認識部位が確認された。認識部位があった(表2)。F3H遺伝子については、複数の制限酵素認識部位の有無が異なる対立遺伝子が存在することが明らかとなった(表2)。PCR増幅DNA断片の制限酵素多型を用いたイチゴ品種の識別)イチゴ14品種のガク又は葉より試験例1と同様の方法でDNAを抽出した。消泡剤1滴を加えてすりつぶし、さらにDNA抽出溶液400μlを添加し、遠心管に移した。65°Cで10分間保温した後、遠心分離(10000rpm、10分間)を行って固形物を分離した。酢酸カリウム200μl(終濃度1.25M)を加え、氷中で10分間保冷する。遠心分離(15000rpm、4°C、10分間)後、上清750μlをとり、新しい遠心管に移し、同量のイソプロパノールを添加した。(15000rpm、4°C、10分間)した。EDTA、pH8.0)+リボヌクレアーゼ(RNase、終濃度0.1mg/ml)溶液150μlを添加し、55°Cで10分間保温しRNAを分解した。EDTA、塩化ナトリウム0.4M)で平衡化したDEAEセファッデクス混液200μlをRNase処理後の溶液に添加し、10分程度、ゆっくり混ぜた。ガラスウールを詰めたピペットチップをカラムにして混液をアプライし、排出した。(このとき排出が悪ければ、圧をかけて押し出す。)次いで、200μlの洗浄バッファーを添加し、圧をかけ排出するという操作を2回繰り返す。カラムから完全にバッファーを排出し、カラムを新しい1.5ml遠心管に入れ、60°Cに保温した溶出バッファー200μlを添加し、1分程度待ち、圧をかけて排出した。(15000rpm、4°C、10分間)した。上清を捨て、70%エタノール100μlを添加し、洗浄した。遠心分離(15000rpm、4°C、10分間)後、上清を捨て、遠心管の蓋を開けて20分ほど乾燥させた。滅菌水40μlを添加し、軽くボルテックスした。55°Cで10分間ほど保温し、スピンダウンして蓋についた液を集めた。得られた液10μlを泳動してDNAの有無を確かめた。マーカーを用いたイチゴ品種識別のため、以下の操作を行った。セットして反応を開始した。【0031】PCR条件は次の通りである。94°Cで5分間反応後、94°C30秒、55°C60秒、72°C60秒の反応を35回繰り返し、72°C5分で伸長反応を補足した。約10ユニット/分の合計20μlとなるように滅菌水で調整し、37°Cで2~3時間反応させてDNAを消化した。制限酵素処理後の反応液10μlに6×ローディングバッファー2μlを添加し、エチジウムブロマイド入りの1.5%アガロースゲルのウエルに入れて、電気泳動を行った。電気泳動は、コスモバイオ(株)製、ミューピッドIIを使用して紫外線照射によりバンドを検出した。電気泳動後のアガロースゲルを紫外線下に移し、写真をとって品種間で多型を比較した(図1)。検出結果を表3にまとめた。○はDNA断片(マーカー)を有する、×は有しないことを示す。マーカーを用いたこと以外は実施例1と同様にしてイチゴ品種の識別を行った。結果を図2と表4に示す。表中の数字や記号は表3と同じである。図2及び表4から明らかなように、供試した14品種をマーカーの有無により2群に分けることができる。マーカーを用いたこと以外は実施例1と同様にしてイチゴ品種の識別を行った。PCR用プライマーとPCR反応後に使用する制限酵素の種類の違いを除くとPCR反応液の組成、PCR条件及び検出操作は実施例1の場合と同様に実施した。その結果を図3(1)、(2)、(3)、(4)、(5)及び表5に示す。表中の数字や記号は表3と同じである。F3Hマーカーの有無により、供試した14種の品種は分類される。以外の4種、「ピーストロ」はF3H-DdeI以外の4種のマーカーを有していた。F3H-HpaII、F3H-AccI及びF3H-DdeIの3種、「サンチーゴ」はF3H-AccI、F3H-DdeI及びF3H-RsaIの3種、「けいきわせ」はF3H-NcoI、F3H-AccI及びF3H-RsaIの3種のマーカーを有していた。2種、「濃姫」、「アイストロ」はF3H-AccIの1種、「女峰」はF3H-NcoIの1種を有しており、「とちおとめ」はどのマーカーも有していなかった。以上の結果より、実施例1~3において各マーカーを組み合わせることによって、供試した14品種のイチゴはすべて識別することができることが分かる。本発明により、イチゴの種苗、果実等を試料として、栽培条件や保存条件などに左右されずに、イチゴ品種を正確に識別することができる方法が提供される。Iマーカー多型の泳動写真である。【符号の説明】1は「とよのか」、2は「女峰」、3は「とちおとめ」、4は「章姫」、5は「さちのか」、6は「アイベリー」、7は「レッドパール」、8は「濃姫」、9は「サンチーゴ」、10は「ピーストロ」、11は「アイストロ」、12は「べにほっぺ」、13は「けいきわせ」、14は「セセナ」をそれぞれ示す。マーカー多型の泳動写真である。マーカー多型のそれぞれの泳動写真である。