Разработка технологии выделения и очистки этанол-метаболизирующей системы из дрожжей saccharomyces cerevisiae
Определены рациональные условия очистки ЭМС: диализ против дистиллированной воды при температуре 0 ± 2 °С в течение 24 ч; ультрафильтрация на мембранах марки УПМ-67; микрофильтрация на мембранах фирмы «Millipore» с диаметром пор 0,22 мкм; сорбция белка на колонке с карбоксиметилцеллюлозой, 0,020 М фосфатный буфер (рН 7,4); элюация белкового комплекса градиентом концентраций 0,4M NaCl растворенного в 0,020 М фосфатном буфере (рН 7,4). В этих условиях сорбция ферментной системы достигла 95 %, элюция 85−87 %. Подобранные условия позволили отделить инертные белки и другие полимерные вещества, которые снижают потребительские и каталитические свойства ЭМС. В результате проведенных исследований каталитическая активность ЭМС повысилась более чем в 10 раз, что связано со значительным снижением количества сопутствующих белков.