本間一江様のご厚意により掲載させていただきました。プライマーとしてはランダムプライマーが含まれております。操作の手間を減らすことができます。ターゲット領域が効率的に逆転写されることが期待できます。これらにより、逆転写反応における操作の簡略化と操作時間の短縮化を図ることができます。本資料の末にあります『逆転写反応に用いるプライマー選択のポイント』もご参考ください。検討の背景ラットの腸間膜脂肪組織から抽出したRNAを用いて発現定量解析を行ってきました。cDNAの合成を行いましたが、酵素の添加ステップや、RNAの高次構造を解くステップに対して、若干操作上の手間を感じていました。Mix(5X)(NE-LS64)を使用したところ、必要な試薬類がすでに混合されており、また操作のステップも少ない分、簡便に使用することが出来ました。未処置のControlラットとSTZ(※)を投与した糖尿病モデルラットを用いた。発現量が対照群よりも低かった。これまでに使用していた製品でも同様の結果が得られており、相対発現量が正しく測定できたと考えられる。お客様のコメント感想としましては、Mixに全て準備されているのでとても楽でした。minインキュベートさせましたが、短時間でも十分反応することが示されているので、今後使用する時には、より作業時間を短縮することができると期待しています。ダウンストリームアプリケーションに合わせて、適切なプライマーを選択してください。Mixタイプは、ランダムプライマーが含まれています。cDNA合成キット(NE-LS63)もございます。ランダムプライマー:ランダムな塩基配列を持った短鎖のプライマー。種類のプライマーが含まれる。反応液に含まれるRNAを様々な位置から網羅的に逆転写できるため、遺伝子の発現定量を目的とする場合に効果的である。ポリAテールを持たない原核生物由来のmRNAや、二次構造を持つRNAでも効果的に逆転写することが可能となる。mRNAにおいて、ポリAテール側から完全長cDNAをクローニングするような場合には適さない。プライマー:ポリA配列にアニーリングするプライマー。(例:真核生物由来のmRNAのポリAテールなど)このため、主に真核生物由来のmRNAの完全長のcDNA合成に用いる。真核生物の遺伝子の発現定量を目的とする場合に、ランダムプライマーに混合して使用すると、逆転写効率の向上が期待できる。特異的プライマー:ターゲットのRNA配列に基づいて、設計されたプライマー。特定の遺伝子のみを検出する場合や、高い特異性が必要な場合に用いる。IIアプリケーションノート検索ページ(型番・キーワード・アプリケーションから検索可能)アプリケーションノートFastGene逆転写酵素RNAcDNAPCRラットScriptaseII質問してみる!「?」と思ったらすぐ解決。どんな小さなことでもお気軽に。ご意見・ご感想もお待ちしています。?~受付終了~【2019年5月】GeneF@N会員特典「シークレットキャンペーン」第二弾のお知らせハンディ核酸精製デバイス【MaelstromTM8+オートステージ】RECOMMENDこちらの記事も人気です。