Zidentyfikowaliśmy nowego członka nadrodziny transformującego czynnika wzrostu beta (TGF-beta), czynnik wzrostu/różnicowania-10 (GDF-10), który jest wysoce spokrewniony z białkiem morfogenetycznym kości-3 (BMP-3). wysoce spokrewniony z białkiem morfogenetycznym kości-3 (BMP-3). Sekwencja nukleotydów GDF-10 koduje przewidywane białko 476 aminokwasów o masie cząsteczkowej około 52 000. Polipeptyd GDF-10 zawiera potencjalną sekwencję sygnałową sekwencję sygnałową do wydzielania, domniemane miejsce przetwarzania proteolitycznego RXXR i domenę domenę karboksyterminalną o znacznej homologii do innych znanych członków nadrodziny TGF-beta. nadrodziny TGF-beta. W dojrzałej domenie karboksy-końcowej GDF-10 jest bardziej homologiczny do BMP-3 (83% identyczności sekwencji aminokwasów) niż do jakiegokolwiek innego wcześniej zidentyfikowany członek rodziny TGF-beta. GDF-10 wykazuje również znaczną homologię do BMP-3 (około 30% identyczności sekwencji aminokwasów) w regionie pro- regionu cząsteczki. Na podstawie tych porównań sekwencji, GDF-10 i BMP-3 definiują nową podgrupę w obrębie większej nadrodziny TGF-beta. Przez analizę Northern mRNA GDF-10 wykryto głównie w macicy myszy, tkance tłuszczowej i mózgu oraz w mniejszym stopniu w mózgu, i mózgu oraz w mniejszym stopniu w wątrobie i śledzionie. Ponadto, GDF-10 mRNA było obecne zarówno w próbkach kości noworodków, jak i dorosłych, przy czym wyższe poziomy były w kalwarii niż w kości długiej. Wyniki te sugerują, że GDF10 może odgrywać wiele ról w regulowaniu zdarzeń różnicowania komórek, w tym tych zaangażowane w morfogenezę szkieletu. Gdf10 został zmapowany do proksymalnego regionu mysiego chromosomu 14 w pobliżu regionu, o którym wiadomo, że zawiera spontaniczną recesywną mutację mutację, która jest związana z wadą twarzoczaszki. --- BMP-3b (określane również jako GDF-10) jest nowym białkiem związanym z BMP-3, niedawno odkrytym w tkance kości udowej szczura poprzez klonowanie molekularne. W tym artykule wyizolowaliśmy cDNA i gen dla ludzkiego BMP-3b oraz określiliśmy ich strukturę. Sklonowany ludzki BMP-3b o wielkości 2632 par zasad koduje 478 aminokwasów prekursorowych białko dzielące 83% identyczności ze szczurzym BMP-3b. Ludzki gen BMP-3b składa się z z 3 eksonów i obejmuje około 13 kilobaz DNA. Region flankujący 5' nie zawiera typowego pola TATA, ale sekwencje bogate w G + C. Analiza Southern blot ujawniła, że gen BMP-3b znajduje się w pojedynczym locus chromosomu 10. Przez Northern, ludzkie transkrypty BMP-3b wykryto głównie w kości udowej, mózgu, płucach, mięśniach szkieletowych, trzustce i jądrach. --- Czynnik różnicowania wzrostu 10 (Gdf10), znany również jako Bmp3b, jest członkiem nadrodziny transformujących czynników wzrostu (TGF)-ß. nadrodziny transformującego czynnika wzrostu (TGF)-ß. Gdf10 ulega ekspresji w Bergmanna, co zostało zbadane za pomocą profilowania transkrypcyjnego pojedynczych komórek (Koirala i Coral. (Koirala i Corfas, (2010) PLoS ONE 5: e9198). Tutaj przedstawiamy szczegółową charakterystykę ekspresji Gdf10 od E14, etapu, na którym Gdf10 ulega ekspresji po raz pierwszy w móżdżku, aż do P28. Wykryliśmy ekspresję Gdf10 w obu strefach zarodkowych: w strefie komorowej (VZ) komory 4. komory, jak również w wardze rombowej (RL). Postuluje się, że VZ daje neurony GABAergiczne i komórki glejowe, podczas gdy RL daje początek neuronom neurony glutaminergiczne. Dlatego bardzo zaskakujące było odkrycie genu, który jest ulega ekspresji wyłącznie w komórkach glejowych i nie ogranicza się do ekspresji w VZ, ale jest również obecny w RL. Na etapach postnatalnych Gdf10 był dystrybuowany równomiernie w komórkach glejowych Bergmanna móżdżku. Ponadto stwierdziliśmy, że Gdf10 jest regulowany przez Sonic hedgehog (Shh), który jest wydzielany przez komórki Purkinjego móżdżku. móżdżku. W warunkowych mutantach Shh, komórki glejowe wykazywały zmniejszoną ekspresję ekspresję Gdf10, podczas gdy ekspresja nestyny i wimentyny była niezmieniona. niezmieniona. W ten sposób po raz pierwszy pokazujemy, że Gdf10, wyrażany w komórkach glejowych Bergmanna komórkach glejowych, jest dotknięty utratą Shh już w E18.5, co sugeruje regulację rozwoju gleju przez Shh.
Co to jest GDF10?
Czynnik wzrostu/różnicowania-10 (GDF-10) jest nowym członkiem nadrodziny transformującego czynnika wzrostu-beta (TGF-beta). Jest wysoce spokrewniony z białkiem morfogenetycznym kości-3 (BMP-3) i często określany jako BMP3b. Sekwencja nukleotydowa GDF-10 koduje przewidywane białko 476 aminokwasów o masie cząsteczkowej około 52 000. Polipeptyd GDF-10 zawiera potencjalną sekwencję sygnałową do wydzielania, domniemane miejsce przetwarzania proteolitycznego RXXR i domenę karboksyterminalną o znacznej homologii do innych znanych członków nadrodziny TGF-beta. GDF10 występuje głównie w macicy, tkance tłuszczowej i mózgu myszy, a w mniejszym stopniu w wątrobie i śledzionie. Ponadto mRNA GDF-10 było obecne zarówno w próbkach kości noworodków, jak i dorosłych, przy czym wyższe poziomy wykryto w kalwariach niż w kości długiej. Wyniki te sugerują, że GDF10 może odgrywać wiele ról w regulacji różnicowania komórek, w tym tych zaangażowanych w morfogenezę szkieletu. Gdf10 został zmapowany do proksymalnego regionu mysiego chromosomu 14 w pobliżu regionu, o którym wiadomo, że zawiera spontaniczną mutację recesywną, która jest związana z wadą twarzoczaszki.