Ènzim rèstriksi utawi èndonuklèasè rèstriksi inggih punika ènzim ingkang motong molèkul DNA. Ènzim punika motong DNA ing rangka gula-fosfat tanpa ngerusak basa. Setiap enzim mempunyai sekuens pengenalan yang unik pada utas DNA, biasanya sepanjang 4-6 pasang basa.