【図8D】FOXO1に関する免疫組織化学を示す。【図8E】FOXO1に関する免疫組織化学を示す。【図8F】FOXO1に関する免疫組織化学を示す。(6ケース)のFOXO1陽性細胞のパーセンテージを示す。【図8H】1名のアフリカ系アメリカ人の成熟ケロイド部位(3ケース)および2名の日本人患者の成熟ケロイド部位(6ケース)におけるFOXO1陽性細胞のパーセンテージを示す。【図8I】FOXO1によるケロイドの悪化の提唱モデルを示す。上皮におけるFOXO1の発現上昇がケロイドの過形成の原因である。対照的に、成熟ケロイドの深い部位でFOXO1発現細胞の数が顕著に低下している。ケロイドの近傍の無傷の皮膚は正常に見える。FOXO1の発現は、成熟ケロイドに比べて顕著に上昇している。このことは、FOXO1陽性細胞はケロイドの拡張と関連していることを示唆する。以上まとめると、FOXO1陽性細胞の多くはコラーゲンを産生し炎症反応を促進させ、ケロイド瘢痕の増悪につながると考えられる。【図9】Foxo1+/-マウスがLPSで誘導されたエンドトキシンショックに耐性であることを示す生存曲線である。ODNまたはコントロールODNを滴下し、創傷の治癒を肉眼で観察した結果を示す。(1984)〕、「塩基配列またはアミノ酸配列を含む明細書等の作成のためのガイドライン」(日本国特許庁編)、および当該分野における慣用記号に従う。本明細書で用いられる「創傷」という用語は、例えば、急性創傷、治癒が遅延しているか緩徐であるかまたは困難な創傷、および慢性創傷を含めた、任意の組織に対する傷害を含む。創傷の例は、開放創傷および閉鎖創傷の両方を意味する。予測される速度で治癒しない創傷も含まれる。線維性状態には、線維症を特徴とする、線維原性に関連する生物学または病理学が含まれる。本発明においては、上記疾患、障害または状態を総称して、「線維症」という。脊髄損傷によって引き起こされた偽性強皮症を含む状態から生じる線維症を含む。カポジ肉腫、ハンセン病、コラーゲン蓄積大腸炎および急性線維症を含む。他の眼線維症を含む状態から生じる線維症を含む。線維症にはまた、拘縮が含まれうる。結合組織、または脂肪)の喪失による、運動範囲の永久的または長期的な低下を指す。一般に、拘縮状態は、急性および慢性両方の炎症成分による線維性反応を伴いうる。その一部は、リリース手技を含めた手術と関連しうる。デュピュイトラン拘縮、ペイロニー病、およびレダーホース病などの遺伝性拘縮もまた含まれる。線維症は、慢性の場合も急性の場合もある。線維性状態には、組織内における過剰量の細胞外マトリックスの蓄積が含まれ、機能不全また潜在的には臓器不全を引き起こす組織を形成する、過剰量の線維状組織が含まれる。/または心臓の線維症を含む。化学療法による治療を含めた各形態の外傷に対する一般的な反応として生じることが典型的である。外傷により損傷したすべての組織は、特に、損傷が反復される場合、線維性となりうる。本発明において、「治療」とは、上記「創傷」または「線維症」の治療のみならず、予防をも含む概念である。本発明においては、「治療」には「創傷」の治癒に伴う瘢痕またはケロイドの抑制も含まれる。「皮膚ケロイド」は、皮膚上における瘢痕組織の過度な成長である。これらは、真皮および皮下組織におけるコラーゲンの過剰蓄積によって特徴付けられる。通常の傷の修復の細線瘢痕の特徴とは異なり、ケロイドおよびHSCの盛んな瘢痕化は、通常、外観が損なわれ、拘縮、痒み、および痛みにも繋がる。これらの障害は、創傷治癒の基本的なプロセスにおける異常を表し、これは、細胞の遊走と増殖、炎症、サイトカインおよび細胞外マトリックス(ECM)タンパク質の増加した合成および分泌、並びに新たに合成されたマトリックスの再形成を含む。生物学的には、ケロイドは、細胞外マトリックス成分の、特に、コラーゲン、フィブロネクチン、エラスチン、およびプロテオグリカンの、過度の沈着を有する非定型線維芽細胞の集合によって特徴づけられる線維性組織である。本発明においては、FoxO1の発現を特異的に阻害することにより、「創傷」の治癒に伴う瘢痕またはケロイドを抑制することができる。本発明において、FoxO1は、任意の哺乳動物由来の転写因子である。哺乳動物としては、ヒトおよびヒトを除く哺乳動物が挙げられ、ヒトを除く哺乳動物としては、例えば、マウス、ラット、ハムスター、モルモット等のげっ歯類やウサギ等の実験動物、ブタ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ等の家畜、イヌ、ネコ等のペット、サル、オランウータン、チンパンジー等の霊長類が挙げられる。ヒトの疾患の治療のためには、ヒト由来のFoxO1に基づいて治療剤の有効成分を決定することが望ましいが、FoxO1の塩基配列およびアミノ酸配列は哺乳動物間で高度に保存されており(HomoloGene:1527を参照のこと)、他の哺乳動物のFoxO1に対する試験結果に基づいてヒトへの適用を考慮することができる。NM_002015.3)などがGenBankに登録され、公表されている。NM_019739.3)などがGenBankに登録され、公表されている。ヒトFoxO1アミノ酸配列およびマウスFoxO1のアミノ酸配列は、BLASTNでホモロジー検索を行うと、91%の一致を示す。本発明の治療剤は、FoxO1の発現を特異的に阻害する物質を含有することを特徴とする。本発明の治療剤に有効成分として含まれるFoxO1の発現を特異的に阻害する物質は、FoxO1の転写過程に作用してその発現を特異的に阻害する物質であれば特に限定されるものではない。かかる阻害物質としては、アンチセンス核酸、RNAi誘導性核酸もしくはリボザイムまたはそれらの発現ベクターが挙げられる。【0023】FoxO1に対するアンチセンス核酸は、FoxO1の転写産物(mRNAまたは初期転写産物)を発現する細胞の生理的条件下で該転写産物とハイブリダイズし得る塩基配列からなり、且つハイブリダイズした状態で該転写産物にコードされるポリペプチドの翻訳を阻害し得るポリヌクレオチドをいう。アンチセンス核酸の種類はDNAであってもRNAであってもよいし、あるいはDNA/RNAキメラであってもよい。アンチセンス核酸は、非修飾(天然型)のリン酸ジエステル結合を有するものであっても、分解酵素に安定なチオリン酸型(リン酸結合のP=OをP=Sに置換)や2’-O-メチル型等の化学修飾されたヌクレオチドであってもよい。アンチセンス核酸の設計に重要な他の要素として、水溶性および細胞膜透過性を高めること等が挙げられるが、これらはリポソームやマイクロスフェアを使用するなどの剤形の工夫によっても克服できる。アンチセンス核酸の長さは、FoxO1の転写産物(例、配列番号1または配列番号3の塩基配列に対応するmRNA)と特異的にハイブリダイズし得る限り特に制限はなく、短いもので約6塩基程度、長いもので転写産物の全配列に相補的な配列を含むような配列であってもよい。合成の容易さや抗原性の問題等から、例えば約6塩基以上、好ましくは約18~約40塩基、より好ましくは約18塩基~約30塩基からなるオリゴヌクレオチドが例示される。アンチセンス核酸は、FoxO1の転写産物とハイブリダイズして翻訳を阻害するだけでなく、二本鎖DNAと結合して三重鎖(トリプレックス)を形成し、mRNAへの転写を阻害し得るものであってもよい。FoxO1に対するアンチセンス核酸は、好ましくは、配列番号6~16のいずれかで表される塩基配列(表2に示す。アンチセンス核酸がRNAの場合、TはUである)を含むものである。本明細書において、「相補的である」とは、塩基配列間で約70%以上、好ましくは約80%以上、より好ましくは約90%以上、更に好ましくは約95%以上、最も好ましくは100%の相補性を有することをいう。Tool)を用い、以下の条件(期待値=10;ギャップを許す;フィルタリング=ON;マッチスコア=1;ミスマッチスコア=-3)にて計算することができる。前記RNAi誘導性核酸とは、細胞内に導入されることにより、RNA干渉を誘導し得るポリヌクレオチドをいい、好ましくはRNAまたはRNAとDNAのキメラ分子である。RNA干渉とは、mRNAと同一の塩基配列(またはその部分配列)を含む2本鎖構造のRNAが、当該mRNAの発現を抑制する効果をいう。このRNAi効果を得るには、例えば、少なくとも19の連続する標的mRNAと同一の塩基配列(またはその部分配列)を有する2本鎖構造のRNAを用いることが好ましい。FoxO1の発現阻害作用を有していれば数塩基置換されているものであってもよく、19塩基長よりも短いRNAであってもよい。2本鎖構造は、センス鎖とアンチセンス鎖の異なるストランドで構成されていてもよいし、一つのRNAのステムループ構造によって与えられる2本鎖(shRNA)であってもよい。RNAi誘導性核酸としては、例えばsiRNA、miRNAなどが挙げられる。【0026】RNAi誘導性核酸は、転写抑制活性が強いという観点から、siRNAが好ましい。FoxO1に対するsiRNAは、FoxO1のmRNAの任意の部分を標的とすることができる。FoxO1に対するsiRNA分子は、RNAi効果を誘導できる限り特に制限されないが、例えば18~27塩基長、好ましくは21~25塩基長である。FoxO1に対するsiRNAは、センス鎖およびアンチセンス鎖を含む二重鎖である。具体的には、FoxO1に対するsiRNAは、配列番号1の塩基配列に対応するmRNAにおける18~25個の連続する塩基配列を含むセンス鎖と、その相補配列を含むアンチセンス鎖からなるものである。FoxO1に対するsiRNAは、配列番号3の塩基配列に対応するmRNAにおける18~25個の連続する塩基配列を含むセンス鎖と、その相補配列を含むアンチセンス鎖からなるものである。FoxO1に対するsiRNAは、センス鎖、アンチセンス鎖の一方または双方の5’末端または3’末端においてオーバーハングを有していてもよい。オーバーハングは、センス鎖および/またはアンチセンス鎖の末端における1~数個(例、1、2または3個)の塩基の付加により形成されるものである。siRNAの設計方法は、当業者に公知であり、siRNAの様々な設計ソフトウエアまたはアルゴリズムを用いて、上記塩基配列から適切なsiRNAの塩基配列を選択することができる。【0027】FoxO1に対するsiRNAFoxO1に対するsiRNAの具体的な配列は、配列番号6~16の塩基配列を基準として、下記(a)または(b)で定義される二重鎖RNAが例示される。【0028】(a)配列番号6~16のいずれかで表される塩基配列を含むアンチセンス鎖(ただし、TはUに置き換えられる)、およびその相補配列を含むセンス鎖から構成され、該センス鎖および/またはアンチセンス鎖の末端にオーバーハングを有していてもよく、かつ、FoxO1の発現阻害活性を有する二重鎖RNA;または(b)配列番号6~16のいずれかで表される塩基配列の5’末端および/または3’末端において、1~数個の塩基が付加および/または欠失された塩基配列を含むアンチセンス鎖、およびその相補配列を含むセンス鎖から構成され、該センス鎖および/またはアンチセンス鎖の末端にオーバーハングを有していてもよく、かつFoxO1の発現阻害活性を有する二重鎖RNA。ここで、配列番号6~16のいずれかで表される塩基配列の5’末端および/または3’末端において、1~数個(例えば1~5個、好ましくは1~3個、より好ましくは1または2個)の塩基の付加および/または欠失は、FoxO1の発現阻害活性の保持という観点から、FoxO1遺伝子をコードするセンス鎖およびそのアンチセンス鎖の部分塩基配列との同一性を確保するように達成され得る。前記「リボザイム」とは核酸を切断する酵素活性を有するRNAをいうが、最近では当該酵素活性部位の塩基配列を有するオリゴDNAも同様に核酸切断活性を有することが明らかになっているので、本明細書では配列特異的な核酸切断活性を有する限りDNAをも包含する概念として用いる。具体的には、リボザイムは、FoxO1をコードするmRNAまたは初期転写産物を、コード領域の内部(初期転写産物の場合はイントロン部分を含む)で特異的に切断し得る。リボザイムとして最も汎用性の高いものとしては、ウイロイドやウイルソイド等の感染性RNAに見られるセルフスプライシングRNAがあり、ハンマーヘッド型やヘアピン型等が知られている。ハンマーヘッド型は約40塩基程度で酵素活性を発揮し、ハンマーヘッド構造をとる部分に隣接する両端の数塩基ずつ(合わせて約10塩基程度)をmRNAの所望の切断部位と相補的な配列にすることにより、標的mRNAのみを特異的に切断することが可能である。【0030】FoxO1特異的阻害物質は、発現ベクターとしても提供され得る。かかる発現ベクターは、FoxO1特異的阻害物質をコードするポリヌクレオチド、および当該ポリヌクレオチドに機能可能に連結されたプロモーターを含む。前記プロモーターは、その制御下にある発現対象の核酸の種類により適宜選択され得るが、例えば、polIIIプロモーター(例、tRNAプロモーター、U6プロモーター、H1プロモーター)、哺乳動物用プロモーター(例、CMVプロモーター、CAGプロモーター、SV40プロモーター)が挙げられる。相補する遺伝子等)をさらに含んでいてもよい。本発明の発現ベクターのバックボーン(backbone)としては、ヒト等の哺乳動物細胞中でFoxO1特異的阻害物質を産生できるものであれば特に制限されないが、例えば、プラスミドベクター、ウイルスベクターが挙げられる。哺乳動物への投与に好適なベクターとしては、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、ポリオウイルス、シンドビスウイルス、センダイウイルス等のウイルスベクターが挙げられる。なかでも、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ワクシニアウイルス由来のウイルスベクターが好ましい。よって異なるが、通常、成人1日あたり有効成分量として約0.0001~約1000mg/kgが例示される。本発明の治療剤を創傷部位への局所に適用する場合、創傷部位あたり約10μMの有効成分量が例示される。挙げられ、必要に応じて、製薬学的に許容され得る添加剤と共に、投与に適した剤型に製剤化される。ローション剤、クリーム剤に点眼剤などが挙げられる。これらは当該分野で汎用されている通常の技術を用い、調製することができる。本発明の治療剤は、上述の治療効果を奏する限りその投与経路および剤形は特に限定されないが、好ましい投与経路は局所投与であり、その剤形は注射剤、軟膏、ローション剤、クリーム剤または貼付剤である。【0036】また、本発明の治療剤は、これらの製剤の他に臓器内インプラント用製剤やマイクロスフェア等のDDS(ドラッグデリバリーシステム)化された製剤にすることもできる。)など)などを添加剤として加えることができる。これら添加剤の添加量は、添加する添加剤の種類、用途などによって異なるが、添加剤の目的を達成し得る濃度を添加すればよい。本発明の治療剤は、アンチセンス核酸等の核酸をリポフェクション法を用いて製剤化することもできる。リポフェクション法には、通常ホスファチジルセリンからなるリポソームが用いられる。ホスファチジルセリンは陰電荷を有するため、ホスファチジルセリンの代用として、より安定したリポソームを作りやすいN-[1-(2,3-ジオレイルオキシ)プロピル]-N,N,N-トリエチルアンモニウムクロライド(DOTMA)という陽イオン性脂質(商品名:トランスフェクタム、リポフェクトアミン)を用いることが好ましい。これらの陽イオン性脂質と陰電荷を持つ核酸との複合体を形成させると、全体として正に荷電しているリポソームが、負に荷電している細胞の表面に吸着し、細胞膜と融合できることで核酸を細胞内に導入することができる。以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されない。1108010940-5、1108010940-7および1311121101)に従って行った。34741-34749)。Industries)または2匹を全層切開創傷(1cm)し、次いで、6mm生検パンチを用いて創傷を収集した。systems)にて領域を計算した。【0041】(ヒトの試料)ヒトケロイド組織試料を、手術時に14名の日本人およびアフリカ系アメリカ人より得て、通常の病理学的試験により診断を確定した。正常の皮膚組織は、ケロイド部位のすぐ近傍から収集した。すべての実験は、長崎大学病院の倫理委員会の承認(No.09062523-2)の下、ヘルシンキ宣言に従って実施した。各被験者からインフォームドコンセントを書面にて得た。【0042】(組織学)4%パラホルムアルデヒド(PFA)中で組織を固定し、パラフィンで包埋した。6μmの切片をヘマトキシリン&エオジン染色、マッソントリクローム染色、ピクロシリウスレッド染色あるいはFoxO1、好中球およびF4/80に対する免疫組織化学に供した。Corporation)を用いて、顕微鏡観察結果およびデータ解析をそれぞれ得た。Corporation)を用いて測定した。(各パーセンテージにつき16時間)に暴露し、OCT化合物中で凍結させた。X-100で2時間透過処理をした。CD31に関する免疫組織化学を表1-1に示す。(BITPLANE)を用いて行った。PFA、その後、1%四酸化オスミウムで2時間皮膚検体を固定した。Ltd)のプロセスに供した。【0046】(コラーゲンの形態学的解析)コラーゲンの直径の測定に関しては、処置群当たり無作為に選択した3つの視野を無傷の皮膚および創傷皮膚から写真撮影した。ARソフトウエアおよびPhotoshopCS4を用いて測定した。コラーゲン密度の測定に関して、無作為に選択した3つの視野を無傷の皮膚および創傷皮膚から写真撮影した。