活動ブログ平成23年度活動ブログ養成講座の活動を記録しています。『スフェロイドからRNAを取り出し、DNAの逆転写』をしました。今回は一般的とされているRT-PCR法で行いました。<RT-PCRの原理>逆転写酵素を使用してRNAを1本鎖cDNAに転写します。その後、cDNA増幅のためDNAポリメラーゼを使用します。RT-PCRには主に、ワンステップ操作(逆転写と増幅が1つのチューブ内で連続的に行われる)、またはツーステップ操作(逆転写と増幅が別々のチューブ内で行われる)の2つがあります。今回の手順は、1スピンダウン2スピンカラムを用いたRNA抽出3メンプレン上でのDNase処理4RNAの溶出5逆転写反応によるcDNA合成と、real-timePCR法による発現量の解析を行います。今回はかなりの時間がかかってしまいました。行う事が出来ずにこの日は終わってしまいました。先生、TAの方すみません。長時間の作業に途中集中力が途切れてしまったことがありました。これは今後の課題です。大学の先生や生徒の皆さんが分かりやすく噛み砕いて説明をしてくれているのにも関わらず、<科学を学びたい>と思って自ら志願し東北大学におじゃましている私がこのような状態で受講していては駄目だと思いました。TAの方や先生に失礼ですし、他の受講生にも失礼だと反省しました。自分がいかに恵まれているかをとても感じることが出来ました。心機一転頑張りたいと思います。2014.04.04第7回科学者の卵の報告!2014.03.22卵5期のみなさま、先日はありがとうございました。