Исследование регуляторных свойств растворимой нуклеозидтрифосфатазы из почек быка
Из почек быка получен препарат растворимой НТФазы с удельной активностью 80 Ед•мг -1 белка. Схема очистки фермента включала экстракцию, высаливание сульфатом аммония и последующую хро-матографию на колонках с молселектом Г-75, ДЭАЭ тойоперлом 650М, тойоперлом HW-60, сефадексом G-200, гидроксиапатитом и сефакрилом S-200. Установлено, что активность НТФазы изменяется в присутствии физиологических концентраций фруктозо-1,6-дифосфата, АТФ и PPi, при этом фруктозо-1,6-дифосфат выступает в роли активатора во всем исследованном диапазоне концентраций (0,01-5 мМ). В то же время, АТФ и PPi при относительно малых концентрациях (соответственно 1-2 мМ и 0,2-0,6 мМ) активируют фермент, а в более высоких концентрациях проявляют ингибирующее действие. Полученные результаты дают основание рассматривать фруктозо-1,6-дифосфат, АТФ и PPi в качестве возможных регуляторов НТФазы in vivo.