本発明は、エキソソームを任意の細胞に導入する手段の提供を課題とする。斯かる課題を解決する手段として、疎水化多糖ナノゲルとエキソソームから構成される、複合体を提供する。特許請求の範囲[請求項1]疎水化多糖ナノゲルとエキソソームから構成される、複合体。[請求項2]疎水化多糖ナノゲルが、多糖部分及び疎水性部分を有している、請求項1に記載の複合体。[請求項3]疎水化多糖ナノゲルの多糖部分が、プルラン、アミロペクチン、アミロース、デキストラン、ヒドロキシエチルデキストラン、マンナン、レバン、イヌリン、キチン、キトサン、キシログルカン、水溶性セルロースからなる群から選択される少なくとも1種である請求項2に記載の複合体。[請求項4]疎水性部分が、炭素数8~50の炭化水素基またはステリル基である、請求項2または3に記載の複合体。[請求項5]疎水性部分が、コレステリル基である、請求項2~4のいずれか1項に記載の複合体。[請求項6]疎水化多糖ナノゲルがカチオン性である、請求項1~5のいずれか1項に記載の複合体。[請求項7]疎水化多糖ナノゲルがカチオン性のコレステリル化プルランである、請求項6に記載の複合体。[請求項8]カチオン性基として、アミノ基を有する、請求項1~7のいずれか1項に記載の複合体。[請求項9]エキソソームが粒子径200ナノメートル未満の細胞外分泌小胞である請求項1~8のいずれかに記載の複合体。[請求項10]前記エキソソームが薬物またはsiRNAを含む、請求項1~8のいずれかに記載の複合体。[請求項11]請求項1~9のいずれかに記載の複合体からなる物質導入用担体。[請求項12]請求項10に記載の複合体からなる薬物またはsiRNAの導入剤。[請求項13]細胞内に薬物またはsiRNAもしくはその前駆体を導入したエキソソームと疎水化多糖ナノゲルを混合することを特徴とする、請求項10に記載の複合体の製造方法。[請求項14]細胞内に薬物またはsiRNAもしくはその前駆体を導入し、前記細胞を培養してエキソソームを得、得られたエキソソームと疎水化多糖ナノゲルを混合することを特徴とする、請求項13に記載の複合体の製造方法。2012-219155号明細書(その開示全体が参照により本明細書中に援用される)に基づく優先権を主張する。[0002]本発明は、エキソソームを含む複合体とドラッグデリバリーシステム(DDS)に関する。背景技術[0003]エキソソームは、細胞が分泌するエンドソーム由来の50~200nm程度の小胞であり、その存在は1980年代から知られていた。近年、このエキソソーム中にメッセンジャーRNA(mRNA)やマイクロRNA(miRNA)が含まれており、他の細胞に核酸やタンパク質を運ぶ運搬体として機能することが見いだされている。特定の細胞由来の細胞膜タンパク質や核酸を含むエキソソームが、長距離の細胞間コミュニケーション経路として、種々の生命現象に重要に関わっていることが明らかにされつつあり、医療やバイオへの応用研究が進められている。[0004]生体内において細胞同士が離れた場所にある場合、細胞はタンパク質や低分子化合物等を介して情報のやりとりを行っていることが知られている。近年、新たな細胞間コミュニケーション手段として体液中に存在するRNAが注目を浴びている。古くから体液中にRNAが存在することは報告されていたが、その役割は長い間不明であった。体液中ではRNAが非常に不安定であることから、長距離の細胞間コミュニケーションに関与しているとは考えられていなかった。[0005]最近になり、細胞から分泌されるエキソソーム内にmRNAやmiRNAが存在することが報告され、分泌型RNAという新たな細胞間コミュニケーション手段が明らかとなりつつある。エキソソーム由来miRNAの受け手側細胞での機能発現についてもいくつかの報告がされている。6328-6333)。17442-17452)。[0006]エキソソームと免疫に関する研究は数多く行われているが、その中でも、癌細胞と免疫細胞との間のエキソソームを介した相互作用について多くの知見が報告されている。癌抗原として癌細胞特異的な膜タンパク質やエンドソーム構成タンパク質が多く含まれており、このようなエキソソームが抗原提示細胞に取り込まれることにより抗腫瘍免疫作用が誘導される。癌細胞由来エキソソームは免疫促進作用だけでなく免疫抑制作用を示すことも明らかとなっている。67:7458-7466等が報告されており、癌細胞から分泌されたエキソソームは様々な免疫抑制作用を示すことで、多面的に抗腫瘍免疫作用から癌細胞を守っているとも考えられる。[0007]このようなエキソソームによる免疫制御機能が明らかになるにつれ、エキソソームによる新しい癌免疫療法の開発も進められつつある。[0008]エキソソームをドラッグデリバリーキャリアとして応用した例はまだそれほど多くはないが、エキソソームを分泌する側の細胞を適切に選択することにより、また、疾病特異的に発現している膜タンパク質等のリガンドをエンドソームや細胞膜に過剰発現させてエキソソームに移行させるにより、標的指向性を上昇させ、ドラッグキャリアとして利用することが試みられている。18:1606-1614)。11:108-118)。[0009]一方、Ervitiらは、siRNAを搭載したエキソソームをマウスの脳に送り込むことに成功している(非特許文献11)。用いてニューロン特異的ペプチド(RVGペプチド)を融合させたエキソソーム膜タンパク質(Lamp2b)を発現する樹状細胞を作製した。その細胞から回収したエキソソームに電気穿孔法を用いてsiRNAを内包させ、マウスに投与したところ、脳のニューロンやミクログリアなどにsiRNAが送達され、標的遺伝子がノックダウンされることを報告している。アルツハイマー病治療の標的遺伝子であるBACE1のノックダウンにも成功しており、新しい治療法として期待されている。nmの会合体微粒子(ナノゲル)を形成する事を見出している。ナノゲルはタンパク質のリフォールディングを助けるシャペロン機能を有し、さらには、カチオン性基を導入したナノゲルにおいては細胞内にタンパク質や核酸を導入し得る事が分かっている。nm)を自発的に形成し得ること、さらに細胞内でシャペロン機能によりタンパク質を効率よく放出しえることが他のキャリアにはない大きな特徴である。155:54-59)のデリバリーとしてもカチオン性ナノゲルが有用であることを報告している。ナノゲルの癌ワクチンへの応用も進められている。[0011]癌ワクチンによる癌免疫療法は、副作用が少ないこと、長期にわたり癌細胞の増殖、再発、転移の抑制が可能であることなど他の治療法にはない特長を有している。ワクチン療法では、癌細胞や感染細胞が特異的に発現する抗原タンパク質をマクロファージや樹状細胞に、いかに効率よくデリバリーするかが重要である。nm以下の安定な複合体ナノ微粒子を形成した。99:3717-3724)。99:601-607)。食道がん抗原のNY-ESO-1タンパク質を内包したCHPナノゲルの臨床有用性も示唆されており、治験に進んでいる。最近、カチオン性ナノゲルの細胞親和性を利用した、粘膜ワクチンの開発も進めている。全身組織に加え、粘膜組織にも誘導可能であることから、インフルエンザなどの呼吸器感染症に対する予防ワクチンとして非常に効果的とされている。一方で、粘膜組織は、通常は上皮層によって強固に覆われており、経鼻ワクチンの効果を最大限に期待するためには、上気道粘膜免疫システムへの効果的なワクチンデリバリー技術の開発が必要不可欠とされてきた。9:572-578)。12:14-26)、リポソーム表面の機能化への応用も進めている。[0013]通常、特定の細胞から抽出精製したエキソソームは、特定の受け手細胞と相互作用して取り込まれることが明らかとなっているが、その受け手細胞以外の細胞とは相互作用しない。その為、本来の受け手細胞以外の任意の細胞にエキソソームを取り込ませる場合、従来は、目的の細胞が発現する細胞膜受容体に対する特異的なリガンドをエキソソーム表面に人為的に発現させることで、目的細胞とエキソソームの相互作用を実現させる戦略がとられてきた。あるリガンドをエキソソーム表面に発現させる技術としては、エキソソームに存在する膜タンパク質とリガンドの融合遺伝子を遺伝子工学的にエキソソーム産生細胞に導入する方法がほとんどである。その遺伝子工学操作の困難さや、産生細胞内部でのエキソソームへのリガンドの導入が不確実であること等から、エキソソームの任意の細胞への取り込み手法はいまだ確立されていない。[0014]疎水化多糖ナノゲルは、例えば特許文献1に記載されている。発明が解決しようとする課題[0017]本発明は、エキソソームの任意細胞への取り込み手法を提供することを目的とする。物質の細胞への導入法に関するものである。疎水化多糖ナノゲルとエキソソームから構成される、複合体。疎水化多糖ナノゲルが、多糖部分及び疎水性部分を有している、項1に記載の複合体。疎水化多糖ナノゲルの多糖部分が、プルラン、アミロペクチン、アミロース、デキストラン、ヒドロキシエチルデキストラン、マンナン、レバン、イヌリン、キチン、キトサン、キシログルカン、水溶性セルロースからなる群から選択される少なくとも1種である項2に記載の複合体。疎水性部分が、炭素数8~50の炭化水素基またはステリル基である、項2または3に記載の複合体。疎水性部分が、コレステリル基である、項2~4のいずれか1項に記載の複合体。疎水化多糖ナノゲルがカチオン性である、項1~5のいずれか1項に記載の複合体。疎水化多糖ナノゲルがカチオン性のコレステリル化プルランである、項6に記載の複合体。カチオン性基として、アミノ基を有する、項1~7のいずれか1項に記載の複合体。エキソソームが粒子径200ナノメートル未満の細胞外分泌小胞である項1~8のいずれかに記載の複合体。前記エキソソームが薬物またはsiRNAを含む、項1~8のいずれかに記載の複合体。項1~9のいずれかに記載の複合体からなる物質導入用担体。項10に記載の複合体からなる薬物またはsiRNAの導入剤。細胞内に薬物またはsiRNAもしくはその前駆体を導入したエキソソームと疎水化多糖ナノゲルを混合することを特徴とする、項10に記載の複合体の製造方法。細胞内に薬物またはsiRNAもしくはその前駆体を導入し、前記細胞を培養してエキソソームを得、得られたエキソソームと疎水化多糖ナノゲルを混合することを特徴とする、項13に記載の複合体の製造方法。エキソソームにエレクトロポレーションにより薬物またはsiRNAもしくはその前駆体を導入し、得られたエキソソームと疎水化多糖ナノゲルを混合することを特徴とする、項13に記載の複合体の製造方法。発明の効果[0034]本発明によれば、エキソソームの任意細胞への取り込み機能を付与し、核酸、薬物、タンパク質などの様々な生理活性物質の細胞への取り込みを促進、向上させることができる。細胞との親和性分子を導入した疎水化多糖ナノゲルをエキソソーム表面に被覆することでエキソソーム表面に細胞との親和性を付与することが可能となる。[0035]本発明によれば、本来、相互作用し得ない細胞へのエキソソームの導入を行うことが可能になる。確率論的なエキソソームへの機能改変膜タンパク質の導入では不可能な、エキソソーム膜表面の確実な機能化を可能とする。付与する機能をナノゲルへ導入する機能分子により制御することができる。[図2A]CHP-NH2ナノゲル/CFSE標識エキソソーム複合体を取り込んだHeLa細胞の共焦点レーザー顕微鏡画像(a)CFSE標識エキソソームのみ(b)CHP-NH2ナノゲル/CFSE標識エキソソーム複合体。[図2B]図2Aの上段において、色を反転させた図。[図3A]CHP-NH2ナノゲル/CFSE標識エキソソーム複合体を取り込んだRAW264.7細胞の共焦点レーザー顕微鏡画像(a)CFSE標識エキソソームのみ(b)CHP-NH2ナノゲル/CFSE標識エキソソーム複合体。[図3B]図3Aの上段において、色を反転させた図。[図4A]CHP-NH2ナノゲル/エキソソーム複合体によるsiRNAの細胞内導入実験(CT26細胞、CMS5細胞)。