ВРЕМЯ ЖИЗНИ ВОЗБУЖДЕННОГО СОСТОЯНИЯ И АНИЗОТРОПИЯ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ СВОБОДНОГО И СВЯЗАННОГО С АМИЛОИДНЫМИ ФИБРИЛЛАМИ ТИОФЛАВИНА Т
В настоящей работе были исследованы кривые затухания флуоресценции бензтиазольного красителя тиофлавина Т (ThT) в водно-глицериновых смесях в условиях макромолекулярного краудинга, имитирующих клеточную среду, и в амилоидных фибриллах на основе инсулина и фрагмента дрожжевого прионного белка Sup35 (Sup35NM). Показано, что анизотропия флуоресценции свободного красителя в растворах с высокой вязкостью в присутствии краудинг-агентов и встроенного в амилоидные фибриллы имеет предельно высокое значение и практически не отличается от анизотропии флуоресценции ThT в водном растворе. При этом времена затухания флуоресценции ThT, связанного с фибриллами на основе инсулина и Sup35NMp, различаются между собой и на несколько порядков превышают время жизни флуоресценции красителя в водных растворах. Сделано предположение о том, что результаты обусловлены молекулярно-роторной природой красителя. На основании данных работы сделано заключение о том, что измерение времени жизни возбужденного состояния ThT (но не анизотропии его флуоресценции) может быть использовано для исследования кинетики образования амилоидных фибрилл и их полиморфизма.