上記のようにタンパク質濃度を決定した。NJ)を使用したSPRによって、VLのプロテインLとの相互作用に対する結合反応速度を測定した。870RUを研究等級のCM5センサーチップ(Biacore)上で固定化させた。製造業者によって供給されたアミンカップリングキットを使用して、10mMの酢酸緩衝液(pH4.5)において50μg/mlのタンパク質濃度で固定化を行った。50μl/分又は100μl/分の流量で150mMのNaCl、3mMのEDTA及び0.005%のP20を含む10mMのHEPES緩衝液(pH7.4)中、25°Cで全ての測定を行った。洗浄緩衝液で洗浄することにより表面を再生した。Inc.)を使用して、データを評価した。五量体VL及びVHの表面プラズモン共鳴SPRによって、HVHP328PVT2のプロテインAとの相互作用及びHVLP335PTV2のプロテインLとの相互作用に対する結合反応速度を決定した。520RUのプロテインA又は基準Fabを上記のように固定化した。VL五量体に関して、上記のように調製した同様の表面を使用した。上記のように測定を行ったが、流量は20μl/分であった。3秒間、50mMのHClで洗浄することによって、表面を再生した。単量体に関して記載のようにデータを評価した。細胞の微小凝集BHIプレート由来の黄色ブドウ球菌の単一コロニーを使用して、BHI培地15mLを接種した。細菌を37°C、200rpmで一晩成長させた。down)、上清を除去して、細胞ペレットをPBS緩衝液で再懸濁させた。細胞を再び遠心分離し、上清を除去して、細胞ペレットを再びPBS緩衝液で再懸濁させた。細胞をA600が1.0になるまで希釈し、段階希釈した細胞を37°CのBHIプレート上に広げて、一晩成長させた。翌朝、細胞力価を測定した。1.0が1.5×109細胞/mlに対応する。同一の工程を行い、成長培地が2xYTであったことを除いて、その後の微小凝集アッセイのために大腸菌株TG1細胞を調製した。1.0=2.1×109細胞/ml。微小凝集アッセイを行うために、マイクロタイタープレートにおけるウェル1〜ウェル11でPBSにおいてHVHP328PVT2の2倍希釈を行った。ウェル12(ブランク)はPBSのみを含んでいた。それぞれのウェルの全量は50μlであった。その後、PBS50μlにおける1×108個の黄色ブドウ球菌細胞を全てのウェルに加えて、プレートを4°Cで一晩インキュベートした。結果を永続的に記録するために、翌朝にプレートの写真を撮った。五量体の対照実験のために、HVHP328PVT2をVL五量体、HVLP335PTV2に置き換えた。細胞の対照実験において、同じ2個の組の実験を大腸菌TG1細胞で繰り返した。単量体のヒトVLの同定及び配列分析ヒトVHファージディスプレイライブラリから可溶性のVHを単離するために用いられた本質的に同じ選択方法を、可溶性で単量体のVLを単離するためにヒトVLライブラリに適用した。大きさが3×106であるヒトVLライブラリを構築した。ライブラリタイタープレートから24個のプラークを選別し、これらのVL遺伝子をPCR及びシークエンシングした。配列は、生殖細胞系起源に関して異なるが、VLの75%はVλ起源であった(データ図示せず)。プロテインLに対する3回のパンニングによって、大きいプラークにおける富化がもたらされた。39個の大きいプラークをシークエンシングして、32個の特殊な配列を同定した(図6)。HVLP325、HVLP335及びHVLP351はそれぞれ、3、4及び2の頻度で起こった。λクラス(サブグループVλ1、生殖細胞系1b)であるHVLP389を除いて、残りの31個のVLはVκクラスに属していた。31個のκVLの中で、24個はVκIIIサブグループに含まれ、7個はVκ1サブグループに含まれていた。24個のVκIII配列の16個は、残りの利用されるA27、L2及びL6生殖細胞系配列を有するL6生殖細胞系配列を利用する。Vκ1サブグループのVLはO2/O12又はA30生殖細胞系配列に由来する。顕著な突然変異は96位で起こった。この位置での生殖細胞系アミノ酸は芳香族及び疎水性アミノ酸、κVLに対するTrp、Phe、Tyr、Leu又はIle、及びλVLに対するTyr、Val又はAlaである。κVLの選択プールにおける31個の中の5個だけが96位でこれらの生殖細胞系アミノ酸を有している:HVLP325、HVLP349、HVLP388、HVLP3109及びHVLP393。96位での21個のアミノ酸を帯電させ、この中の20個が正に帯電する:Arg、Lys又はHis。2個のアミノ酸はPro、1個はGln、1個はSer、及び1個はThrである。単量体化のためにゲルろ過クロマトグラフィで分析された7個のκVLの中で96位がArg又はLysである6個が単量体であった一方で、96位が生殖細胞系アミノ酸LeuであるHVLP325が凝集体を形成した(以下を参照のこと)。有していたHVLP389も単量体であった(以下を参照のこと)。これらのデータは単量体化等のVLの生物物理学的特性が改良された96位での生殖細胞系アミノ酸からの偏差に相関がある(32個の中の27個)。κクラスの18個のVLは、λVLでのみ見出されるアミノ酸Thr、Val及びLeuに置き換えられたこれらの最後の3残基(105〜107)を有していた。換はκVLの生物物理学的特性を改良する役割を果たしている可能性があり、これにより105〜107位の元のκ残基を有する親クローンを超えた上記のVLの選択がもたらされる。ヒトVLの特徴付け異なるV生殖細胞系起源を有する選択VLの中の8個は、培養液1L中の大腸菌で発現し、精製された:HVLP324、HVLP325、HVLP335、HVLP342、HVLP351、HVLP364、HVLP389及びHVLP3103(第6表)。全てがHVLP324に対する6.2mgからHVLP335及びHVLP364に対する約75mgまでに及ぶ良好な収率で発現した。【0059】ゲルろ過クロマトグラフィによるこれらのオリゴマー化状態に関するヒトVLの凝集傾向を評価した。VLを0.6mg/mlの濃度でSuperdex75ゲルろ過クロマトグラフィにかけた。HVLP325を除いた全てが凝集体を本質的に含んでおらず、平均見掛けの分子質量が12.7kDa(範囲、6.2〜19.2kDa)である対称の単一ピークを得た(図7A及び第3表)。これは単量体のVLに関する期待分子質量(13.4〜13.8kDa)と一致している。HVLP325に関して、凝集体が全タンパク質(凝集体+単量体)の11%を構成していた。HVLP351、HVLP342、HVLP335及びHVLP3103は、これらの利用可能な最も高い濃度、すなわちそれぞれ、0.89mg/ml、1.0mg/ml、4.9mg/ml及び5.9mg/mlで試験した場合、依然として単量体であった(図7B)。【0060】BIACORE分析前に、VLをSuperdex−75クロマトグラフィにかけて、物質の凝集に何ら確証がなかったとしても精製した単量体のピークを回収した。SPR分析において、全ての選択されたVLは、プロテインLと結合した(図8)。VLがプロテインLに対するパンニングによって単離されたので、このことは予想外のことではなかった。全てに関して、プロテインLとの結合のKDは、0.6〜3μMであった(第3表)。HVLP324及びHVLP342はKDがそれぞれさらに10nM及び40nM小さかった。VκIサブグループのVLのプロテインLとの低い親和性及び高い親和性の結合が、これまでに報告されている(参考文献)。HVLP324及びHVLP342の両方がVκIサブグループに属している(第3表)。予想通りに、速度論データ及び平衡データは、実際に単量体である単量体ピークと一致していた。表面プラズモン共鳴によって、HVHP328PVT2五量体のプロテインAとの結合及びHVLP335PTV2五量体のプロテインLとの結合を測定した(図9)。会合速度をkobs対濃度のプロットから独立して算出した。五量体の集合の間の多価結合における不均一性によって、1を超えた解離速度(kd)を算出することができる。したがって、1を超えた平衡解離定数(KD)を得ることができる。HVHP328PTV2及びHVLP335PTV2はそれぞれ、2nM及び200pMの最小KDを有していた(第4表)。kdがより遅い場合、HVHP328PTV2及びHVLP335PTV2はそれぞれ、900pM及び90pMまで低いKDを有していた。VL及びVHによる病原菌検出VHのプロテインA結合活性及びVLのプロテインL結合活性を使用して、これらの表面上にプロテインA及び/又はプロテインLを有する細菌を検出することができる。本明細書中のVH及びVL等のVH及びVLが可溶性であり、且つ単量体である(凝集傾向が失われている)場合、このことは可能である。ラクダ科の重鎖抗体又はナースシャーク及びテンジクザメのIgNAR等の軽鎖が欠失した抗体由来の可変ドメインは、自然発生的に可溶性且つ単量体である。このことから、プロテインA結合活性及びプロテインL結合活性を有するものを使用して、これらの表面上にプロテインA及び/又はプロテインLを有する細菌を検出することもできる。プロテインAは、病原菌である黄色ブドウ球菌の表面上に存在する。このように、本明細書中に記載のもの等のプロテインA結合活性のあるVHを使用して、黄色ブドウ球菌を検出することができる。VH五量体の黄色ブドウ球菌と結合する能力を検出した。マイクロタイターウェル(ウェル1〜ウェル11)において2倍希釈したHVHP328PVT2で一定数の細菌細胞をインキュベートした(図10)。ウェル12は五量体の代わりに緩衝液を含んでいた。VHが細菌細胞と結合する場合、したがってその多量体の性質により、五量体は細胞を架橋し、その結果、細胞凝集をもたらすことが可能であるはずである。凝集細胞がマイクロタイターウェルにおける拡散細胞として現れる(図10)。何の結合もなければ、凝集は起こるはずがなく、したがって凝集体は存在せず、細胞はウェルの底部に点として現れる。図10で示されるように、細胞の凝集体が存在するので、五量体は黄色ブドウ球菌と結合する。凝集体は最大ウェル7まで観察される。ウェル7より先は、五量体の濃度が結合するには低すぎるので、凝集体は存在しない。対照のVL五量体は、全く凝集を示さず、これによりVH五量体の黄色ブドウ球菌に対する特異性が実証される(図10)。予想通りVH五量体が大腸菌(TG1株)又はサルモネラ細胞を凝集させないので、結合は細胞特異的でもある(データは示さず)。同様に、これらの細胞表面上にプロテインLを有する細菌、特にペプトストレプトコッカス属マグヌス等の病原菌の検出にプロテインL結合活性を有するVL単量体及びVL五量体を使用することができる。上記で記載の実施例は、本発明の実際の範囲を限定する役割を果たすものでは決してなく、むしろ例示目的のために表されていることが理解される。【図1】選択された実施例の結果(可溶性VH(HVHP428)を示すファージと不溶性VH(BT32/A6)を示すファージとの間のプラークサイズの対比)の図的記述を示す。この写真はプラークの可視化を高めるために拡大した細菌層の寒天プレートの一部を示す。プレートは、それぞれ同じ数の2個のプラーク型を含んでいたが、この写真は基本的に大きいHVHP428プラークを含んでいる。BT32/A6プラークの大多数は小さすぎて写真において鮮明ではっきりした画像を得ることができなかった。矢印で示されたプラークは、この画像で可視化させるのに十分大きかった小さい割合のBT32/A6ファージを示している。アスタリスクは、HVHP428ファージの代表的なプラークサイズを示す。プラークの同一性は、DNAシークエンシングによって決定された。【図2】プロテインAに対する親和性及びプラークサイズに基づき選択されたヒトVHのアミノ酸配列。entries)の点は、HVHP2M10又はHVHP44とアミノ酸が同一であることを示す。ダッシュ記号は配列アラインメントのために含まれている。鍵となる可溶性部分の残基及びプロテインA結合特性を有するVH/VHHに関連する57T残基は太字である。カバットナンバリングシステムを使用する。「頻度」の値の総計は114である。seqは生殖細胞系の配列である。【図3A】ヒトVHの凝集傾向。ゲルろ過クロマトグラムによって、この研究で単離したヒトVH(HVHP428)のオリゴマー化状態をラマVHH(H11C7)及び典型的なヒトVH(BT32/A6)のものと比較する。それぞれのクロマトグラムの最後に溶離したピークは単量体のVHに対応する。二量体のH11C7のピークは矢印によって示される。左側のパネルのスペクトルは、低強度のシグナルのより良好な視覚化を可能にするように2倍に拡大されている。【図4A】37°Cでのトリプシンに対する耐性及び37°Cでの長期のインキュベート後の完全性に関するヒトVHの安定性。21kDaのマーカーに対して未処理のHVHP414VHと15、30及び60分でトリプシン処理したHVHP414VHとの移動度を比較するSDS−PAGE。HVHP414−cMycは、c−Mycを欠失したHVHP414VHを示す。【図4B】37°Cでのトリプシンに対する耐性及び37°Cでの長期のインキュベート後の完全性に関するヒトVHの安定性。未処理のHVHP414VH及びトリプシン処理(60分)HVHP414VHの質量分析法によって得られた分子質量プロファイル。処理済VHの質量分析プロファイルを未処理のVHのものの上に重ねて、より良好な視覚的比較を行う。未処理のVHの実験の分子質量は、14967.6Daであり、これは期待分子質量14967.7Daとほぼ同一である。トリプシン処理したVHで観察された分子質量(13368.5Da)は、c−MycタグにおけるK(Lys)での切断によるC末端での13アミノ酸の欠失を示し、期待分子質量13368.0Daを与える。トリプシン切断部位は、HVHP414のアミノ酸配列上の垂直な矢印によって示される。【図4C】37°Cでのトリプシンに対する耐性及び37°Cでの長期のインキュベート後の完全性に関するヒトVHの安定性。37°Cで処理したHVHP420VHのオリゴマー化状態(上方のプロファイル)と未処理のVH(下方のプロファイル)のものとの比較をするゲルろ過クロマトグラム。重ねるとクロマトグラムが区別できないので、このクロマトグラムを垂直に移動させた。それぞれのクロマトグラムの主なピーク及び微小ピークは、それぞれ単量体のVH及び二量体のVHに対応する。二量体のVHは、全タンパク質の3%を構成する。挿入図は、様々な濃度でのプロテインAとの37°Cで処理したHVHP420の結合に関するセンサーグラムオーバーレイを示す。温度安定性試験に使用されるVHは、既に4°Cで数ヶ月間調製したストック由来であった。【図5】天然HVHP423(太線)及びリフォールディングしたHVHP423(細線)の75、100、150及び200nMの濃度で固定化されたプロテインAとの結合を示すセンサーグラムオーバーレイ。KDn及びKDrefがそれぞれのセンサーグラムから算出され、以下で記載のようにREを求めるのに使用した。【図6】プロテインLに対する親和性及びプラークサイズに基づき選択されたヒトVLのアミノ酸配列。入力配列における点は、HVLP333とアミノ酸が同一であることを示す。ダッシュ記号は配列アラインメントのために含まれる。BASE(http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/index.php?module=pagemaster&PAGE_user_op=view_page&PAGE_id=7&MMN_position=5:5)を参照されたい。L6、A27、L2、L16、O2/O12、A30及び1bは、V生殖細胞系設計である。J生殖細胞系設計は括弧内である。【図7A】ヒトVLドメインのサイズ排除クロマトグラム。VLを0.6mg/mlの濃度で添加した。「#」及び「*」は、それぞれ凝集体及び単量体のピークを示す。凝集体は排除体積で溶出する。【図7B】ヒトVLドメインのサイズ排除クロマトグラム。VLを利用可能な最も高い濃度(1.0mg/mlのHVLP342、5.9mg/mlのHVLP3103、4.9mg/mlのHVLP335、0.89mg/mlのHVLP351)で適用した。「#」及び「*」は、それぞれ凝集体及び単量体のピークを示す。凝集体は排除体積で溶出する。HVLP342パネルにおける矢印で示されたピークは、前の測定からのキャリーオーバーである。【図8】0.2、0.5、0.75、1、2、3、5及び10μM(HVLP389、HVLP351及びHVLP364);1、2、3、5、7.5及び10nM(HVLP342);0.2、0.5、1、2、3、5及び10μM(HVLP335);0.2、0.5、1、1.5、2及び5μM(HVLP325);0.2、0.5、0.75、1、1.5、2、3及び5μM(HVLP3103);並びに1、2、3、4、5及び6nM(HVLP324)の濃度で固定化されたプロテインLとのVLの結合を示すセンサーグラムオーバーレイ。プロテインLの低親和性部位と結合するHVLP324及びHVLP342に関するセンサーグラムは含まれないが、算出されたKDは第3表に記録される。【図9A】表面プラズモン共鳴実験におけるプロテインAとHVHP328PTV2との結合を示す図である。1、2、3、4、6、8及び10nMの濃度で固定化したプロテインAとHVH28PTV2との結合を示すセンサーグラムオーバーレイ。結合データは第4表に記録される。【図9B】表面プラズモン共鳴実験におけるプロテインLとHVLP335PTV2との結合を示す図である。1、2、2.5、3、3.5、4及び4.5nMの濃度で固定化したプロテインLとHVH335PTV2との結合を示すセンサーグラムオーバーレイ。結合データは第4表に記録される。【図10】黄色ブドウ球菌による微小凝集実験の結果を示す図である。五量体の濃度は、ウェル1からウェル11まで2分の1ずつに減少し、ウェル12は五量体がPBS緩衝液で置き換えられている。上の行のウェルはHVHP328PTV2五量体を含み、下の行はHVLP335PTV2五量体を含む。ウェル1〜6の五量体の濃度はそれぞれ、215、108、54、27、13及び7μg/mlである。lawn)の感染を可能にすること、(c)前記細菌層上の平均よりも大きいプラークを形成するファージを同定することを含む、標的ポリペプチドを同定する方法。前記標的ポリペプチドが可溶性である、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが単量体である、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが非凝集性である、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが高発現性である、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが安定である、請求項1に記載の方法。前記ファージが繊維状ファージである、請求項1に記載の方法。前記ファージがM13又はfdである、請求項7に記載の方法。前記安定なポリペプチドが比較的高い熱リフォールディング効率を有する、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドが比較的高い融解温度を有する、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドが37°Cでの長期のインキュベート後にこれらの機能性を維持する、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドが化学変性剤に比較的耐性がある、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドがプロテアーゼに比較的耐性がある、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドが室温以上で、4°C、又は0°C未満で比較的長期の保存期間を有する、請求項6に記載の方法。前記安定性のポリペプチドが、細胞内環境において機能的である、請求項6に記載の方法。前記安定なポリペプチドが、ヒト体内に投与される場合に機能的である、請求項6に記載の方法。【請求項17】(d)工程(c)の前記より大きいプラークファージを単離する工程と、(e)前記より大きいプラークファージにより発現される前記ポリペプチドの配列又は他の特徴を決定する工程とをさらに含む、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが抗体又は抗体のフラグメントである、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドがヒトVH抗体フラグメント又はヒトVL抗体フラグメントである、請求項18に記載の方法。前記標的ポリペプチドがワクチンである、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが治療用タンパク質である、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドが、一本鎖T細胞受容体、T細胞受容体ドメイン、トランスフェリン、リポカリン、kunitzドメイン、アンキリン反復、及び細胞傷害性Tリンパ球関連抗原から成る群より選択される、請求項1に記載の方法。前記標的ポリペプチドがタンパク質性の診断用試薬及び生化学試薬である、請求項1に記載の方法。配列番号8〜配列番号54から成る群より選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のCDR3部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のFR1部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のFR2部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のFR3部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のFR4部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のCDR2部分を含むポリペプチド。請求項24に記載のアミノ酸配列のCDR1部分を含むポリペプチド。配列番号8〜配列番号22から成る群より選択される少なくとも1個のアミノ酸配列を含むVH抗体フラグメント。配列番号23〜配列番号54から成る群より選択される少なくとも1個のアミノ酸配列を含むVL抗体フラグメント。請求項41に記載の少なくとも2個のアミノ酸配列を含むVH抗体フラグメント。請求項42に記載の少なくとも2個のアミノ酸配列を含むVL抗体フラグメント。請求項41に記載の少なくとも3個のアミノ酸配列を含むVH抗体フラグメント。請求項42に記載の少なくとも3個のアミノ酸配列を含むVL抗体フラグメント。請求項41、44又は47に記載の少なくとも2個のVH抗体フラグメントを含む多量体。請求項42、45又は48に記載の少なくとも2個のVL抗体フラグメントを含む多量体。請求項41、44又は47に記載の少なくとも1個のVH抗体フラグメント及び請求項42、45又は48に記載の少なくとも1個のVL抗体フラグメントを含む多量体。請求項41、44又は47に記載の2個のVH抗体フラグメントを含む二量体。請求項42、45又は48に記載の2個のVL抗体フラグメントを含む二量体。請求項41、44又は47に記載の3個のVH抗体フラグメントを含む三量体。請求項42、45又は48に記載の3個のVL抗体フラグメントを含む三量体。請求項41、44又は47に記載の5個のVH抗体フラグメントを含む五量体。請求項42、45又は48に記載の5個のVL抗体フラグメントを含む五量体。請求項1に記載の方法で同定されるVH抗体フラグメント。【請求項60】ヒト起源のものである、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。第1表に示される対応する親の生殖細胞系(germline)配列由来のアミノ酸配列を有する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項62】VH3ファミリーに属する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項63】DP47、V3−49、DP−38、V3−53、YAC−5及び8−1Bから成る群より選択されるV生殖細胞系に属する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項64】JH4b、JH6c、JH3b、JH4、JH3a及びJH1から成る群より選択されるJ生殖細胞系に属する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項65】そのアミノ酸配列の37位にバリン以外の残基を有する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項66】そのアミノ酸配列の37位にフェニルアラニン残基を有する、請求項63に記載のVH抗体フラグメント。【請求項67】そのアミノ酸配列の37位にチロシン残基を有する、請求項63に記載のVH抗体フラグメント。【請求項68】そのアミノ酸配列の1、5、6、35、83、84、84a及び108位から成る群より選択される位置で突然変異を有する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。【請求項69】プロテインAと結合する、請求項59に記載のVH抗体フラグメント。請求項1に記載の方法で同定されるVL抗体フラグメント。【請求項71】ヒト起源のものである、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項72】Vκ1、Vκ3又はVλ1のサブグループに属する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。κクラスに属する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項74】L6、A27、L2、L16、O2/O12、A30及び1bから成る群より選択されるV生殖細胞系に属する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項75】Jκ1、Jκ4、Jκ2及びJλ3bから成る群より選択されるJ生殖細胞系に属する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項76】そのアミノ酸配列の96位にアルギニン、プロリン、リシン、スレオニン、ロイシン、セリン、チロシン、グルタミン酸、グルタミン又はヒスチジン残基を有する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項77】そのアミノ酸配列の96位に荷電アミノ酸残基を有する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項78】プロテインLと結合する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。【請求項79】そのアミノ酸配列の105、106及び107位にスレオニン、バリン又はロイシンのアミノ酸残基を有する、請求項70に記載のVL抗体フラグメント。請求項1に記載の方法で同定されるポリペプチド配列。請求項80に記載のポリペプチド配列を使用して構築されるディスプレイライブラリ。請求項24、59又は70に記載のポリペプチド配列を使用して構築されるディスプレイライブラリ。請求項41、42、44、45、47又は48に記載のVH抗体フラグメント又はVL抗体フラグメントを使用して構築されるディスプレイライブラリ。請求項27、37又は39に記載のポリペプチド配列を使用して構築されるディスプレイライブラリ。請求項24、59又は70に記載のポリペプチドのループ(L1、L2、L3、H1、H2又はH3)領域を使用して構築されるディスプレイライブラリ。【請求項87】ファージディスプレイライブラリである、請求項82〜86のいずれか一項に記載のディスプレイライブラリ。vitro区画化ライブラリである、請求項82〜86のいずれか一項に記載のディスプレイライブラリ。望ましい生物物理学的特性を有するポリペプチドを調製する方法であって、a)請求項41、42、44、45、47、48、59若しくは70に記載の抗体フラグメントをコードするか、又は請求項24、27、37若しくは39に記載のポリペプチド配列をコードし、且つ第1の望ましい特性を有する少なくとも1個の第1の核酸配列を提供する工程と、b)第2の望ましい特性を有する抗体フラグメントをコードする少なくとも1個の第2の核酸配列を提供する工程と、c)前記少なくとも1個の第1の核酸配列及び前記少なくとも1個の第2の核酸配列をランダムなフラグメントに切断する工程と、d)前記ランダムなフラグメントを再び集合化させる工程と、e)前記ランダムなフラグメントを発現する工程と、f)前記発現されたランダムなフラグメントを前記第1の望ましい特性及び前記第2の望ましい特性に関してスクリーニングする工程とを含む、方法。(monomericity)、高発現性、ヒト起源及び結合特異性から成る群より選択される、請求項89に記載の方法。ヒト起源及び結合特異性から成る群より選択される、請求項89に記載の方法。前記少なくとも1個の第2の抗体フラグメントが非ヒト起源のものである、請求項89に記載の方法。前記少なくとも1個の第2の抗体フラグメントがヒト起源のものである、請求項89に記載の方法。前記少なくとも1個の第2の抗体フラグメントがヒトVH又はヒトVLである、請求項89に記載の方法。vitro区画化によって達成される、請求項89に記載の方法。請求項26又は81に記載の核酸配列を含む組換えベクター。請求項98に記載の組み換えベクターで形質転換される宿主細胞。ekouhou.net。