ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВИРУСА ГЕРПЕСА КАРПОВЫХ В УКРАИНЕ
Целью работы было исследовать больных рыб видов лабео двухцветного (Labeo bicolor) и сома мешкожаберного ( Heteropneustes fossilis) тестированием нескольких диагностикумов для выявления вируса герпеса и определения этиологии вспышек инфекции среди аквариумных рыб в Киевском зоопарке летом 2017 года. Во время исследования заболеваний аквариумных рыб в Киевском зоопарке обнаружен вирус Cyprinid herpesvirus 3 - CyHV-3 у лабео двухцветного и мешкожаберного сомика. Анализ инфицированных рыб выявил ряд поражений, прежде всего во внутренних органах и тканях. Жабры больной рыбы характеризовались гиперемией и некрозом. У обоих видов рыб наблюдалось нарушение структуры печени и изменение ее цвета, отеки почек и кровоизлияния желчного пузыря. Вирус не репродуцировался в перевиваемых клеточных линиях рыб RTG-2, FHM и EPC, о чем свидетельствовало отсутствие каких-либо морфологических изменений в исследуемых культурах клеток. В организме инфицированных рыб не было обнаружено возбудителей паразитарных или бактериальных инфекций. Результаты исследований показали, что специфические олигонуклеотидные праймеры к гену тимидинкиназы CyHV-3 успешно амплифицировали фрагмент ДНК вируса. Длина продукта полимеразной цепной реакции, как и ожидалось, составила 264 пары нуклеотидов. Амплифицированные специфические фрагменты были идентичны участку гена тимидинкиназы CyHV-3, о чем свидетельствовал анализ нуклеотидной последовательности ДНК. Идентичность нуклеотидных последовательностей составляла 97-99%. При использовании в качестве контроля праймеров, рекомендованных Международным бюро эпизоотий, были получены фрагменты размером 409 и 292, что также свидетельствовало о наличии CyHV-3. По нашему мнению, CyHV-3 был занесен в Украину путем нелегального импорта аквариумных рыб, а также из-за отсутствия надлежащего санитарного контроля при трансграничных перевозках. Неконтролированное импортирование аквариумных и культивируемых видов рыб является серьезной проблемой, поскольку импортируемая рыба может быть источником высокопатогенных инфекций для промышленной аквакультуры.