¥36,000¥28,8002019/11/25~2020/03/31※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。マークのある製品のご購入には拡散防止措置に関する確認書が必要です。USAサイトへ本製品のご購入には拡散防止措置に関する確認書が必要です。レポーターシステム(表1)は、蛍光または発光アッセイが可能なユニークなレポーター分子をレンチウイルスベクターに組み合わせたシステムで、初代培養細胞やES細胞などさまざまな細胞種でプロモーター活性の研究を可能にする。神経細胞や分化が進んだ非分裂性の細胞にも効率よく導入できる。クロンテック独自の第4世代レンチウイルスパッケージングシステム(各製品に添付)と任意のレンチウイルスベクターを組み合わせて使用する(1)(図1)。いずれのレポーターを選択した場合も、細胞を融解することなく培養を続けながら測定を行えるため、必要な時に何度でもアッセイが行える。細胞数の少ない幹細胞や、短時間に繰り返し測定を行う必要がある実験系などに特に推奨する。Productsに関するライセンス契約が必要です。Lenti-Xレポーターシステムの化学発光(A)または蛍光(B)アッセイ用各レポーターベクターの構造Lenti-Xレポーターベクターは、レンチウイルスへのパッケージングを容易にし、各レポーター遺伝子を高レベルに発現する配列を含んでいる。luciferase)をレポーターとしているため、細胞を融解せず培養を続けながら、培養上清をサンプリングして高感度な発光試薬によるアッセイが行える。Metridiaルシフェラーゼは細胞外でも安定に存在するため、従来の細胞内発現型ルシフェラーゼでは検出できなかったプロモーター活性のわずかな上昇も検出できる。Metridiaルシフェラーゼは、同じ検出装置を用いて、RenillaやFirefly(ホタル)ルシフェラーゼよりも高い検出感度での測定が可能である。培地を交換することで、刺激の応答とは無関係に基底レベルで発現しているレポーター分子を取除くことができる。Systemは蛍光タンパク質レポーター(AmCyan1、ZsGreen1またはtdTomato)とタンパク質分解制御技術であるProteoTunerシステムを組み合わせたもので、レポーター分子(蛍光タンパク質)の発現レベルを自由に調節できる(3)。kDa)を融合して発現する。細胞中で発現したDD融合蛍光タンパク質はプロテアソームにより迅速に分解を受けますが、Shield1を細胞培養液中に添加すると、Shiled1がDDタグに結合し、DD融合蛍光タンパク質を安定化させる。添加するShield1量を調節することで、DD融合タンパク質の量を厳密に制御することができ、また、培地交換により培養液中のShield1を除けば、DD融合タンパク質は再び迅速に分解する(4)(図3)。転写を活性化する化合物とShield1を同時に培地に加えると、プロモーターの活性化により発現する蛍光タンパク質を効果的に安定化させることができる。Shield1の添加により安定化のタイミングを選択できるため、プロモーター活性化のモニタリングを必要な時にだけ行える。必要時に安定化することで、測定されるレポーター分子の大部分は転写活性化後に発現した分子となる。バックグラウンドの原因となる基底発現レベルのレポーター分子を実質、完全に抑制することができ、広いダイナミックレンジでのアッセイが可能である。Vector(パネルB)を導入した。フォルスコリン処理後、各レポーターによるアッセイを行った。リガンド(Shield1)による可逆的で特異的な蛍光タンパク質の安定化サイズの小さい不安定化ドメイン(DD)タグを蛍光タンパク質に融合し発現させる。膜透過性の低分子化合物Shield1はDDタグに結合し、プロテアソームによるDD融合蛍光タンパク質の分解を防ぎ安定化させる。培地にShield1がない状態ではDD融合蛍光タンパク質は迅速に分解し、バックグラウンドレベルに発現する蛍光が完全に抑えられる。ご注意:拡散防止措置に関する確認書が必要な製品です。Lenti-XシリーズのpLVX系レンチウイルスベクターはプロウイルスにおいてLTRのプロモーター活性を持つため、HIV-1の増殖力等欠損株とは見なされません。このため、これらのベクターを用いた遺伝子組換え実験は、遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物多様性の確保に関する法律第13条に基づき、文部科学大臣による拡散防止措置の確認が必要です。拡散防止措置に関する確認書」の添付が必要です。詳細はこちらをご確認ください。この製品を見た人は、こんな製品も見ています。取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。