次に示すもの以外は、総則の3に示すものを用いる。各農薬等の純度が明らかなもの。魚介類の場合は、試料20.0gを量り採る。脂肪の場合は、5.00gを量り採る。回転で5分間遠心分離し、有機層を採る。回転で5分間遠心分離する。得られた有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムを加えて脱水し、無水硫酸ナトリウムをろ別する。ろ液を40°C以下で濃縮し、溶媒を除去した後、残留物の重量を測定し、これを抽出脂肪重量とする。残留物の全量または一定量を採り、ゲル浸透クロマトグラフィー用カラム(スチレンジビニルベンゼン共重合体カラム)への負荷量が試料5.0g相当量になるように(試料5.0g中の抽出脂肪量が0.5gを超える場合には、カラムへの負荷量が抽出脂肪0.50g相当量になるように)アセトン及びシクロヘキサン(1:4)混液に溶かす。乳及び卵の場合は、試料20.0gを量り採る。回転で5分間遠心分離し、有機層を採る。加え、ホモジナイズした後、毎分2,500回転で5分間遠心分離する。得られた有機層を合わせ、塩化ナトリウム10gを加え、振とうする。静置した後、分離した水層を捨てる。アセトニトリル層に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水し、無水硫酸ナトリウムをろ別した後、ろ液を40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。乳及び卵の場合は、残留物をゲル浸透クロマトグラフィー用カラム(スチレンジビニルベンゼン共重合体カラム)への負荷量が試料5.0g相当量になるようにアセトン及びシクロヘキサン(1:4)混液に溶かす。ゲル浸透クロマトグラフィー用カラム(スチレンジビニルベンゼン共重合体カラム)に注入し、アセトン及びシクロヘキサン(1:4)混液で溶出する。アクリナトリンの保持時間からトリシクラゾールの溶出終了までの溶出液を採り、40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。注入し、流出液は捨てる。注入して、全溶出液を採り、40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。mL)としたものを試験溶液とする。ゲル浸透クロマトグラフィー用カラム(スチレンジビニルベンゼン共重合体カラム)に注入し、アセトン及びシクロヘキサン(1:4)混液で溶出する。アクリナトリンの保持時間からアクリナトリンの溶出終了までの画分(画分I)及び画分Iの分取終了からトリシクラゾールの溶出終了までの画分(画分II)を採る。注入し、流出液は捨てる。注入して、全溶出液を採り、40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。注入し、流出液は捨てる。注入し、流出液は捨てる。注入し、溶出液をaで得られた画分IIに合わせ、40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。したものを試験溶液とする。注入し、流出液は捨てる。注入して、全溶出液を採り、40°C以下で濃縮し、溶媒を除去する。したものを試験溶液とする。各農薬等の標準品について、それぞれのアセトニトリル溶液を調製し、それらを混合した後、適切な濃度範囲の各農薬等を含むメタノール溶液を数点調製する。注入し、ピーク高法又はピーク面積法で検量線を作成する。注入し、5の検量線で各農薬等の含量を求める。LC/MS/MSにより確認する。液について下の表の濃度勾配で送液する。測定限界(ng)の例を示したものである。測定及び確認する方法である。本法を適用できる化合物を五十音順に示したものであるが、規制対象となる品目には本法を適用できない代謝物等の化合物が含まれる場合があるので留意すること。保持時間の異なる異性体は、化合物名欄に個別に示した。示した全ての化合物の同時分析を保証したものではない。化合物同士の相互作用による分解等及び測定への干渉等のおそれがあるため、分析対象とする化合物の組み合わせにおいてあらかじめこれらの点を検証する必要がある。(3)アセトニトリル抽出液に添加する塩化ナトリウム(10g)が多すぎる場合は、減らしてもよいが、十分に飽和する量を加える。(4)濃縮し、溶媒を完全に除去する操作は、窒素気流を用いて穏やかに行う。(5)ゲル浸透クロマトグラフィー条件の例を以下に示す。nm分取範囲:次の方法によりあらかじめ決定しておく。モニターし、溶出位置を確認する。測定するなど他の適切な方法を用いてもよい。卵の場合の分取範囲(図1参照)アクリナトリンの保持時間からトリシクラゾールの溶出が終了するまで。肝臓及び腎臓の場合の分取範囲(図2参照)画分I:アクリナトリンの保持時間からアクリナトリンの溶出が終了するまで画分II:画分Iの分取終了からトリシクラゾールの溶出が終了するまで。肝臓及び腎臓の場合の分取範囲(6)ミニカラムは使用条件で各農薬等の溶出調査を事前に行い、溶出位置を確認してから使用する。(7)脂肪含有量が高い試料では、試験溶液の濃縮倍率が低くなる。その際、目標の測定感度が得られない場合には、抽出脂肪を用いてゲル浸透クロマトグラフィー以降の操作を複数回行い、検液を合わせて試験溶液とする。感度によっては、試験溶液をさらにメタノールで希釈する。(9)特にメタノール溶液中では不安定な農薬等があるため、測定は試験溶液の調製後速やかに行う。検量線用溶液は用時調製する。常温のオートサンプラーラック中に試験溶液を長時間置かない。(10)正確な測定値を得るためには、マトリックス添加標準溶液又は標準添加法を用いることが必要な場合がある。(11)定量限界は、使用する機器、試験溶液の濃縮倍率及び試験溶液注入量により異なるので、必要に応じて最適条件を検討する。緊急情報や厚生労働省のご案内などを掲載しています。