Rybosomy mitochondrialne stanowią najbardziej zróżnicowaną grupę znanych rybosomów. Rybosomy rybosomy mitochondrialne ssaków (55S) różnią się nieoczekiwanie od rybosomów bakteryjnych (70S) i rybosomów cytoplazmatycznych (80S), a także innych rodzajów rybosomów mitochondrialnych. rybosomów. Mitochondrialny rybosom bydlęcy został opracowany jako modelowy system system do badania ludzkich rybosomów mitochondrialnych w celu rozwiązania kilku pytania związane ze strukturą, funkcją, biosyntezą i ewolucją tych interesujących rybosomów. tych interesujących rybosomów. Bydlęce mitochondrialne białka rybosomalne (MRP) z każdej podjednostki każdej podjednostki zostały zidentyfikowane i scharakteryzowane pod względem indywidualności i właściwości elektroforetycznych, sekwencji aminokwasów, topograficznej topograficznej, właściwości wiązania RNA, zależności ewolucyjnych i reakcji z sondami powinowactwa rybosomalnych domen funkcjonalnych. Kilka charakterystycznych właściwości tych rybosomów, w tym ich wrażliwość na antybiotyki i skład. wrażliwość na antybiotyki i ich skład. Rybosomy mitochondrialne ssaków nie posiadają kilku głównych struktur macierzystych RNA rybosomów bakteryjnych, ale zawierają one odpowiednio wyższą zawartość białek (aż 80 białek), co sugeruje model, w którym białka model, w którym białka zastąpiły elementy strukturalne RNA podczas ewolucji tych rybosomów. Pomimo niższej zawartości RNA są one fizycznie większe niż rybosomy bakteryjne, ze względu na "dodatkowe" białka, które zawierają. Te dodatkowe białka w rybosomach mitochondrialnych są "nowe" w tym sensie, że są one nie są homologiczne do białek w rybosomach bakteryjnych lub cytoplazmatycznych. Niektóre z nowych białek wydają się być dwufunkcyjne. Wszystkie MRP ssaków są kodowane przez geny jądrowe (oddzielny zestaw od tych kodujących cytoplazmatyczne białka rybosomalne), które ewoluują. białka), które ewoluują szybciej niż te kodujące cytoplazmatyczne białka rybosomalne. białka rybosomalne. MRP są importowane do mitochondriów, gdzie łączą się z mitochondrialnie transkrybowanymi rRNA w rybosomy, które są odpowiedzialne za translację 13 mRNA dla niezbędnych białek systemu fosforylacji oksydacyjnej. systemu fosforylacji oksydacyjnej. Rośnie zainteresowanie strukturą, organizacją, chromosomalną lokalizacją i ekspresją genów dla ludzkich MRP. Białka, które są niezbędne dla funkcji mitoribosomu są kandydatami do zaangażowania w ludzkie choroby genetyczne. chorobach genetycznych. --- Mitochondria mogą być izolowane z mięśni szkieletowych w sposób, który zachowuje ściśle powiązaną funkcję bioenergetyczną in vitro. Celem tego badania było scharakteryzowanie składu takich preparatów przy użyciu podejścia proteomicznego. Mitochondria wyizolowane z biopsji ludzkiego mięśnia obszernego bocznego były funkcjonalne, o czym świadczą funkcjonalne, o czym świadczy ich reakcja na paliwa węglowodanowe i tłuszczowe. Używając jednowymiarowej elektroforezy żelowej i HPLC-ESI-MS/MS, wykryto 823 unikalne białka wykryto, a 487 z nich przypisano do mitochondrium, w tym nowo scharakteryzowane SIRT5, MitoNEET i RDH13. Wykryte białka obejmowały 9 z 13 białek kodowanych przez mitochondrialne DNA i 86 ze 104 białek związanych z łańcuchem transportu elektronów (ETC) (ETC) i białek związanych z ETC. Ponadto wykryto 59 z 78 białek mitoribosomu 55S mitoribosomu, kilka białek TIM i TOM oraz białka śmierci komórkowej. Niniejsze badanie przedstawia skuteczną metodę przyszłej oceny jakościowej białek z funkcjonalnych wyizolowanych mitochondriów z małych próbek zdrowych i chorych mięśni szkieletowych. zdrowych i chorych mięśni szkieletowych. --- Rybosom mitochondrialny (mt) ssaków (mitoribosom) jest rybosomem typu bakteryjnego. ale ma skład bardzo bogaty w białka. Prawie połowa rRNA zawartego w rybosomie bakteryjnym jest zastąpiona białkami w mitoribosomie. Czynnik elongacji G Escherichia coli (EF-G Ec) nie ma aktywności translokacyjnej w mitoribosomie. na mitoribosomie, ale EF-G mt jest funkcjonalny na rybosomie E.coli. Aby zbadać funkcjonalną równoważność rybosomów mt i E.coli, przygotowaliśmy przygotowaliśmy hybrydowe rybosomy mt i E.coli. Hybrydowy mitoribosom zawierający E.coli L7/12 (L7/12 Ec) zamiast L7/12 mt wyraźnie aktywował GTPazę EF-G Ec i skutecznie promował jej aktywność translokacyjną w systemie translacji in vitro. in vitro. Tak więc, mitoribosom jest funkcjonalnie równoważny rybosomowi E.coli pomimo ich odmiennego składu. Aktywność translacyjna zależna od mt EF-Tu rybosomu E. coli została również wyraźnie zwiększona poprzez zastąpienie C-końcowej domeny (CTD) L7/12 Ec z odpowiednikiem mt (hybrydowy rybosom E.coli). To silnie wskazuje, że CTD L7/12 jest odpowiedzialna za funkcję EF-Tu. Wyniki te pokazują, że funkcjonalna kompatybilność między czynnikami elongacji a białkiem L7/12 w rybosomie reguluje jego specyficzność translacyjną. specyficzność translacyjną.
Jaki jest współczynnik sedymentacji mitoribosomu ssaków?
Mitochondrialny rybosom ssaków (mitoribosom) ma bardzo bogaty w białka skład z małym współczynnikiem sedymentacji 55 S, składający się z 39 S dużych i 28 S małych podjednostek.