Wstęp: Niedokrwistość Diamonda-Blackfana jest rzadką, klinicznie heterogenną, wrodzona aplazja czerwonokrwinkowa: 40% pacjentów ma wrodzone nieprawidłowości. Ostatnie badania wykazały, że w krajach zachodnich choroba jest związana z heterozygotycznymi mutacjami z heterozygotycznymi mutacjami w genach białek rybosomalnych (RP) u około 50% pacjentów. pacjentów. Nie przeprowadzono badań mających na celu określenie częstości występowania tych mutacji mutacji u azjatyckich pacjentów z niedokrwistością Diamonda-Blackfana. PROJEKT I METODY: Przebadaliśmy 49 japońskich pacjentów z niedokrwistością Diamond-Blackfan (45 probantów) pod kątem mutacji w sześciu znanych genach związanych z niedokrwistością Diamonda-Blackfana. niedokrwistością Diamonda-Blackfana: RPS19, RPS24, RPS17, RPL5, RPL11 i RPL35A. RPS14 był również ze względu na jego domniemany udział w zespole 5q. WYNIKI: Mutacje w RPS19, RPL5, RPL11 i RPS17 zidentyfikowano u pięciu, czterech, dwóch i jednego z probantów. W sumie, 12 (27%) z japońskich pacjentów z niedokrwistością Diamonda-Blackfana miało mutacje w genach białek rybosomalnych. genach rybosomalnych. Nie wykryto mutacji w RPS14, RPS24 lub RPL35A. Wszyscy pacjenci z mutacjami RPS19 i RPL5 mieli nieprawidłowości fizyczne. Co ciekawe, rozszczep podniebienia zaobserwowano u dwóch pacjentów z mutacją RPL5, a anomalie kciuka zaobserwowano u sześciu pacjentów z mutacją RPS19 lub RPL35A. sześciu pacjentów z mutacją RPS19 lub RPL5. W przeciwieństwie do tego, fenotyp fenotyp zaobserwowano u pięciu pacjentów bez mutacji RPL5. WNIOSKI: Zaobserwowaliśmy nieco niższą częstotliwość mutacji w genach białek genach białek rybosomalnych u pacjentów z niedokrwistością Diamonda-Blackfana w porównaniu do częstością zgłaszaną w krajach zachodnich. Dane genotypowo-fenotypowe sugerują związek między anomaliami i mutacjami RPS19 oraz negatywny związek między fenotypem "small-for-date" a mutacjami RPL5. --- Niedokrwistość Diamonda-Blackfana jest rzadkim dziedzicznym zespołem niewydolności szpiku kostnego (5-7 przypadków na milion żywych urodzeń). do siedmiu przypadków na milion żywych urodzeń) charakteryzujący się niedokrwistością generatywną, zwykle makrocytarną niedokrwistością z brakiem lub mniej niż 5% prekursorów erytroidalnych (erytroblastopenia). (erytroblastopenia) w prawidłowym szpiku kostnym. Liczba płytek krwi i białych krwinek są zwykle prawidłowe, ale obserwuje się neutropenię, trombopenię lub trombocytozę. trombocytoza. U 40 do 50% pacjentów z DBA, wrodzone nieprawidłowości, głównie w okolicy głowowej oraz w kciukach i kończynach górnych. i kończyn górnych. Niedawna analiza wykazała korelację fenotyp/genotyp. korelację. Wrodzona erytroblastopenia DBA jest pierwszą ludzką chorobą wynikającą z defektów biogenezy rybosomalnej. Pierwszy rybosomalny gen zaangażowany w DBA, gen białka rybosomalnego (RP) S19 (gen RPS19), został zidentyfikowany w 1999 roku. zidentyfikowany w 1999 roku. Następnie zidentyfikowano mutacje w 12 innych genach RP z łącznej liczby 78 genów RP. 78 genów RP zostały zidentyfikowane w DBA. Wszystkie opisane do tej pory mutacje genów RP są heterozygotyczne, a dziedziczenie dominujące zostało udokumentowane u 40 do 45% osób dotkniętych chorobą. Ponieważ mutacje RP nie zostały jeszcze zidentyfikowane w około 50% przypadków DBA, prawdopodobne jest, że inne jeszcze niezidentyfikowane geny geny zaangażowane w biogenezę rybosomów lub inne szlaki mogą być odpowiedzialne za fenotyp DBA. fenotyp DBA. --- Niniejsze badanie miało na celu zbadanie mutacji genów białek rybosomalnych (RP) u pacjentów z niedokrwistością Diamond Blackfan (DBA). Dwadzieścia jeden przypadków DBA przyjętych do w naszym szpitalu od grudnia 2008 r. do sierpnia 2012 r. zostało przebadanych metodą PCR pod kątem mutacji w dziewięciu znanych genach związanych z DBA: RPS19, RPS24, RPS17, RPL5, RPL11, RPS7, RPL35a, RPS10 i RPS26. Wyniki wykazały, że 8 pacjentów (38,1%) z DBA miało mutacje w genach kodujących białka rybosomalne, w tym mutację RPS19 zidentyfikowano zidentyfikowano u 3 pacjentów, mutacje RPS24, RPS7, RPL5, RPL11 i RPL35A zidentyfikowano odpowiednio zidentyfikowano odpowiednio u 1 pacjenta. Nie wykryto mutacji w RPS17, RPS10 lub RPS26. Anomalie kciuka stwierdzono u 2 pacjentów z mutacją RPL11 lub RPL5, a spodziectwo stwierdzono u 1 pacjenta z mutacją RPS19. To stwierdzono, że częstość mutacji genów kodujących białko rybosomalne u pacjentów z DBA jest niższa niż w krajach zachodnich. U niektórych pacjentów z mutacją RPS19 można zaobserwować spodziectwo, a u niektórych anomalie daktylowe są związane z mutacjami RPL11 i RPL5. --- Niedokrwistość Diamonda-Blackfana (DBA) jest dziedziczną aplazją czerwonych krwinek, która zwykle pojawia się w pierwszym roku życia. Głównymi cechami choroby są są niedokrwistość normochromiczna i makrocytarna, retikulocytopenia i prawie nieobecne progenitory erytroidalne w szpiku kostnym. progenitorów erytroidalnych w szpiku kostnym. U pacjentów występuje również opóźnienie wzrostu i wrodzonymi wadami twarzoczaszki, kończyn górnych, serca i układu moczowego u ~30-50%. wady rozwojowe kończyn górnych, serca i układu moczowego w ~30-50% przypadków. Choroba jest związana z mutacjami punktowymi mutacjami punktowymi i dużymi delecjami w dziesięciu genach białek rybosomalnych (RP) RPS19, RPS24, RPS17, RPL35A, RPL5, RPL11, RPS7, RPS10, RPS26 i RPL26 oraz GATA1 u około 60-65% pacjentów. 60-65% pacjentów. Tutaj opisujemy nową dużą delecję w RPL15, genie, który nie był wcześniej wcześniej uważany za przyczynę DBA. Podobnie jak RPL26, RPL15 ma charakterystyczną cechę charakterystyczną cechę bycia wymaganym zarówno do tworzenia podjednostki 60S, jak i do wydajnego rozszczepiania wewnętrznego transkrybowanego odstępu 1. Ponadto wykryliśmy pięć delecji w genach RP, w których mutacje zostały wcześniej mutacje powodujące DBA: po jednej w RPS19, RPS24 i RPS26 oraz dwie w RPS17. Przetwarzanie przedrybosomalnego RNA było zaburzone w komórkach uzyskanych od pacjentów noszących te delecje, co sugeruje możliwą molekularną podstawę ich patologicznego działania. patologicznego efektu. Dane te identyfikują RPL15 jako nowy gen zaangażowany w DBA i dodatkowo potwierdzają obecność dużych delecji w genach RP u pacjentów z DBA. --- Niedokrwistość Diamonda-Blackfana jest chorobą autosomalną dominującą spowodowaną mutacjami w dziewięciu genach kodujących białka dziewięciu genach kodujących białka rybosomalne. Ponieważ większość mutacji to utrata funkcji i jest wykrywana przez bezpośrednie sekwencjonowanie kodujących eksonów, uznaliśmy, że część z około 50% pacjentów z mutacją ujemną mogła nosić wariant liczby kopii wariant liczby kopii genów białek rybosomalnych. Jako dowód koncepcji, zaprojektowaliśmy multipleksowy test amplifikacji sondy zależnej od ligacji, ukierunkowany na przesiewanie sześciu genów, które są najczęściej zmutowane u pacjentów z niedokrwistością Diamonda-Blackfana: RPS17, RPS19, RPS26, RPL5, RPL11 i RPL35A. Używając tego testu wykazaliśmy, że delecje stanowią około 20% wszystkich mutacji. Połączenie sekwencjonowania i multipleksowej analizy amplifikacji sond zależnej od ligacji tych sześciu genów pozwala na charakterystykę genetyczną około 65% pacjentów. pacjentów, wykazując, że niedokrwistość Diamonda-Blackfana jest bezsprzecznie rybosomopatią. --- Niedokrwistość Diamonda-Blackfana (DBA) to rzadka, czysta aplazja czerwonokrwinkowa, która występuje w okresie niemowlęcym. w okresie niemowlęcym. Około 40% przypadków jest związanych z innymi wadami wrodzonymi. wrodzonymi, w szczególności wadami rozwojowymi kończyn górnych lub twarzoczaszki. Mutacje w genie kodującym białko rybosomalne RPS19 zidentyfikowano u 25% pacjentów z DBA. zidentyfikowano u 25% pacjentów z DBA, z wynikającym z tego upośledzeniem przetwarzania 18S rRNA i tworzenia podjednostki rybosomalnej 40S. Ponadto, mutacje w innych genach mutacje w innych genach kodujących białka rybosomalne stanowią około 25% innych przypadków DBA. Niedawno przeprowadzono analizę myszy, u których gen kodujący eksporter hemu Receptor podgrupy C wirusa białaczki kotów (FLVCR1) został usunięty, co sugeruje, że gen ten może być zaangażowany w patogenezę DBA. Myszy FLVCR1-null wykazują fenotyp fenotyp przypominający fenotyp pacjentów z DBA, w tym niewydolność erytroidalną i wady rozwojowe. wady rozwojowe. Co ciekawe, niektórzy pacjenci z DBA mają powiązanie choroby z chromosomem 1q31, gdzie mapowany jest FLVCR1. Ponadto doniesiono, że komórki komórki od pacjentów z DBA wyrażają alternatywnie splicowane izoformy FLVCR1, które kodują niefunkcjonalne białka. Niniejszym dokonujemy przeglądu znanych ról RPS19 i FLVCR1 odpowiednio w funkcji rybosomów i metabolizmie hemu oraz omawiamy, w jaki sposób niedobór białka rybosomalnego lub eksportera hemu może skutkować tym samym fenotypem. ten sam fenotyp. --- Niedokrwistość Diamonda-Blackfana (DBA) to niedokrwistość hipoplastyczna charakteryzująca się upośledzoną produkcją czerwonych krwinek. produkcji czerwonych krwinek, przy czym około połowa wszystkich przypadków przypisywana jest mutacjom przypisuje się mutacjom genów białek rybosomalnych. Przeprowadziliśmy sekwencjonowanie egzomu u dwojga rodzeństwa rodzeństwa, które nie miało znanych mutacji patogennych dla DBA i zidentyfikowało mutację w genie kodującym hematopoetyczny czynnik transkrypcyjny GATA1. Mutacja ta mutacja, która wystąpiła w miejscu splicingu genu GATA1, upośledzała produkcję pełnej długości białka. Następnie zidentyfikowaliśmy dodatkowego pacjenta z odmienną mutacją w tym samym miejscu splicingowym genu GATA1. Odkrycia te zapewniają wgląd w patogenezę DBA, pokazując, że zmniejszenie erytropoezy związanej z chorobą może wynikać z przyczyn innych niż defekty w genach białek rybosomalnych. Wyniki te ilustrują również wieloczynnikową rolę GATA1 w ludzkiej hematopoezie.
Które geny są zaangażowane w niedokrwistość Diamonda-Blackfana?
Niedokrwistość Diamonda-Blackfana (DBA) jest dziedziczną aplazją czerwonych krwinek, która zwykle pojawia się w pierwszym roku życia. Choroba jest związana z mutacjami punktowymi i dużymi delecjami w dziesięciu genach białek rybosomalnych (RP) RPS19, RPS24, RPS17, RPL35A, RPL5, RPL11, RPS7, RPS10, RPS26 i RPL26, a także w GATA1, u około 60-65% pacjentów.