Подбор оптимальных параметров постановки РНФ для индикации бактерий вида K. Oxytoca
В статье представлены результаты исследований, связанных с подбором оптимальных условий постановки реакции нарастания титра фага с бактериофагами активными в отношении бактерий вида K. oxytoca. При использовании метода реакции нарастания титра фага применяли бактериофаги Кох-9 УГСХА и Кох-11 УГСХА, обладающие строгой специфичностью и достаточной литической активностью в отношении бактерий вида K. oxytoca (K. oxytoca 86 - индикаторная культура для бактериофага Кох-9 УГСХА, K. oxytoca 124 - индикаторная культура для бактериофага Кох-11 УГСХА). Проведенные исследования заключались в определении количественного показателя реакции (имеющего диагностическое значение) и установлении оптимального временного параметра, обеспечивающего наиболее полное взаимодействие корпускул фага с бактериями. Заражающая концентрация культур варьировала в пределах 101-105 м.к./мл.. При подборе временного параметра реакции, обеспечивающего оптимальное взаимодействие фага с бактериями, применяли метод предварительного подращивания исследуемого материала и увеличивали время контакта исследуемого материала с бактериофагом. Установлено, что наиболее эффективным для постановки данной реакции является режим, где заражающая концентрация бактериями вида K. oxytoca равна 103 м.к./мл, при 5 часовой инкубации исследуемого материала с фагом. Анализ полученных результатов позволил заключить 06 отсутствии необходимости в предварительном подращивании материала исследования при температуре 37 °С в течение 5, 6,10,16 и 24 часов. Общее время исследований составило 22 часа. Увеличение времени подращивания исследуемого материала до 16 часов позволяет обнаружить бактерии вида K. oxytoca в количестве 102 м.к./мл, но при увеличении сроков исследования до 37 часов.