000)は炎症性サイトカインによって活性化される経路の重要な酵素であり、そのため癌治療薬の標的として注目されています。ヒスチジンタグを持つ24種類の切断型MK2を昆虫細胞系で一過性発現させ(翻訳後修飾を得るため)、可溶性発現量と精製効率に関するスクリーニングを行いました。HPとTecan液体処理ワークステーションを使用し、真空ポンプを用いたプロトコールに従って24種類すべてを平行して精製しました。溶出した画分をSDS-PAGE(図5.11)で分析した結果、発現/精製効率に大きな差が認められました。詳細については、参考文献5を参照してください。一過性発現の昆虫細胞系で72時間発現させたヒスチジンタグ切断型MK2の溶出液のSDS-PAGE分析。レーン06~31:ヒスチジンタグ切断型キナーゼ。E:高感度緑色蛍光タンパク質(タグなしトランスフェクション陽性コントロール)。C:トランスフェクションなしHi5細胞。