Horizonの企業情報についてご紹介します。サービス情報を紹介します。情報Horizonの各種資料/情報を紹介します。目的のターゲット遺伝子の編集が保証されています。vitro転写ステップが不要です。タンパク質の機能的ノックアウトの可能性を最大化し、オフターゲット編集を最小化するようにデザインされています。レンチウイルス粒子あるいは大腸菌グリセロールストックをご用意しています。信頼性の高い遺伝子ノックアウト結果のための機能的および特異的ターゲティングEdit-RレンチウイルスsgRNAは、Cas9ヌクレアーゼによる標的DNAの二本鎖切断をガイドするためのRNAを発現します。Edit-RレンチウイルスsgRNAベクターバックボーンでは、遺伝子特異的ガイドRNAはヒトU6プロモーターの制御下で発現されますが、ピューロマイシン耐性マーカー(PuroR)の発現はマウスCMVプロモーターから駆動され、sgRNAが組み込まれた細胞の迅速な選択を可能にします。各Edit-RレンチウイルスsgRNAは、目的の遺伝子およびゲノム部位に特異的です。トランスフェクションが困難な細胞でノックアウトを起こす、またはプールされたレンチウイルスsgRNAライブラリースクリーニングからのヒットをフォローアップすることなどが、主要なこのガイドフォーマットの使用方法です。CRISPR-Cas9は遺伝子機能を調べるための非常に効果的なツールですが、すべてのガイドRNAがタンパク質の機能的なノックアウトを実現するのに有効であるとは限りません。この問題に対処するために、Horizo​​nは、挿入または欠失を起こすだけでなく、機能的な遺伝子ノックアウトを生じる可能性が最も高いガイドを選択するように検証されたアルゴリズムを開発しました。お好みのデザイン済みsgRNA発現用レンチウイルスを3つセットでご提供する製品です。sgRNAを発現するレンチウイルスベクターを導入した大腸菌の培養液にグリセロールを加えたものです。sgRNAを発現するレンチウイルスベクターを導入した大腸菌の培養液にグリセロールを加えたものです。Kitがおすすめです。ワークフローEdit-RレンチウイルスsgRNAを使用した実験的ワークフローEdit-Rレンチウイルス遺伝子工学システムは、Cas9ヌクレアーゼとシングルガイドRNAを2段階のプロセスで利用します。Edit-RレンチウイルスCas9ヌクレアーゼ発現粒子を使用して、Cas9ヌクレアーゼを安定して発現する細胞株を作製します。その後、これらの細胞にEdit-RレンチウイルスsgRNA粒子を形質導入して、、細胞集団または単離されたクローン細胞株の表現型解析のための効率的なゲノム編集(低MOIであっても)を実現できます。サポートデータさまざまなプロモーターの制御下でCas9を使用してゲノム編集をテストすると、複数の細胞株でEdit-RレンチウイルスsgRNAを使用して高レベルの遺伝子編集が実現できることがわかる。さまざまなプロモーターの制御下でCas9を使用して遺伝子編集をテストすると、複数の細胞株でEdit-RレンチウイルスsgRNAを使用して高レベルの遺伝子編集が実現できることがわかります。-EGFP)とHEK293T細胞は、Cas9とブラストサイジン耐性遺伝子を含むレンチウイルス粒子で安定的に形質導入されました。安定的に形質導入された細胞の集団は、sgRNAの形質導入の前に最低10日間ブラストサイジンで選択されました。低MOIでsgRNAレンチウイルス粒子を細胞に形質導入して、細胞当たり1つのsgRNA配列を有する細胞を得て、分析の前に7日間ピューロマイシンで選択しました。ピューロマイシン選択細胞におけるゲノム編集の相対頻度は、T7エンドヌクレアーゼIを使用したDNAミスマッチ検出アッセイから計算されました。Edit-RレンチウイルスsgRNAベクターのプラスミドベクター要素の概略図Edit-RレンチウイルスsgRNAベクターバックボーンでは、遺伝子特異的なsgRNAはヒトU6プロモーターの制御下で発現します。ピューロマイシン耐性マーカー(PuroR)の発現はマウスCMVプロモーターから駆動され、sgRNAが組み込まれた細胞の迅速な選択を可能にします。このプラスミドには、大腸菌での増殖と選択のためのアンピシリン耐性マーカーが含まれています。アルゴリズムは化学合成crRNAと発現sgRNAの両方に適用されうるここでは、12の異なるサイトで遺伝子PSMD11をターゲットにし、プロテアソームの破壊を示すEGFPシグナルによって機能を測定しています。細胞に、crRNA:tracrRNAsをトランスフェクトするか、crRNAと同じターゲット配列を含むsgRNAを発現するレンチウイルス粒子を形質導入しました。solutions”を迅速に提供します。当社は、当社のウェブサイトの利用者の方々に最適の利用を保証するためCookieを使用します。Cookieは利用者の方々のログインの詳細を記憶し、利用者の方々の利用に応じてサイトの機能を最適化する手助けをします。Policyをご参考ください。