Влияние реагентов, увеличивающих вязкость среды, на синтез АТФ в тилакоидах хлоропласта
Исследовано влияние увеличения вязкости реакционной среды на циклическое фотофосфорилирование в тилакоидах хлоропластов и на Са 2+-зависимый гидролиз АТФ сопрягающим фактором CFi. Показано, что добавление в реакционную среду агентов разной природы (сахарозы, декстрана 40, полиэтиленгликоля 6000), увеличивающих вязкость среды, приводит к уменьшению скорости синтеза АТФ при концентрации АДФ 0,1-0,2 мМ в условиях, когда эти агенты еще не вызывают ни разобщения, ни ингибирования переноса электронов в отсутствие АДФ. Декстран и полиэтиленгликоль ингибировали синтез АТФ на 50% при концентрациях гораздо меньших (6-10%), чем сахароза (30-40%), тогда как 50%-е ингибирование Са 2+ -зависимого гидролиза АТФ CFl-ATФазой наблюдалось при более высоких концентрациях декстрана и полиэтиленгликоля (9-13%), но при более низких концентрациях сахарозы (около 20%). Установлено, что эффективная константа Михаэлиса (Км) для АДФ с возрастанием вязкости среды увеличивается в два-три раза, при этом максимальная скорость циклического фотофосфорилирования остается постоянной. Сделан вывод о том, что зависимость Км от вязкости среды может служить критерием функционирования процесса фотофосфорилирования в диффузионно-контролируемом режиме. Обсуждаются возможные механизмы диффузии АДФ и АтФ.