式1Aで示される部分構造を分子内に有するβ修飾リン酸化合物前駆体である。このβ修飾リン酸化合物前駆体を含有する反応阻害剤及び医薬である。ヨウ素から選択されるハロゲンを意味する)を示し、R1は水素、炭素数1~20のアルキル基などである。L1は水素、炭素数1~20のアルキル基などを示し、L2は炭素数1~20のアルキル基などを示す。L1とL2は互いに連結して4~6員の環構造を形成してもよい。L1及びL2は、それぞれ置換基を有していてもよい。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手である。)特許請求の範囲[請求項1]リン酸化反応によりリン酸化されるβ修飾リン酸化合物前駆体であって、下記式1Aで示される部分構造を分子内に有することを特徴とするβ修飾リン酸化合物前駆体。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。)[請求項2]下記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であることを特徴とする請求項1に記載のβ修飾リン酸化合物前駆体。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化3](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。)[請求項3]下記式3Aで示されるメバロン酸誘導体であることを特徴とする請求項1に記載のβ修飾リン酸化合物前駆体。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。)[請求項4]下記式4Aで示されるホスファチジルイノシトール誘導体であることを特徴とする請求項1に記載のβ修飾リン酸化合物前駆体。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。4はステアリン酸、パルミチン酸から選択される飽和脂肪酸である。)[請求項5]下記式1Bで示される部分構造を分子内に有することを特徴とするβ修飾リン酸化合物。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、炭素数1~20のアルケニル基から選択される。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。)[請求項6]下記式2Bで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であることを特徴とする請求項5に記載のβ修飾リン酸化合物。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化8](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。)[請求項7]リン酸化を伴う反応におけるリン酸化後の反応の進行を阻害する反応阻害剤であって、請求項1~4のいずれか1項に記載のβ修飾リン酸化合物前駆体を含有することを特徴とする反応阻害剤。[請求項8]前記β修飾リン酸化合物前駆体が前記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であり、DNAポリメラーゼの反応を阻害することを特徴とする請求項7に記載の反応阻害剤。[請求項9]請求項7に記載の反応阻害剤を含有することを特徴とする医薬。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。)を備えることを特徴とする反応阻害方法。前記活性種は下記式2Cで示される化合物であることを特徴とする請求項9に記載の反応阻害方法。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化11](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。これを含む医薬並びに反応阻害方法に関する。[0002]リン酸化は、生体反応の重要なプロセスであり、生体内ではリン酸化を伴う様々な反応が行われている。DNAの複製では、DNAポリメラーゼがDNAのリン酸化を伴う反応を行っている。DNAポリメラーゼは、プライマー配列を起点とし、一本鎖DNAを鋳型としてこれに相補的なデオキシヌクレオチド三リン酸(dNTP)を3’末端側に順次結合することで、3’→5’方向に相補鎖DNAを伸長する。この反応では、DNAポリメラーゼによって、dNTPの三リン酸の2つのリン酸基が脱リン酸化されて残る1つのリン酸基が3’末端側の糖(デオキリシボース)の3位の水酸基(ヒドロキシル基)に結合する。その結果、3’末端側の糖はリン酸化され、相補鎖DNAが伸長する。ポリメラーゼは、DNAの複製や転写に関与し、癌やウイルスなどに起因する疾患の治療薬における重要な標的タンパク質でもある。[0003]また、メバロン酸は、テルペノイドやステロイドの合成に関与する化合物である。メバロン酸は、ATPを基質としてメバロン酸キナーゼによりリン酸化されて5-ホスホメバロン酸となり、その後のプロセスによってコレステロールなどに転化される。メバロン酸は、高脂血症などの治療薬における重要な標的物質としても知られている。[0004]このように、生体反応においてリン酸化は重要なプロセスであり、その後の反応を特異的かつ効率的に阻害できれば、種々の疾患の治療方法を提供できる可能性を秘めている。従来の技術では、リン酸化反応に起因する生体反応を選択的かつ効率的に阻害するには不十分であった。[0005]例えば、特許文献1には、DNAポリメラーゼの阻害剤としてアシクロビルが開示されている。アシクロビルは、ウイルスにおける一リン酸化と宿主(ヒト)における三リン酸化を受け、DNAポリメラーゼ反応において、伸長鎖の3’末端側に結合することで、ウイルスDNAポリメラーゼを拮抗阻害する。[0007]しかしながら、アシクロビルのような化合物は、DNAの伸長を阻害するにすぎず、より効率的かつ強力に反応を阻害する阻害剤が求められていた。これを含む医薬並びに反応阻害方法を提供することを目的とする。[0009]本発明者らは、上記問題を解決すべく鋭意研究を重ねた。その結果、炭素-炭素結合の一方の炭素(α位)にヒドロキシル基が結合し、他方の炭素(β位)に特定の修飾基が結合した部分構造を有する化合物について、ヒドロキシル基がリン酸化されることに起因して高い反応性を有する活性種が生成することを見出した。この活性種によって、リン酸化後の生体分子による反応が特異的に阻害されることを見出し、本発明を完成させた。[0010]すなわち、本発明は、リン酸化反応によりリン酸化されるβ修飾リン酸化合物前駆体であって、下記式1Aで示される部分構造を分子内に有することを特徴とするβ修飾リン酸化合物前駆体である。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。)[0011]この場合において、下記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であることが好ましい。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化3](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。)[0012]あるいは、上記の場合において、下記式3Aで示されるメバロン酸誘導体であることが好ましい。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。)[0013]あるいはまた、上記の場合において、下記式4Aで示されるホスファチジルイノシトール誘導体であることを特徴とする請求項1に記載のβ修飾リン酸化合物前駆体。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。4はステアリン酸、パルミチン酸から選択される飽和脂肪酸である。)[0014]本発明は、下記式1Bで示される部分構造を分子内に有することを特徴とするβ修飾リン酸化合物である。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、炭素数1~20のアルケニル基から選択される。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。)[0015]この場合において、下記式2Bで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であることが好ましい。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化8](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。)[0016]本発明は、リン酸化を伴う反応におけるリン酸化後の反応の進行を阻害する反応阻害剤であって、上記のいずれかに記載のβ修飾リン酸化合物前駆体を含有することを特徴とする反応阻害剤である。[0017]この場合において、β修飾リン酸化合物前駆体が前記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体又は該ヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸であり、DNAポリメラーゼの反応を阻害することが好ましい。[0018]また、本発明は、上記の反応阻害剤を含有することを特徴とする医薬である。[0019]本発明は、上記のいずれかに記載の反応阻害剤によってリン酸化を伴う反応におけるリン酸化後の反応の進行を阻害する反応阻害方法であって、前記式1Aに記載のβ修飾リン酸化合物前駆体を用意する工程と、前記β修飾リン酸化合物前駆体をリン酸化して前記式1Bに記載のβ修飾リン酸化合物を生成させるとともに、前記β修飾リン酸化合物を部分開裂させて下記式1Cで示される活性種を生成させる工程と、を備えることを特徴とする反応阻害方法である。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。)[0020]この場合において、前記β修飾リン酸化合物前駆体は前記式2Aで示される化合物であり、前記β修飾リン酸化合物は前記式2Bで示される化合物であり、前記活性種は下記式2Cで示される化合物であることが好ましい。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化11](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。これを含む医薬並びに反応阻害方法を提供することが可能となる。β修飾リン酸化合物前駆体による反応阻害機構を示す説明図である。実施例におけるリン酸部分の切断実験の結果を示すNMRスペクトル図である。実施例におけるB型肝炎ウイルスの増殖抑制効果を示すグラフである。実施例における不可逆阻害実験の結果を示すグラフである。実施例における抗HBV活性評価の結果を示すグラフである。β修飾リン酸化合物前駆体について説明する。本発明のβ修飾リン酸化合物前駆体は、リン酸化反応によりリン酸化されるβ修飾リン酸化合物前駆体であって、下記式1Aの部分構造を分子内に有する。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。1は、水素、炭素数1~10のアルキル基、炭素数1~10のアリール基、炭素数1~10のアルケニル基から選択されることが好ましく、水素、炭素数1~6のアルキル基、炭素数1~6のアリール基、炭素数1~6のアルケニル基から選択されることが特に好ましい。[0025]炭素数1~10のアルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、2-プロペニル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、2-エチルヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基などを挙げることができる。炭素数1~10のアリール基としては、フェニル基、o-トリル基、p-トリル基、2,3-ジメチルフェニル基、2,4-ジメチルフェニル基、2,5-ジメチルフェニル基、2,6-ジメチルフェニル基、メシチル基、o-クメニル基などを挙げることができる。炭素数1~6のアルケニル基としては、ビニル基、1-プロペニル基、2-プロペニル基、1-ヘキセニル基などを挙げることができる。以下の説明においても同様である。2は、互いに同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素、炭素数1~10のアルキル基、炭素数1~10のアリール基、又は炭素数1~10のアルケニル基から選択されることが好ましく、水素、炭素数1~6のアルキル基、炭素数1~6のアリール基、炭素数1~6のアルケニル基から選択されることが特に好ましい。2が互いに連結して環構造を形成する場合、シクロヘキサン、ベンゼン、五単糖、六単糖などを挙げることができる。2は、それぞれ置換基を有していてもよく、置換基としては、ヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、及び塩基から選択される。2がリボース又はデオキシリボースの場合、置換基として1’位に塩基が結合するとヌクレオシド誘導体となる。[0028]塩基としては、天然の核酸塩基でもよく、非天然の(合成した)核酸塩基でもよい。天然の核酸塩基としては、アデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシルを挙げることができる。非天然の核酸塩基としては、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、5,6-ジヒドロウラシルなどを挙げることができる。[0029]*は結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味している。リン酸化前において、特に、水素と結合していること(すなわち、*-Oがヒドロキシル基であること)が好ましい。1で修飾した化合物ということができる。リン酸化は、生体内及び生体外のいずれの反応でもよいが、医薬用途としてのβ修飾リン酸化合物前駆体としては、生体内でリン酸化される生体化合物の類似体が好ましい。するメバロン酸やイノシトールリン酸などの代謝関連物質などを挙げることができる。次に、β修飾リン酸化合物について説明する。本発明のβ修飾リン酸化合物は、式1Aのβ修飾リン酸化合物前駆体において、α位の炭素に結合する酸素がリン酸化された化合物である。具体的には、下記式1Bで示される部分構造を有するβ修飾リン酸化合物である。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、炭素数1~20のアルケニル基から選択される。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。次に、反応阻害剤及び反応阻害方法について説明する。本発明の反応阻害剤は、リン酸化を伴う反応におけるリン酸化後の反応の進行を阻害する反応阻害剤であって、上記式1Aで示される部分構造を分子内に有するβ修飾リン酸化合物前駆体を含有する。上記式1Aのβ修飾リン酸化化合物前駆体がリン酸化されて上記式1Bのβ修飾リン酸化化合物が生成する。このβ修飾リン酸化化合物は、以下の反応メカニズムにより、リン酸化後の反応を阻害する。[0033]以下、本発明の反応阻害方法(反応メカニズム)について説明する。上記の反応阻害剤を用いた反応阻害方法では、まず、上記式1Aで示される部分構造を分子内に有するβ修飾リン酸化合物前駆体を用意する(工程1)。[0034]次に、このβ修飾リン酸化合物前駆体をリン酸化して、式1Bで示される部分構造を分子内に有するβ修飾リン酸化合物を生成させる(工程2)。このとき生成する式1Bの化合物は、構造が不安定であり、部分開裂して下記式1Cで示される活性種が生成する。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。2は炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基を示す。硫黄から選択される1種類以上の元素で構成される。2は、それぞれヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アリール基、炭素数15~30の飽和脂肪酸及び/又は不飽和脂肪酸を1以上含むリン脂質、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、及び塩基(ここで、塩基はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルを意味する)から選択される1又は2以上の置換基を有していてもよい。)[0035]この活性種は、反応性が高く、他の化合物を求核攻撃して共有結合を形成しやすい性質を有している。2が-S-の場合、α、β炭素と硫黄原子とがチイラン環を分子内に形成する。このチイラン環は、アミノ基、チオール基、ヒドロキシル基、イミダゾイル基などの官能基と反応して共有結合を形成しやすく、このため、タンパク質中の分子内にリシン、システイン、チロシン、ヒスチジン、トリプトファンなどのアミノ酸の側鎖の部分と共有結合しやすい。活性種がタンパク質と不可逆的に共有結合することで、その後の反応の進行が停止し、反応阻害作用を発揮すると推測される。[0036]β修飾リン酸化合物前駆体が阻害する反応としては、リン酸化を伴う種々の反応を挙げることができる。生体内での反応に対して効率的に阻害することができる。活性種が結合する分子は、タンパク質に限定されず、種々の分子に結合して反応を阻害する。[0037]このように、本発明では、β修飾リン酸化合物前駆体を用いることで、リン酸化により活性種を生成させて共有結合により不可逆的に反応を阻害することが可能となる。リン酸化を受ける反応に特化して反応を阻害することができるため、副作用などが生じにくい。式1Aの部分構造に基づいて、特定の反応をターゲットにした反応阻害剤の化合物を設計できるという利点もある。本発明の反応阻害剤は、上記のようにリン酸化後の反応を阻害することから、医薬、農薬などの薬剤における有効成分として有用であり、特に、医薬用途が好ましい。ゼリー剤、液剤などを挙げることができる。添加物を含んでいてもよい。製剤用溶剤としては、例えば、水、エタノール、グリセリンなどを挙げることができる。アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウムのような珪酸塩類;リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、硫酸カルシウムなどを挙げることができる。結合剤としては、例えば、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、マクロゴールなどを挙げることができる。崩壊剤としては、例えば、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンなどを挙げることができる。安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クレゾール、チメロサール、無水酢酸、ソルビン酸などを挙げることができる。懸濁化剤としては、例えば、ポリソルベート80、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを挙げることができる。次に、β修飾リン酸化合物前駆体の製造方法について説明する。式1Aのβ修飾リン酸化合物前駆体は、下記式のスキームで合成することができる。具体的には、β位の炭素にヒドロキシル基などが結合した化合物を出発物質とし、このヒドロキシル基以外のヒドロキシル基に保護基を結合して保護する。1で置換し、最後に保護基を脱離させることで式1Aの化合物を合成することができる。出発物質や保護基の種類、反応条件(濃度、温度等)などは、合成するβ修飾リン酸化合物前駆体によって異なる。[化15](省略)[0041]β修飾リン酸化合物前駆体としては、種々の具体的な化合物を挙げることができる。以下、ヌクレオシド誘導体、メバロン酸誘導体、ホスファチジルイノシトール誘導体についてそれぞれ詳細に説明する。リン酸化合物前駆体としては、下記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体を挙げることができる。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は下記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。[化17](省略)(ここで、nは1~3の整数を示す。1は、ヒドロキシル基、又はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン若しくはプロリンのメチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、n-ブチルエステル、ベンジルエステル若しくはフェニルエステルである。2は、水素、炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基である。1は同一又は異なっていてもよい。)Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。*はリン酸化を受けてリン酸基が結合する結合手であり、リン酸化前においては水素又はリン酸基以外の置換基が結合していることを意味する。)[0043]ここで、ヌクレオシド誘導体としては、具体的には、以下に示される化合物を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。[0044]塩基がアデニンであるアデノシン誘導体としては、下記式(2A-1A)~(2A-12A)の化合物を例示することができる。[化18](省略)[0045]塩基がグアニンであるグアノシン誘導体としては、下記式(2A-1G)~(2A-12G)の化合物を例示することができる。[化19](省略)[0046]塩基がシトシンであるシチジン誘導体としては、下記式(2A-1C)~(2A-12C)の化合物を例示することができる。[化20](省略)[0047]塩基がチミンであるチミジン誘導体としては、下記式(2A-1T)~(2A-12T)の化合物を例示することができる。[化21](省略)[0048]塩基がウラシルであるウリジン誘導体としては、下記式(2A-1U)~(2A-12U)の化合物を例示することができる。3がモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基、若しくはこれらの誘導体の場合)も含まれる。3が上記の式2Dの化合物を挙げることができる。2が水素の場合に該当する。2が炭素数1~4のアルキル基、ハロゲン、又はフェニル基の場合に該当する。1としては、アラニンイソプロピルエステル、アラニンシクロヘキシルエステル、アラニンネオペンチルエステル、バリンイソプロピルエステル、又はロイシンイソプロピルエステルであることが好ましい。これらのエステル類は、グリシン等のアミノ酸由来の窒素を介してリンに結合する。2としては、フェニル基であることが好ましい。[0050]さらに、β修飾リン酸化合物前駆体としては、上記式2Aのヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸を挙げることができる。ここで、核酸としては、デオキシリボ核酸(DNA)、リボ核酸(RNA)のいずれでもよく、また、DNAの場合は二本鎖DNA、一本鎖DNAのいずれでもよい。核酸の構成単位数としては、特に制限はないが、通常は1~100塩基(二本鎖DNAの場合は塩基対)の範囲内であり、1~50塩基(塩基対)の範囲内が好ましく、1~10塩基(塩基対)の範囲内がより好ましい。上記式2Aで示されるヌクレオシド誘導体がリン酸化を受けたあとのβ修飾リン酸化合物としては、下記式2Bで示される部分構造を有するβ修飾リン酸化合物を挙げることができる。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、又は上記式2Dで示されるモノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。)[0052]さらに、β修飾リン酸化合物としては、上記式2Bのヌクレオシド誘導体を3’末端に有する核酸を挙げることができる。ここで、核酸としては、デオキシリボ核酸(DNA)、リボ核酸(RNA)のいずれでもよく、また、DNAの場合は二本鎖DNA、一本鎖DNAのいずれでもよい。核酸の構成単位数としては、特に制限はないが、通常は1~100塩基(二本鎖DNAの場合は塩基対)の範囲内であり、1~50塩基(塩基対)の範囲内が好ましく、1~10塩基(塩基対)の範囲内がより好ましい。リン酸化合物前駆体が式2Aで示されるヌクレオシド誘導体であり、β修飾リン酸化合物が上記式2Bで示されるヌクレオシド誘導体である場合、中間体である活性種として下記式2Cで示される化合物が生成する。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。3は水素、モノリン酸基、ジリン酸基、又はトリリン酸基である。Bはアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、N-メチルアデニン、N-ベンゾイルアデニン、2-メチルチオアデニン、2-アミノアデニン、7-メチルグアニン、N-イソブチリルグアニン、5-フルオロシトシン、5-ブロモシトシン、5-メチルシトシン、4-N-メチルシトシン、4-N,N-ジメチルシトシン、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、又は5,6-ジヒドロウラシルから選択される塩基である。)[0054]β修飾リン酸化合物が式2Aで示されるヌクレオシド誘導体の場合、特にポリメラーゼ反応を効率的に阻害する。ポリメラーゼ反応は、DNAポリメラーゼとRNAポリメラーゼの両方が含まれるが、式2Aのヌクレオシド誘導体は、特にDNAポリメラーゼを好適に阻害することができる。以下、図面を参照して、DNAポリメラーゼ阻害作用について説明する。1(チオアルキル基)の場合におけるDNAポリメラーゼ阻害作用を示す模式図である。生体内(細胞内)にヌクレオシド誘導体を投与すると、キナーゼによってヌクレオシド誘導体の5’ヒドロキシル基がリン酸化され、ヌクレオシド三リン酸誘導体となる。これは、DNAポリメラーゼ反応の基質となり、DNAポリメラーゼによって伸長する一本鎖DNAの3’末端側に結合する。次に、このヌクレオシド誘導体の3’ヒドロキシル基に次のヌクレオシドの5’リン酸基が結合する(図の下段左側)。この状態の反応中間体では、2’のチオアルキル基の求核攻撃によって3’のリン酸基が解離するとともに、2’位の炭素、3’位の炭素、チオアルキル基の硫黄の3つでチイラン環が形成される(図の下段中央)。このチイラン環は反応性が高く、DNAポリメラーゼを構成する特定のアミノ酸の側鎖と反応して共有結合する(図の下段右側)と推測される。この反応は不可逆的であり、これ以降にポリメラーゼ反応が進行することがない。このように、ヌクレオシド誘導体を用いることで、従来のアシクロビルなどを用いた伸長阻害反応とは異なり、ポリメラーゼに共有結合して反応を阻害するという新規なメカニズムで効率的に反応を阻害することができる。[0056]ポリメラーゼ反応の阻害を行うには、まず、式2Aのヌクレオシド誘導体を標的とする生体試料(細胞、ウイルスなど)に添加する。ヌクレオシド誘導体は、緩衝液など適当な溶媒に溶解して添加する。添加時のヌクレオシド誘導体の濃度は、標的とする反応の特性等に応じて適宜設定することができる。後述するB型肝炎ウイルスの場合、ヌクレオシド誘導体の濃度は、通常は1μM~1mMの範囲内であり、10μM~500μMの範囲内が好ましく、50~200μMの範囲内が特に好ましい。反応時間も適宜設定することができるが、例えばB型肝炎ウイルスの場合、通常は1~30日の範囲内であり、5~10日の範囲内がより好ましい。[0057]β修飾リン酸化合物前駆体により、リン酸化を伴う反応において、リン酸化より後の反応が阻害される。β修飾リン酸化合物前駆体による反応阻害活性は、リン酸化により生成する化合物(ポリメラーゼ反応の場合はDNAやRNA)や、さらには細胞、ウイルスなど生体試料そのものを定量することで評価することができる。[0058](4)医薬ヌクレオシド誘導体は、ポリメラーゼ阻害剤であり、DNAの複製やRNAの転写反応を阻害するため、細胞やウイルスの増殖などを抑制する。このため、式2Aで示されるヌクレオシド誘導体は、増殖阻害剤であり、ウイルス性疾患や癌などの治療薬として有用である。以下、ヌクレオシド誘導体の製造方法について説明する。具体的な反応条件などは、後述する実施例において詳細に説明するため、ここでは、いくつかのヌクレオシド誘導体について、合成方法(製造方法)の概略を説明する。1が-SHの化合物)下記の合成スキームに沿って説明する。以下で説明する合成スキームにおいて、数字は化合物の番号を表す。2)をピリジンなどの溶媒中で反応させる。これにより、リボースの3’ヒドロキシル基と5’ヒドロキシル基との間でシロキサン結合の環状構造を形成させ、3’位と5’位のヒドロキシル基を保護する(化合物1)。次に、N-フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを添加して、N,N-ジメチル-4-アミノピリジン(DMAP)などの求核剤をジクロロメタン(DCM)などの溶媒中で反応させて、リボースの2’位をトリフルオロスルホン酸基とする(化合物2)。次に、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)などの存在下でチオ酢酸カリウムなどのチオール基を有する化合物を反応させて、リボースの2’位にチオエステルを形成させる(化合物3)。アンモニア/メタノール溶液中で反応させることでチオエステル基をチオール基に変換する(化合物4)。3N)とテトラヒドロフラン(THF)とを添加してリボースの3’位と5’位の保護基を脱離させてヒドロキシル基にする。5の化合物)化合物4までの合成スキームは上記の式(2A-1A)の化合物の合成の場合と同じである。続いて、テトラヒドロフラン(THF)とアゾジカルボン酸ジイソプロピル(DIAD)の混合溶媒などの溶媒中で1-プロパンチオールなどのチオアルキル化合物と反応させてリボースの2’位をジスルフィドアルキル基に変換する(化合物5)。次に、溶媒中で塩化ベンゾイル(BzCl)と反応させて、塩基のアミノ基をベンゾイル基で保護する。3N)とTHFとを添加してリボースの3’位と5’位の保護基を脱離させてヒドロキシル基にする(化合物11)。3の化合物)化合物2までの合成スキームは上記の式(2A-1A)の化合物の合成の場合と同じである。次に、ジメチルジセレニド、水素化ホウ素ナトリウム、さらにはTHF等の溶媒中で反応させる(化合物12)。フッ化テトラ-n-ブチルアンモニウム(TBAF)、THFなどを添加してリボースの3’位と5’位の保護基を脱離させてヒドロキシル基にする(化合物13)。1がハロゲンの化合物)次に、ハロゲン化合物の合成スキームについて説明する。化合物2までの合成スキームは上記の式(2A-1A)の化合物の合成の場合と同じである。次に、ハロゲン化リチウムを添加して加熱してハロゲンを導入する。ハロゲン化リチウムとしては、フッ化リチウム、塩化リチウム、臭化リチウム、ヨウ化リチウムを挙げることができる。3N)とTHFとを添加してリボースの3’位と5’位の保護基を脱離させてヒドロキシル基にする。リン酸化合物前駆体としては、下記式3Aで示されるメバロン酸誘導体を挙げることができる。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。7などの化合物が好ましい。[0066](2)β修飾リン酸化合物また、上記式3Aで示されるメバロン酸誘導体がリン酸化を受けたあとのβ修飾リン酸化合物としては、下記式3Bで示される部分構造を有するβ修飾リン酸化合物を挙げることができる。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。β修飾リン酸化合物前駆体が式3Aで示されるメバロン酸誘導体であり、β修飾リン酸化合物が上記式3Bで示されるメバロン酸誘導体である場合、中間体である活性種として下記式3Cで示される化合物が生成する。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。1が-SHの化合物)を示して説明する。1の硫黄が骨格の炭素-炭素結合とチイラン環を形成する。この環構造は非常に不安定であり、他の化合物と容易に共有結合する性質を有している[化32](省略)[0069]β修飾リン酸化合物が式3Aで示されるメバロン酸誘導体の場合、特にメバロン酸キナーゼや5-ホスホメバロン酸キナーゼを効率的に阻害する。メバロン酸は、テルペンを合成するメバロン酸経路に関与する物質であり、メバロン酸キナーゼによってメバロン酸とATPから5-ホスホメバロン酸が生成し、さらに5-ホスホメバロン酸キナーゼによって5-ホスホメバロン酸とATPから5-ジホスホメバロン酸が生成する。式3Aで示されるメバロン酸誘導体は、このメバロン酸のアナログとしてメバロン酸経路の効率的は反応阻害剤となる。式3Aで示されるメバロン酸誘導体がリン酸化されて式3Bの化合物を経て式3Cの活性種が生成し、これがメバロン酸キナーゼや5-ホスホメバロン酸キナーゼなどに共有結合することで、リン酸化後の反応を阻害すると推測される。式3Aで示されるメバロン酸誘導体は、メバロン酸経路を阻害するため、コレステロールの生成を抑制する。このため、式3Aで示されるメバロン酸誘導体は、コレステロール生成阻害剤であり、高脂血症や高コレステロール血症などの治療薬として有用である。リン酸化合物前駆体としては、下記式4Aで示されるホスファチジルイノシトール誘導体を挙げることができる。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。4はステアリン酸、パルミチン酸から選択される飽和脂肪酸である。7などの化合物が好ましい。β修飾リン酸化合物前駆体が式4Aで示されるホスファチジルイノシトール誘導体であり、β修飾リン酸化合物が上記式4Bで示されるホスファチジルイノシトール誘導体である場合、中間体である活性種として下記式4Cで示される化合物が生成する。1は水素、炭素数1~20のアルキル基、炭素数1~20のアリール基、又は炭素数1~20のアルケニル基である。4はステアリン酸、パルミチン酸から選択される飽和脂肪酸である。3の化合物)を示して説明する。1の硫黄がイノシトール骨格の炭素-炭素結合と環構造を形成する。この環構造の硫黄はプラスの電荷を有している。この環構造も非常に不安定であり、他の化合物と容易に共有結合する性質を有している[化35](省略)[0075]β修飾リン酸化合物が式4Aで示されるホスファチジルイノシトールの場合、特にホスホイノシチド-3-キナーゼ(PI3K)の反応を効率的に阻害する。PI3Kは、イノシトールリン脂質をリン酸化することにより、ホスファチジルイノシトール3,4,5-三リン酸を生成する。これらの化合物は、PI3K/Akt経路に関与する物質であり、Aktはがん遺伝子産物でもある。式4Aで示されるホスファチジルイノシトールがリン酸化されて式4Bの化合物を経て式4Cの活性種が生成し、これがPI3Kに共有結合することで反応を阻害すると推測される。式4Aで示されるホスファチジルイノシトールは、PI3K活性阻害剤であり、癌、悪性リンパ腫、白血病、リウマチなどの治療薬として有用である。式4Aで示されるホスファチジルイノシトールの製造方法は、式2Aで示されるヌクレオシド誘導体と同様の方法で製造することができる。式4Aのホスファチジルイノシトールは、以下の手順で合成することができる。シロキサン類を保護基としてイノシトールの2’以外のヒドロキシル基を保護する。次に、2’位にトリフルオロスルホン酸基を導入したのち、チオエステルからチオール基に変換する。最後に保護基をイノシトールから脱離させる。[0078]以下、本発明を実施例に基づいて具体的に説明するが、これらは本発明の目的を限定するものではない。以下の実施例において「%」表示は特に規定しない限り質量基準(質量パーセント)である。[0079]以下の実施例におけるヌクレオシド誘導体の合成スキームの全体を下記に示す。以下、この合成スキームに沿ってヌクレオシド誘導体の合成方法を説明する(なお、合成スキーム中の番号は化合物の番号と一致している)。「%」の数字は収率を意味する。2(3.2mL,10.1mmol,1.0eq.)を加え、室温で46時間撹拌した。aq.,brine)で分液した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した後、綿栓ろ過し、減圧下で溶媒を留去した。0-4%))にて精製し、化合物1(4.14g,80%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。3):δ1.06-1.13(m,28H),3.31(s,1H),4.01-4.16(m,3H),4.56(d,J=5.6Hz,1H),5.07-5.11(m,1H),5.79(s,2H),5.97(d,J=1.2Hz,1H),7.97(s,1H),8.28(s,1H).[0081](2)化合物2の合成Ar雰囲気下、氷冷下で化合物1(1.00g,1.83mmol,1.0eq.)とDMAP(650mg,5.5mmol,3eq.)を脱水DCM(17mL)に溶かし、N-Phenyltrifluoromethanesulfonimide(803mg,2.2mmol,1.2eq.)を加えて2時間撹拌した。aq.,brine)で分液した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した後、綿栓ろ過し、減圧下で溶媒を留去した。中性フラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=1/1)で精製し、化合物2(946mg,81%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。[0082](3)化合物3の合成Ar雰囲気下で化合物2(2.80g,4.36mmol,1.0eq.)及び、脱水アセトニトリルで共沸したチオ酢酸カリウム(1.06g,9.28mmol,2.1eq.)を脱水DMF(9mL)に溶かし、14.5時間撹拌した。aq.,brine)で分液した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した後、綿栓ろ過し、減圧下で溶媒を留去した。中性フラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=2/3)で精製し、化合物3(1.72g,67%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。3-MeOH(25mL)に溶かし1時間撹拌した。aq.,brine)で分液した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した後、綿栓ろ過し、減圧下で溶媒を留去し、化合物4(1.75g,quant.)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。化合物4)に溶かし、DIAD(124μL,0.628mmol,1.1eq.)を加えて18時間撹拌した。1-propanethiol(3.1mL,33.7mmol,59eq.)を加え、80°Cに加熱して29時間撹拌し、室温まで放冷した。減圧下で溶媒を留去し、中性フラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=1/1)で精製し、化合物5(230mg,67%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。化合物5)に溶かし、そこにBzCl(91μL,0.785mmol,1.5eq.)を加えて3時間30分撹拌した。1.0eq.)を加え、さらに1時間撹拌した。0.5eq.)を加え、さらに40分撹拌した。1.0eq.)を加え、さらに40分撹拌した。4mLの水を加え、5分撹拌した後、28%アンモニア水溶液を8mL加えて15分撹拌した。aq.,brine)で分液した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した後、綿栓ろ過し、減圧下で溶媒を留去した。1H-NMR情報は以下のとおりである。3N(139μL,0.855mmol,2.5eq.)を加えて2時間20分撹拌した。0-5%))で分離し、化合物7(154mg,98%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。mmol,1.2eq.)を加えた。TLCにて反応を追跡しながら、撹拌開始から2h,4h,7h,10h後にそれぞれBzClを0.6eq.,0.6eq.,1.2eq.,1.2eq.ずつ加えて、反応開始から11h後にMeOH(5ml)を加えて10min撹拌した。aq.,brine)にて分液を行った。芒硝乾燥したのち溶媒留去を行い、中性フラッシュカラム(H/A=1/1)にて精製して化合物8(133mg,68%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。TEA)を加え、1.5h撹拌した後、反応系を室温に戻し、2.5h撹拌した。その後MQを150μl加え、overnight撹拌した後、HPLCにて精製した。反応収率はHPLCで計算し62%であった。3N(424μL,2.6mmol,2.5eq.)を加えて2時間40分撹拌した。減圧下で溶媒を留去し、DCMで吸引ろ過、洗浄し、化合物10(266mg,89%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。3N(375μL,2.30mmol,2.5eq.)を加えて2時間撹拌した。0-5%))で分離し、化合物11(337mg,quant.)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。Aの合成?78°Cで、無水DCM(4.2ml)中の塩化ホスホリル(130μl、1.4mmol、1.0eq.)の溶液に、フェノール(132mg、1.4mmol、1.0eq.)及びトリエチルアミン(132mg)の溶液を加えた。無水DCM(1.4ml)中の195μl、1.4mmol、1.0eq.)を滴下した。2.0eq.)を滴下した。それを?78°Cでさらに1時間撹拌し、次いで1時間かけて室温まで温めた。0°Cに冷却した後、上記混合物を、無水DCM(1.4ml)中の化合物11(94.2mg、0.280mmol、0.2当量)及びNMI(111μl、1.4mmol、1.0当量)の溶液でさらに処理し、0°Cで16時間撹拌した。2O(7.0ml)で処理し、DCMで抽出した。有機層を0.5Mの希HCl及び食塩水で順次洗浄した。Aを得た(48mg,38%)。得られた化合物のNMR情報は以下のとおりである。氷冷下でジメチルジセレニド(300μL,3.17mmol)を溶解したエタノール(5mL)に水素化ホウ素ナトリウム(289mg,7.64mmol)を加えた。化合物2(3.36g,5.30mmol)をTHF(20mL)に溶解し、反応溶液に加え、70°Cで3.5時間撹拌した。ジメチルジセレニド(100μL,1.06mmol)と水素化ホウ素ナトリウム(62.3mg,1.64mmol)を加え、60°Cで2.5時間撹拌した。1M塩酸で中和した後、溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル(50mL)に溶解し水で3回、飽和食塩水1回で洗浄し、有機層を芒硝乾燥した。溶媒を留去した後、中性フラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=1/1→9/1→酢酸エチル/メタノール=9/1)により精製し、化合物12(1.90g,61%)を得た。本反応には耐圧容器を用いた。1H-NMR情報は以下のとおりである。THF,7.8mL,7.80mmol)を加え、17.5時間撹拌した。溶媒を留去し、中性フラッシュカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/メタノール=95/5→85/15)で精製し、化合物13(1.04g,97%)を得た。1H-NMR情報は以下のとおりである。3(134μL,1.50mmol)をジクロロメタン(4.5mL)に溶解し、-78°Cで撹拌した。フェノール(132.6mg,1.46mmol)とトリエチルアミン(201uL,1.50mmol)をジクロロメタン(1.5mL)に溶解し、滴下し、3時間撹拌した。L-イソプロピルアラニン塩酸塩(248.4mg,1.54mmol)とトリエチルアミン(201uL,3.00mmol)を加え、更に1時間撹拌し、室温まで上昇させた。化合物13(94.2mg,0.27mmol)とNMI(114uL,1.50mmol)をジクロロメタン(1.5mL)に溶解し滴下した。0°Cで20.5時間撹拌した後、水でクエンチした。SelenoA(33.5mg,19%)を得た。得られた化合物のNMR情報は以下のとおりである。SeTPの合成リン酸トリメチル(84.1mg)にセレノアデノシン(化合物13:101mg,0.30mmol)とトリブチルアミン(643μL,2.70mmol)を加え、-30°Cで撹拌しながら、塩化ホスホリル(84μL,0.90mmol)を滴下し、16時間撹拌した。アセトニトリル(1.6mL)にビス(トリブチルアンモニウム)ピロリン酸(993.5mg,1.51mmol)とトリブチルアミン(600μL)を加え、24時間撹拌した。TEAB(5mL)を加え、凍結乾燥をした。TEAB/ACN=100/0→70/30)で精製をし、三リン酸体のトリエチルアンモニウム塩を得た。0.1M過塩素酸ナトリウムのアセトン溶液を加え、吸引ろ過により三リン酸体のナトリウム塩(93.9mg,43%)を得た。得られた化合物のNMR情報は以下のとおりである。2O(332.5uL)、DTT水溶液(1M,17.5uL)を加え、混合した後、25°Cで20時間インキュベートした。HPLC(条件は下記に記載)で分析し、ピークの同定はHRMS(ESI)で行った。その結果のグラフを図2に示す。このことから、リボースの3’位がリン酸化された状態で、DTTにより2’位のジスルフィド基を脱保護すると、以下の反応によって3’位のリン酸部が切断され、チイラン構造を有する活性化されたヌクレオシド誘導体とリン酸フェニルとに分解されることが確認できた。[化38](省略)[0098]3.B型肝炎ウイルス(HBV)の増殖抑制効果ヒト肝がん細胞HuH-7由来でHBVゲノム(遺伝子型C)が恒常的に複製する細胞株EB-HBCeを24ウェルプレートに播種し、化合物A-1(化合物10)及びA-2(化合物11)を終濃度10又は100μMで添加し9日間培養した。その間、3日毎に培地を交換するとともに同濃度の化合物を添加した。RNAを抽出し、DNaseI及びRNase阻害剤の処理を行った。Kit(東洋紡社)を用いた定量PCRによってHBV複製中間体であるウイルスRNA(pgRNA)を定量した。その結果を図3に示す。左側のグラフから順に、コントロール、化合物A-1を10μM、化合物A-1を100μM、化合物A-2を10μM、化合物A-2を100μM添加した結果である。右側のグラフは、肝炎の治療薬であるETV(エンテカビル)を10μM添加した結果である。[0099]この図から、化合物A-1と化合物A-2のいずれも100μM添加した場合に、ウイルスRNAの低下がみられた。このことから、いずれの化合物もB型肝炎ウイルスの増殖を抑制できることがわかった。濃度100μMにおける化合物A-1と化合物A-2の結果を比較すると、化合物A-2のほうが化合物A-1よりも若干、ウイルスRNAの量が少なかった。このことから、同じ濃度であれば化合物A-2のほうが化合物A-1よりもウイルス増殖抑制効果が高いことがわかった。SeTP(100μM)を加え、42°Cで3時間インキュベートした。3Kを用いてタンパク溶液を濃縮した。反応時間5分、30分、60分において10μLのサンプルを取り、2×変性バッファーに加えて、反応を停止した。const.)で電気泳動を行い、蛍光発光で伸長核酸を定量検出した。その結果を図4に示す。SeTPは、逆転写酵素による核酸伸長反応を阻害することがわかった。[0102]5.抗HBV活性ヒト肝がん細胞HuH-7由来でHBVゲノム(遺伝子型C)が恒常的に複製する細胞株EB-HBCeを24ウェルプレートに播種し、各化合物を種々の終濃度で添加し9日間培養した。その間、3日毎に培地を交換するとともに同濃度の化合物を添加した。A(タカラバイオ社)で37°C、1時間処理することによって粒子外の核酸を除いた。Kで一晩処理した後、DNAをフェノール/クロロホルム抽出しエタノール沈殿を行った。DNAの定量測定を行った。その結果を図5に示す。図中の「SelenoA」は化合物13を、「entecavir」はエンテカビルを、それぞれ添加した結果を表す。Aのいずれも抗HBV活性を示し、添加濃度が増えるほど活性が高くなることがわかった。SelenoAは、添加濃度が10μMでは、これらの3種類の中で最も高い抗HBV活性を示すことがわかった。2の条件でTZM-bl細胞を培養した。DMEM+10%FBS)。10ng)をこの順に培養液に添加した。異なるタイプのウイルスを用い、複数の化合物について実験を行った。その結果を下記表(A)に示す。表中、「AZT」はアジドチミジン、「Lamivudine」はラミブジン、「Didanosine」はジダノシンを意味する。Assay(Promega)を使用した。NL4-3をMOI=0.001で感染させた。2インキュベーター内で1時間培養した。各ウェルに添加し、よく混和し4°Cで一晩静置した。その結果を下記表(B)に示す。SelenoAはLamivudine、Didanosineと比べると高い抗HIV活性を示した。HIVタイプM41L/T69SSG/T215Yに対しては、AZTよりも優れた抗HIV活性を示した。SelenoAはAZTよりも毒性が低いことが分かった。ライセンスをご希望の方、特許の内容に興味を持たれた方は、問合せボタンを押してください。同じキーワードでJ-STORE内を検索することが出来ます。