blotting(和泉孝志)1.はじめに通常SDSーPAGE後、メンブレンフィルターに吸着させたタンパク質を特異抗体を用いて検出する方法である。ブロッティング方法として(1)水槽型、(2)セミドライ型があるが、ここでは操作が簡単で速いセミドライ型について述べる。A法(抗体ではない、高感度)などがあるが、ここでは操作が簡単で基質の安全性の高いAP法について述べる。5μlを同時に流しておくとマーカーとして、またブロティング効率の推定のために便利。μetc.)操作が簡単でブロッキングも短くてよいが泳動しすぎる危険がある。etc)主にシークエンス用、ブロッキングを長くする必要あり。泳動しすぎる危険はない。メタノール(数秒)、転写液(15分)にて湿しておく必要がある。その後乾かしてはいけない。ここでは1について述べる。