Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regionsThe present invention relates to variants of subtilisin-like proteases having decreased immunogenicity relative to their corresponding wild-type proteases. More particularly, the present invention relates to variants having a modified amino acid sequence of a wild-type amino acid sequence, wherein the modified amino acid sequence comprises a substitution of one or  more epitope regions. The invention further relates to mutant genes encoding such variants and cleaning and personal care compositions comprising such variants.Subtilisin sample ease variants, it is characterized in that described variant has the aminoacid sequence of the modification of wild-type amino acid sequence, described wild-type sequence comprises first epi-position district and second epi-position district, the aminoacid sequence of described modification is included in the replacement of the substituted amino acid of one or more positions in one or more epi-positions district, wherein:(a) when replacement occurred in first epi-position district, described replacement occurred in 108,109, one or more positions of 110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122,123,124,125 and 126, wherein:(i) when replacement occurred in 108, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, trp and tyr;(ii) when replacement occurred in 109, substituted amino acid was selected from phe, gly, his, leu, met, pro, gln, trp and tyr;(iii) when replacement occurred in 110, substituted amino acid was selected from ala, asp, glu, phe, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, ser, thr, val, trp and tyr;(iv) when replacement occurred in 111, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(v) when replacement occurred in 112, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, val, trp and tyr;(vi) when replacement occurred in 113, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val and tyr;(vii) when replacement occurred in 114, substituted amino acid was selected from asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(viii) when replacement occurred in 115, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(ix) when replacement occurred in 116, substituted amino acid was selected from cys, asp, phe, gly, his, ile, leu, met, asn, pro, gln, ser, val, trp and tyr;(x) when replacement occurred in 117, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, leu, met, pro, gln, ser, thr, val, trp and tyr;(xi) when replacement occurred in 118, substituted amino acid was selected from cys, asp, glu, phe, gly, his, lys, met, gln, arg, thr, trp and tyr;(xii) when replacement occurred in 119, substituted amino acid was selected from ala, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(xiii) when replacement occurred in 120, substituted amino acid was selected from ala, cys, glu, phe, gly, ile, leu, met, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(xiv) when replacement occurred in 121, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, trp and tyr;(xv) when replacement occurred in 122, substituted amino acid was selected from ala, asp, glu, phe, gly, his, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(xvi) when replacement occurred in 123, substituted amino acid was selected from asp, glu, phe, his, lys, leu, met, pro, gln, arg, val, trp and tyr;(xvii) when replacement occurred in 124, substituted amino acid was selected from cys, asp, glu, phe, gly, his, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(xviii) when replacement occurred in 125, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, thr, val, trp and tyr; with(xix) when replacement occurred in 126, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, lys, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr; with(b) when replacement occurred in second epi-position district, described replacement occurred in 221,223, and 224,225,226,227,228,229,230,231,232,233,234,235,236,237,238, one or more positions of 239,240,241,242,243,244,245 and 246, wherein:(i) when replacement occurred in 221, substituted amino acid was selected from asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, thr, val, trp and tyr;(ii) when replacement occurred in 223, substituted amino acid was selected from cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, ser, thr, val, trp and tyr;(iii) when replacement occurred in 224, substituted amino acid was selected from ala, asp, glu, phe, gly, his, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, val, trp and tyr;(iv) when replacement occurred in 225, substituted amino acid was selected from cys, asp, glu, phe, gly, his, ile, asn, thr, trp and tyr;(v) when replacement occurred in 226, substituted amino acid was selected from ala, asp, glu, phe, gly, ile, lys, leu, met, asn, pro, gln, arg, thr, val, trp and tyr;(vi) when replacement occurred in 227, substituted amino acid was selected from ala, cys, asp, glu, phe, gly, his, ile...
정의된 에피토프 구역에 아미노산 치환을 가진 서브틸리신프로테아제 변이체본 발명은 야생형 프로테아제보다 감소된 면역원성을 가진 서브틸리신-유사 프로테아제에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 하나 이상의 에피토프 구역 내의 치환체를 포함하는 야생형 아미노산 서열의 변경된 아미노산 서열을 가진 변이체에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기의 변이체를 코딩하는 변이 유전자, 및 상기 변이체를 함유하는 퍼스널 케어용 조성물에 관한 것이다. 제 1 에피토프 구역 및 제 2 에피토프 구역을 포함하는 야생형 아미노산 서열의 변경된 아미노산 서열을 가지며, 변경된 아미노산 서열은 하나 이상의 에피토프 구역 내의 하나 이상의 위치에 치환 아미노산에 의한 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 서브틸리신-유사 프로테아제 변이체: (a) 치환이 제 1 에피토프 구역에서 발생할 때, 치환은 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 및 126 위치들 중 하나 이상에서 하기와 같이 발생하며: (i) 108 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (ii) 109 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Phe, Gly, His, Leu, Met, Pro, Gln, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (iii) 110 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (iv) 111 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (v) 112 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (vi) 113 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (vii) 114 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (viii) 115 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (ix) 116 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (x) 117 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xi) 118 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Met, Gln, Arg, Thr, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xii) 119 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xiii) 120 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Glu, Phe, Gly, Ile, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xiv) 121 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xv) 122 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xvi) 123 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, His, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xvii) 124 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xviii) 125 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xix) 126 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택됨; (b) 치환이 제 2 에피토프 구역에서 발생할 때, 치환은 221, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 및 246 위치들 중 하나 이상에서 하기와 같이 발생함: (i) 221 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (ii) 223 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (iii) 224 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (iv) 225 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Asn, Thr, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (v) 226 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (vi) 227 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (vii) 228 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (viii) 229 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (ix) 230 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (x) 231 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xi) 232 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xii) 233 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xiii) 234 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp 및 Tyr 로 구성되는 군으로부터 선택되며; (xiv) 235 위치에 치환이 발생할 때, 치환 아미노산은 Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Met, Asn, Pro, Gln,...