(piRNA)は、生殖細胞特異的に産生される24~30塩基長の小分子RNAであり、PIWIタンパク質ファミリーと複合体を形成することで機能する。piRNAの多くはトランスポゾンの相補的な配列を有し、塩基配列特異的にPIWI-piRNA複合体がトランスポゾンRNAに作用することで、それらの発現を抑制し、生殖細胞のゲノムの品質管理を担う。piRNAが産生されないとトランスポゾンによって生殖ゲノムが損傷し、卵や精子の形成不全を引き起こす。piRNAの産生経路に関しては3つのモデル、プライマリー経路およびピンポン経路、フェイジング経路が提唱されている。ショウジョウバエ卵巣は、主に生殖細胞とそれを取り囲む濾胞細胞から構成され、プライマリー経路とフェイジング経路は両細胞でみられるが、ピンポン経路は生殖細胞でのみ観察される(図1A)。そのため、ピンポン経路によるpiRNA生合成機構を研究するには、卵巣や精巣といった生殖組織を使わざるを得ない。生殖組織を用いて生化学的な解析を行う上で問題となるのは、生殖組織は生殖細胞以外の細胞が混じったヘテロな細胞集団であり、それが解析上のノイズとなり得ること、さらに、個体数の制限や組織解剖の手間といったサンプル調整の困難さ、である。これらの点は、ショウジョウバエに限らず、マウスなどのモデル生物であってもpiRNA研究を推進する上で律速となっていた。そのため、生化学的な解析には組織よりも培養細胞が適しており、均一な細胞集団を用いたシンプルな実験系での解析を可能とする。ピンポン経路を有する培養細胞の作出が、本題の解消につながると考えられた。[l(3)mbt]を機能欠損させると脳腫瘍が生じ、その腫瘍細胞ではVasaやAub、AGO3といった生殖細胞特異的なpiRNA生合成因子が異所的に発現することが報告されていた。そこで、我々は、l(3)mbt遺伝子に着目し、ショウジョウバエ濾胞細胞由来の培養細胞株OSCにおいて、l(3)mbt遺伝子をノックアウトした培養細胞株「Δmbt-OSC」をCRISPR-Cas9システムを用いて作出した(図1A)。A生合成経路を生化学的に分子レベルで解明できる優れた研究ツールであると考えられる。Δmbt-OSCの培養細胞としての性状などは他のショウジョウバエ培養細胞株と変わらず、容易に継代・維持が可能である。維持されており、そちらからも入手可能である(https://dgrc.bio.indiana.edu/Home)。