nudeマウス(♂、8週令)の皮下に移植することでがん悪液質モデルを作製し、6週間観察した。この時、下肢腓腹筋および精巣周囲脂肪の重量低下も認められたことから、85As2移植2週間後を悪液質初期と定義し、悪液質初期の中枢性変化を解析した。抽出し、CE-TOFMSを用いて96種類の代謝物の量的変化を解析した。その結果、18種類の代謝物について有意な変化を認め、この内6種類はプリンヌクレオチド代謝に関連する代謝物であった。プリンヌクレオチド代謝酵素の一つであるキサンチンオキシダーゼの活性は、悪液質初期モデル前脳においてコントロールの1.5~2倍程度高かった。以上より、悪液質初期の前脳内ではプリンヌクレオチド代謝が亢進していることが示唆された。前脳の中でも特に視床下部領域のグリア細胞が摂食制御に重要であることが報告されていることから、続いて悪液質初期モデルの視床下部領域におけるグリア細胞マーカーのタンパク質発現を確認した。この結果、コントロールと比較してマイクログリアマーカーIba-1の発現は1.2倍程度、アストロサイトマーカーGFAPは1.5倍程度増加した。よって悪液質初期の視床下部ではグリア細胞が活性化していることが示唆された。Sciencesに発表した(印刷中)。がん悪液質における脳内プリン代謝変化がプリン受容体シグナルにも影響を及ぼしている可能性を考え、各種プリン受容体を発現するラットグリオーマ細胞株C6を85As2細胞培養上清中で培養しプリン受容体アゴニストを添加したところ、プリン受容体の応答性が増強した。計画では、1年目に悪液質における中枢変化の解析、2年目に薬物治療実験を行う予定であったが、1年目にキサンチンオキシダーゼ阻害薬フェブキソスタットによる治療実験を行うことができたため。いった悪液質症状は改善されなかった。フェブキソスタット(フェブリク錠)のインタビューフォームを参照すると、フェブキソスタットは中枢移行性が低いことから、中枢のキサンチンオキシダーゼを標的とするにはフェブキソスタットを中枢に直接投与する、あるいは中枢移行性の高いキサンチンオキシダーゼ阻害薬を使用する、といった変更が必要であると考えられる。そこでフェブキソスタットの中枢への直接投与をするために予備検討を進めたが、侵襲性が高く体重や摂餌量に影響する可能性が高いことがわかった。よって今後は中枢移行性の高いキサンチンオキシダーゼ阻害薬による治療実験を進めることが望ましいと考えるに至った。以上より、研究1年目で治療実験を始めることができたため、十分な情報収集や予備検討を行い今後の実験の方向性を明確に定めることができたことから、当初の計画以上に進展していると考えられる。今後はがん悪液質における中枢キサンチンオキシダーゼ阻害の有効性を評価することが重要であるが、中枢移行性の高いキサンチンオキシダーゼ阻害薬アロプリノールは腎毒性の懸念や特異性の低さが問題となる。よって中枢移行性が高く、且つオフターゲットの少ないキサンチンオキシダーゼ阻害薬を新規にスクリーニングした上で治療実験を行うことが重要であると考えられる。悪液質初期の前脳におけるプリンヌクレオチド代謝変化とグリア細胞活性化に関連があるのか明らかにするため、アストロサイトやマイクログリアの培養系に対し85As2細胞の培養上清を加えてGFAPやIba-1の発現やプリン代謝の変化を検討する予定である。