Anti- tumor aktiviteten af topotecan involverer hæmning af topoisomerase- 1, et enzym tæt involveret i DNA replikation, da den eliminerer det torsionale belastning, der opstår foran den bevægelige replikationsgaffel.
Topotekaani kasvajavastane toime põhineb DNA replikatsioonis vahetult osaleva ensüümi topoisomeraas- I inhibeerimisel, mis leevendab enne replikatsioonihargnemist tekkinud torsioonipinget.