ФИЗИОЛОГО-ЭМБРИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ МЕТОДОМ МИКРОИНЪЕКЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫХ КОНСТРУКЦИЙ В ПРОНУКЛЕУСЫ ЗИГОТ
Технология получения генно-модифицированных животных на сегодняшний день имеет множество спорных моментов, требующих уточнения и более подробного исследования. При проведении экспериментов с ранними эмбрионами требуется совершенное владение эмбриологическими методиками и использование современных технологий. Цель данной работы - систематизация этих методик, отработанных авторами в ходе длительных исследований по получению животных - продуцентов рекомбинантных белков с молоком. Описаны условия содержания модельных животных (мышей), методики индукции суперовуляции у мышей-доноров эмбрионов и получения зигот, микроинъекции генно-инженерной конструкции в пронуклеусы, культивирования зигот, подготовки вазэктомированных самцов, псевдобеременных самок и трансплантации эмбрионов. Комплекс отработанных методик использован в исследованиях по получению модельных животных, экспрессирующих в молоко лактоферрин и гранулоцит-колониестимулирующий фактор, а также других трансгенных животных.