Способы индикации некультивируемых жизнеспособных микроорганизмов при контроле критических точек технологии животноводства, птицеводства и пищевых производств
Приведены результаты морфометрических и денситометрических показателей биопленок, апробированы и подобраны эффективные способы детекции некультивируемых жизнеспособных микроорганизмов, выделенных из репрезентативной выборки объектов ветеринарно-санитарного надзора. При оптической, люминисцентной и сканирующей электронной микроскопии выявлено формирование трехмерной структуры биопленок в виде плотной сети, состоящей из грамотрицательных и грамположительных бактерий, дрожжевых клеток, гифальных и псевдогифальных форм, окружённых межклеточным полимерным матриксом. Наличие гифов микроскопических грибов обусловливает увеличение количества адгезированных к субстрату бактерий, формировались микроколонии из бактерий и дрожжевых клеток микроскопических грибов. Патогенез синдрома избыточного роста микроорганизмов обеспечивается наличием различных диссоциативных вариантов, дисперсией некультивируемых клеток бактерий, получающих преимущества при гиперагрегации архитектоники гетерогенных биопленок. Выявлялись многослойные мембраны, везикулы, клетки с дефектной клеточной стенкой, сферопласты, протопласты, L-формы, игольчатые и гигантские структуры, клетки-ревертанты. Динамика изменений жизнеспособных структур микроорганизмов характеризовалась чередующимися периодами снижения и увеличения интенсивности формирования биоплёнки. При детекции жизнеспособности микроорганизмов в составе биопленок дифференцировали жизнеспособные и нежизнеспособные клетки - зелёный спектр люминесценции и красный спектр люминесценции, соответственно. Диссоциация популяции обусловливала увеличение концентрации клеток R-диссоциантов, обладающих большей скоростью роста, лизис клеток выявляли через 48.72 ч культивирования, наблюдалось изменение соотношения фенотипических форм - преобладающим являлся М-диссоциант. Исследова ние гетерогенной структуры популяции, без нарушения естественной архитектоники биопленок выявило прямые коррелятивные зависимости (r=0,89) между морфометрическими (>90 % поля зрения) и денситометрическими показателями (OD). Для репарации клеточной стенки, реверсии L-форм микроорганизмов установлена эффективность питательной среды, содержащей гидролизат панкреатический, маннит, L-аспарагин и глицерин.