Związek między chorobą a wariantami/haplotypami został oceniony z uwzględnieniem biorąc pod uwagę dane kliniczne i nawroty choroby. WYNIKI: Poszczególne miejsca zmienności nie wykazywały znaczących różnic w częstości alleli między częstotliwości alleli między przypadkami a grupą kontrolną. W przeciwieństwie do tego, jeden haplotyp miał wyższą częstotliwość w grupie kontrolnej, a inny haplotyp był znacznie częstszy częstszy w przypadkach z guzami niskiego stopnia (GI/II) i przeżyciem wolnym od progresji (NED). (NED). WNIOSEK: Prawdopodobnie zidentyfikowaliśmy haplotypy, które oznaczają allele mające korzystny wpływ na rozwój raka prostaty. Co więcej, nasze wyniki sugerują, że warianty genetyczne genu EZH2 nie są odpowiedzialne za powiązanie 7q z agresywnym rakiem prostaty. --- CEL: Enhancer of zeste homolog 2 (EZH2), rodzaj represora transkrypcji represor transkrypcji, ulega nadmiernej ekspresji w przerzutowym raku prostaty. W tym badaniu przeanalizowaliśmy mRNA EZH2 w krążących komórkach nowotworowych (CTC) we krwi obwodowej jako biomarker u pacjentów z przerzutowym rakiem prostaty. PACJENCI I METODY: Do pobrania CTC użyto kulek immunomagnetycznych pokrytych Ber-EP4. CTC, a mRNA izolowano za pomocą kulek immunomagnetycznych sprzężonych z oligo-dT. Przeprowadzono reakcję łańcuchową polimerazy z odwrotną transkryptazą dla mRNA EZH2 i zmierzono gęstość ekspresji. zmierzono gęstość ekspresji. Czułość tego testu do wykrywania EZH2 mRNA została określona przez seryjne rozcieńczenia linii komórek ludzkiego raka prostaty. linii komórkowej ludzkiego raka prostaty. Próbki krwi pobrano od 20 pacjentów z przerzutowym lub z przerzutowym lub zlokalizowanym rakiem prostaty i 10 zdrowych ochotników. WYNIKI: Eksperymenty czułości wykazały, że test był bardzo czuły, ponieważ mógł wykryć 10 komórek nowotworowych na 5 ml. Ekspresja mRNA EZH2 została uzyskana z próbek krwi obwodowej pacjentów i osób z grupy kontrolnej. Ekspresja mRNA EZH2 w grupie pacjentów z przerzutowym rakiem prostaty była znacząco wyższa niż w grupie kontrolnej (p=0,023). niż w grupie kontrolnej (p=0,023) i zlokalizowanego raka prostaty (p=0,019). Nie było nie było różnicy między grupą kontrolną a grupą zlokalizowanego raka prostaty (p > 0.05). WNIOSEK: Ekspresja mRNA EZH2 w krążących komórkach nabłonkowych stanowi obiecujący marker obiecujący marker do wykrywania wczesnych przerzutów w raku prostaty. Jednakże, potrzebne są jednak bardziej specyficzne i czułe techniki wykrywania CTC, aby uniknąć zanieczyszczenia komórek jednojądrzastych. zanieczyszczenia komórkami jednojądrzastymi. --- TŁO: Sygnatury molekularne w tkance nowotworowej mogą być przydatne do diagnozy i są związane z przeżywalnością. Wykorzystaliśmy wyniki z mikromacierzy tkankowych mikromacierzy tkankowych (TMA) w celu zdefiniowania kombinacji kandydujących biomarkerów związanych z szybkością progresji raka prostaty po radykalnej prostatektomii, które może zidentyfikować pacjentów z wysokim ryzykiem nawrotu. METODY: Czternaście kandydujących biomarkerów raka prostaty, dla których dostępne są przeciwciała przeciwciała obejmowały hepsynę, kinazę pim-1, E-kadherynę (ECAD; cząsteczkę adhezji komórek cząsteczka), racemaza alfa-metyloacylo-koenzymu A i EZH2 (enhancer of zeste homolog 2, represor transkrypcji). TMA zawierające ponad 2000 próbek guza od 259 pacjentów, którzy przeszli radykalną prostatektomię z powodu zlokalizowanego raka prostaty raka prostaty były badane za pomocą tych przeciwciał. Wyniki immunohistochemii oceniano w połączeniu z parametrami klinicznymi związanymi z progresją raka prostaty z progresją raka prostaty, w tym stadium nowotworu, punktacją w skali Gleasona i poziomem swoistego antygen gruczołu krokowego (PSA). Nawrót zdefiniowano jako poziom PSA po operacji wynoszący więcej niż 0,2 ng/ml. niż 0,2 ng/ml. Wszystkie testy statystyczne były dwustronne. WYNIKI: Umiarkowana lub silna ekspresja EZH2 w połączeniu z co najwyżej umiarkowaną ekspresją ECAD (tj. co najwyżej umiarkowaną ekspresją ECAD (tj. dodatni status EZH2:ECAD) była kombinacją biomarkerów, która najsilniej biomarkerem, który był najsilniej związany z nawrotem raka prostaty. raka prostaty. Status EZH2:ECAD był statystycznie istotnie związany z nawrotem raka prostaty w zestawie treningowym 103 pacjentów (ryzyko względne [RR] = 2,52, 95% przedział ufności [CI] = 1,09 do 5,81; P = 0,021), w walidacji 80 pacjentów (RR = 3,72, 95% CI = 1,27 do 10,91; P =.009) oraz w połączonym zestawie 183 pacjentów (RR = 1,27 do 5,81; P =.021). 183 pacjentów (RR = 2,96, 95% CI = 1,56 do 5,61; P<,001). Status EZH2:ECAD był statystycznie istotnie związany z nawrotem choroby nawet po uwzględnieniu parametrów klinicznych, takich jak stopień zaawansowania nowotworu, Gleasona i poziom PSA (współczynnik ryzyka = 3,19, 95% CI = 1,50 do 6,77; P =.003). WNIOSEK: Status EZH2:ECAD był istotnie statystycznie związany z nawrotem raka prostaty po radykalnej prostatektomii i może być użyteczny w definiowaniu kohorty pacjentów wysokiego ryzyka. --- TŁO: Antygeny ulegające nadekspresji w przerzutowym raku prostaty są odpowiednim celami w immunoterapii przeciwnowotworowej, a jednym z kandydatów jest grupa polycomb białko enhancer of zeste homolog 2 (EZH2). METODY: Jedenaście peptydów pochodzących od EZH2 przygotowano w oparciu o motyw wiążący HLA-A24. motyw. Ci kandydaci na peptydy zostali najpierw sprawdzeni pod kątem ich zdolności do bycia rozpoznawane przez immunoglobulinę G (IgG), a następnie przez ich zdolność do indukowania specyficznych dla peptydów cytotoksycznych limfocytów T (CTL). WYNIKI: IgG reagujące na trzy peptydy EZH2 (EZH2-243 do -252, EZH2-291 do -299 i EZH2-735 do -;742) wykryto w osoczu prawie połowy pacjentów z rakiem prostaty. pacjentów z rakiem prostaty. Wśród nich peptydy EZH2-291 do -299 i EZH2-735 do -742 skutecznie indukowały CTL ograniczone do HLA-A24 i reagujące na raka prostaty CTL od pacjentów z rakiem prostaty. Cytotoksyczność zależała głównie od EZH2 i limfocytów T CD8+. WNIOSKI: Te peptydy EZH2-291 do -299 i EZH2-735 do -742 mogą być obiecującymi kandydatami do immunoterapii peptydowej u pacjentów z rakiem prostaty HLA-A24+ z przerzutami. z przerzutami.
Czy EZH2 jest związany z rakiem prostaty?
EZH2 jest epigenetycznym czynnikiem wywołującym raka prostaty. Zależny od EZH2 H3K27me3 jest zaangażowany w epigenetyczne wyciszanie ID4 w raku prostaty. EZH2 odgrywa aktywną rolę w tym procesie poprzez hamowanie ekspresji TIMP2 i TIMP3 w komórkach raka prostaty. Znokautowanie EZH2 znacznie zmniejsza aktywność proteolityczną MMP-9, tym samym zmniejszając aktywność inwazyjną komórek raka prostaty. Złożony wskaźnik c-Myc, EZH2 i p27 może być ceniony jako silny parametr prognostyczny dla pacjentów z rakiem prostaty średniego ryzyka po operacji, a pooperacyjna terapia adiuwantowa może być odpowiednio dostosowana.