Abstract今回我々は、これらのヒト免疫グロブリン遺伝子導入マウスを用いて、ヒト型抗TSH受容体抗体の作製と同抗体遺伝子解析を試みることにした。この研究によって、以前困難であつた高親和性ヒト型抗TSH受容体抗体の作製や抗体産主に使用される可変部遺伝子断片を解析の検討を予定している。本年度は、以下の点を研究した。tagを融合させた可溶型TSHRの作成を行った。PAK9トランスファーベクターに組み込んだ。PAK6ウイルスDNAをSf9昆虫細胞にリポフェクション法によりトラシスフェクトし、これらDNAを昆虫細胞内で相同性組み替えを起こさせ、可溶型TSHRcDNAを組み込んだウイルスを作成した。five昆虫細胞に感染させ、可溶型TSHRを発現させた。作成しHistagを利用したニッケルアフィニティカラムによりそれぞれ精製を行い、可溶型TSHRの発現をウエスタンブロットはより確認した。供給してもらうめどがついた。今後、TSH受容体蛋白をゼノマウスに免疫し、ハイブリドーマ法によるヒト型モノクローナル作製の予定である。