ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКА HPF ИЗ <i>Staphylococcus aureus</i> И АНАЛИЗ ЕГО СТРУКТУРЫ МЕТОДОМ СПЕКТРОСКОПИИ ЯМР
Исследуемый белок SaHPF ( Staphylococcus aureus hibernation-promoting factor) с молекулярным весом 22.2 кДа является трансляционным фактором, который в условиях стресса (например, при аминокислотном голодании или под давлением антибиотика), связываясь с рибосомой, инактивирует ее, тем самым позволяя клетке выживать в неблагоприятных условиях. Процесс получения кристаллов данного белка сопровождается большими трудностями, поэтому определение его структуры методом спектроскопии ЯМР представляет большой интерес. В работе описаны получение белка в минимальной синтетической среде, меченного по изотопам 13C и 15N, и результаты ЯМР-экспериментов, которые показали, что белок присутствует в растворе в виде димера. При этом для полного белка в спектрах ЯМР наблюдаются два типа сигналов: 1) с низкой интенсивностью, но хорошей дисперсией от остатков N-концевого домена и 2) с высокой интенсивностью, но плохой дисперсией от остатков, соответствующих подвижной петле между доменами. Сигналов от остатков С-концевого домена белка в спектрах ЯМР не наблюдалось, что свидетельствует о возможном их участии в процессах димеризации белка. Наличие белка в димерной форме было подтверждено методом электрофореза в нативных условиях.