10 मिमी अमोनियम बिकारबोनिट (पीएच 8) में बढ़ रही ACN एकाग्रता की एक ढाल लगाने से एक C18-HPLC स्तंभ पर पेप्टाइड मिश्रण fractionate. 5 मिनट के लिए 5% (v / v) ACN के साथ शुरू करो, 60 मिनट में 35% ACN को बढ़ाने, और 1 मिनट में फिर से 90% ACN. 9 मिनट के लिए फिर से संतुलित करने के लिए कॉलम 5% की ACN को कम करने से पहले 4 मिनट के लिए 90% ACN को बनाये रखें. एक 96 अच्छी तरह से थाली (H12 को ए 1) में बराबर मात्रा के 96 भिन्न लीजिए. पेप्टाइड्स स्तंभ (यहाँ वर्णित शर्तों के लिए 10-70 मिनट) बंद eluting कर रहे हैं, जबकि 220 एनएम पर एक यूवी डिटेक्टर का उपयोग fractionation मॉनिटर.