発色試薬の使い方DNPによるケトンとアルデヒド検出の原理DNP(2,4-Dinitrophenylhydrazine)はケトンやアルデヒドと反応して黄色~橙色に呈色します。TLC上でも黄色から橙色のスポットとして検出できます。検出試薬には酸が含まれているため、アルデヒドのアセタール保護体などは外れて検出される場合があります。DNPのヒドラジンはケトンやアルデヒドに求核付加、脱水によりヒドラゾンを形成します。生成したヒドラゾンは芳香族ケトン・アルデヒドではより濃く発色(橙色)し、脂肪族では黄色に発色します。DNPはアルコールからアルデヒド・ケトンを合成した時などに便利です。mLDNPをエタノールに溶解し、リン酸を加えて調製します。できるだけ冷蔵庫で保存したほうが良いです。室温で数ヶ月以上保存すると沈殿が生じてきますが、使用している感じでは使えています。展開後のTLCをDNP発色試薬溶液にディップします。フリーのアルデヒドなどは加熱しなくても瞬時に橙色に発色します。加熱しすぎると焦げて発色が見えなるので注意します。検出できる化合物は、アルデヒド、ケトンの他、還元糖(アルドース、ケトース)、デヒドロアスコルビン酸などがあります。コメントをキャンセルメールアドレスが公開されることはありません。(3)科学系ブログです。