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建议用改良的抗酸染色法涂片、染色,这个过程能够将布鲁氏菌与可能的　革兰阳性球菌、皮肤污染菌以及血培养基中的杂质相区分。　在地中海国家,很少从病例中分离到牛种布鲁氏菌,此原因未知。例如,在西班牙从人　体分离的　2107　株布鲁氏菌超过　98%　都是羊种菌。发热病例血清培养阳性率可高达　86.5%。　在低热或不发热的病例中阳性率则下降至　75%　和28.5%。复发病例同样如此。然而两项大范　围研究显示,31.8%　和41.9%　的羊种布鲁氏菌是从无发热症状病例中分离出来的。　“属”水平的布鲁氏菌可根据菌落形态、革兰或印记涂片染色状态、氧化酶和布鲁氏　菌特异抗血清玻片凝集试验结果进行分离筛查,分子识别方法也可以进行分离筛查,例如采　用特异插入序列引物和基因片段的聚合酶链反应方法,引物包括　IS　711　或IS　650,基因　片段包括　16S-23SrRNA,BCPS31　和omp　2a　基因。分离到的布鲁氏菌应提交给参比实验室做　精确的种型鉴定,因为这可以提供非常有价值的流行病学信息。　近期有学者提议用聚合酶链反应方法直接在血液中检测布鲁氏菌。该方法是否能够取　代传统血液培养方法还需更多试验证明。将这类试验作为常规实验室检测之前,必须确认其　16　人兽布鲁氏菌病　敏感度、特异度和可重复性。进行这类试验操作前须制定有效的控制规程,防止来自实验室　环境的细菌　DNA　或放大复制子的样本污染。　4.1.2　血清学诊断　4.1.2.1　抗原和免疫球蛋白在诊断中的意义　用于诊断人布鲁氏菌病的主要布鲁氏菌抗　原是外层细胞膜和内部(细胞质)蛋白的光滑脂多糖(S-LPS),它是免疫显性抗原,还是　一种分子,该分子能携带与其他革兰阴性菌起交叉反应的表位,这些革兰阴性菌包括小肠结　肠炎耶尔森菌　O∶　9,大肠埃希菌　O∶　157,土拉弗朗西斯菌、沙门菌　O∶　30　及霍乱弧菌等。　试管凝集试验(SAT)或根据其改良的微滴定平板试验,用高温或苯酚(石碳酸)灭活　的光滑菌体来检测　S-LPS　抗体。当试验使用含有　S-LPS　的提取物时,其他检验方法也能检　测到抗原抗体反应,例如酶联免疫吸附试验。由于这是免疫显性抗原,因此,用S-LPS　无　胞质蛋白制剂来检测抗体。使用胞质蛋白的重要一点是从未发现与上述细菌存在显著的血　清学交叉反应(然而能与布鲁氏菌基因相近的细菌出现交叉反应,如苍白杆菌等),因