ウイルスで感染され、感染後にウイルスの増殖を可能にし、かつ少なくとも2倍の細胞の増殖を目的とする条件下で培養される。得られたウイルス及び発現されたタンパク質は薬物および診断剤の製造のために使用される。対象となるウイルスは、ssDNAウイルス、dsDNAウイルス、RNA(+)ウイルス、RNA(−)ウイルスまたはdsRNAウイルスであり、使用される細胞株はMDCK細胞(イヌ腎臓細胞)。本発明は、細胞培養物中のウイルス増殖のための方法に関し、ここで細胞はウイルスに感染し、そして感染後、これらの細胞は、ウイルス増殖が可能でかつ同時に、少なくとも2倍の、標的されたさらなる細胞増殖が可能な条件下で、細胞培養物中で培養される。感染症、特にウイルス感染は、依然として医薬においてかなり重要である。養物中でウイルスを増殖することができるよりよい方法を利用可能にして、ウイルスに関する研究およびワクチンの製造を可能にする必要性は、不変的なままである。ウイルス感染に対するワクチンの製造は、通常、多量の対応するウイルスの増殖および単離を必要とする。【0003】この対応するウイルスに依存して、ウイルス増殖のための種々の宿主系および培養条件が、先行技術において使用されている。株化細胞系統が、宿主系として使用される(非特許文献1〜3)。【0004】ニワトリ胚性卵におけるウイルス増殖は、高コストおよび時間の損失につながっている。この卵は、感染前にインキュベートされ、次いで、その胚の生存度について試験されなければならない。生存している胚のみが、ウイルスを増殖し得る。ウイルス感染後、増殖が起こり、さらにインキュベートして、この胚は最終的に殺傷される。この卵から単離されたウイルスは、汚染物質を含まず、濃縮されている。インキュベートした卵におけるウイルス増殖は、厳密に滅菌した条件下では不可能であるので、医薬用途または診断用途のために利用可能であるべきならば、汚染した病原性微生物が、その単離物から取り除かれなければならない。Biotechnologie,KayserおよびMuller(編)、2000、257〜281)。多数の細胞株は、残留する外来性ウイルス汚染物質に起因してか、またはウイルス実証がないこと、不明確な起源および経歴に起因して、ワクチンまたは類似の医薬的に利用可能な調製物の製造に適していない。養物が、ウイルスの最大増殖後に回収される。サルの腎臓細胞由来のVero細胞は、ワクチン製造用の個々のウイルス(ポリオウイルス、狂犬病ウイルス)の増殖のために使用された。Organization(WHO)によって、医薬研究用の試験細胞バンクからも利用可能になっている。【0008】これらのVero細胞は、接着系統であり、ガラスボトル、プラスチック培養プレートまたはプラスチックフラスコのような細胞増殖用の支持体表面を必要とする。上で、細胞が増殖し得る))中の対応する細胞の培養物中で生じる。接着性BHK(ベビーハムスターの腎臓)細胞および接着性MDCK(MandineDarbyのイヌ腎臓)細胞、ならびに他の細胞もまた、前述のVero細胞に加えて、活発にウイルスを増殖し、これらは、薬学的生成物の生成のための基質として使用されるか、またはそれらの使用が考慮される。CRL34(NBL−2)において、水疱性口内炎ウイルス、コクサッキーウイルスB5(B3でもB4でもない)、レオウイルス2型および3型、アデノウイルス4型および5型、ならびにワクシニアウイルスもまた、実験によって増殖されている。全ての対応する刊行物は、排他的に、接着性培養物に適合させている(ATCC製品情報を参照のこと)。Culture,2000,pp.173ff)。97/37000に開示される。対応する宿主細胞を使用するインフルエンザウイルスの増殖もまた、記載される。受容可能に高い収率を達成するために、かなり有意である。従って、所望のウイルス系統の収率を最大にするために、宿主系と培養条件との両方が、所望のウイルス系統のために有利な環境条件を達成するために、特に適応されなければならない。従って、種々のウイルス系統の高収率を達成するために、最適の増殖条件を生じる系が、必要とされる。多数のウイルスは、特定の宿主系に制限され、これらのうちのいくらかは、ウイルス収率に関して非常に非効率的である。効率的な生成系はしばしば、対応する培養系のウイルス集団の適応に基づき、しばしば他の宿主系との中間状態を使用し、そしてタンパク質添加物(大部分は、動物またはヒト起源の血清)を用いる。血清または他の増殖因子の添加を用いた初期増殖後のほとんど全ての培養物は、血清もタンパク質添加物もなしで少なくとも特定の時間保たれ得ることがまた、研究者によって知られている。清もタンパク質添加物も含まない培地に取り換えられ得(switched)、回収まで保たれる。これは、外来性タンパク質を回避するかまたは低下させながら、ワクチンまたは診断試験用のウイルス材料を得るための、長期にわたる慣習である。物における使用を可能にする際の重要な問題を有する。No.12,1978年改訂を参照のこと)。多くのウイルスは、タンパク質含有培地中でほとんどわずかにしか増殖され得ないかまたは全く培養され得ないこともまた、知られている。分解酵素(プロテアーゼ)の活性化に頼るウイルスが、含まれる。これらのプロテアーゼは、培地へのタンパク質の添加によって競合的に阻害されるので、少なくとも感染期間または生成段階におけるタンパク質の添加は、ここで理論的に問うまでもない。プロテアーゼの添加によって通常増殖されるはずであり、それによって、可能ならば感染培地へのタンパク質の添加なしで良好な収率を達成するウイルスの例は、インフルエンザウイルスおよびロタウイルスである。パラミクソウイルスおよびレオウイルスのような他の型のウイルスもまた、できる限りタンパク質の少ない培地からの増殖の間、有利である。