-サンプル編-をお届けしました。今回はサンプルバッファーとランニングバッファーが原因で起こる電気泳動・ウエスタンブロットのトラブルをご紹介します。SDS-PAGEのトラブルシューティングです。SDS)が含まれています。SLS)と呼ばれることもありますが、ここではSDSで統一します。知られていませんが、他の電気泳動に使う化合物と比べ、SDSは比較的劣化しやすく、水に溶かして室温で保管していると分解されてpHが下がります。酸性になったバッファー類でSDS-PAGEをすると泳動がなかなか進まなくなったり、バンドの歪みが発生します。ブロモフェノールブルー、グリセロール、トリス、グリシンから成り、pHは6.8です。サンプルバッファーには、pH指示薬のブロモフェノールブルーが入っているので、pHが下がると黄色になります。ブロモフェノールブルーの色をSDS劣化の指標にするのは危険です。ブロモフェノールブルーはpHが下がると黄色になりますが、これはかなり劣化が進んだ後です。見た目の色が変わらずともSDSの劣化は起きています。ランニングバッファーランニング(泳動)バッファーは、SDS、トリス、グリシンから成り、pHは8.3前後です。サンプルバッファーと違い、こちらは無色の液体なのでpH試験紙で簡単にpHを確認できます。ドデシル硫酸ナトリウム劣化の対策バッファー類を用事調製すれば解決しますが、SDS-PAGEなど電気泳動試薬を用事調製するのは手間なので避けたいところです。できることと言えば、バッファー類を冷蔵で保管することです。一方で、SDSは析出しやすいため、使う前はバッファーを室温に戻してから使うことを推奨します。析出しやすくなった、室温に戻しても析出物が消えないといった現象が現れた場合、バッファーを再調製した方がよいかもしれません。コメントをキャンセルメールアドレスが公開されることはありません。※サイト次回のコメントで使用するためブラウザーに自分の名前、メールアドレス、サイトを保存する。上に表示された文字を入力してください。date*日本語が含まれない投稿は無視されますのでご注意ください。-サンプル編-各社の試薬キャンペーン一覧RECOMMENDこちらの記事も人気です。