vivo環境下での動的構造変化を解明することを目的とする。本研究の平成30年度の成果は以下の通りである。本研究計画で解析するタンパク質のうち、多数の基質を選択的に認識する酸化ストレス応答タンパク質Keap1について、基質である転写因子Nrf2の相互作用をNMRで高次構造レベルで詳細な解析を行うとともに、別のタンパク質との相互作用に伴う構造変化についても詳細な解析を実施した。別の種類の基質である各種低分子(親電子性物質)とKeap1の相互作用について、特にシステイン残基への結合に伴うKeap1やNrf2の構造変化や、Nrf2とKeap1の相互作用に親電子性物質が与える影響をNMRを用いて高次構造レベルで解析を実施した。(PAH)や、異なるドメイン構成を持つ別の代謝酵素ASPGについても大量発現・精製を行い解析を進めている。今後は遠距離の情報が得られる常磁性効果を利用してドメイン間の距離情報を得る方法を上記3種類の解析対象に適応し、ドメイン間の構造変化を解析するとともに、細胞内における構造変化を19F-NMR法と常磁性効果により詳細に解析する。vivo環境下での動的構造変化を解明することを目的とする。平成30年度には、本研究計画で解析する各タンパク質のNMR測定を実施し、Keap1-Nrf2経路では実際に基質認識に伴う高次構造変化について詳細な解析を実施した。vivo環境下での動的構造変化の解析への応用を進めている。Activity細胞内におけるタンパク質の様々な分子認識機構の解明に向けて、平成30年度に基質認識に伴う高次構造変化等の解析を実施した各タンパク質について、各種19F標識技術や19F-NMR計測技術を中心に適宜最新の計測技術を組み合わせることで細胞内での解析を進める。基質結合に伴い大規模な構造変化が起こることが想定されているKeap1-Nrf2複合体を引き続き重点的に解析するとともに、新たに常磁性効果を用いた遠位距離情報の解析を組み合わせることで、ドメイン間の構造変化を詳細に解析する。vivo環境下での動的構造変化の解明をめざす。