chain;κ-chain,λ-chainImmunoglobulin(Ig:免疫グロブリン)はすべての脊椎動物の体液中に存在する抗体機能をもつ蛋白。ヒトでは抗原刺激を受けたB細胞の分化過程(特に形質細胞)で産生され、血漿蛋白のγグロブリン分画のほとんどを占めるが、分泌物に含まれるものやB細胞の細胞表面に結合し抗原レセプターとして機能するものもある。chain(L鎖:軽鎖)の各々相同な2本ずつ、計4本のポリペプチド鎖がジスルフィド結合したY字型の基本構造をしており、一部はその二量体、五量体を形成する。分類されており、それに対応してIgもIgA,IgG,IgD,IgE,IgMの5つのクラスに分類され、さらにIgA,IgG,IgMは幾つかのサブクラスに分類されている。L鎖も同様にκ鎖(Gene:2p12)とλ鎖(Gene:22q11.2)の2種類に分類されており、これらの組合せによってIgAκ型、IgAλ型などのように大きく10種類に分けられる。region(可変領域)と呼ばれる部分では同一クラスでも分子間で多様なアミノ酸配列をとり、これが抗体としての抗原特異性を示している。Igは蛋白分解酵素のパパインによって抗原結合部を含むFabと、H鎖のC領域のほとんどを含むFcとに切断されるが、同じ蛋白分解酵素であるペプシンでは切断部位が異なり、Fab'と呼ばれている。Fab,Fab'ともに抗原結合能を、Fcは一部のIgで補体活性能を有する。IgAは糖質を8%ほど含む分子量約17万、沈降定数7Sの糖蛋白。哺乳類および鳥類が持ち、ヒト血清Igの10-20%程度を占める。消化管、生殖器からの分泌物に含まれ粘膜の局所免疫に関与する分泌型とがある。receptorの細胞外部分,Gene:1q32.1)を挟んだニ量体構造をとり蛋白分解酵素に対して抵抗性をもつ。血清型はSCを含まない単量体として存在する。IgGは分子量約15万、沈降定数7Sの蛋白。両生類以降に見られる主要なIgで、ヒトの血清Ig中では最も多く70-80%ほどを占めるほか血管外の組織にも含まれる。胎盤を通過する唯一のIgであり、C1qに結合して補体系を活性化する。γ鎖(H鎖)2本とL鎖2本からなる単量体で、γ鎖の種類によって生物学的機能が異なるIgG1〜G4の4つのサブクラスに分かれる。IgG4IgMは分子量約90万、沈降定数19Sと最も大きなIgで、マクログロブリンとも呼ばれる。魚類,両生類,爬虫類など全ての脊椎動物にみられ、進化の過程で最初に出現したIgと考えられている。ヒト血清Igの10%程度を占め、ABO式血液型などの自然抗体の多くはこのクラスに属するが、B細胞の分化過程でsIgとして細胞表面にも発現する。switch)によって他のクラスのIgと交代する。血清中では主にJ鎖(Gene:4q21)によって結ばれた五量体構造をとり、H鎖を構成するμ鎖の種類によってIgM1とIgM2のサブクラスがある。IgDは分子量約17万、沈降定数7Sの蛋白で、δ鎖(H鎖)2本とL鎖2本からなる単量体。B細胞の分化過程でsIgとして細胞表面に発現するほか、血清中にもごく微量に含まれる。マウスでは免疫記憶などに関係しているらしいが、ヒトでの生理的意義は明らかではない。(Ig受容体として抗体産生細胞の誘導に関わるとも考えられている。インスリンやジフテリア毒素などに対する抗体活性も知られている。)IgEは分子量約19万、沈降定数7.9SとIgMに次いで大きな分子で、ε鎖(H鎖)2本とL鎖2本からなる単量体。血清中にごく微量のみ含まれ、寄生虫感染などで増加する。アレルゲン刺激により肥満細胞や好塩基球の表面に存在するIgE(Fc)受容体と結合し化学伝達物質を放出させ、即時型(I型)アレルギーを惹起するレアギン活性を有し、アナフィラキシー誘発性抗体として知られる。pathway)を介して補体を活性化する。いずれもFFPE切片でも可能。主な対象となるが、後二者は、一般的には新鮮凍結切片を用いた直接螢光抗体法(時に間接螢光抗体法が用いられることもある)で行われることが多い。これは、LsAB法など鋭敏な酵素抗体法では、ホルマリン固定過程で組織中に漏出した微量の血漿蛋白も検出してしまいBackgroundのノイズ(共染)が強くなるためで、蛍光抗体法(標識螢光色素として一般にはFITCが使用される)の方が見やすい。(厳密には全く背景が光らないわけではないが、その点は写真の撮り方でかなり変わる)なお、FFPE切片を用いて酵素抗体法で行う場合は、蛋白分解酵素(比較的消化力の緩いTrypsinが良い)で切片を前処理しておくとBackgroundの過染は改善される。天疱瘡、類天疱瘡では表皮の細胞間あるいは基底膜との接着に関係する蛋白に対する自己抗体が形成されるため、細胞が解離した裂隙から水疱ができる。血清中の自己抗体は免疫ブロット法やELISA法で検出されるが、皮膚生検組織では直接蛍光抗体法によって主にIgG(時にIgA)の沈着が直接検出されるほか、C3などの活性化された補体が検出されることもある。正常な皮膚組織に対し患者血清を反応させた後に間接蛍光抗体法によって検出する方法もある。天疱瘡(Pemphigus)では、デスモゾームの構成蛋白であるデスモグレイン(Dsg)に対する自己抗体(表皮細胞間抗体と呼ばれ、ほとんどがIgG)が形成され、その結果表皮細胞間に裂隙が生じて水疱を形成する。表皮の細胞間結合が解離するため、この水疱は薄く破れやすい特徴があり弛緩性水疱といわれる。foliaceus)はDsg1に対する抗体で、表皮層の中間部、棘細胞層の細胞間に裂隙が見られるとともに、この部分の広い範囲で細胞を縁取るようにIgの沈着をみる。antigen;BPあるいはBPA)に対する自己抗体(表皮基底膜抗体と呼ばれ、主にIgG)が形成される。BPには、ラミニンと結合する180kDの膜貫通蛋白(BP180、BPAII)と、ケラチンとBP180を結ぶ230kDのデスモブラキンと相同性が高い蛋白(BP230、BPAI)とがあり、主にBP180に反応するものが多い。いずれも蛍光抗体法では基底膜に沿って線状にIgの沈着がみられ、そこから表皮層がはがれて水疱ができるため、この水疱は比較的大きく、壁の厚い破れにくいところから緊満性水疱といわれる。IgGにはIgG1〜IgG4の4つのサブクラスがあり、このうちIgG4は量的に最も少ない。disease)として注目されている。syndrome(AMOLPS)という疾患概念も提唱されている。従来使用していた抗体が製造中止となった為、抗体を変更しました。Lett.10(3-4):223-252,1985)でも評価されているクローンで、pFcをエピトープとしています。NOSはL-アルギニン酸と酸素からL-シトルリンと一酸化窒素(NO)を合成する酵素(EC1.14.13.39)で、iNOS(NOS2)のほか、脳神経系に分布するnNOS(NOS1)や血管内皮のeNOS(NOS3)などが知られているが、これらのNOS(cNOSとも言われる)が「構成型」(constitutive)として恒常的に発現しているのに対し、iNOSは「誘導型」(inducible)と呼ばれるようにリポ多糖類(LPS)やIL-1,TNF-αなどの炎症性サイトカインによって一過性に発現が誘導される。(この発現調節にはNFκBが関与しているらしい)N末端側にreductase、C末端側にOxygenase領域を持ち(従ってSynthaseと言うものの実は酸化還元酵素)、中間にCalmodulinが結合する130kD,1153aaの蛋白で、遺伝子は17q11.2-q12;NOS2A。この抗体の免疫源はマウスのマクロファージ(Mφ)に由来するがラット、ヒトと交差し、ホルマリン固定でも可能。肝細胞、Mφ、消化管粘膜(上皮表面)、平滑筋(弱陽性)のほか、癌細胞にも発現がみられることがある。)の2種類が存在する。testosterone産生促進などのホルモン作用を示すほか卵胞の発育、精祖細胞の分化の調節にも関係しているらしい。Aが多く卵胞期にはBが多いと言われる。男性ではほとんどBという。腫瘍では顆粒膜細胞腫、セルトリ細胞腫など性腺間質腫瘍の確認に有用であるが、稀に他の腫瘍でも陽性のこともあるといわれる。ホルマリン固定組織は要熱処理だが、固定状況によっては綺麗な局在を得るのが難しいこともある。(なお、同じTGFβファミリーに属するActivinは実はInhibinのβサブユニットがホモダイマーとなったもので、これは逆にFSHの分泌を促進させる。インシュリンは膵ラ島のβ細胞から分泌される分子量5800のペプチドホルモンで、遺伝子は11p15.5。プロインシュリンとして合成されたものからCペプチドが分離したアミノ酸21個のA鎖,同30個のB鎖から成る。ブアン固定のほかホルマリン固定組織でも検出可能だが、固定時間が長いと陽性細胞の周辺の細胞にも弱い発色が見られることがある。他の膵ペプチドホルモン同様にラットなど他種動物との種間交差性は高い。Insulin/IGF/Relaxinファミリーに属する分泌型蛋白で、Somatomedinとも呼ばれる。A)とがあり、両者には60%ほどの相同性があるといわれる。遺伝子の位置では後者が11p15.5とInsulinに近く、前者は12q23。receptorと類似するがIGF-IIRは異なっている。アミノ酸67個からなる分子量約7400ほどのペプチドで等電点は6.7とされる。肝で産生されるが他の多くの臓器にも存在すると言われ、組織中ではIGF結合蛋白(IGFBP)と結合して活性を制御されている。IGF-Iは末端肥大症で高値を示すなどGH分泌の血中モニターとして利用されるほか、bFGFなどとともに血管平滑筋を増殖させ動脈硬化との関係が注目されている。IGF-IIは胎盤性Lactogen(HPL)に影響され胎児の成長、特に筋肉の分化に関係していると考えられているほか、Rhabdomyosarcomaとの関係が疑われている。ホルマリン固定組織では要熱処理だが、反応が弱いことがある。その分子の90%近くが細胞外に突出するようにして細胞表面に存在している。IntegrinがFibronectinの受容体として発見されたように、基本的機能として細胞と細胞外基質、あるいは細胞と細胞の接着に関係するが、近年では細胞の増殖や分化、生存に関わるシグナルの受容体として細胞機能を調節していると考えられてきている。8種類のβサブユニットが知られており、βサブユニットの種類によってβ1〜β8のサブファミリーに分類されている。血小板や白血球の一部は特有のIntegrinを持つが、多くの細胞では複数のIntegrinの発現がみられる。呼ばれ、α鎖(α1〜α6)によりVLA-1〜VLA-6(CD49a〜49f)がある。kinase(FAK)と呼ばれるチロシンキナーゼを介したMAPKやAktへのシグナル伝達に関与する。type3:CR3,CD11b/CD18,αMβ2)、CR4(p150/95,CD11c/CD18,αxβ2)が含まれ、ICAM-1(CD54),ICAM-3とはリガンドの関係にある。Mac-1,CR4は補体成分(C3b)と結合し補体制御蛋白としても働く。β3鎖(CD61)はサイトアドヘシンとも、gpIIIaとも呼ばれる。Willebrand因子をリガンドとし血小板凝集に関係する。ある血小板無力症として知られている。(現在、VLA-1,VLA-2,VLA-4,β2及びgpIIb(CD41)についてはリスト非掲載です。免疫グロブリンのVドメインやCドメインに類似する構造をその細胞外領域に有する接着分子はImmunoglobrin(Ig)スーパーファミリーと呼ばれる。各ICAMはこれに属する膜貫通型糖蛋白で、主に白血球の血管内皮細胞への接着と血管外浸潤に関与する。軟骨細胞などにも発現する。白血球分化抗原ではCD54に分類されている。感染した赤血球とも結合する。CD43とも結合し、それによってLFA-1との結合が制御されているらしい。ホルマリン固定では要熱処理。リストより削除することになりました。残念ですが、これでICAMのシリーズの常備抗体はなくなってしまいました。Immunoglobrin(Ig)スーパーファミリーに属する接着分子。ICAM-2(CD102,Gene:17q23-q25,275aa)は通常血管内皮細胞にICAM-1より多く構造的に含まれるがサイトカインの影響を受けず、また好中球には見られない。ICAM-3(CD50,Gene:19p13.3-p13.2,547aa)は血管内皮には発現がなく好中球をはじめとする白血球での発現が強い。共にLFA-1をリガンドとするがその結合はICAM-1より弱いといわれる。ウィルス増殖を阻害interfereするものというのが名前の由来である広範な生物に見られるcytokineの一種。亜型があり、一方γは他とは異なり146個のアミノ酸から成る17kDの糖蛋白でII型とされている。両者は遺伝子の位置(α,βは9p22、γは12q24.1)やレセプターも異なる。γは肝炎の治療に使用されることで有名だが、I型に比べ抗腫瘍作用や免疫抑制作用が強く、pH4以下の酸性下では不安定となる特長がある。抗ウィルス、抗腫瘍作用など免疫系に種々関与する。IL-1やGM-CSF、TNFなどと共にマクロファージ活性化因子(MAF)とも呼ばれる。enzyme(ICE)などのプロテアーゼにより切断されて17kDとなる。等電点の差によってアミノ酸159個のαと153個のβに分けられているが、両者には約20%ほどの相同性がある。多彩な細胞から産生されるが、特にαはマクロファージ・線維芽細胞・T細胞・B細胞などで産生されるのに対してβは主に上皮細胞・グリアなどから産生される。多彩な作用を示し慢性炎症性疾患と関係が深い。pyrogenなど別名も多くβはCatabolinとも呼ばれる。サイトカインに属する133個(前駆体としては153個)のアミノ酸より成る14-16kDの糖蛋白で、遺伝子は染色体4q26-27に存在する。(TCGF)とか、Aldesleukinという名もある。I)であるIL-2Rはα(55kD,CD25)、β(75kD,CD122)、γ(65kD,CD132)のサブユニットからなる。IL-15Rと共通している。してはCD25に分類されている。成人T細胞性白血病(ATL)ではT細胞表面にIL-2Rの持続的な発現がみられ、自身が産生したIL-2と結合して起こるクローン増幅が発症に関与するといわれている。ホルマリン固定組織でも熱処理によって反応可能な抗体が市販されている。γ鎖(CD132,Gene:Xq13.1)のサブユニットから成るヘテロダイマー。※二量体であるにも関わらず「β鎖」ではなく「γ鎖」と呼ぶのは、IL-2Rのγ鎖(CD132)と同一であるため。γchain(γc)と呼ばれ、他にIL-7、IL-13、IL-21にも共通しており複数のサイトカインが同じ作用を示す原因となっている。従って、通常IL-4R抗体と言う場合はα鎖(CD124)に対する抗体となる。T・B細胞、その他の造血細胞以外に神経、筋肉などにも発現する。左図はホルマリン固定ブタ脾臓のパラフィン切片。)を及ぼし、形質細胞腫、Castleman病、慢性関節リウマチ、メサンギウム増殖性腎炎などに関与するといわれている。ホルマリン固定組織では熱処理が必要だが、固定条件によっては染色性が弱いこともある。ヒトとマウスのIL-6の構造上の相同性は40%ほどで交差性は乏しい。FFPE標本でも賦活処理なしで染まる時は染まるが、熱処理をするとびまん性に染まって非特異的反応と紛らわしくなることもある。envelope(CE:辺縁帯あるいは周辺帯などとも言われる)と呼ばれる不溶性沈着物を形成し、これが細胞膜を裏打ちすることによって細胞は硬く強固になっていく。Involucrin(Gene:1q21;IVL,585aa)はその主要な構成成分となる69-120kDの構造蛋白で、免疫組織化学的には表皮有棘層上部に限定的に見られ、角質層や基底層には通常見られない。vulgarisなどでは肥厚した表皮に広く発現することが知られている。扁平上皮癌においては極性の乱れを反映して不規則な発現がみられ(図右側)、CytokeratinのCK1/10,CK5/14などと併せて細胞の分化傾向がわかる。ホルマリン固定組織でも可で、反応の弱い時にはCytokeratin同様にTrypsin処理が有効。Javascript対応のブラウザでご覧下さい。