用いれば、培養液の温度を変化させることによって培養した細胞を基材から剥離させ回収することができる。【従来の技術】今日の細胞培養技術は、1)細胞産生物の生産、2)生体の病変部や欠損部への補綴材、3)薬剤の毒性および薬理活性評価用のシュミレーターなどに利用されている。【0003】以下に上記の応用分野を中心として従来技術について概観する。【0004】今日、細胞培養に使用されている動物細胞は2種類に分類される。cells)と接着依存性細胞(anchoragedependentcells)である。細胞機能が細胞の足場である基質が存在しなくても正常に発現される細胞である。典型的な例としてミエローマ細胞、リンホーマ細胞などから形成されるハイブリドーマがあげられる。細胞機能が細胞の足場である基質が存在しなくては正常に発現されない細胞である。初代培養細胞をはじめとした正常二倍体細胞の大部分は接着依存性である。無限に増殖可能な樹立細胞系にも、接着依存性を示すものが数多く知られている。インターフェロン、インターロイキンなどのサイトカイン類、エリスロポエチン、コロニー・ステュミレイティング・ファクター、トロンボボエチンなどの各種分化成長ホルモン、組織プラスミノーゲンアクチべーター、ワクチンなどの有用な細胞産生物を生産する樹立細胞系にも接着依存性を示すものが多く知られている。従って、これら有用な細胞産生物の生産のためにも接着依存性細胞の培養技術の確立は非常に重要である。【0006】一般に細胞を物質生産のために利用する場合、細胞を高機能を維持した状態で大量にかつ高密度に培養することが重要である。ところが、動物細胞は微生物細胞と比較して老廃物の蓄積および酸素をはじめとした栄養物の供給不足の影響を受け易く、高密度で大量に培養する時にその機能を維持することが極めて困難である。場合には、浮遊培養法が最も適当であると考えられている。撹拌下に浮遊培養法を行えば、細胞老廃物の速やかな除去および栄養物の効率的な供給が可能であり、大量かつ高密度化を目的とした装置のスケール・アップが容易だからである。接着依存性細胞の場合には、細胞の足場としての基質が必要なために浮遊培養法を適用することができない。そこで従来、種々の接着依存性細胞の培養器が開発されてきた。実験室的に少量の細胞を培養する場合には、一般的にはデイッシュ型、フラスコ型、プレート型などの細胞培養器が広く使用されている。これらの容器は細胞を大量に効率良く培養したい場合には不適当である。このため、細胞が接着する基質面積を全体の容積に対して大きくすることによって大量培養を可能にするために、以下のような工夫が行われてきた。マイクロビーズを培養液中に浮遊させマイクロビーズ表面に細胞を接着させて撹拌下に培養を行う疑似浮遊培養法(マイクロビーズ培養法)である。【0009】以上のように、細胞を高密度で大量培養することにより有用な細胞産生物を効率良く大量に生産させるために、培養装置および培養基材の形状に重点をおいた開発が従来進められてきた。活性あるいは機能維持および発現には培養基材の性質が著しく関連していることがわかってきて、上述したように培養基材の形状により酸素をはじめとした栄養素の効率的供給あるいは細胞老廃物の効率的除去のみでは細胞を長期間にわたり、その活性および特異的な機能を維持した状態で培養することがほとんど不可能であるということがわかってきた。機械的物性および成型性、低コストなどの点からポリスチレンが広く使用されている。ポリスチレン表面は疎水性が強く、細胞活性維持のために細胞の接着が著しく阻害されるという重大な欠点を有している。そこでポリスチレン表面をコロナ放電処理することにより表面にのみ陰イオン基を導入し親水性を付与することにより細胞の接着、増殖性を改善した細胞培養基材が開発され広く使用されている。機能を向上させる研究が行われてきた。細胞外マトリックスを細胞基材に組合せる方法である。【0010】ところで、生体内での細胞外マトリックスの機能についての研究が近年急速に進み、従来から知られていた細胞を支持、固定化するという単純な受動的な役割だけではなく、細胞機能を能動的に制御する機能も有していることが分かってきた。【0011】例えば、細胞外マトリックスの主成分であるコラーゲンには10種以上あることが発見されており、それぞれのコラーゲンは決まった細胞によって合成され、一定の組織に局在し、そして異なる細胞機能を制御する役割を有していることが解明されつつある。同一タイプのコラーゲンでも、高次構造の変性あるいは種々の官能基を導入するなどの改質によっても細胞機能に影響があることがわかってきた。【0012】また、細胞外マトリックスの第2成分である、フィブロネクチン、ラミニン、ビトロネクチン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカンなどは、コラーゲンおよび細胞膜に対して特異的な結合部位を有し、細胞の基質への接着に重要な役割を果たしている。接着性タンパク質はそれぞれ一定種の細胞、コラーゲンに特異的に結合する。フィブロネクチンは主として繊維芽細胞およびI型、II型のコラーゲンに、ラミニンは上皮、内皮細胞およびIV型コラーゲンにそれぞれ特有の結合部位を有している。上記の細胞外マトリックス以外にも細胞機能に大きな影響を与えるものとしてコラーゲンの熱変性物であるゼラチン、細胞膜上の糖鎖に特異的に結合するレクチン、フィブロネクチンなどの結合部位である接着性オリゴペプチド、イガイから得られた細胞接着蛋白等が知られている。22(3).24A.1986)などが開発され、細胞接着および増殖効果の改善が認められている。生体由来の細胞外基質のかわりにガラクトース末端を側鎖に有するポリスチレンをコーティングした基材(赤池敏宏ら、人工臓器、17.227.1988)が開発され特に肝細胞の接着性の向上および生存性の維持が認められている。従来、培養条件が厳しく接着が非常に困難であった細胞も上記したような方法で表面を処理した培養基材を用いることによって培養が可能になってきた。くみこんだ培養基材の開発が進んできたにも拘らず、現在の技術には下記のような重大な問題点が残されていた。【0013】接着依存性細胞の重要な特徴は、細胞が培養基材に接着し、増殖し、基材表面を完全に覆ってしまうとコンタクト・インヒビションという機能が働きそれ以上の細胞増殖が停止してしまうという性質である。したがって細胞を更に増殖させるためには細胞を新しい培養基材に植え替える継代操作が必要となる。【0014】従来、基材表面に接着し、増殖した細胞を脱離させる継代操作にはトリプシン、コラゲナーゼ、などの蛋白分解酵素、カルシウムイオンの錯体化合物であるEDTAなどが一般的に用いられてきたがこれらの細胞脱離剤は下記のように細胞機能および細胞培養工程に重大な障害をもたらす。【0015】1)従来の細胞脱離剤は培養基材と細胞の間の結合を破壊するのみならず細胞と細胞の間のあらゆる結合を破壊してしまう。細胞間の結合にはタイトジャンクション、ギャップジャンクション、デスモゾームと呼ばれる3種類の結合様式があることがわかっていて、細胞同士が集合してタイトジャンクションが形成されると細胞集合体としての物質透過に対してのバリヤーとしての働き生体内部の特異的環境が維持される。ギャップジャンクションが形成されるとその結合を通じて隣り合う細胞間の情報および物質の交換が行われる。デスモゾームはタイトジャンクション、ギャップジャンクションの結合が維持されるように細胞集合体を機械的に保持する。P.673.1983)。したがって従来の細胞脱離剤は高度に機能が維持された状態で培養された細胞に対しても継代時に致命的な障害を与えてしまう。【0016】2)細胞膜上にはホルモン、神経伝達物質などの種々の信号物質に対するリセプターが存在し、細胞はこれらの信号物質とリセプターの特異的反応により遠隔制御を受けかつ行っている。al..BiochemPharmocol.38.696.1989)。したがって従来の技術によって継代された細胞を特異的生理活性を有する信号物質によりその機能をコントロールすることはほとんど不可能である。【0017】3)一般的に細胞培養液中には栄養素として血清が添加されていて血清中には強力なトリプシン阻害物質が存在する。このため、トリプシン処理の継代時には、あらかじめ緩衝液で充分細胞を洗浄しトリプシン阻害物質を除去しておくことが必要である。この洗浄工程は操作を煩雑にするばかりでなく細胞培養にとって致命的な汚染の重大な原因にもなる。述べたように細胞外マトリックスなどの細胞の接着、増殖、分化などの機能の発現を促進させる因子を用いた培養基材の進展にもかかわらず、細胞を回収、継代する際に従来の細胞脱離剤を用いれば上述(1)、(2)の理由によりせっかく維持された細胞の高機能性が著しく損なわれることになる。この問題が高機能性を維持した細胞を培養する技術の大きな障害になっている。【0018】一方、従来の細胞脱離操作は大量培養技術にも致命的な欠点をもたらす。接着依存性細胞は培養液中の初期細胞濃度が低すぎると細胞は基質に接着しても増殖および物質産生機能を十分に発揮することができないといわれている。採取が困難な初代培養細胞あるいは正常二倍体細胞などの場合は、初めから大容量の培養液中で培養することは細胞濃度が低くなりすぎるので、小容量の培養装置を用いて段階的に細胞継代を繰り返しながら大容量化しなければならない。通常、大量培養時には数回の細胞回収、継代の操作が必要になる。したがって(3)の理由により従来の細胞脱離法は特に大量培養時の致命的欠隔である操作装置の煩雑化および汚染の大きな危険性にもつながることになる。用いた細胞培養技術を開発してきた。その後の本発明者らによる検討により、細胞の接着性および増殖性が非常に良好でかつ増殖した細胞を効率よく回収するのに適した基材の条件は、細胞の種類によって微妙に異なることが明らかになった。簡単に判定できるようにした。正確に判定できないことが明らかになった。提供することを目的とする。提供する本発明により達成された。使用する細胞接着性物質は、試料として与えられた細胞を変性することなく接着する物質を1以上含み、コラーゲンを50%以上含有するものを意味する。含有させることができるコラーゲンの種類は、特に限定されない。したがって、各種タイプのコラーゲン単体やそれらの混合物を広く用いることができる。凝集し沈殿する特徴を有する。LCSTより高い温度では非水溶性で固体状態であり、温度をLCSTより低くすることによって可逆的に水溶性になる。とからなる層を足場として細胞が接着、増殖することができる。温度をLCST以下にすることによって高分子化合物は水に可溶性になるため増殖した細胞は足場を失い、細胞間の結合を損なわずしかも細胞膜表面のタンパク質を損傷することなく増殖細胞を回収することができる。とからなる本発明の基材を用いれば、トリプシンやEDTAといった剥離剤を使用せずに、機能を損なうことなく細胞を簡単に剥離して回収することができる。しては、ポリN置換アクリルアミド誘導体、ポリN置換メタアクリルアミド誘導体およびこれらの共重合体、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキサイド、エーテル化メチルセルロース、ポリビニルアルコール部分酢化物などが挙げられる。好ましいのは、ポリN置換アクリルアミド誘導体、ポリN置換メタアクリルアミド誘導体またはこれらの共重合体、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルアルコール部分酢化物である。【0025】好ましい高分子化合物を以下にLCSTが低い順に列挙する。【0026】ポリ−N−アクリロイルピペリジン;ポリーN−n−プロピルメタアクリルアミド;ポリーN−イソプロピルアクリルアミド;ポリーN,N−ジエチルアクリルアミド;ポリーN−イソプロピルメタアクリルアミド;ポリーN−シクロプロピルアクリルアミド;ポリーN−アクリロイルピロリジン;ポリーN,N−エチルメチルアクリルアミド;ポリーN−シクロプロピルメタアクリルアミド;ポリーN−エチルアクリルアミド上記の高分子は、単一の単量体を重合したものであっても、他の単量体と共重合したものであってもよい。いずれであってもよい。一般的には、親水性単量体と共重合するとLCSTは上昇し、疎水性単量体と共重合するとLCSTは下降する。したがって、これらを適宜選択することによって所望のLCSTを有する高分子化合物を得ることもできる。【0027】親水性単量体としては、N−ビニルピロリドン、ビニルピリジン、アクリルアミド、メタアクリルアミド、N−メチルアクリルアミド、ヒドロキシエチルメタアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシメチルメタアクリレート、ヒドロキシメチルアクリレート、酸性基を有するアクリル酸、メタアクリル酸およびそれらの塩、ビニルスルホン酸、スチルスルホン酸およびそれらの塩、ビニルスルホン酸、スチルスルホン酸など、並びに塩基性を有するN,N−ジメチルアミノエチルメタクリレート、N,N−ジエチルアミノエチルメタクリレート、N,N−ジメチルアミノプロピルアクリルアミドおよびそれらの塩などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。しては、エチルアクリレート、メチルメタクリレート、グリシジルメタクリレートなどのアクリレート誘導体およびメタクリレート誘導体、N−n−ブチルメタアクリルアミドなどのN置換アルキルメタアクリルアミド誘導体、塩化ビニル、アクリロニトリル、スチレン、酢酸ビニルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。分子量が1.0x105以上であるのが好ましい。好ましくは1.0x106以上である。含有する層が細胞を播種したときにその一部が剥離してしまうため、十分に細胞を脱離することができない。ここでいう分子量とは、粘度から求めた平均分子量をさす。ポリ−N−イソプロピルアクリルアミドの平均分子量と極限粘度との関係は、下記の式で表される。層状構造状に有しており、かつ、該基材が、細胞接着性物質の架橋されている部分の架橋の程度が異なる複数の部分を有しているところにある。【0032】細胞接着性物質の代表例であるコラーゲンは一般に培養状態において線維を形成し、生体内と同様の構造をとることが知られている。このように線維を形成したコラーゲンは、培養液に溶解することはほとんどない。コラーゲンが共存する系においては、コラーゲンが本来有する線維形成能を十分に発揮することができないため、細胞が基材に接着する前に基材中のコラーゲンの一部が培養液に溶出してしまう。その結果、細胞の接着性や増殖性が悪くなって系の利用性を損なう場合もある。かかる事態に対処するために、本発明者らは先にコラーゲンに部分的に架橋が導入されている細胞培養用基材を開発した。架橋を導入することによって、コラーゲンは培養液に対して不溶性になるため、細胞を基材に十分に接着させることができるのである。【0033】一方、細胞は細胞膜表面にモザイク状に存在する結合サイトにより細胞培養用基材に接着して増殖する。この接着様式は多点接着であるため、接着点の数が多ければ多いほど細胞の接着強度は強くなって剥離しにくくなる。従って、細胞培養用基材からの剥離性が悪い細胞を培養する際は、このような接着点をある程度少なくする方が有利である。層状構造に形成されている細胞培養用基材を用いれば、接着点の数を制御して剥離性をコントロールしやすくなる。細胞培養の容易性は、このような構造のみならず、架橋が導入されている部分の架橋の程度によっても左右される。一般的な傾向として、架橋の程度を大きくすると細胞の接着、増殖性は増し、剥離性は低下することが明らかになっている。逆に、架橋の程度を小さくすると、細胞の接着、増殖性は悪くなるが、剥離性は良くなる。最適な架橋の程度を正確に予測することは極めて困難であるため、何らかの試験用基材を用いてあらかじめ最適条件を決定しておくことが不可欠である。架橋の程度が異なる複数の部分からなるため、架橋の最適条件を定める試験に極めて有効である。層状構造状のいずれか1つの構造の規則性が異なる複数の部分からなっていてもよいし、2種または3種の構造の規則性がそれぞれ異なる複数の部分からなっていてもよい。複数の部分相互の規則性の違いは特に制限されないため、島と島の間の距離、島のサイズ、周期の大きさが異なる場合だけでなく、島と海の関係が逆転している場合も本発明の範囲に含まれる。このような構造または規則性が異なる複数の部分は同一平面上に存在させるのが一般的である。構造または規則性が異なる部分は2以上あればよく、その数の上限は制限されない。通常は2〜10程度とし、4〜8にするのが典型的である。海島構造状をとる場合は、架橋が導入されている部分が海と島のいずれであってもよい。架橋が導入されている部分が島であっても海であっても、島のサイズおよび島と島の間の距離は培養する細胞のサイズ以下であるのが望ましい。これらのサイズの平均は両方とも、50μm以下であるのが好ましく、20μm以下であればより好ましい。下限は通常0.1μmである。【0036】海海構造状または層状構造状をとる部分は、その周期が培養する細胞のサイズの2倍以下であるのが好ましい。ここで、周期とは細胞培養用基材をある一線で切ったときに、隣あう2つの部分(架橋されている部分とされていない部分)の距離の平均値をいう。周期は100μm以下であるのが好ましく、40μm以下であればより好ましい。含有させる細胞接着性物質のうち架橋されているものの総面積は、細胞の増殖面積の50%以下あるのが望ましい。30%以下であればより望ましい。【0038】細胞接着性物質へ架橋を導入する方法は、特に限定されるものではなく、一般的に用いられる方法であればいかなる方法であってもよい。プラズマ処理法などを用いることができる。プラズマ処理法が適していると考えられる。プラズマ処理法が適していると思われる。良好であるため好ましい。好ましい範囲は、1:9から1:39である。構造は、特に制限されるものではなく、どのような構造をとっていてもよい。コーティング層と支持体から形成されているのが一般的である。支持体上にコーティングされていない基材も本発明の範囲に含まれる。乾燥後のコーティング層の厚みは0.5μm以上であるのが好ましく、1.0μm以上であればより好ましい。コーティング層の厚みは、基材を形成する物質の密度を1.0と考えて、混合物溶液の濃度と乾燥前のコーティング層の厚みから計算して求める。コーティング層の厚みが0.5μm以下であると、細胞の脱離性が悪くなったり、脱離までの時間が非常に長くなったりして、性能が不安定になる。なる層のコーティングは、支持体の全表面にわたってもよいし、一部であってもよい。【0041】本発明において、コーティングされる支持体は、透明または半透明であるのが好ましい。細胞を顕微鏡下で観察するのに十分な透明性を有していることが好ましい。材料は、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリアミド、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリメチルメタクリレート、アクリル系樹脂などの透明または半透明の材料を広く用いることができる。物質透過性を有する膜を使用するのも好ましい。そのような膜の例として、再生セルロース、セルロースアセテート、コラーゲン、キトサンなどの半透膜や、ポリプロピレン、セルロースアセテート、テフロンTM、ポリフッ化ビニリデンなどの多孔質膜などを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。支持体の形状は、ディッシュ、プレート、ボトル、チューブ、フラスコ、フィルムなどが一般的であるがこれらに限定されるものではない。本発明の細胞培養用基材は、通常用いられている当業者に自明な方法で製造することができ、その方法は特に制限されない。溶媒キャスティング法やディップ法を用いれば簡便に製造することができる。効率よく製造することができる。【0043】工程(a)においては、キャスト法やディップ法など層を形成させることができる方法を広く用いることができる。層を別々に形成させるような方法を採ることもできる。層状構造状であり、本発明の目的を有効に達成することができるものであればその種類や材質は特に制限されない。したがって、市販のメッシュや多孔質膜を代用してもよいし、また、材質は石英ガラスであってもよい。【0045】工程(b)で用いるマスク(ロ)は、図1に示すようにある部分のみ紫外線が透過し他の部分は紫外線がまったく透過しないものであってもよいし、図2に示すように紫外線透過量が異なる複数の部分からなるものであってもよい。前者のマスクを使用する場合はマスクの位置を変えたりマスクそのものを換えたりして紫外線照射を複数回行う必要がある。複数回の照射とは2回以上の照射を意味するが、通常は2〜10回であり、典型的には4〜8回とする。後者のマスクを使用する場合は紫外線照射は1回で済ませることもできる。後者のマスクを紫外線強度を変えながら複数回使用して製造することもできる。複数の部分からなるマスクを2種類以上用いて紫外線照射することによって製造することもできる。これらの態様はいずれも本発明の方法の中に含まれる。【0046】いずれのマスクを用いる場合でも、マスク(イ)とマスク(ロ)は重ねて用いる。本明細書において「重ねて用いる」とは、2種類の別個のマスクを重ねて用いる場合のみならず、マスク(イ)とマスク(ロ)がはじめから一体となっている1つのマスクを用いる場合も含まれる。マスク(イ)とマスク(ロ)の2つの機能を合わせ持つ1つのマスクを用いる場合も本発明の方法に含まれる。【0047】紫外線の照射量(照射強度x時間:254nm)は、100〜10,000J/m2とするのが好ましく、500〜8,000J/m2とすればより好ましい。100J/m2以下では紫外線照射の効果がほとんどなく、また、10,000J/m2以上では細胞がほとんど剥離しない。254nm以外の波長の紫外線を使用する場合は、254nmの紫外線を上記の範囲で照射したときと同程度の架橋を生じる量を照射する。【実施例】以下に実施例を示し、本発明をさらに具体的に説明するが本発明の範囲は特許請求の範囲の記載により定まるものであり、以下の実施例により制限を受けるものではない。PNIPAAm)水溶液(塩酸でpH3に調整、この溶液はオートクレーブ処理後再溶解したもの)を、コラーゲンとPNIPAAmの混合比が1対9になるように混合し、キャスティング溶液を調製した。このキャスティング溶液の2.4mlを市販のφ90mmディッシュ(Falcon#3003、日本ベクトン製)に分注し、すばやく均一にのばしてコーティングした。その後10°Cのインキュベーター内で約10時間乾燥させた。乾燥後のコーティング層の厚みは、約2μmである。このディッシュの裏面には、面積が均等に6分割されるような線をあらかじめ引いておいた。【0050】次に、6分割した中の1つの場所だけが紫外線を透過できる窓を有するマスク(図1参照)をつくり、この窓の部分に表1に示すサイズのメッシュ(500メッシュ、線幅18μm、開口幅32μm、開口率41%)をはり、これをディッシュに乗せて紫外線照射装置(XX−100、波長254nm、フナコシ製)で紫外線を照射した。このときのマスクの窓の位置を移動させ、照射時間を変えながら5回照射した。このときの紫外線照射エネルギーは表1に示すとおりとした。コーティングおよび紫外線の照射は、無菌的な環境下で行った。このコーティングしたディッシュを用いて培養評価を行った。【0051】また、比較例としてメッシュを入れないで同様に紫外線照射したものも同時に培養評価した。【0052】以下には培養評価実験の内容を示す。ヒト真皮由来の線維芽細胞をダルベッコ改変イーグル培地(以下D−MEM、10%牛胎児血清含有、GIBCO社製)を用いて、最終細胞濃度が約2x105細胞/mlになるように細胞懸濁液を作製し、37°Cに保温した。ディッシュは、あらかじめ37°Cに保温しておいたプレート(マイクロウォームプレート、北里サプライ製)の上に乗せて保温し、細胞懸濁液を12ml注入した。これを素早く37°Cの炭酸ガスインキュベーター(5%炭酸ガス)内に移し3日間培養した。【0053】細胞の接着、増殖性と剥離性については、位相差顕微鏡下で観察し、以下の式に従って、接着、増殖率と剥離率を計算した。接着、増殖性の観察は37°Cで行い、剥離性の観察はディッシュを氷上に移し約3分間放置したのち室温にて行った。【0054】【0055】結果を表1に示す。メッシュを使用した系では、メッシュを用いない系に比較して、細胞の接着、増殖性はやや悪くなるものの、剥離性が大幅に改善されていることが明らかである。メッシュを使用しない系では細胞の剥離に約3〜5分もかかるのに比べ、メッシュを使用した系では約1分で細胞が剥離し、剥離スピードもかなり改善されていることが確認された。表1の各データを比較することによって、この系では紫外線照射エネルギー4,000J/m2のときが最適条件となることが明らかになった。このときの細胞の接着、増殖性は比較例よりもさらに良くなっており、剥離しにくい細胞の最適条件を決めるためには本発明の基材が非常に有効であることが明らかになった。【0056】【0057】(実施例2および比較例2)実施例1および比較例1に示した方法と同様にコーティングおよび細胞評価を行った。メッシュの代わりに、石英ガラスに線幅6μm、周期10μmの層状のパターンが刻まれているマスク(イ)と、図2に示したような紫外線の透過量が場所によって異なるマスク(ロ)を重ねて用いた。紫外線の照射エネルギーは表2に示した通りである。このメッシュを用いて架橋を導入すると、架橋されたところの総面積は40%となる。コラーゲンとPNIPAAmの混合比は1対19とした。細胞は、ヒト絨毛膜由来の線維芽細胞を用い、培地としてイーグル培地を用いた。【0058】比較例では、マスク(ロ)のみを使用して紫外線照射を行った。【0059】結果を表2に示す。実施例1と同様に、マスク(イ)を使用した系では、使用しない系に比較して、細胞の接着、増殖性は若干悪くなる傾向がみられたものの、剥離性は大幅に改善され、さらに、剥離スピードの改善も確認された。表2の各データを比較することによって、この系では紫外線照射エネルギー8,000J/m2のとき、最適条件となることがわかった。このときの細胞の接着、増殖性および剥離性は比較例よりもさらに一段と良くなっており、剥離しにくい細胞の最適条件を決めるためには本発明の基材が非常に有効であることが明らかになった。【0060】【0061】(実施例3および比較例3)実施例1および比較例1に示した方法と同様にコーティングおよび細胞評価を行った。コラーゲンとPNIPAAmの混合比を1:39にし、図1に示したマスクと石英ガラスに周期10μmの海海構造のパターンが刻まれているマスクを重ねて紫外線を照射した。紫外線の照射エネルギーは表3に示すとおりである。このマスクを用いて架橋を導入すると、架橋されたところの総面積は30%となる。比較例では、図1に示したマスクのみを用いて紫外線照射した。【0062】細胞はIMR−90(ヒト胎児肺由来の線維芽細胞株)を用い、培地としてD−MEMを用いた。【0063】結果を表3に示す。実施例1および2と同様にパターンが刻まれているマスクを使用した系では、マスクを使用しない系に比較して、細胞の接着、増殖性が若干悪くなる傾向が見られたものの、剥離性は大幅に改善され、さらに、剥離性スピードの改善も確認された。表3の各データを比較することによって、この系では紫外線照射エネルギー8,000J/m2のとき、最適条件になることが明らかになった。このときの細胞の接着、増殖性と剥離性は比較例よりもさらに一段と良くなることが明らかになり、剥離しにくい細胞の最適条件を決めるためには本発明の基材が非常に有効であることが明らかになった。用いれば、従来法では接着、増殖性および剥離性を判定することが難しかった細胞でも、接着、増殖性および剥離性を簡単にかつ再現性よく判定することが可能になった。収集に関しては慎重に行っておりますが、もし掲載内容に関し異議がございましたらお問い合わせください、速やかに情報を削除させていただきます。