CONJUGATION LINKERS, CELL BINDING MOLECULE-DRUG CONJUGATES CONTAINING THE LIKERS, METHODS OF MAKING AND USES SUCH CONJUGATES WITH THE LINKERSThe present invention relates to linkers having a group of propiolyl, substituted acryl (acryloyl), or disubstituted propanoyl, and using such linkers for the conjugation of compounds, in particular, cytotoxic agents to a cell-binding molecule.A linker compound of the Formula (I) and (II) :whereinandrepresent a single bond, andcan be an enantiomer or stereoiso-mer bond when linked to a single or a double bond.represents either a single bond, or a double bond, or a triple bond.It provided that whenrepresents a single bond, both Lv1 and Lv2 are not H； whenrepresents a double bond, either Lv1 or Lv2 can be H, but they are not H at the same time； when represents a triple bond, Lv1 is absent and Lv2 can optionally be H.Lv1 and Lv2, represent the same or different leaving group that can be substituted by a thiol, and are selected from a halide (selected from, fluoride, chloride, bromide, and iodide) , methanesulfonyl (mesyl) , toluenesulfonyl (tosyl) , trifluoromethyl-sulfonyl (triflate) , trifluoromethylsulfonate, nitrophenoxyl, N-succinimidyloxyl (NHS) , phenoxyl； dinitrophenoxyl； pentafluorophenoxyl, tetrafluorophenoxyl, trifluorophenoxyl, difluorophenoxyl, monofluorophenoxyl, pentachlorophenoxyl, 1H-imidazole-1-yl, chlorophenoxyl, dichlorophenoxyl, trichlorophenoxyl, tetrachlorophenoxyl, N- (benzotriazol-yl) oxyl, 2-ethyl-5-phenylisoxazolium-3′-sulfonyl, phenyloxadiazole-sulfonyl (-sulfone-ODA) , 2-ethyl-5-phenylisoxazolium-yl, phenyloxadiazol-yl (ODA) , oxadiazol-yl, or an intermediate molecule generated with a condensation reagent of EDC (N- (3-Dimethylaminopropyl) -N′-ethylcarbodiimide) , DCC (Dicyclohexyl-carbodiimide) , N, N′-Diisopropylcarbodiimide (DIC) , N-Cyclohexyl-N′- (2-morpholino-ethyl) carbodiimide metho-p-toluenesulfonate (CMC, or CME-CDI) , 1, 1′-Carbonyldiimi-dazole (CDI) , TBTU (O- (Benzotriazol-1-yl) -N, N, N′, N′-tetramethyluronium tetrafluoroborate) , N, N, N′, N′-Tetramethyl-O- (1H-benzotriazol-1-yl) uronium hexafluorophosphate (HBTU) , (Benzotriazol-1-yloxy) tris (dimethylamino) phosphonium hexafluorophosphate (BOP) , (Benzotriazol-1-yloxy) tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP) , Diethyl cyanophosphonate (DEPC) , Chloro-N, N, N′, N′-tetramethylformamidiniumhexafluorophosphate, 1- [Bis (dimethylamino) methylene] -1H-1, 2, 3-triazolo [4, 5-b] pyridinium 3-oxid hexafluorophos-phate (HATU) , 1- [ (Dimethylami-no) (morpholino) methylene] -1H- [1, 2, 3] triazolo [4, 5-b] pyridine-1-ium 3-oxide hexafluorophosphate (HDMA) , 2-Chloro-1, 3-dimethyl-imidazolidinium hexafluorophosphate (CIP) , Chlorotripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyCloP) , Fluoro-N, N, N′, N′-bis (tetramethylene) formamidinium hexafluorophosphate (BTFFH) , N, N, N′, N′-Tetramethyl-S- (1-oxido-2-pyridyl) thiuronium hexafluorophosphate, O- (2-Oxo-1 (2H) pyridyl) -N, N, N′, N′-tetramethyluronium tetrafluoroborate (TPTU) , S- (1-Oxido-2-pyridyl) -N, N, N′, N′-tetramethylthiuronium tetrafluoroborate, O- [ (Ethoxycarbonyl) -cyanomethylenamino] -N, N, N′, N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HOTU) , (1-Cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidenaminooxy) dimethylamino-morpholino-carbenium hexafluorophosphate (COMU) , O- (Benzotriazol-1-yl) -N, N, N′, N′-bis (tetramethylene) uronium hexafluorophosphate (HBPyU) , N-Benzyl-N′-cyclohexyl-carbodiimide (with, or without poly-mer-bound) , Dipyrrolidino (N-succinimidyl-oxy) carbenium hexafluoro-phosphate (HSPyU) , Chlorodipyrrolidinocarbenium hexafluorophosphate (PyClU) , 2-Chloro-1, 3-dimethylimidazolidinium tetrafluoroborate (CIB) , (Benzotriazol-1-yloxy) dipiperidino-carbenium hexafluorophosphate (HBPipU) , O- (6-Chlorobenzotriazol-1-yl) -N, N, N′, N′-tetramethyluronium tetrafluoroborate (TCTU) , Bromotris (dimethylamino) -phosphonium hexafluorophosphate (BroP) , Propylphosphonic anhydride2-Morpholinoethyl isocyanide (MEI) , N, N, N′, N′-Tetramethyl-O- (N-succinimidyl) uronium hexafluorophosphate (HSTU) , 2-Bromo-1-ethyl-pyridinium tetrafluoroborate (BEP) , O- [ (Ethoxycarbonyl) cyano-methylenamino] -N, N, N′, N′-tetra-methyluronium tetrafluoroborate (TOTU) , 4- (4, 6-Dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methylmorpholiniumchloride (MMTM, DMTMM) , N, N, N′, N′-Tetramethyl-O- (N-succinimidyl) uronium tetrafluoroborate (TSTU) , O- (3, 4-Dihydro-4-oxo-1, 2, 3-benzotriazin-3-yl) -N, N, N′, N′-tetramethyluronium tetrafluoro-borate (TDBTU) , 1, 1′- (Azodicarbonyl) -dipiperidine (ADD) , Di- (4-chlorobenzyl) azodicarboxylate (DCAD) , Di-tert-butyl azodicarboxylate (DBAD) , Diisopropyl azodicarboxylate (DIAD) , or Diethyl azodicarboxylate (DEAD) .Y is a function group that enables to react with a drug or a cytotoxic agent, to form a disul-fide, ether, ester, thioether, thioester, peptide, hydrazone, carbamate, carbonate, amine (second-ary, tertiary, or quarter) , imine, cycloheteroalkyane, heteroaromatic, alkyloxime or amide bond； Y is selected from the following structures:disulfide；haloacetyl；acyl halide (acid halide) ； N-hydroxysuccinimide ester；maleimide；monosubstituted maleimide；disubstituted maleimide；monosubstituted succinimide；disubstituted succinimide； -CHO aldehyde；ethenesulfonyl；acryl (acryloyl) ；2- (tosyloxy) acetyl；2- (mesyloxy) acetyl；2- (nitrophenoxy) acetyl；2- (dinitrophenoxy) acetyl；2- (fluorophenoxy) -a...
결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용본 발명은 프로피올일, 치환된 아크릴(아크릴로일) 또는 이 치환된 프로파노일의 그룹을 갖는 링커, 및 화합물, 특히 세포 독성제를 세포 결합 분자에 결합하기 위해 그러한 링커를 사용하는 것에 관한 것이다. 화학식 (I) 및 (II)의 링커 화합물: 여기서, "" 및 ""은 단일 결합을 나타내고，""는 단일 또는 이중 결합에 링크될 때 거울상 이성질체 또는 입체 이성질체 결합일 수 있고,는 단일 결합, 이중 결합 또는 삼중 결합 중 어느 하나를 나타내고,가 단일 결합을 나타낼 때，Lv1과 Lv2 모두는 H가 아니고; 가 이중 결합을 나타낼 때, Lv1 또는 Lv2는 H일 수 있지만, 이들은 동시에 H가 아니고,；가 삼중 결합을 나타낼 때, Lv1은 부재하고, Lv2는 선택적으로 H일 수 있고,Lv1 및 Lv2은 티올에 의해 치환될 수 있는 동일 또는 상이한 이탈 기(leaving group)를 나타내며, 할라이드(플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드로부터 선택됨), 메탄술포닐(메실), 톨루엔술포닐(토실), 트리플루오로메틸-술포닐(트리플레이트), 트리플루오로메틸술포네이트, 니트로페녹실, N-숙신이미딜옥시(NHS), 페녹실, 디니트로페녹실, 펜타풀루오로페녹실, 테트라플루오로페녹실, 트리플루오로페녹실, 디플루오로페녹실, 모노플루오로페녹실, 펜타클로로페녹실, 1H-이미다졸-1-일, 클로로페녹실, 디클로로페녹실, 트리클로로페녹실, 테트라클로로페녹실, N-(벤조트리아졸-일)옥실, 2-에틸-5-페닐이속사졸리움-3'-술포닐, 페닐옥사디아졸-술포닐(-술폰-ODA), 2-에틸-5-페닐이속사졸리움-일, 페닐옥사디아졸-일(ODA), 옥사디아졸-일; 또는 EDC(N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드), DCC(디시클로헥실카르보디이미드), N,N'-디이소프로필카르보디이미드(DIC)，N-시클로헥실-N'-(2-모르폴리노-에틸)카르보디이미드 메토-p-톨루엔술포네이트(CMC, 또는 CME-CDI)，1,1'-카르보닐디이미다졸(CDI), TBTU(O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)유로늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBOP), 디에틸 시아노포스포네이트(DEPC), 클로로-N,N,N',N'-테트라메틸포름아미디늄헥사플루오로포스페이트, 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HATU), 1-[(디메틸아미노)(모르폴리노)메틸렌]-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-1-이움 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HDMA), 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸이디늄 헥사플루오로포스페이트(CIP), 클로로트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyCloP), 플루오로-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트(BTFFH), N,N,N',N'-테트라메틸-S-(1-옥시도-2-피리딜)티유로늄헥사플루오로포스페이트, O-(2-옥소-1(2H)피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TPTU), S-(1-옥시도-2-피리딜)-N,N,N',N'-테트라메틸티유로늄 테트라플루오로보레이트, O-[(에톡시카르보닐)시아노메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트(HOTU), (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸이덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(COMU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)유로늄헥사플루오로포스페이트(HBPyU), N-벤질-N'-시클로헥실-카르보디이미드(중합체-결합을 갖거나 또는 갖지 않음), 디피롤리디노(N-숙신이미딜-옥시)카르베늄 헥사플루오로포스페이트(HSPyU), 클로로디피롤리디노카르베늄 헥사플루오로포스페이트(PyClU), 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸이디늄 테트라플루오로보레이트(CIB), (벤조트리아졸-1-일옥시)디피페리디노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트(HBPipU), O-(6-클로로벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TCTU), 브로모트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BroP), 프로필포스포닉 무수물(PPACA, T3P®), 2-모르폴리노에틸 이소시아니드(MEI), N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)유로늄 헥사플루오로포스페이트(HSTU), 2-브로모-1-에틸-피리디늄 테트라플루오로보레이트(BEP), O-[(에톡시카르보닐)시아노-메틸렌아미노]-N,N,N',N'-테트라-메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TOTU), 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄클로라이드((MMTM, DMTMM),N,N,N',N'-테트라메틸-O-(N-숙신이미딜)유로늄 테트라플루오르보레이트(TSTU), O-(3,4-디히드로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일)-N,N,N',N'-테크라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TDBTU),1,1'-(아조디카르보닐)-디피페리딘(ADD), 디-(4-클로로벤질)아조디카복실레이트(DCAD), 디-tert-부틸 아조디카복실레이트(DBAD), 디이소프로필 아조디카복실레이트(DIAD) 또는 디에틸 아조디카복실레이트(DEAD)의 축합제(condensation reagent)로 생성된 중간생성물 분자일 수 있고, Y는 약물 또는 세포 독성제와 반응하여 디설피드, 에테르, 에스테르, 티오에테르, 티오에스테르, 펩티드, 히드라존, 카바메이트, 카보네이트, 아민(2차, 3차 또는 4차), 이민, 시클로헤테로알킬, 헤테로방향족, 알킬옥심 또는 아미드 결합을 형성할 수 있는 기능 기이고; Y는 하기 구조들로부터 선택되고:이황화; 할로아세틸; 아실 할라이드(산 할로겐화물); N-히드록시숙신이미드에스테르; 말레이미드; 단일 치환된 말레이미드; 이 치환된 말레이미드; 단일 치환된 숙신이미드; 이 치환된 숙신이미드;-CHO 알데히드;에텐술포닐;  아크릴(아크릴로일); 2-(토실옥시)아세틸; 2-(메실옥시)아세틸; 2-(니트로페녹시)아세틸; 2-(디니트로페녹시)아세틸; 2-(플루오로페녹시)-아세틸; 2-(디플루오로페녹시)-아세틸; 2-(((트리플루오로메틸)-술포닐)옥시)아세틸;케톤 또는 알데히드,2-(펜타플루오로페녹시)아세틸; , 메틸술폰페닐옥사디아졸(ODA); 산 무수물, 알킬옥시아미노; 아지도, 알키닐 또는 히드라지드，여기서, X1'는 F, Cl, Br, I 또는 Lv3이고; X2'는 O, NH, N(R1) 또는 CH2이고; R3 및 R5는 독립적으로 H, R1, 방향족, 헤테로방향족 또는 방향족 그룹이며，여기서 하나 또는 수 개의 H 원자는 -R1, -할로겐, -OR1, -SR1, -NR1R2, -NO2, -S(O)R1, -S(O)2R1 또는 -COOR1에 의해 독립적으로 치환되고; Lv3은 니트로페놀；N-히드록시숙신이미드(NHS); 페놀; 디니트로페놀; 펜타플루오로페놀; 테트라플루오로페놀; 디플루오로페놀; 모노플루오로페놀; 펜타클로로페놀; 트리플레이트; 이미다졸; 디클로로페놀; 테트라클로로페놀; 1-히드록시벤조트리아졸; 토실레이트; 메실레이트; 2-에틸-5-페닐이속사졸리움-3'-술포네이트; 그 자체로 형성된 무수물 또는 아세틸 무수물, 포르밀 무수물로부터 선택되는 다른 무수물과 함께 형성된 무수물; 또는 펩티드 커플링 반응 또는 미츠노부(Mitsunobu) 반응을 위한 축합제로 생성된 중간생성물 분자로부터 선택된 이탈 기이고, R1은 부재하거나 또는 알킬의 C1-C8; 헤테로알킬, 알킬시클로알킬, 헤테로시클로알킬의 C2-C8； 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카보사이클릭, 시클로알킬, 헤테로알킬시클로알킬, 알킬카보닐, 헤테로아릴의 C3-C8；또는 에스테르，에테르, 아미드, 아민, 이민, 폴리아민, 히드라진, 히드라존, 우레아, 세미카르바지드, 카바지드, 알콕시아민, 알콕시아민, 우레탄, 아미노산, 아실옥시아민, 글리코시드 또는 히드록삼산의 C2-C8(2-8 탄소 원자); 또는 1 내지 8개의 아미노산을 함유하는 펩티드, 또는 화학식 (OCH2CH2)p 또는 (OCH2CH(CH3))p[여기서, p는 1 내지 약 1000의 정수임]의 폴리에틸렌옥시 유닛 또는 이들의 조합으로부터 선택되고,T는 CH2, NH, NHNH, N(R3), N(R3)N(R3'), O, S, 헤테로알킬, 알킬시클로알킬, 헤테로시클로알킬의 C2-C8; 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카보사이클릭, 시클로알킬, 헤테로알킬시클로알킬, 알킬카보닐, 헤테로아릴의 C3-C8; 1 내지 4 유닛의 아미노산을 함유하는 펩티드; 또는 다음 구조들 중 하나이고, 여기서 는 결합(linkage) 사이트이고, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X1', X2' 및 X3'는 NH; NHNH; N(R3); N(R3)N(R3'); O; S; 알킬의 C1-C6；헤테로알킬, 알킬시클로알킬, 헤테로시클로알킬의 C2-C6; 아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카보사이클릭, 시클로알킬, 헤테로알킬시클로알킬, 알킬카보닐, 헤테로아릴의 C3-C8； 또는 1 내지 8개의 아미노산으로부터 독립적으로 선택되고；R3 및 R3'는 독립적으로 H； 알킬의 C1-C8; 헤테로알킬, 알킬시클로알킬, 헤테로시클로알킬의 C2-C8；아릴, Ar-알킬, 헤테로사이클릭, 카보사이클릭, 시클로알킬, 헤테로알킬시클로알킬, 알킬카보닐, 헤테로아릴의 C3-C8; 또는 에스테르, 에테르 또는 아미드의 1 내지 8개의 탄소 원자; 또는 1 내지 8개의 아미노산; 또는 화학식 (OCH2CH2)p 또는 (OCH2CH(CH3))p[여기서, p는 1 내지 약 1000의 정수임]의 폴리에틸렌옥시 유닛 또는 이들의 조합이고,m, m1, m2, m3, m4 및 m5는 독립적으로 1 내지 10의 정수, 바람직하게는 1 내지 4의 정수이고,L1 및 L2는 동일하거나 상이하며, O, NH, S, NHNH, N(R3), N(R3...