vector]バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。TH初歩的かもしれませんが教えてください。Harmonia同様に、目的遺伝子部分がintegrateされていても、目的遺伝子が発現するとは限りません。vectorの確認法ではないように見えますが。>薬剤耐性があるということは、目的遺伝子の発現の有無にかかわらず薬剤遺伝子が導入されているという理解でよろしいのですかね?導入細胞がspontaneousに薬剤耐性能を持つことは、希と考えていいと思います。それは、薬剤選択時の適切な薬剤濃度を調べる予備検討で確認されているはずです。そのため、少なくとも薬剤耐性遺伝子(とその発現に必須の配列)は導入されていると考えていいでしょう。発現していることと、目的遺伝子部分もintegrateされていることは必ずしも一致しません。TS薬剤耐性があれば、耐性遺伝子はIntegrateされているはずです。耐性遺伝子がintegrateされていても、目的遺伝子がIntegrateされているわけではありません。controlに対しては、特にValidationを取りません(Selectionできた=耐性遺伝子は入っている、と解釈しているため)。nmさんの方法は、より堅実だといえるのかもしれませんね。nnn当方では、念のためRT-PCRで確認を行ってます。目的遺伝子だと、そのCDSを含んだ長さのPCR産物、となります。TH有難うございます。薬剤耐性遺伝子を持つプラスミドを用いています。薬剤耐性でselectionしても目的遺伝子が発現していないことがあったので気になってました。薬剤耐性があることでベクターが入っていることを示しています。インサート入りのベクターと同じように薬剤セレクションをかけていますので、わざわざPCRでベクターの骨格部分や薬剤耐性遺伝子の存在を示す必要は無いと思っています。TH初歩的かもしれませんが教えてください。半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。