12 Tenofovirdiphosphat hæmmer HIV- 1- reverse- transkriptase og HBV- polymerase ved direkte bindingskonkurrence med det naturlige deoxyribonukleotidsubstrat og - efter indføjelse i DNA - ved DNA- kædeblokering.
A tenofovir- difoszfát kompetitíven gátolja a HIV- 1 reverz transzkriptázt és a HBV polimerázt, úgy, hogy az enzim természetes dezoxiribonukleotid szubsztrátjával verseng a bekötődésért, és a DNS láncba beépülve DNS lánc terminációt idéz elő.