実験では、試薬や溶液の必要量を正確に量り取ったり、迅速に分注したりする技術が必要となる。mL)について使用法を学ぶ。メスピペット先端を細く絞ったガラス管に、目盛りの付いた構造で、ホールピペットと異なり、任意の体積の液体を量り取ることが出来るが、精度はホールピペットに比較して劣る。液体を所定の体積ずつ、複数の容器に連続して分注する際などに用いると便利である。先端まで目盛りの付いた「先端目盛型」と、先端部に目盛りのない「中間目盛型」があるが(下図)、後者では、吸い上げた全量を吐き出すやり方での使用はできない。口で吸引し、人差し指で液の流出を調節するが、人体に有害な液体や、微生物の培養液等を取り扱う場合は、安全ピペッターや電動ピペッターを用いる。体積を正確に量り取るために、標線に液面を合わせる際や、液を受器に流出させている間は、ピペットの先端を容器の内壁に接触させておかなければいけない。先端の欠けたピペットは使用しない。mLのプラスチックチューブを電子天秤の秤量皿にのせ、TAREボタンを押して、表示をゼロにする。mL受器にとって、秤量皿にのせ、量り取った水の重量を読み取って記録する。(a)および(b)の操作を合計3回行って、平均値を求める。mLについても同様の測定を行う。自班の測定結果はこの誤差範囲に収まっているか確認せよ。量り取る体積によって誤差が変化する傾向はあるか、ある場合はその要因を考察せよ。mL程度の液体を量り取ることができる機械式のピペットを指す。内部にピストンとシリンダーがあり、ピストンの可動範囲を精密に調節することで、任意の体積の液体を量り取ることが出来る。先端にピペットチップと呼ばれる使い捨てのノズルを装着して用いる。極微量の液体を正確に、無駄なく取り扱えるので、分子生物学や生化学の実験で多用される。不適切な使用を行うと、内部の部品を容易に劣化させ、大きな誤差を生ずるようになる。そのような状態になっても外見は正常なので注意が必要である。ピペットチップより上側の部分は、洗浄せずに繰り返し使われるので、この部分を介して試料や試薬の汚染が起こりやすく、厳重な注意が必要である。※ピペットチップより上側の部分を、容器に接触させない。※ピペットチップより上側に、絶対に液を吸い上げない。※先端を上に向けない。マイクロピペットは内部に樹脂や金属製の部品があり、これらを腐食する蒸気を発する有機溶媒や、揮発性の強酸、強塩基等の取り扱いに用いてはならない。マイクロピペットの説明(動画)マイクロピペットの操作方法(動画)【取り扱い方】以下の下線部を守らないと、本体内部に液体を吸い上げることになります。容量の設定ダイアルを回し、希望の容量に合わせる。容量を増やすときは、いったんその目盛りを少し超えるまで回し、その後、希望の目盛りに合わせる。容量を減らすときは、直接その目盛りに合わせる。mL以下や最大容量を大きく超える容量)にダイアルを回そうとすると、破損するので、絶対にしないこと。ピペットチップをしっかりと装着する。プランジャー(ピストン)は2段階に押し込めるようになっていて(図3)親指で操作する。mm程度;図4-1)。プランジャーを押さえる力を弱め、バネの力で、b→aまでゆっくり(重要!)戻すと設定量がチップ内に吸引される(図4-2)。受器の内壁に、チップの先端を接触させ、プランジャーをゆっくり(特に粘度の高い液体の場合重要)a→bまで押し込んで、液体を吐き出させる(図4-34)。ピペットチップの先端に残った液は、プランジャーをさらにcまで押し込むことで、排出させる(図4-5)。排出後、プランジャーを押さえる力を弱め、ゆっくりとaの位置まで戻す。この時、チップの先端は受器の液体の液面より上になければならない。ピペットチップ廃棄容器の上で、イジェクトボタンを押して、チップを取り外す。mLのマイクロピペットについて、【実験1】の要領で検定を行う。検定に際しては、マイクロピペットの製造番号を記録せよ。mgの桁まで測定できる電子天秤を使用する。mLマイクロテストチューブを使用する。いずれも、秤量に際しては、ふたを閉じること。設定容量は以下の通りとし、各容量について、3回測定し、平均値を求めよ。以下(太線内)は本実験で用いるマイクロピペットの公称誤差である。自班の測定結果が公称誤差の範囲に収まっているかどうか確認せよ。所定の組成の溶液を再現性良く調製できることが必要である。必要とされる濃度の正確さは、使用目的によって異なる。濃度の表し方は、下記の4つがよく用いられる。g(比重を1とする場合、メスシリンダーで90mLを計り取る)の水に溶解する。(w/w)の溶液になってしまう。mLにメスアップする。→溶質を加えることで、体積が増大することを考慮していない。mLにメスアップする。mLの水を取り、ビーカーに注ぎだして混合する。mLの溶液にはならない。g)を天秤で計り取り、ビーカーに移して水を加えて溶解する。※溶液の希釈(重量体積パーセント、体積パーセント、モル濃度の場合)x分の一の濃度にする。→溶媒で体積をx倍にする。NaClに希釈したい。〇濃度を1/50にする。ml容量のメスフラスコに取り、水でメスアップする(体積を50倍にする)。分析など、生物学および生化学のあらゆる実験で多用される。緩衝液は、弱酸とその共役塩基、または、弱塩基とその共役酸が溶液中に共存する状態を作り出すことによって作成する。Tris-HCl緩衝液では、Tris(トリスヒドロキシメチルアミノメタンの略称)が弱塩基、それがプロトン(H+)を受け取ってできる陽イオンが共役酸である。これらが溶液中に共存する時、外部から酸が入ってきた場合、式1の反応が右向きに進行することで、水素イオン濃度の上昇が抑えられる。外部から塩基が入ってきた場合には、式1の反応が左向きに進行することで、塩基を中和する。]はモル濃度を意味する)、酸に対しての緩衝作用はあるものの、塩基に対しての緩衝作用はほとんど示さない。そのような状態を作り出すため、ここでは、トリス水溶液にその半分程度のモル量の塩酸を加える方法で、緩衝液を作成する。Trisと塩酸で作成した緩衝液でpHを7.5に保つ性質を持つ。