Ламивудин се метаболизира вътреклетъчно до активния метаболит ламивудин 5 '- трифосфат.
Intracellulárisan a hatásért felelős lamivudin- 5 ’ - trifoszfáttá metabolizálódik, és elsősorban a HIV reverz transzkripció láncterminátoraként fejti ki hatását.