(FSM)蛍光スペックル顕微鏡法では、蛍光標識した高次構造のサブユニットを低濃度で細胞内に導入し、タイムラプス観察を行う。蛍光標識体は、高次構造に不均一に取り込まれ、斑点状のシグナル(スペックル)として画像化される。speckleであることが示されている。制御様式を定量的に明らかにしたことが挙げられる[1][5]。(qFSM)定量蛍光スペックル顕微鏡法は、主に蛍光スペックル顕微鏡法で観察されるアクチン動態解析に用いられる。膨大なアクチンスペックルデータをコンピュータ解析し、例えば、スペックルの出現/消失によりアクチン重合/脱重合の顕著な場所がヒートマップ様の分布で示される[2]。スペックル密度が高い場合、スペックルの融合や分離、近い場所での消失/出現を自動解析で正確に捉えることは困難であることが予想され、解析データにはエラーが含まれる可能性が指摘されている[6]。一分子ごとに斑点(スペックル)状のシグナルとして画像化され、葉状仮足アクチン線維流動を可視化することができる。(SiMS)単分子蛍光スペックル顕微鏡法は、蛍光スペックル顕微鏡法よりもさらに低密度の蛍光標識アクチンを発現する細胞について蛍光1分子ごとに可視化する顕微鏡法として紹介された。この手法では、2秒程度までのゆっくりとした露光時間を用いることで、蛍光標識アクチンが細胞内のアクチン線維と共重合した時のみ、自由拡散を止めて安定したシグナル(蛍光)を放出するため、斑点状のスペックルとして画像化される(図)[3]。この原理に基づいて、アクチン細胞骨格関連分子を中心とした他のタンパク質にも応用されており、分子の移動速度や、細胞構造への分子の結合・解離時間が精密に定量できる。speckleとは区別されるべきである。1分子レベルで直接現象を捉えるので、定量蛍光スペックル顕微鏡の解説で述べたようなエラーは回避できる。統計的に信頼できる情報を得るためには、十分な時間・空間に渡る解析を必要とする。単分子蛍光スペックル顕微鏡原法では、GFP融合タンパク質が蛍光標識体として用いられるが、低密度にGFPを発現する細胞を選別する作業は難しく、経験が必要であった。eSiMS)が開発された。新法では、蛍光標識したアクチンタンパク質を電気穿孔法(エレクトロポレーション)で直接細胞に導入することで、ほぼ100%の細胞で蛍光アクチンの単分子観察が可能となった[4]。Internationalのライセンスで利用できます。脳科学辞典について免責事項モバイルビュ。