甲状腺结节切除后的病人,会存在一定的复发率,在临床上常见的甲状腺结节需要手术治疗的疾病有结节性甲状腺肿、甲状腺瘤、还有甲状腺癌。这三种不同的甲状腺疾病,会采取不同的手术治疗方式。比方说甲状腺瘤的治疗方式,会在手术当中切除甲状腺瘤所在甲状腺叶的大部分或者是次全切除,甚至是全部甲状腺腺叶所在腺叶的切除。但是可能会遗留有甲状腺瘤所在腺叶的少部分,还有对侧的甲状腺腺叶都会正常的保留,那么只要有正常的甲状腺保留,在术后还会存在复发的可能性。结节性甲状腺肿的手术方式也是这样,在手术当中可能会将所在腺叶的甲状腺腺叶进行次全切除或者全部切除。而遗留另外一侧稍微正常的甲状腺腺叶组织,那么只要存在正常的甲状腺腺叶组织,结节性甲状腺肿就有复发的可能。
三种荧光定量PCR检测方法比较 定量pcr: 以参照物为标准, 对PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测, 从而达 到评估样本中靶基因的拷贝数, 称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩 增的指数期进行的。 常见荧光定量PCR检测方法可分为以下几类: SYBRGreen 检测模式SYBR Green 是一种能与双链DNA 结合发光的荧光染料。其与双链 DNA 结合后, 荧光大大增强。因此, SYBR Green 的荧光信号强度与双链DNA 的数量相关, 能够根据 荧光信号检测出 PCR 体系存在的双链 DNA 数量。SYBR Green 的最大吸收波长约为497nm, 发射波长最大约为 520nm。PCR 扩增程序一般为 94~55~72三步法, 40 个循环。SYBR Green 的缺点:由于 SYBR Green 没有特异性,不能识别特定的双链, PCR反应中的非特异性扩增或引物二聚体也会产生荧光, 一般 本底较高, 因此在临床上使用可能会有假阳性发生。 SYBR Green 的优点:SYBR Green 的优点是因为其缺点产生,由于它能所有的双 DNA相结合, 因此对不同模板不需特别定制不同的特异性探针, 通用性较好, 而且价格相 对较低。这对科研是很有利的, 因此国内外在科研中使用比较普遍。 水解探针模式(taqman探针) TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针, 荧光基团连接在探针的 5’末端, 而淬灭剂则在 末端。当探针与靶序列配对时,荧光基团发射的荧光因与 进行延伸反应时,聚合酶的 5’外切酶活性将探针切断, 使得荧光基团与淬灭剂分离, 发射荧 光。一分子的产物生成就伴随着一分子的荧光信号的产生。随着扩增循环数的增加, 释放 出来的荧光基团不断积累。因此 Taqman 探针检测的是积累荧光。PCR 扩增程序一般是: 94~60 40个循环。常见的荧光基团是 FAM, TET, VIC, HEX。 杂交探针模式(Beacon、FRET) 分子信标是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针, 两端的核酸序列互补配对, 由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中, 环一般为 15-30 个核苷酸长, 并与目标序列互补;茎一般 5-7 个核苷酸长, 相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另