Полиглутаматните форми се задържат в клетките и са дори по- мощен инхибитор на тимидилат синтаза (ТС) и глицинамид рибонуклеотид формилтрансфераза (GARFT).
A polyglutamát vegyületek a sejtben maradnak és még hatékonyabban gátolják TS- t és GARFT- t.