антило.抗体は販売していません。厳密には免疫反応ではありません。詳細は説明を御参照下さい。HBME-1は悪性中皮腫(上皮型)の患者の中皮細胞を免疫源として作製された抗体のクローン名で、抗ヒト中皮細胞抗体として市販されている。この抗体が認識する抗原の詳細は不明だが、ヒト中皮細胞および中皮腫細胞表面のmicrovilliの部分に反応し、時に細胞質全体が染まる。中皮腫の確認に有用だが、肺、卵巣などの腺癌でも陽性のことがあり、Calretinin、Mesotelin、Thrombomodulinなどや上皮性抗原に対する抗体との併用が望ましい。ホルマリン固定組織でも可能。protein:sHSP)である。receptorによる増殖に関係していると言われており核にも陽性となることがある。(左図)一般にHSPはホルマリン固定に対して不安定(要熱処理)だが自験例ではHSP70よりもHSP27の方がパラフィン切片ではよく反応している。(抗体残量がなくなったためリストより削除しました。希望があれば復活します。熱ショック蛋白(HSP)と呼ばれる一群の蛋白質の中でも主を占めるおよそ70〜80kDaのグループ(Geneでは5q31.1-q31.2,6p21.3など)を総称してHSP70と呼ぶ。これらの蛋白は分子シャペロンとして虚血、炎症などの細胞stress下での変性蛋白の凝集を防ぐと共にサイトカインの生合成などにも関係していると考えられている。HSP27の過剰発現が主に細胞質に見られるのに対して、HSP70の場合は細胞質と核に陽性反応が見られるが、細胞質内では遊離の状態で、核内ではp53やc-myc遺伝子蛋白などと結合して存在しているとも言われる。pigとの交差反応を確認している。lymphomaや癌との関連が注目されている。免疫抗体法は特異性に優れるが、菌体そのものの観察には左図に示すように、特殊染色の方がむしろ勝る。oxygenase(HO)は、その名の通りヘム蛋白に酸素を添加し分解する酵素(EC1.14.99.3)。Monoxide:CO)が生成されるのでCO生成酵素とも言える。)で、正常では肝のKupffer細胞や精巣のSertoli細胞、脾のマクロファージなどの細胞質に発現がみられる。ホルマリン固定組織でも反応し、ヒト用のGTS-1とラット用のGTS-3がある。(抗体の期限切れに伴いリストより削除しました。希望があれば復活します。肝炎ウィルスにはA〜G等の種類があることが知られている。そのほとんどはRNAウィルスであるが、B型肝炎ウィルス(HBV)は全長約3200塩基対(実は不完全二重鎖で、長鎖とその50〜70%程度の短鎖からなる)の環状DNAを有する比較的小型のウィルスで、ピコナウィルス(Picornavirus)科ヘパドナウィルス(Hepadnavirus)属に分類されている。Dane粒子とも呼ばれる直径約42nmほどの球状粒子はDNAを含むコア部分とその表面を被う厚さ7nmほどのエンベロープ(envelope:外被)の二重構造をしている。血液を介して非経口的にヒト、チンパンジーなどに感染し肝炎を起す病原体で、特に東南アジアやアフリカに感染者が多い。HBVにはウィルスのコア蛋白(HBc抗原)以外に、エンベロープに由来する表面抗原(HBs抗原)およびHBe抗原の3つの関連抗原がある。このうち、HBe抗原はコア蛋白の前駆蛋白(pre-C)が切断され細胞外に分泌された可溶性蛋白であるために血液などでの免疫血清学的検査に比べて組織標本での免疫組織化学的な証明は難しいが、逆に血液からは検出しにくい*HBc抗原は免疫組織化学的には感染細胞の核内(一部細胞質)に検出(ホルマリン固定組織でも可能)できる。HBe抗原とHBc抗原とは免疫学的に交差反応は起さない。血液ではHBc抗原を直接検出するよりもむしろHBc抗体が検査されることが多い)HBs抗原は1963年にオーストラリア先住民の血清より発見されたためかつてオーストラリア(Au)抗原とも呼ばれた。免疫組織化学的には細胞質内にびまん性に検出でき(ホルマリン固定組織でも可能)、左図のようにHBsはOrcein染色等とよく相関する。envelopeの違いによるサブタイプ(adr,adw,ayw,ayr)の識別はできない。血清学的に検出されない変異ウィルスによるいわゆる「サイレントHB」においても、免疫組織化学的にはHBs抗原が細胞質に微弱ながら検出されるという報告がある。(リストより削除しました。感染症関連抗体は必要な時は必要なのですが、その頻度が少ないのが問題です。要因となるC型肝炎ウィルス(HCV)はフラビウィルス(Flavivirus)科ヘパシウィルス(Hepacivirus)属に分類されている全長約9400塩基対からなる直鎖RNAウィルスで、形態的にはエンベロープ(外被)を有する直径40〜60nmの球状粒子。protein)になる。非構造蛋白にはNS2,3,4A,4B,5A,5Bがあり、この抗体はNS3蛋白を認識する。NS3は約69kDa、631aaで、N末端側約1/3がプロテアーゼ活性を示すが、そのアミノ酸配列のうち3か所がキモトリプシンに代表されるセリンプロテアーゼに必須の3つの活性残基と相同性が高いが交差はしない。感染細胞では小胞体膜や脂肪滴の周囲でHCV複製複合体が多く見られると言われ、免疫組織化学的にもHBVのHBs抗原の反応が比較的細胞質にびまん性に見られることが多いのに対して、この抗体による反応は弱く反応する細胞質内に強い陽性部分が滴状、斑点状に見られることが多い。1"(HEP-PAR1)とも呼ばれるが、対応抗原はまだ確定されていない。ヒト肝細胞(胎児肝細胞を含む)の細胞質にブツブツと顆粒状に反応し、胆管には反応しない。稀に消化管(特に上部)の癌に反応することもあるらしいが、殆どの場合他の癌には反応しないので肝芽腫、肝細胞癌(HCCの場合は全てが陽性ではないようだが、90%以上で反応するという文献あり。CK7,8,20などと組合せて肝内胆管癌とHCCの鑑別に利用される。当然ながらホルマリン固定組織で反応するが、反応には細胞間差が幾分あり、また固定液の浸透の悪い部分では反応は弱いようだ。LsABなどビオチンを用いる方法で染める場合、たまに肝細胞では内因性ビオチンが問題になることがある。この場合の反応はもっと細かくびまん性に近い。kitが市販されている)をするか間接法で行うと回避できる。virusのvirionは、2本鎖DNAから成るゲノムを包む正20面体のcapsid(殻)の外側をenvelopeが包む構造をした、直径120〜200nmほどの球状の粒子。国際ウィルス分類委員会(ICTV)の分類ではgroup1に属し、ヘルペス科(Herpesviridae)として3つの亜科、6つの属に分けられている。type:HSV2)とがあるが、免疫組織化学的に完全な区別は難しい。左図は食道の感染例で、食道では中下部に主にHSV1の感染がみられ潰瘍を形成する中に大型、多核細胞が見られるが、この様な巨細胞は皮膚では水疱の底部によく見られる。ホルマリン固定組織でも細胞塗抹材料でも反応する。細胞質は一定ではないが比較的外側によく染まり、時に細胞質内にドット状に強く染まることもある。virus:VZV)はヘルペス科のDNAウィルス(アルファヘルペス亜科,HHV-3)で、ほとんどのヒトは水痘(いわゆる”水疱瘡”)として小児期に感染する。このウィルスは水痘の治癒後も神経節に潜伏し宿主の抵抗力が減弱した時などに体幹部、顔面を好発部位として神経に沿って赤い発疹や水疱が帯状にできる帯状疱疹を起こす。この抗体はホルマリン固定標本でも可能で、水疱底部および水疱内に剥離した細胞の主に細胞質に反応する。同じヘルペス属のHSVとは交差反応をしない。水疱内容の塗抹標本では通常の細胞診の固定法でも可能。hydroperoxide:LOOH)に変える。LOOHはアルデヒドに分解されて4-HNEなどが生成されるが、直接蛋白質の酸化修飾を行うこともある。acid(13-HPODE,C18H32O4)がリジン残基と結合したアミド型リジン付加体(脂質付加修飾リジン)。1999年に兵庫県立大学の加藤らによって脂質酸化過程初期の指標として報告された。成人型Melanocyteには反応しない。nevusでは陰性といわれる。Melanomaの中にはHMB45の反応の乏しい例があることも知られており、TyrosinaseやMelanA(MART-1)などの併用が推奨されている。H-ras,K-ras,N-rasがある。呼ばれ、GDPとGTPを結合させ、GTPを加水分解するGTPase活性を持ち、2万〜3.6万と低分子量で、サブユニット構造を持たないという特徴を有する低分子量G蛋白質のスーパーファミリーに属する。コドン12などでの点突然変異が起きたras遺伝子が誘導する変異蛋白ではGTPase活性が低く増殖や分化の細胞内情報伝達が持続し細胞の異常増殖を来すと考えられている。EGFR遺伝子のプロモーターとして働くとも言われる。胎盤から分泌される性腺刺激ホルモンで、約30%の糖を含有する約39kDaの糖蛋白であるが糖鎖の違いにより分子多様性がある。αとβのサブユニットから成り、前者はLH,FSH,TSHのαサブユニットと構造が共通しているのでαサブユニットを含む抗体ではこれらと交差反応を起こす可能性がある。非機能性のHCG産生腫瘍の中にはαサブユニットを含む抗体にのみ陽性のものがあることも知られており、19q13.3上の遺伝子にコードされるβサブユニットに特異的な抗体との併用や使い分けが必要な場合もある。Mole,Choriocarcinomaなど絨毛性腫瘍、HCG産生腫瘍の確認にホルマリン固定組織が用いられる。HCGはHCGβ(HCGb)のみの受託とさせて頂きます。complex:MHC)は、輸血の際の適合血液型のように移植組織の適合性に関係するものとして1936年に発見されたもので、軟骨魚類以上の生物が持つ自己・非自己の免疫認識に重要な分子である。antigen:HLA)と呼ばれる。HLAは複数の遺伝子によって決定され、各々が多数の対立遺伝子を有しており遺伝的多様性が強い。II抗原に分けられている。Ia」と呼ばれる)があり、それぞれ亜型がある。赤血球を除くほとんどの細胞にみられ、その細胞がウィルスなどに感染して生成される蛋白抗原が分解されたペプチドをCD8陽性Tリンパ球(CTL)に提示し、自らへのperforin,Gramzymeによる攻撃を促す働きをする。抗原にはHLA-DP,DQ,DRがあり、それぞれ亜型がある。B細胞・マクロファージ・樹状細胞など免疫に関係する細胞に発現がみられ、細菌などの蛋白抗原を分解したペプチドをCD4陽性T細胞に提示し、マクロファージを活性化したりBリンパ球の抗体産生を促す働きをする。I抗原に属し、第11回国際HLAワークショップでは27個の対立遺伝子が分類されている。突出したH鎖は、細胞内で生成されるウィルス蛋白などの抗原をCD8(+)Tリンバ球に提示し自らの細胞への攻撃を誘導する。I抗原に対する抗体は一般に重(α)鎖を認識する。II抗原に属し、第11回国際HLAワークショップでは24個の対立遺伝子が分類されている。構造的には、各2個ずつのドメインを有する分子量30kDのα鎖と34kDのβ鎖のヘテロダイマーからなる膜結合糖蛋白で、N末端側が細胞膜外へ突出するように存在し、CD4抗原分子のリガンドとしてCD4(+)Tリンパ球に細菌などの外来抗原を提示し、それらを活性化する。HLA-DRの発現はIFN-γ、IL-4などによって増強され、マクロファージ、Bリンパ球、活性化されたTリンパ球、血管内皮細胞などに見られる。typeやATLなどに陽性例もある。一部の上皮細胞にも発現が見られることがあるともいう。β鎖用のclone:DK-22は凍結切片でのみ反応する。protein)が核内に存在する。呼ばれるようになった。2p21-22にあっておよそ100kDaのMSH2蛋白をコードしている。syndrome)の原因とされており、MLH1またはMSH2等の(特にMLH1の異常が約90%を占めると言われる)遺伝子異常を伴う。cancerに因んでそれぞれFCC1,FCC2とか、COCA1,COCA2などとも呼ばれる。他に膵、胃、乳癌および肺小細胞癌などでも遺伝子異常が報告されている。膀胱癌においてMSH2発現の減少、消失例は再発率が高いとする報告もある。共にホルマリン固定組織では熱処理が必要。Japan(http://grj.umin.jp)で詳しく説明されているので参照されたい。(MEMA)とも呼ばれるが、汗腺、腎尿細管でも反応する。HMFG-2の認識するエピトープとしては分化した乳腺細胞と乳汁成分にある糖蛋白のCH基に反応し、またHMFG-1の方は比較的低分化の乳癌に由来する。乳腺では乳汁分泌期でなくとも乳管上皮細胞の管腔表面に発現が見られ、特に断頭分泌している部分によく見られる。表面に強く反応し一部細胞質にも陽性となる。carcinoma)の鑑別に利用できるが乳腺に絶対的特異性はない。腺癌以外の腫瘍ではほとんど陰性である。(実はこの抗原は単一蛋白ではなく膜表面を構成する複数の異なった分子群であり、乳腺以外の腺上皮に存在する構造が類似した膜表面抗原と交差反応を起こすことによる。病的条件下に分子群の構成が変化すると反応態度は異なってくることがある。)ホルマリン固定にも安定。(2011:HMFG-2はリストより削除しました。2013:HMFG-1は抗体を変更しました。疣贅に関係して感染細胞の核内に検出される。DNAの塩基配列の違いから70種類以上のtypeに分類されており、一部のtypeは子宮癌などの発癌に関係していると言われている。hybrydization法を用いていくつかのtypeは同定できるほか、DNA解析により詳しいtypingが可能。type6,11(他に42,43,44)が多く検出され、他にtype31,33,35,51,52,58が中間群といわれている。hybridization(ISH)を中止し、免疫組織化学(IHC)のみ行うことにしました。2013:抗体のCloneを変更しました。黄体刺激、乳腺の発育促進などPRL様の作用、またInsurinに拮抗し血糖値を増加させるなどの作用を示すホルモンで、Gene:17q23-q24、約20kDaほど。(スプライシングによるバリアントあり)胎盤絨毛の合胞性trophoblastから分泌され母体の卵巣、乳腺、肝の受容体に作用するが胎児には移行しない。HCGが妊娠初期から中期にかけて増加するのに対してHPLは中期から後期にかけて増加する。HCGが絨毛癌、胞状奇胎などで増加するのに対してHPLの血中値はむしろ低値となる。ホルマリン固定組織でも可能で、胎盤機能や絨毛性腫瘍の確認に用いられる。多く含まれる酸性粘液多糖類で、全ての脊椎動物にみられる。グルクロン酸とグルコサミンとの二糖繰り返し構造(GlcUAβ1-3GlcNAc)が鎖状に繋がったGlycosaminoglycan(GAG)の巨大分子で、軟骨などではAggrecanなどのproteoglycanがリンク蛋白の介在のもとに多数結合している。45kD,40-45kD,70-80kDの3種類の蛋白(リンク蛋白、コア蛋白のHA結合部およびそれにケラタン硫酸を含む部分が結合したもの)を含んでいる。抗体ではないが、ビオチン化したこの蛋白を用いればHAとの親和性を利用して左図のようにHAを検出することができる。(LsAB法などの酵素抗体法の試薬を利用するため一見、酵素抗体法のように見えるが、厳密には抗原抗体反応を利用しないので免疫抗体法=免疫組織化学ではなく、Lectinによる反応と同様に特定物質の親和性を利用した「組織化学」となる。iron染色などが一般的に用いられており、これらの方法ではHAの確認のためにhyaluronidaseを作用させた後にこれらの染色を行う方法が用いられる。HABPを用いた方法では消化後みごとに「陰性化」する。この方法でもHAに結合しているプロテオグリカンの影響を全く受けないわけではなく、HABPの結合が阻害される部分では何らかの消化処理をしないと反応しないことがある。ABCやTrypsin処理によっても染色性の得られない部分があるという。4位のCに水酸基(-OH)が付いたアルデヒド(CHO)。addition(二重結合に炭素イオンが1,4-付加される反応)によってhis,Lys,Cysなどのアミノ酸に4-HNEが付加され蛋白の酸化修飾が起こる。4-HNEはアルツハイマー病の人に多いとかアルデヒド脱水素酵素活性の低い人に多いとも言われる。「抗4-HNE抗体」とか「抗HEL抗体」と呼ばれるものの、正確には過酸化脂質そのものではなく、その付加体(adduct)に対する抗体である。hemocyanine(KLH)付加体を免疫源としており、主にシステイン(Cys)付加体を認識し、他の過酸化脂質・アルデヒドとは交差反応しないと言われる。ヒト以外にラットなどげっ歯類にも利用可。ホルマリン固定では要熱処理。細胞質に反応するが、時に核に反応が見られDNAへの付加も考えられている。(8OHdG)は、ヒドロキシラジカルによりグアニンが過酸化され、8位の炭素に水酸基(-OH)が付いたもの。グアニンの本来の塩基対はシトシンであるが、修飾されて8OHdGになるとアデニンと結合するようになりDNAのトランスバーションが起こる。8OHdGは比較的安定しているためDNAに対する加齢・酸化ストレスの指標としてよく用いられる。塩酸によるDNA解離処理は不要で、ホルマリン固定組織でも熱処理によって核に強く反応する。固定条件によっては細胞質にも弱く反応する(特に組織の縁)ことがある。HIF-1は低酸素(Hypoxia)下に働く転写因子で、解糖系酵素やエリスロポエチン(EPO)遺伝子の転写を促進してエネルギーや酸素輸送能力を増加させたり、VEGFやPDGFβ誘導による血管新生のプロモーターとしての機能を持つ。diseaseに関連する癌抑制遺伝子VHL蛋白が結合してubiquitin化され速やかに分解されてしまう。element:HRE)と呼ばれるDNA領域に結合してその発現を誘導するが、酸素分圧が回復すると元に戻る。1(MOP1)とも呼ばれる。(Arnt1,ARNT1)とも呼ばれる。(HIF-1βは抗体を使い切った為リストより削除し、現在HIF-1αのみになりましたが、希望があればβも復活します。腫瘍中には低酸素領域が存在し、この部分では生物学的悪性度が高く、また多剤耐性遺伝子により放射線や抗がん剤に抵抗性を示す*ことが知られている。左図(上、下)はホルマリン固定パラフィン切片の癌組織でのHIF-1αとβの反応を示し、αの反応は主に胞巣辺縁部癌細胞の核内に強く現れ一部細胞質にもみられる。HIF-1はヒトとマウスで相同性が高く(αは約90%)、この抗体はマウス、ラットに交差する。低酸素下で発現する遺伝子のうち、p21,p53,bcl-2などはHIF-1依存性であるが、HO-1などのように非依存性と考えられているものもある。Oxide(NO)がHIF-1をリン酸化し安定化させるなどの報告があるが十分解明されてはいない。density)が放射線感受性と最も良く相関すること、酸素が拡散する血管から100〜150μmの範囲以遠の低酸素または無酸素領域が少ない症例で有意に放射線感受性が高いことが述べられている。density(VD)の計測は病理学的にしばしば用いられる方法であり、一般にCD31,CD34あるいはF-VIIIRA(vWF)などで血管を染めて画像解析により面積などの計測を行う。HIF-1αを用いることにより低酸素領域を直接計測することが可能になるだろう。免疫組織化学(染色)は病理診断確定上の補助手段としての面もあるが、利用方法によっては例えばHER2やERのように直接治療上の指標となり得るものもかなりある。Javascript対応のブラウザでご覧下さい。