溶媒は100秒遅れ【0187】フラグメンテーションChromaTOFソフトウェアは、より良い分離および解釈のために、フラグメンテーションをコンパイルし、および同時移動するピークを解析する。脂肪酸の同定は、同じ条件で注入された標準液(下記参照)を元に、保持時間およびフラグメンテーション合致、ならびに/または先に説明されたソフトウェアに含まれたNIST/EPA/NIHデータベースとの良好な合致により行う。11-オクタデセン酸メチルエステルとしても公知であるバクセン酸メチルエステルは、Sigmaから得たバクセン酸(CAS:506-17-2)から作製された標準物を試行することにより、カノーラ種子抽出物から同定された。保持時間は、1207秒であり、標準品と853の合致および先に説明された文献と814の合致を生じる。【0191】(表22)【0192】バクセン酸メチルエステル法:メチル化された生成物を、この酸100mgのメチル化後に得た。0.5N(Supelco)の5mlに溶解。−窒素下70°Cで1時間加熱。−室温に冷却後、0.9%NaClを含有する水5mlを添加。−3回連続したヘキサン(15ml)抽出により、ヘキサン中にエステルを分配。−この有機層を、HNaCO3を2.5%含有する水15mlと混合することにより、酸残渣を中和。−有機層を、N2下で蒸発させ、室温で油状の透明な液体を得、これはバクセン酸メチルエステルに対応している。様々な圃場で、農学的測定を行い、トランスジェニックと対照を比較した。710対照と、同様に挙動し、および類似した形質を示した(はるかに改善された飽和体レベル以外)。従って本導入遺伝子は、植物の健康に一貫して負の作用は有さない。形質および等級化システムのまとめを、表23に示している。様々な判定基準を、様々な場所の圃場で使用した。表24-27は、いくつかの代表的結果を数値で表している。下記の略号を、これらの図において使用した。表24は、事象#218-11.30からの系統の農学的データを示している。表25は、事象#36-11.19からの系統の農学的データを示している。表26は、事象69-11.19からの系統の農学的データを示している。これらのことは、本発明、すなわち「無飽和」カノーラの実現は、驚くべきことに、他の重要な農学的形質への有害な作用を伴わずに実践することができることを明らかにしている。本実施例は更に、Δ9デサチュラーゼ遺伝子の「スタック」している多コピーは、驚くべき遺伝子量の作用を有し、このことは、カノーラのような油糧種子植物中の飽和体の更なる低下にも使用することができることを示している。以下は、特に記さない限りは、FAME手法を用いて測定された温室データである。10種子バルク脂肪酸データを示す。710対照と比較した、各植物に関するおおよその平均総飽和体、および総飽和体の平均減少の概数を示す)。その世代で、サザンデータは使用しなかった。従って飽和体発現およびインベーダーアッセイ法によって、推定されたスタックおよび推定された親同胞に加えヌルの選択を行い、F3植物の生育およびサザンを使用する再試験により確認した。統計学的には分析されないが、41種の「スタック」系統からの試料は、平均総飽和体3.5%を有した。21種の「シングル」系統は、平均総飽和3.84%を有した。表28は、コピー数および接合状態を確認するために植直しした推定されたF3スタック、推定された親同胞、およびヌルのまとめを含んでいる。TDN0400141、TDN0400142、TDN0400145、TDN0400155、TDN0400158、およびTDN0400160と命名された系統は、ホモ接合体スタックであると推定された。系統TDN0400189、TDN0400143、TDN0400197、TDN0400167、およびTDN0400184は、スタック外の親同胞であると推定された。系統TDN0400198、TDN0400199は、これらのスタックの自殖されたヌルとして進めた。TDN0400202、TDN0400204、およびTDN0400208は、シングル事象である。この材料は、現在も圃場にあるか、または最近収穫された。従って圃場データは、まだ入手できていない。図8および9は、F3植物からのDNAの2個のゲル泳動の写真である。サザン分析についての単離したDNAと同様の問題点にこの工程で遭遇し、そのため提供されたこれらの植物の9種全てがゲルに出現したわけではない。これらのゲルを元に、系統TDN0400141、TDN0400142、および恐らくTDN0400158(わずかに2種の植物)は、ホモ接合体スタックである。TDN0400145は、依然事象36について分離しており、およびTDN0400155は、依然事象69について分離している。系統TDN0400160は、バンドの奇数分離を有するように見え、これは全て3種のシングル事象に分離していることを示している。TDN0400160について、経過観察を行った。この交雑からの植物#8は、2.6%と低い飽和レベルを有し、これは高い接合状態のトリプルスタックと一致している。追加の分子分析は、このことを確認している。親同胞であると推定された系統の全てが、これらのゲル中に出現したわけではない(表29の事象カラムにおいて強調された系統TDN0400184、TDN0400189、およびTDN0400197、以下に考察)。単独の植物脂肪酸データを元に、TDN0400184由来の9種の植物(同胞でない(sibbed-out)シングル事象218であると推定される)は、推定されたスタックと同じくらい低い飽和レベルを有した。このデータの傾向は、スタックは、「同胞でない」事象と比べ、飽和体の減少を一貫して示す(2種のトランスジェニック事象の交雑から回復された単純トランスジェニック事象)。710、シングル事象、および各単独のF4植物からの10種の種子バルク脂肪酸データを含む。各推定されたスタック、ヌル、シングル事象などの9種の植物は、再生し、分子分析のために組織試料とし、および脂肪酸分析のための種子セットで維持した。【図1】アラビドプシスにおいて、飽和脂肪酸の60%を超える減少が実現されたことを示している。このグラフは、単独のアラビドプシス事象に関するT2およびT3種子データをまとめている。【図2】18種の追加の形質転換体由来のT2アラビドプシス種子における、最大60〜70%の「飽和体」の減少を示している。このグラフに図示されたデータは、表8に示された数値データおよびより早期の数値データと組み合わせられた。【図3】Westarカノーラにおいて、飽和脂肪が、43%よりも多く減少したこと(および、24:0が含まれる場合は、50%減少が達成されたこと)を示している。【図4A】対照と比較した、事象36-11.19を含む様々なカノーラ植物由来の種子の総飽和を比較する棒グラフを示す。【図4B】棒グラフにより図示された数値データを表す。【図4C】棒グラフにより図示された数値データを表す。【図5A】対照と比較した、事象218-11.30を含む様々なカノーラ植物由来の種子の総飽和を比較する棒グラフを示す。【図5B】棒グラフにより図示された数値データを表す。【図5C】棒グラフにより図示された数値データを表す。【図6】T3圃場試験由来のハーフ種子データを示す。図6Aおよび6Bは、ヌル対照(導入遺伝子が植物から分離された事象)および野生型対照(非形質転換系統)と比較したトランスジェニック事象におけるC16:0の減少およびC16:1の増加を明らかに示している。図6Cおよび6Dは、ヌル対照および野生型対照と比較したトランスジェニック事象におけるC18:0の減少およびC18:1の増加を明らかに示している。図6Eおよび6Fは、ヌル対照および野生型対照と比較したトランスジェニック事象におけるC20:0およびC22:0の各々の減少を明らかに示している。図6Gおよび6Hは、ヌル対照および野生型対照と比較したトランスジェニック事象におけるC16:0のシフトおよび減少、ならびにC16:1のシフトおよび増加を明らかに示している。図6Iおよび6Jは、ヌル対照および野生型対照と比較したトランスジェニック事象におけるC18:0のシフトおよび減少、ならびにC18:1のシフトおよび増加を明らかに示している。図6Kおよび6Lは、C18:2およびC18:3の同様の棒グラフを示している。710系統と比べた、総飽和の減少を図示している。図6Nは、1000個の種子についての分布を示している。【図7】実施例16のプロトコールを使用して得たデータを示している。【図8】実施例19において考察した、F3植物由来のDNAによる2個のゲル泳動の図である。【図9】実施例19において考察した、F3植物由来のDNAによる2個のゲル泳動の図である。【請求項1】3.5%未満の総飽和体(saturate)および80%未満のオレイン酸を含有する油性画分を有する種子を生成する、カノーラ植物。前記油性画分が、70%〜78%のオレイン酸を含有する、請求項1記載の植物。前記油性画分が、3%を超えないリノレン酸を含有する、請求項1記載の植物。前記油性画分が、70%〜78%のオレイン酸および3.5%を超えないリノレン酸を含有する、請求項1記載の植物。請求項1記載のカノーラ植物から生じた、種子。【請求項6】3.5%未満の総飽和体および80%未満のオレイン酸を含有する、カノーラ油。前記油性画分が、2.7%を超えない総飽和体を有する、請求項1記載のカノーラ植物。【請求項9】2.7%を超えない総飽和体を含有する油性画分を有する、請求項5記載のカノーラ種子。【請求項10】2.7%を超えない総飽和体を含有する油性画分を有する、請求項6記載のカノーラ油。【請求項11】ジャガイモ材料を、請求項6記載のカノーラ油で揚げる工程を含む、フライ食品組成物の製造法。Sulfate)による室温で15分間である、植物。NO:1を含む、請求項12記載の植物。前記洗浄条件が、0.1xSSCおよび0.1%SDSによる、室温で15分間である、請求項12記載の植物。前記洗浄条件が、0.1xSSCおよび0.1%SDSによる、55°Cで30分間である、請求項12記載の植物。前記ゲノムが、2種の前記ポリヌクレオチドを含む、請求項12記載の植物。前記ゲノムが、3種の前記ポリヌクレオチドを含む、請求項12記載の植物。前記ポリヌクレオチドが、種子特異的プロモーターへ機能的に連結されている、請求項12記載の植物。請求項5記載の種子により生育された植物。NO:1の分子とハイブリダイズする、方法。油性画分が、80%未満のオレイン酸を含有する、請求項20記載の方法。前記タンパク質が、前記対応する野生型カノーラ植物と比較して、前記トランスジェニックカノーラ植物の前記種子の油性画分中のパルミチン酸(16:0)の減少、ベヘン酸(22:0)の減少、およびパルミトレイン酸(16:1)の増加を引き起こす、請求項20記載の方法。前記飽和脂肪が、少なくとも60%減少される、請求項20記載の方法。NO:1に示されたヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド。前記植物が、高さが少なくとも100cmであり、平均種子質量が3mgを上回る、請求項1記載の植物。ekouhou.net。