МАГНИТНОЕ МАРКИРОВАНИЕ ФЕТАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА СУПЕРПАРАМАГНИТНЫМИ НАНОЧАСТИЦАМИ ОКСИДА ЖЕЛЕЗА, СТАБИЛИЗИРОВАННЫМИ ЦИТРАТОМ
Магнитное маркирование клеток имеет широкие перспективы биомедицинского применения: например, в тканевой инженерии, гипертермической терапии, доставке лекарств и терапевтических клеток, МРТ-трекинге клеток in vivo и других направлениях. С помощью магнитных наночастиц и магнитных полей можно существенно (в несколько раз) повысить эффективность клеточной трансплантологии. Суперпарамагнитные наночастицы оксида железа (SPION) являются наиболее перспективных магнитных наночастиц для целей магнитоуправляемой доставки клеток in vivo. В исследовании осуществляли магнитную маркировку фетальных фибробластов человека с помощью SPION, стабилизированных цитратом (SPION-Cit), относящимся к анионным магнитным наночастицам. Использовались дозы наночастиц 100, 200, 300 и 500 мкг Fe/мл; время инкубации 1, 2 и 3 ч. Эффективность магнитного мечения клеток оценивали с помощью магнитофореза в специальной камере с использованием дискового FeNdB магнита с индукцией 0,255 Тл: определяли скорость движения магнитомаркированных клеток в градиентном магнитном поле и рассчитывали их магнитную восприимчивость. Жизнеспособность магнитомаркированных фибробластов оценивали методом окрашивания трипановым синим. Величина магнитной восприимчивости магнитомаркированных фибробластов зависела от величины дозы наночастиц и времени инкубации. При этом фактор времени инкубации имел большее значение, чем фактор концентрации наночастиц. Дальность захвата магнитомаркированных клеток магнитом был в пределах 3-4 мм. Магнитофоретическое движение контрольных фибробластов не наблюдалось. Жизнеспособность магнитомаркированных фибробластов в пределах концентраций наночастиц 100-300 мкг Fe/мл и времени инкубации 1-3 ч в значительной степени не нарушалась. При концентрации 500 мкг Fe/мл наблюдали частичную гибель клеток и отслоение клеточного пласта от поверхности культурального флакона (начальные признаки отслоения наблюдали и при режиме маркировки 300 мкг Fe/мл, 3 ч). Наиболее оптимальный режим магнитного маркирования фибробластов SPION-Cit был при концентрации наночастиц 100 мкг Fe/мл, 3 ч, с дальностью захвата клеток магнитом 4 мм.