Антитуморната активност на топотекан включва инхибиране на топоизомераза- I, ензим който участва непосредствено в репликацията на ДНК, като освобождава торзионното напрежение пред движещата се репликационна вилица.
Topoizomerazė- I yra fermentas, labai susijęs su DNR replikacija, kadangi mažina torsioninę įtampą, atsirandančią priešais judantį replikacijos išsišakojimą.