ПРОДУКТИВНЫЕ И НЕПРОДУКТИВНЫЕ КОМПЛЕКСЫ В ЦИТОХРОМ P450-СОДЕРЖАЩИХ СИСТЕМАХ
Измерены равновесные константы диссоциации KD, кинетические константы скоростей образования (kon), распада (koff) и времена жизни (τlT) комплексов редокс-партнеров трёх цитохром Р450 - содержащих монооксигеназных систем (P450cam, P450scc и Р450 2В4) в условиях гидроксилирования. Для определения продуктивности комплексов исследуемых систем введен параметр (Q) - как отношение времени жизни комплексов белков-партнеров (τlT) ко времени полного цикла гидроксилирования (τturnover). Показано, что при переходе от окисления к гидроксилированию параметр Q изменяется несущественно. Времена жизни (τlT) бинарных комплексов белков-партнёров, относящихся к цитохром Р450сат и P450scc - содержащим системам, где обязательно требуется промежуточный электрон-транспортный белок между редуктазой и цитохромом Р450, не позволяют реализовать реакции гидроксилирования субстратов с известными τturnover, т.е. такие комплексы являются непродуктивными, в то время как бинарные комплексы в мембранной Р450 2В4-системе, не требующей такого промежуточного электронно-транспортного белка, являются продуктивными. Зарегистрировано образование тройных комплексов редокс-партнеров во всех рассматриваемых системах. Анализ значений Q позволил определить, что тройные комплексы, формирующиеся в цитохром Р450саm- и Р450sсс-содержащих системах, являются продуктивными. В случае цитохром Р450 2В4 - содержащей системы больше половины (около 60%) образующихся в ней тройных комплексов также являются продуктивными.