domainの解析からNHEJに関わる新規DNA修復酵素PALFを発見した。15:101-10)。活性、3’-exonuclease活性を持つことを明らかにした。現在、C4orf27をAPNXと命名し、その生理機能を解析している。53(1):101-14)。;74(9):2465-75)。今年度の実験計画としてあげた3つの計画について研究状況を説明する。APNXの変異体を作製し、活性ドメインの同定を行う予定で研究を進めたが、保存されたアミノ酸の点変異体を作製すると多くは可溶性が変化しリコンビナントタンパク質が回収できないことがわかった。変更しリコンビナントタンパク質を作成している。ーTip60の安定発現細胞株を樹立し免疫沈降した結果、APNXがTip60の結合タンパク質であることが分った。vitroでAPNXがTip60をアセチル化することからTip60がAPNXの基質であると考えられる。APNXのsiRNAでノックダウンでアセチル化が阻害されるタンパク質として、アセチル化酵素p300、とH2AZを想定しているがTip60と同様にp300を活性化する可能性があるためp300の安定発現細胞株を樹立して調べようとしている。typeの安定発現細胞株を樹立した。この細胞をそれぞれノーマル培養した細胞とH2O2処理した細胞を使って免疫沈降し、抗APNX抗体でウエスタン解析をしたところ(I)APNXはTip60の結合タンパク質で、H2O2処理で活性化Tip60から離れること、(II)活性のない変異Tip60とは通常結合しないが、H2O2処理で変異Tip60に結合してくることが明らかになった。vivoの結合パターンからAPNXがTip60の活性化因子であることが強く示唆された。siteに集積すること、また、アセチル基転移酵素としてTip60をアセチル化し活性化することは、細胞内におけるリン酸化カスケードによるシグナル伝達と同様なメカニズム、アセチル化カスケードによるシグナル伝達が存在する可能性を示唆している。エフェクターの機能調節のシグナル伝達が証明されれば重要な発見となるので、今後はこのパスウエイの証明に重点をおいて研究する。repeatタンパク質でシグナル分子のスキャフォルドタンパク質として機能することが知られている)のプロテオーム解析で酸化ストレスで特異的にRACK1にAPNXが結合することを発見したが、APNXがRACK1複合体をアセチル化し酸化ストレスでのmRNAのクオリティーコントロールに関与するかどうかを調べる目的で、酸化トレスでAPNXがRACK1複合体をアセチル化するかどうかを調べる。