蛍光によって評価した。この系で達成されるウイルス力価によって、対応する生成法においての収量に対する大まかな補正を、認定されたヒトワクチン(Rabivac)に対するMRC−5培養物を使用して実施し、このワクチンは、どれだけの量のワクチン抗原が、1mL当たりの培養収集物に含まれるかについての方向付けを可能にする(表5を参照のこと)。約1.2〜0.5logCID50までのより低いウイルス力価において認識され得る)は、わずかに遅らされた。11日目の培養物の第3の継代から、初期細胞破砕に伴う非常に強い特定の免疫蛍光が全ての培養物において見出され、次いで、ほとんどの細胞が、18日目の第5継代によって完全に破砕され、感染が終了するまで、この免疫蛍光は、さらに増加した。特定のウイルス含量は、14日目まで連続的に増加し、次いで、細胞破砕の増加の結果として再び減少する。則的な間隔で繰り返し、細胞が継続的に再増殖するにも関わらず、回収され得る。類似する様式で、同じウイルスを、実施例1に従う懸濁培養液中に直接播種し、ここで、0.0001のMOIを、さらに使用する。的に使用し、培養物をまた、1:8または1:10で1週間に2回移した。移動は、細胞の新鮮な培地中への単純な希釈および新たな播種によってのみ生じた。功を、上記のように、MRC−5細胞中でのウイルス力価滴定のみを参照して追跡した。破砕物をもたらさなかった。感染を、第8継代(感染後、28日目)まで追跡し、次いで、中断した。【0108】これらの感染由来のウイルスサンプルを、種ウイルスとして凍結し、100mLから始められる懸濁培養液の新規の感染のために使用され、標準培地において、そして上記される同じ継代条件下で使用された。この場合、MOIは、0.000025まで減少される。感染を、6細胞継代(21日)にわたって維持した。経路の終わりに、ゆっくりとウイルス力価を上昇することによって測定される。代後、回収され得、これは、約150,000ワクチン用量に対応するウイルス収量である。VR−288株を使用した。第3日目を、回収時間として選択した。ウイルス複製が非常に迅速であるからである。切な滴定系として示された。評価および滴定は、5日後に生じた。37°Cでの感染後にさらにインキュベーションされた培養物は、107.4CID50/mLを生じた;感染温度が感染時点から33°Cまで低下された場合、同じ力価が測定された。【0111】このウイルスを用いた、接着性培養物と懸濁培養物との間の直接の比較を、実施した。濁培養系は、72時間後に、比較的、より良好かつより迅速な収量を、107.3CID50/mL生じた。VR−93)で、5%FCSを含むMEMで感染した。MAb−FITC)でポジティブな免疫蛍光を示した。地中での感染のために、実施例12と類似した様式での化学的に規定された培地および無タンパク質培地下で使用した。養体積の22%を除去し、そして新鮮な培地と入れ換えた。7日目において、細胞を含む培養堆積の50%を除去し、新鮮な培地で置換する。感染の間の全培養体積を、1回より多く完全に入れ換え、そして希釈に従って、培地の補充による、さらなる細胞の増殖のための機会を提供した。応し、ここでわずかな超過量を除去した。非常により高い培養液の継代または希釈は、特に開始期において可能であり、ここではっきりと完全に使用されたわけではなかった。以下のウイルス収率を測定した。Doc,Hannoverから得た)を用いて0.01のMOIで感染し、そして33°Cまたは37°Cで3日間または5日間さらにインキュベートした。FCSを含むMEM培地中のBHK細胞を使用して供給された系において滴定した。滴定の評価は、7日後に生じた。【0115】5日後の懸濁培養物のウイルス収量は、37°Cで108.1CID50/mLであり、33°Cで108.0CID50/mLであった。7日後の、両温度ロットにおける滴定は、108.0CID50/mLであった。中で、実施例12に類似した化学的に規定された培地および無タンパク質培地下で使用した。感染3日目、7日目、および10日目において、培養体積の22%を除去し、新鮮な培地によって入れ換えた。従って、感染の間の全培養体積を、ほぼ完全に交換し、希釈に従って、培地補充によってさらに増幅するための機会を細胞に提供した。培養液の大体1:2継代に対応し、ここでわずかな超過量を除去した。養液の継代または希釈は、特に開始期において可能であり、ここではっきりと完全に使用されたわけではなかった。以下のウイルス収率を測定した。VR−1302)での感染のために使用した。このウイルスを、1:100に希釈し、そして新しく調製した培地に播種し、次いでその培地を37°Cでインキュベートした。1週間後、1mLの培養上清を新しい培地に取替え、そして再び7日間インキュベートした。85102918)の、回収した培養上清は、CPEによる力価評価の間に、105.5CID50/mLのウイルス力価を示す。VR−1302)を、実施例12と類似した、化学的に規定されかつタンパク質を含まない培地での感染のために使用した。積の22%をとり、そして新鮮な培地と交換した。7日目に、細胞を含む培養物体積の50%を取り出し、そして新しい培地と交換した。致し、ここで、過剰な量だけを除去した。開始段階において可能性のある、有意に高い培養物の継代または希釈は、ここでは十分に活用されなかった。VR−1401)を、同じロットにおいて試験した。Institute(以前は、Frankfurtによって好意で提供された)を使用した。代表的なウイルス合胞体は、力価測定により良く開発され、従って評価が容易であるからである。ekouhou.net。