ТОНКАЯ СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ПРОФИЛЕЙ EB3 НА МИКРОТРУБОЧКАХ В КЛЕТКАХ ФИБРОБЛАСТОВ
У млекопитающих семейство плюс-конец-связывающих белков микротрубочек (EB) содержит три белка EB1 / 2/3, которые ассоциируются с растущими кончиками микротрубочек и могут регулировать их динамику, путем привлечения белков-партнеров для полимеризации тубулина. Было показано ранее, что EB-белки распознавали стабилизирующую шапочку из ГТФ / ГДФ-фосфат тубулина в растущих микротрубочках in vitro, служащую маркером мгновенной стабильности микротрубочки. Тонкая структура и динамика зоны связывания распознаются EB-белками в живых клетках. В этой работе на культуре фибробластов 3Т3, трансфецированных EB3-RFP мы изучили профиль интенсивности EB3-комет. Было показано, что профили распределения белка ЕВ3-RFP на микротрубочках в мышиных фибробластах хорошо описываются базовыми теоретическиеми представлениями. Однако мы обнаружили, что в некоторых случаях профиль имеет более сложную структуру, отличающуюся от классического представления. Под сложной формой мы понимаем дополнительную зону повышенной интенсивности белка ЕВ3-RFP на микротрубочке позади основной кометы, которая проявляется на кимограммах в виде характерных стационарных полос, которые в свою очередь могут появляться как в теле микротрубочки, так и вблизи основного пика. Мы считаем, что данный факт может свидетельствовать о более сложной структуре растущего плюс-конца микротрубочки и ГТФ-шапочки в частности.