血栓症のマウストロンビン受容体PAR4を標的とする抗体の注入は示された。血栓-サイトターゲットnanovehicles特に積極的に血栓が示された形成に特異的に結合します。Pは、粒子の注入を示します。ピークBは、血栓への粒子のピークバンドを示しています。全ての画像は同じ倍率で撮影しました。スケールバー=300μmの。この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。血栓形成に対するRBCの図6.役割。(A)7.5%のFeCl後に頸動脈血栓症モデルとイメージに供したのDiI標識RBCの灌流を受けた血小板マウス。(B&C)負傷した頚動脈を回収し、そして凍結切片を作製しました。血小板は、CD41(緑)で染色し、RBCを(ディル)赤色で示されました。核はDAPIで染色しました。(B及びC)に示す容器は、二つの異なるマウスからのものでした。スケールバー=50μmでは。この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。ビデオ1:野生型(WT)マウスにおける頸動脈血栓症モデルの代表的なビデオ。(右クリックしてダウンロードすること。血小板は、ローダミン6Gの静脈内注射によって標識し、そして映像をモノクロモードで撮影されました。白い塊が凝固した血小板です。(右クリックしてダウンロードしてください。3傷害後静脈内に5分を注入しました。3と位置濾紙を適用することによって開始される前(右クリックしてダウンロードする。)この実験では、マウスは、PAR4抗体およびローダミン6G注射10分を与えました。(右クリックしてダウンロードすること。ナノ粒子は、ローダミンBで標識し、静脈損傷後にマウスを5分間注入しました。"/>ビデオ5:頸動脈血栓症モデルによって検出赤血球の結合。(ダウンロードするには右クリックします。'、3'-テトラメチル過塩素酸塩(ディル、10μMの最終濃度)、および100μlの標識しましたDIL標識されたRBC(35%ヘマトクリット)血小板マウスに注射しました。いいえ血小板の標識はこの実験では行いませんでした。3を上記のように血栓を開始しました。ビデオ6:WTマウス上腸間膜動脈と静脈血栓症モデルの代表的なビデオ。3溶液をろ紙一枚を適用した後に局所的に開始しました。容器は10倍、乾燥レンズで観察しました。-誘発モデルは、血小板機能および血栓症7,8,16,19,31-33上の遺伝子改変に関する貴重な情報を提供することができるだけでなく、貴重なツールとなりうる最も広く使用されている血栓症モデルの一つであり、アテローム血栓性疾患11,17,34-37の治療および予防のための治療化合物および戦略を評価するため。ここでは、私たちの修正と、このモデルの改良を示し、抗凝固因子(tPA)および抗血小板薬(PAR4抗体)の効果を決定するのに十分に敏感であり、この技術の有用性の追加の証拠を示しています。血栓症の機序研究に加えて、モデルは、ナノテクノロジーベースの血栓標的薬物送達を研究するために利用することができます。蛍光ROSインジケータ21の注射による血管壁の反応性酸素種(ROS)形成の検出に使用することができます。細部まで行き届きました技術は、これらのモデルを実行するために必要です。オペレータは十分な外科的なスキルだけでなく、血管や血液細胞生物学の深い理解を持っている必要があります。(2)明確にろ紙を直接血管壁に接触、さらには損傷を生成することを可能にするために頸動脈の周囲の外膜軟部組織を取り除きます。-飽和濾紙の適用前に、血管壁への機械的損傷なし血栓形成を確認しません。3を拡散を防止するために黒いプラスチックの「U」字状の部分と頚動脈の根底にあります。14)6,7,19です。循環細胞を標識するローダミン6Gの頚静脈注射が困難な場合があります。代替として、尾静脈注射は、15cmのプレートの蓋の上にマウスを固定する前に行うことができます。頸動脈モデルに比較すると、腸間膜動脈と静脈のモデルは、より簡単に、より少ない外科的に集約的です。脂肪組織による血管の取材に、結果の項で述べたようにしかし、腸間膜血栓症モデルは、静脈血栓症を研究するための良いですが、別のマウスとの間の誤差を最小にするために、より大きなサンプルサイズが必要です。このモデルの制限は、メカニズムは明らかで、まだ論争のではないということです。3を、内皮細胞の生成ROS誘発性侵食、およびSUのものであると考えられていましたbsequently血小板付着、凝集および血栓形成6,11をレンダリングするために、血栓内皮下層への血液成分の露出につながりました。3誘発性血栓形成19を阻害しました。3モデルが血栓6媒介性ヒト動脈硬化性プラーク破裂の病態生理を模倣する可能性が高いことを示唆しています。3を誘発凝集の物理化学的効果などの新しいメカニズムを提案しています。これらの新しい洞察は、このモデルの潜在的なメカニズムはより複雑になり得ることを示唆しています。図6とオンラインビデオ5であることが判明しました)。私たちは、明白な赤血球の付着を見つけられませんでした、と血栓におけるRBCの蓄積は、トラ​​ッピングの結果である可能性が最も高いと思われました。我々の調査結果は、一次および二次止血39の概念と一致しています。血行動態を劇的に両方の肺に減少され、そして胸は機械換気せずにオープンされた後の心機能はすぐに影響を受けることになります。酸素欠乏は、長い凝血促進経路及び血栓症40のトリガーともRBCの密着性を高めることができると関連しています。3の定常状態濃度をもたらすことが示されています。3の効果を調べました。3モデルを表していないよう注意して解釈する必要があります。FECの高い濃度とは対照的にリットル3(論文に示されているように20%、1M)および長期治療(5または10分)、我々の以前の研究と同様には、バールら。3処置は7分6,30内頸動脈の急速な閉塞性血栓の形成を誘導するのに十分であることを実証しました。7.5%)が使用されます。研究するための適切なツールではないかもしれないということです。蛍光標識された白血球の潅流と組み合わせて、頸動脈を準備するためにこれらの技術を用いることにより、我々は、炎症性内皮41の白血球の接着及びローリングをテストすることができます。-誘発性血管損傷モデルを標準化しています。マウスまたは候補薬物の直接血管内注入への血小板の注入との組み合わせでは、我々は、これは生体内で血栓症を研究するための、便利で簡単かつ敏感なツールであることが実証されている7-10,16,19,42,43。