Achievements本研究においてはチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)を含む化学療法でも治癒困難なフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球性白血病(Ph+ALL)の治療抵抗性機序の解明を目的としている。これまでにFRETの原理を応用して、生細胞でのBCR-ABLのキナーゼ活性を可視化する技術を開発しているが、本手法を用いてPh+ALLにおけるTKI抵抗性細胞群を同定することが出来た。TKI感受性細胞群と抵抗性細胞群における遺伝子発現の差異をマイクロアレイでスクリーニングしたところ、TKI抵抗性細胞群において多岐にわたる遺伝子の発現亢進が観察された。これらの遺伝子群の中でも、細胞内タンパク修飾系に着目し解析を進めている。本タンパク修飾系によってBCR-ABLの翻訳後修飾の有無を確認した所、BCR-ABLもタンパク修飾をうけることが確認された。vitroでBCR-ABLに会合する酵素が同定されている。現在は、会合する酵素が、BCR-ABLの機能修飾を行うかどうかの解析を進めている。本修飾系の阻害剤を用いたところ、Ph+ALL由来細胞株に細胞死誘導を生じることを確認したが、Ph+ALL以外の細胞にも細胞死誘導を生じることが明らかとなり、現在は、TKIとの併用による相乗、相加効果の有無について検討を進めている。vivoモデル系での実験が具体化していない。Activity生化学実験での問題点は、BCR-ABLが約200KDaと分子量が大きく、タンパク修飾を検出することが、やや難しく、今後はBCR-ABLの欠失変異型を用いることや、細胞内での発現を免疫染色で細胞な局在がタンパク修飾で制御されるかどうかを検討していく予定である。Carryover予算は、ほぼ全額使用しているが、一部、小額が残っている。これは小額なために、必要な試薬を購入するには不十分であったため残金が生じた。Budget次年度研究費に併せて、研究目的に使用する。