W niniejszym badaniu opisano wpływ leczenia dokanałowego za pomocą antysensowne oligonukleotydy komplementarne do hormonu uwalniającego tyreotropinę (TRH) mRNA receptora na odpowiedź presyjną na dokanałowe podanie TRH i na spoczynkowe ciśnienie tętnicze krwi u szczurów Wistar-Kyoto (WKY) i spontanicznie szczury z nadciśnieniem tętniczym (SHR). U 16-tygodniowych samców szczurów WKY, 18-zasadowy fosfodiester antysensowne lub niedopasowane oligonukleotydy do mRNA receptora TRH (100 mikrogramów na dzień) wstrzykiwano dokanałowo przez 3 dni. Dwadzieścia cztery godziny po ostatnim wstrzyknięciu, wielkość odpowiedzi presyjnej na dokanałowy TRH (10 mikrogramów) była znacząco mniejsza w grupie leczonej antysensem (n = 7) w porównaniu z grupą kontrolną leczoną niedopasowaniem (n = 7) (zmiana średniego ciśnienia tętni tętniczego, +20,3 +/- 3,0 w porównaniu do +32,6 +/- 2,5 mm Hg, P < .01). Nie zaobserwowano różnic zaobserwowano w odpowiedzi presyjnej na wstrzyknięcie kwasu N-metylo-D-asparaginowego. Leczenie antysensowne u szczurów WKY nie miało wpływu na spoczynkowe ciśnienie tętnicze krwi. szczurów. W oddzielnych eksperymentach 16-tygodniowe samce SHR leczono antysensem (n = 7) lub niedopasowanymi (n = 6) oligonukleotydami przez 3 dni. Średnie spoczynkowe ciśnienie tętnicze ciśnienie krwi było znacząco obniżone przez leczenie antysensownymi oligonukleotydami oligonukleotydami (z 157 +/- 4,8 do 119 +/- 8,8 mm Hg, P < .01), ale nie zaobserwowano żadnych znaczących zmian zaobserwowano u zwierząt leczonych niedopasowaniem. Nasze wyniki sugerują, że ekspresja receptorów TRH w rdzeniowych współczulnych neuronach przedwojennych neurony mogą być selektywnie zmniejszane przez dokanałowe leczenie antysensownymi oligonukleotydami oligonukleotydami i że projekcje TRH do współczulnych neuronów przedwojennych odgrywają ważną rolę w podwyższaniu ciśnienia tętniczego krwi u SHR. --- Hormon uwalniający tyreotropinę (TRH) odgrywa ważną rolę w centralnej regulacji układu krążenia poprzez aktywację różnych neuroprzekaźników. regulacja układu sercowo-naczyniowego poprzez aktywację różnych neuroprzekaźników w różnych miejscach poza podwzgórzem. Aby zbadać możliwe zmiany w systemie TRH w stanie nadciśnienia tętniczego, zmierzyliśmy stężenie TRH w płyn mózgowo-rdzeniowy i zawartość TRH w obszarze przedoptycznym u spontanicznie szczurów z nadciśnieniem samoistnym (SHR) i szczurów Wistar-Kyoto (WKY) za pomocą testu radioimmunologicznego. Dodatkowo Ponadto zmierzyliśmy również gęstość receptora TRH w tym obszarze za pomocą techniką szybkiej filtracji z użyciem [3H]metylo-TRH. Stwierdziliśmy znaczny wzrost zarówno w zawartości TRH (634 +/- 61 w porównaniu do 350 +/- 26 pg / mg białka, SHR w porównaniu do WKY; P < .01, n = 5) i gęstości receptorów TRH bez zmian w powinowactwie (Bmax, 5,0 +/- 0,1 w porównaniu do 3,3 +/- 0,1 fmol/mg białka, P < .01, n = 4). Stwierdzono również wzrost stężenia TRH stwierdzono również w płynie mózgowo-rdzeniowym SHR (30 +/- 3 w porównaniu z 21 +/- 2 pg / ml, P < .01, n = 5), co sugeruje zwiększone uwalnianie TRH w ośrodkowym układzie nerwowym. Analiza Northern blot wykazała trzykrotnie zwiększona obfitość prekursorowego mRNA TRH w obszarze przedoptycznym SHR. Przeciwciało poliklonalne podniesione przeciwko TRH wstrzyknięte obwodowo lub obniżało ciśnienie tętnicze krwi u SHR, ale nie u WKY. Ponadto, długotrwałe leczenie enalaprylem (5 mg/kg dwa razy dziennie), który był skuteczne w hamowaniu aktywności enzymu konwertującego angiotensynę w surowicy o ponad ponad 50%, obniżyło ciśnienie tętnicze krwi i zawartość TRH w obszarze przedoptycznym SHR, podczas gdy inny lek rozszerzający naczynia krwionośne, diltiazem (10 mg / kg co 8 godzin), nie powiódł się (ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) --- Leptyna, hormon uwalniany przez adipocyty, modyfikuje spożycie pokarmu i wydatek energetyczny, regulując funkcję osi podwzgórze-przysadka-tarczyca. regulując funkcjonowanie osi podwzgórze-przysadka-tarczyca. My wcześniej informowaliśmy, że gen prekursorowy hormonu uwalniającego tyreotropinę (TRH) nadekspresja indukuje nadciśnienie u normalnego szczura i że spontanicznie szczury z nadciśnieniem mają centralną nadpobudliwość TRH ze zwiększoną syntezą TRH i uwalnianiem oraz podwyższoną liczbą receptorów TRH. W obu modelach, śródmózgowe leczenie antysensowne (AS) przeciwko prekursorowi TRH spowodowało zależne od dawki zmniejszenie zwiększonej zawartości TRH w międzymózgowiu jednocześnie normalizując wysokie ciśnienie tętnicze krwi. W tym artykule donosimy, że samce szczurów Wistar, u których nadciśnienie wywołano przez dokomorowe wstrzyknięcie eukariotycznego plazmidu ekspresyjnego zawierającego cDNA pre-TRH wykazało obniżone poziomy leptyny w osoczu i że leczenie pre-TRH AS odwróciło to zjawisko. zjawisko. Ponadto samce i samice szczurów z nadciśnieniem spontanicznym wykazywały niższe poziomy krążącej leptyny niż dopasowane pod względem płci szczury kontrolne Wistar-Kyoto. szczury. Ta różnica również została zmniejszona przez leczenie AS przedTRH. I odwrotnie, 20 mikrog leptyny ICV wywołało długotrwały efekt presyjny (18 +/- 5 mm Hg, n = 6, P<0,01, >60 minut), którego nie zaobserwowano u szczurów poddanych działaniu AS przedTRH (2 +/- 3 mm Hg, n = 6), ale utrzymywał się u szczurów stosowanych jako kontrole, które były leczone odwróconym oligonukleotydem (20 +/- 6 mm Hg, n=4, P<0,01). Dane te sugerują, że u szczurów z nadciśnieniem indukowanym TRH leptyna jest zmniejszona, indukując kompensacyjną otyłość. Proponujemy, że ponieważ leptyna powoduje centralną syntezę i uwalnianie TRH otyłość może wywoływać nadciśnienie tętnicze poprzez aktywację układu TRH i aktywację TRH-leptyny. aktywację układu TRH i że interakcja TRH-leptyna może w ten sposób przyczyniać się do silnego związek między nadciśnieniem tętniczym a otyłością. --- W nadciśnieniu tętniczym pierwotnym, zespole wielogenowym i wieloczynnikowym, kilka genów kilka genów oddziałuje ze środowiskiem w celu wytworzenia wysokiego ciśnienia krwi. Hormon uwalniający tyreotropinę (TRH) odgrywa ważną rolę w centralnej regulacji układu krążenia. regulacji układu sercowo-naczyniowego. Opisaliśmy, że nadekspresja TRH indukuje nadciśnienie u normalnego szczura, które zostało odwrócone przez leczenie antysensowne TRH. Leczenie to zmniejsza również centralną nadpobudliwość TRH u spontanicznie szczurów z nadciśnieniem i normalizuje ciśnienie krwi. Ludzki receptor TRH (TRHR) należy do siedmiobłonowej domeny receptora sprzężonego z białkiem G nadrodziny. Mutacje tych receptorów mogą powodować ich konstytutywną aktywację. Ponieważ wykazano, że pacjenci z nadciśnieniem mają osłabioną odpowiedź TSH odpowiedź na wstrzyknięcie TRH, co sugeruje defekt w TRHR, postulujemy, że gen TRHR jest zaangażowany w ludzkie nadciśnienie. Przebadaliśmy 2 niezależne populacje z różnych regionów geograficznych naszego kraju: próbkę dorosłych z kliniki kierującej i populacyjną próbkę uczniów szkół średnich. uczniów szkół średnich. W poszukiwaniu wariantów molekularnych TRHR ujawniliśmy, że polimorficzny dinukleotyd TG polimorficzne powtórzenie dinukleotydu TG (STR) przy -68 bp i nowy pojedynczy nukleotyd polimorfizm, konwersja G-->C przy -221 zlokalizowana w promotorze TRHR są związane z nadciśnieniem tętniczym. Ponieważ STR wykryte w promotorach genów są potencjalnymi sekwencjami tworzącymi Z-DNA i wydają się wpływać na ekspresję genów, zbadaliśmy potencjalnie różną aktywność transkrypcyjną tych wariantów promotora TRHR i stwierdziliśmy, że allel S/-221C ma wyższe powinowactwo niż allel L/G-221 do jądrowego czynnika(ów) białkowego(ych). Nasze odkrycia potwierdzają hipotezę że gen TRHR uczestniczy w etiopatogenezie pierwotnego nadciśnienia tętniczego. nadciśnienia tętniczego. --- 1. Celem tego badania było zbadanie udziału układu układ współczulno-nadnerczowy do odpowiedzi ciśnienia krwi na dożylne bolus hormonu uwalniającego tyreotropinę (TRH) u przytomnych medulektomizowanych i pozorowane szczury. 2. Szczytowy efekt presyjny 0,5 mg TRH był znacząco zwiększone u szczurów bez rdzenia nadnerczy (+24,2 +/- 1,6 mmHg, średnia +/- s.e.m., P < 0,01) w porównaniu do zwierząt poddanych operacji pozorowanej (+12,2 +/- 3,0 mmHg). 3. Blokada receptorów alfa-adrenergicznych za pomocą fentolaminy zniosła działanie presyjne efekt TRH u szczurów kontrolnych (+2,1 +/- 1,9 mmHg), ale nie osłabił odpowiedź ciśnienia krwi u szczurów z medulektomią (+21,5 +/- 4,7 mmHg). W W przeciwieństwie do tego, beta-blokada z propranololem stępiła ciśnienie krwi reaktywność szczurów poddanych medulektomii nadnerczy (+12.4 +/- 2.6 mmHg) ale nie modyfikował efektu TRH w kontrolach pozorowanych (+10,9 +/- 2,9 mmHg). 4. Bezpośredni wpływ TRH in vitro na izolowane tętnice krezkowe szczurów krezkowych szczurów. TRH nie wywoływał skurczów izolowanych tętnic. 5. Wyniki te sugerują, że u szczurów z nienaruszonymi nadnerczami działanie presyjne TRH jest pośredniczony głównie przez stymulację receptorów alfa-adrenergicznych. receptorów alfa-adrenergicznych. Medulektomia nadnerczy wydaje się zwiększać odpowiedź ciśnienia krwi na dożylny TRH. Aktywacja sercowych beta-adrenoreceptorów wydaje się przyczyniać do zwiększającego ciśnienie krwi działania dożylnego TRH u zwierząt z medulektomią zwierząt. --- Niedawno wykazaliśmy, że międzymózgowia TRH może pośredniczyć w centralnym indukowanym leptyną efekt presyjny. Tutaj, aby zbadać rolę TRH w nadciśnieniu indukowanym otyłością (OIH), zastosowaliśmy model OIH wytwarzany przez dietę wysokotłuszczową (HFD, 45 dni) u samców szczurów Wistar. szczury Wistar. Po 4 tygodniach masa ciała i skurczowe ciśnienie tętnicze krwi (SABP) wzrosły u zwierząt HFD. Leptyna w osoczu była skorelowana z otrzewnową tkanką tłuszczową. tkanki tłuszczowej. Następnie traktowaliśmy zwierzęta OIH antysensownym oligodeoksynukleotydem i małe interferujące (si) RNA przeciwko prepro-TRH. Antysens znacząco zmniejszyła zawartość TRH w międzymózgowiu i SABP po 24 i 48 godzinach po leczeniu. Podobne efekty zaobserwowano w przypadku siRNA przeciwko prepro-TRH, ale przez okres do 4 tygodni. I odwrotnie, nośnik, odwrócona sekwencja antysensowna i siRNA przeciwko białku zielonej fluorescencji białko fluorescencyjne, nie spowodowały żadnych zmian. Spadek SABP wydaje się być spowodowany hamowanie zwiększonego przez otyłość odpływu współczulnego, ale nie zmiana w stanie tarczycy. Korzystając z prostego modelu OIH, po raz pierwszy wykazaliśmy, że centralny TRH uczestniczy w nadciśnieniu indukowanym przyrostem masy ciała prawdopodobnie poprzez jego dobrze znane działanie na aktywność współczulną. Zatem interakcja interakcja TRH-leptyna może przyczyniać się do silnego związku między nadciśnieniem a otyłością. nadciśnieniem tętniczym i otyłością. --- Wiązanie [3H] [3-MeHis2] hormonu uwalniającego tyreotropinę [( 3H]MeTRH) z błonami mózgowymi błony mózgowe przygotowane od 8-tygodniowego spontanicznego nadciśnienia (SHR) i określono normotensyjne szczury Wistar-Kyoto (WKY). [3H]MeTRH wiązał się specyficznie z błonami mózgu szczura w pojedynczym miejscu o wysokim powinowactwie. Gęstość (wartość Bmax) miejsc wiązania [3H]MeTRH była znacznie większa (28%) u szczurów SHR w porównaniu do szczurów WKY. Pozorne stałe dysocjacji (wartości Kd) dla wiązania [3H] MeTRH u szczurów SHR i WKY nie różniły się. Wiązanie w różne regiony mózgu ujawniły, że gęstość [3H] MeTRH była najwyższa w podwzgórze, a następnie w kolejności malejącej przez mosty + rdzeń, śródmózgowie, korę i prążkowiu. Wiązanie [3H]MeTRH było o około 25% większe w korze mózgowej, podwzgórzu i prążkowiu szczurów SHR w porównaniu do szczurów WKY. Wiązanie w pons + medulla, śródmózgowiu i przysadce szczurów SHR i WKY nie różniły się. Aby ocenić znaczenie zwiększonych miejsc wiązania dla [3H] MeTRH w niektórych obszarach mózgu regionach mózgu szczurów SHR, badania wiązania przeprowadzono podczas normotensyjnych i nadciśnienia tętniczego w wieku postnatalnym u obu szczepów. U 3 i 4 tygodniowych szczurów SHR nie było ani wzrostu ciśnienia krwi, ani wzrostu wiązania [3H]MeTRH. [3H]MeTRH w podwzgórzu i prążkowiu w porównaniu do szczurów WKY. szczurów WKY. Wraz z rozwojem podwyższonego ciśnienia krwi po 6 tygodniach, zaobserwowano wzrost wiązania [3H] MeTRH w podwzgórzu i prążkowiu szczurów SHR w w porównaniu do tkanek szczurów WKY. Wyniki dostarczają, po raz pierwszy po raz pierwszy dowody na równoległy wzrost gęstości mózgowych receptorów TRH z podwyższeniem ciśnienia krwi i sugerują, że mózgowe receptory TRH mogą odgrywać ważną rolę w patofizjologii nadciśnienia tętniczego. --- Centralnie podawany hormon uwalniający tyreotropinę wywiera dobrze udokumentowany działanie nadciśnieniowe. W tym badaniu możliwą fizjologiczną rolę hormon uwalniający tyreotropinę w centralnej regulacji układu sercowo-naczyniowego był oceniano u szczurów z nadciśnieniem samoistnym otrzymujących długotrwałe (8-14 dni) wlew dokomorowy heterologicznej surowicy odpornościowej do hormonu uwalniającego tyreotropinę. Wpływ tej biernej immunizacji na ciśnienie krwi ciśnienie krwi monitorowano u przytomnych zwierząt metodą mankietu ogonowego. Surowica odpornościowa hormonu uwalniającego tyreotropinę znacząco obniżyła skurczowe ciśnienie tętnicze u dorosłych szczurów. ciśnienie tętnicze u dorosłych szczurów z ustalonym nadciśnieniem. Nie stwierdzono zmian w hormonu tarczycy w surowicy, co wskazuje, że działanie przeciwnadciśnieniowe efekt immunologicznej blokady hormonu uwalniającego tyreotropinę nie był spowodowany zmiany poziomu hormonów tarczycy w surowicy. Wyniki te dostarczają dowodów na rolę endogennego hormonu uwalniającego tyreotropinę w mózgu w utrzymaniu nadciśnienie u szczurów z samoistnym nadciśnieniem tętniczym. --- Hormon uwalniający tyreotropinę (TRH) odgrywa ważną rolę w centralnej regulacji regulacji układu sercowo-naczyniowego. Niedawno opisaliśmy, że nadekspresja genu prekursorowego TRH indukuje nadciśnienie tętnicze u normalnego szczura. Ponadto opublikowaliśmy że szczury z samoistnym nadciśnieniem tętniczym (SHR) mają centralną pozapodwzgórzową nadaktywność TRH ze zwiększoną syntezą i uwalnianiem TRH oraz podwyższoną liczbą receptorów TRH liczba receptorów. W niniejszym badaniu donosimy, że leczenie wewnątrzkomorowe leczenie antysensowne (AS) oligonukleotydem fosforotioanowym przeciwko genowi prekursorowemu TRH gen prekursorowy znacznie zmniejszył się do 72 godzin i w sposób zależny od dawki sposób zwiększona zawartość TRH w międzymózgowiu, podczas gdy znormalizowana skurczowa krew ciśnienie skurczowe krwi (SABP) było obecne u szczurów SHR w porównaniu ze szczurami Wistar-Kyoto (WKY). Chociaż podstawowa tyreotropina była wyższa u SHR w porównaniu ze szczurami WKY i ta różnica różnica zniknęła po leczeniu antysensownym, nie zaobserwowano różnic w osoczu T4 lub T3 między szczepami z lub bez leczenia AS, co wskazuje, że wpływ AS na SABP był niezależny od stanu tarczycy. Ponieważ mózgowy układ renina-angiotensyna wydaje się być kluczowy w rozwoju i / lub utrzymaniu nadciśnienia tętniczego u SHR, zbadaliśmy wpływ antysensowne hamowanie TRH w tym systemie i stwierdzono, że antysens TRH znacznie zmniejszyło podwyższoną zawartość angiotensyny II (Ang II) w SHR bez żadnego efektu u zwierząt kontrolnych, co sugeruje, że system Ang II jest zaangażowany w efekty sercowo-naczyniowe TRH. Podsumowując, centralny układ TRH wydaje się być zaangażowany w etiopatogenezę nadciśnienia tętniczego w tym modelu nadciśnienia tętniczego pierwotnego.
Jaka jest rola TRH w nadciśnieniu tętniczym?
Nadekspresja genu TRH indukuje nadciśnienie u normalnych szczurów, a szczury z nadciśnieniem spontanicznym wykazują centralną nadaktywność TRH ze zwiększoną syntezą i uwalnianiem TRH oraz podwyższoną liczbą receptorów TRH. Leczenie antysensem TRH zmniejsza nadciśnienie.
Centralny TRH uczestniczy w nadciśnieniu indukowanym przez przyrost masy ciała prawdopodobnie poprzez jego dobrze znane działanie na aktywność współczulną.
W działaniu presyjnym dożylnego TRH pośredniczy przede wszystkim stymulacja receptorów alfa-adrenergicznych.  Wydaje się, że aktywacja sercowych beta-adrenoreceptorów przyczynia się do wzrostu ciśnienia krwi w wyniku dożylnego podawania TRH. Układ Ang II jest zaangażowany w efekty sercowo-naczyniowe TRH.
Polimorfizmy TRH (hormonu uwalniającego tyreotropinę) są istotnie związane zarówno ze zmianami ciśnienia krwi, jak i nadciśnieniem.
TRH może pośredniczyć w centralnym efekcie nadciśnienia indukowanym leptyną
Wykazano równoległy wzrost gęstości receptorów TRH w mózgu wraz z podwyższeniem ciśnienia krwi, co sugeruje, że receptory TRH w mózgu mogą odgrywać ważną rolę w patofizjologii nadciśnienia tętniczego. Gen receptora TRH uczestniczy w etiopatogenezie samoistnego nadciśnienia tętniczego.