Mechanizm molekularny wpływu hormonu tarczycy (TH) na metabolizm kwasów tłuszczowych w wątrobie w wątrobie nie został jeszcze wyjaśniony. Białko wiążące element odpowiedzi węglowodanowej (ChREBP), jak również białko wiążące element odpowiedzi sterolowej (SREBP)-1c odgrywa kluczową rolę w lipogenezie wątrobowej. kluczową rolę w lipogenezie wątrobowej. Zarówno SREBP-1c, jak i ChREBP są genami docelowymi receptorów wątrobowych X (LXR). Ponieważ LXR i receptory TH (TR) wzajemnie oddziałują na siebie wzajemnie w wielu aspektach transkrypcji, zbadaliśmy, czy TR regulują ekspresję genu ekspresję genu ChREBP u myszy. W bieżącym badaniu wykazaliśmy, że TH regulowały w górę mysie mRNA ChREBP i ekspresję białka w wątrobie. Testy run-on i testy lucyferazy wykazały, że TH i TR-beta1 pozytywnie regulowały transkrypcję genu ChREBP transkrypcję genu ChREBP. Mysi promotor genu ChREBP zawiera dwa bezpośrednie miejsca powtórzenia-4 (LXRE1 i LXRE2), a EMSA wykazały, że LXR-alfa i TR-beta1 wolą wiązać odpowiednio LXRE1 i LXRE2. Bezpośrednia delecja powtórzenia-4 i mutanty mutanty LXRE2 promotora pogarszają pozytywną regulację przez TR-beta1, wskazując, że LXRE2 jest funkcjonalnie ważny dla regulacji. My również wykazali, że ekspresja ludzkiego genu ChREBP i aktywność promotora były regulowane w górę przez TH. Dane te sugerują, że ekspresja mRNA ChREBP jest pozytywnie regulowana przez TR-beta1 i TH na poziomie transkrypcyjnym u ssaków. Ta nowa obserwacja wskazuje, że TH dostraja lipogenezę wątrobową poprzez regulację SREBP-1c i ekspresję genów ChREBP. --- Obecne badanie pokazuje, że aktywowana przez T3 transkrypcja genu NADPH:oksydoreduktaza cytochromu P450 (P450R) jest zależna od stanu hormonalnego tarczycy. status hormonalny zwierzęcia, przy czym zarówno transkrypcyjne, jak i szlaki potranskrypcyjne są ważne w regulacji komórkowego poziomu mRNA P450R mRNA. Region wymagany do aktywacji transkrypcyjnej genu P450R przez T3 został zidentyfikowany. Eksperymenty jądrowe wykazały, że wpływ T3 na transkrypcję P450R jest zależny od stanu tarczycy, z wzmocnienie transkrypcji uzyskane w wątrobie szczura z niedoczynnością tarczycy traktowanej T3 (1,8-krotny wzrost), ale nie u zwierząt z eutyreozą leczonych T3. Przejściowa kotransfekcja promotora P450R / acetylotransferazy chloramfenikolu (CAT) konstrukty i plazmid ekspresyjny receptora hormonu tarczycy beta1 (TR beta1) do komórek szczurzego wątrobiaka H4IIE spowodowało 2,4-krotną indukcję promotora która była zależna zarówno od T3, jak i TR beta1. Analiza delecji promotora zidentyfikowała region odpowiedzi tarczycy P450R (P450R-TRE; zasady, -564 do -536) zawierający trzy niedoskonałe bezpośrednie powtórzenia motywu odpowiedzi tarczycy, AGGTCA. Analiza mutacyjna wykazała ponadto, że indukcja T3 była zależna tylko od bezpośredniego powtórzenia w górę łańcucha, mającego sekwencję AGGTGAgctgAGGCCA. Analiza śladu wykazała, że wszystkie trzy motywy były chronione przez białka obecne w ekstraktach jądrowych wątroby szczura, a bezpośrednia interakcja między P450R-TRE i receptorami T3 TR alfa1 i TR beta1 wykazano przez przesunięcie żelu analiza. Badania wiązania in vitro z P450R-TRE ujawniły tworzenie się kompleksy heterodimeryczne, gdy TR alfa1 był koinkubowany z receptorem retinowym X lub ekstraktem jądrowym z wątroby szczura, komórek COS lub H4IIE. Ponadto Ponadto, umieszczenie P450R-TRE przed T3-niereagującym heterologiczny promotor kinazy tymidynowej spowodował 2,7-krotne zwiększenie transkrypcji wzmocnienie, które było zależne zarówno od T3, jak i TR beta1. Poprzednie badania wykazały, że T3 zwiększa poziomy mRNA P450R około 20-30 razy i około 12-krotnie, odpowiednio u szczurów z niedoczynnością tarczycy i eutyreozą. Stąd, dla stanu niedoczynności tarczycy, zdarzenia transkrypcyjne i potranskrypcyjne przyczyniają się do wzrostu mRNA indukowanego przez T3; jednak znaczny wzrost poziom wiadomości u zwierząt eutyreozowych leczonych T3 zależy przede wszystkim od szlaków potranskrypcyjnych. --- Geny reagujące na hormon tarczycy (TH) mogą być zarówno pozytywnie, jak i negatywnie regulowane przez TH poprzez receptory (TR) alfa i beta wyrażane w większości tkanek ciała. tkankach. Jednak ich względne role w regulacji specyficznej ekspresji genów ekspresji genów pozostają nieznane. Mysz z nokautem TR beta, u której brakuje zarówno izoform TR beta1 i TR beta2, zapewnia model do badania roli tych receptorów w pośredniczeniu w działaniu TH. Myszy z niedoborem TR beta (TR beta-/-), które nie wykazują kompensacyjny wzrost TR alfa i myszy typu dzikiego (TR beta + / +) tego samego zostały pozbawione TH poprzez karmienie ich dietą o niskiej zawartości jodu zawierającą propylotiouracyl, a następnie poddano działaniu ponadfizjologicznych dawek L-T3 (0,5, 5,5 i 25 mikrog/dzień/mysz). Sama deprywacja TH zwiększyła stężenie cholesterolu w surowicy stężenie cholesterolu w surowicy o 25% u myszy TR beta+/+ i paradoksalnie zmniejszyło je o 23% u myszy TR beta-/-. Pozbawienie TH zmniejszyło stężenie fosfatazy alkalicznej (AP) w surowicy (AP) o 31% u myszy TR beta+/+, ale nie wykazała żadnych zmian u myszy TR beta-/-. Leczenie L-T3 (0,5 do 25 mikrog / mysz / dzień) spowodowało 57% spadek cholesterolu w surowicy i 231% wzrost AP w surowicy u myszy TR beta+/+ myszy. Myszy TR beta-/- były odporne na indukowane przez L-T3 zmiany w surowicy cholesterolu i wykazywały wzrost AP tylko przy najwyższej dawce L-T3. Podstawowa tętno (HR) u myszy TR beta-/- było wyższe niż u myszy TR beta+/+ o 11%. HR i wydatek energetyczny (EE) zarówno u myszy TR beta+/+, jak i TR beta-/- wykazały podobne spadki (49 i 46%) i wzrosty (49 i 41%) w odpowiedzi na TH i leczenie L-T3, odpowiednio. Wpływ TH na akumulację akumulację informacyjnego RNA (mRNA) genów wątrobowych regulowanych przez TH. zbadano. Pozbawienie TH regulowało w dół mRNA plamki 14 (S14) i nie wykazywało zmian mRNA enzymu jabłkowego (ME) zarówno u myszy TR beta+/+, jak i TR beta-/-. W przeciwieństwie do tego leczenie L-T3 spowodowało wzrost S14 i ME, ale bez zmian u myszy TR beta-/-. Na podstawie tych wyników można wywnioskować, że regulacja HR i EE są niezależne od TR beta. Z wyjątkiem stężenia cholesterolu w surowicy stężenie i akumulacja mRNA ME w wątrobie, wszystkie inne markery działania TH badane podczas deprywacji TH wykazywały oczekiwane odpowiedzi pod nieobecność TR beta. Tak więc, jak wcześniej wykazano dla TSH w surowicy, TR beta nie jest absolutnie niezbędny do wystąpienia niektórych zmian typowych dla niedoczynności tarczycy. W przeciwieństwie do tego, z wyjątkiem HR i EE, pełna manifestacja działania za pośrednictwem TH wymagała obecność TR beta.
Które geny reguluje receptor beta1 hormonu tarczycy w wątrobie?
Receptor LDL"//
"ChREBP"//
"ME", "enzym jabłkowy"//
"oksydoreduktaza cytochromu P450"//