КЛОНИРОВАНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ФУНКЦИИ ДВУХ НОВЫХ ВАРИАНТОВ СПЛАЙСИНГА <i>BRCA1</i>
Клонированы два новых варианта сплайсинга гена BRCA1 из клеточной линии рака груди ZR-75-30. Установлено, что в продуктах транскрипции, названных BRCA1-PI21-∆2-21 и BRCA1-∆2-14, отсутствовало большинство экзонов полноразмерного гена BRCA1, но сохранилась изначальная рамка считывания. Продемонстрировано наличие BRCA1-PI21-∆2-21 в нескольких клеточных линиях, полученных от человека. Белковые продукты двух вариантов сплайсинга гена BRCA1, модифицированные присоединением зеленого флуоресцирующего белка (ЗФБ), направляются в различные зоны трансфицированных клеток. Отмечено, что жизнеспособность клеток, экспрессирующих любой из модифицированных белков, заметно уменьшалась по сравнению с жизнеспособностью клеток, экспрессирующих только ЗФБ. Методом проточной флуороцитометрии подтверждено, что сверхэкспрессия обоих вариантов сплайсинга приводила к апоптозу клеток. Различие внутриклеточной локализации и воздействия на клетки позволяет предположить, что два продукта сплайсинга выполняют разные биологические функции в раковых клетках. Выяснение функций продуктов сплайсинга BRCA1 окажет помощь в понимании роли гена BRCA1 в подавлении опухолей.