研究者の卵が毎日カエルと戯れながら漏らす独り言。カエラーにとっては、たまに有益な情報が転がっているかもしれない。トロピを扱わせれば世界で2、3位を自負。眠いずっと夜中一回は起きてストレッチしないと足ムズムズで眠れないんですが、昨日は2回も目が覚めてきつい。今朝7時に来て実験開始して、今とってるタイムラプスが終わるのは18時半、、。今週は卵母細胞の調子が良かったので、この実験も今回で最後だろう。reviewer2が要求した一番難しい実験。ROSが細胞周期によってオスシレーション(オシレーション?)するというのをトランスジェニック胚のタイムラプスで示したんですが、フォーカスや卵割の動きによってできるアーティファクトではないか?というクレーム。そこで一応YFPのトランスジェニックのイメージングもしたんですが(イメージングによるアーティファクトでないことが証明できました)、最良のコントロールは、ROSに反応しないhyperの変異バージョンsypHer。トランスジェニックがいない。vitroで成熟させた後、精子核移植!!!という実験をここ数週間やっておりました。これで4回めかな?やっとコツを覚えて、まずは朝7時に最初の核移植、それが卵割始めるまで他のreviwerの要求を答えるための卵母細胞を使った実験のためのイメージングをし、卵割始めたらそれをセットしてタイムラプス開始、そして次の核移植、ちょうど3時間で前のやつを止めて次のやつ。いう感じで、今3回めのタイムラプス中。プロゲステロンを前日に培地に加えるのですが、朝7時にやろうとしたらどうやら昼の2時には入れないと、一見成熟しているように見えても実はインジェクションによるactivationが起きない!というのを前回に気づいて、今回は昼2時と帰宅前に入れることでより長く核移植を可能に!先週の土曜日のタイムラプスで綺麗なポジコンが取れたんですが、それをエンリケにブラインドテストしたところ、ちゃんとポジコンだけがオスシレーションしているという回答。ナンシーが来て、ナンシーから見てもポジコンのみオスシレーションしていて、sypherはランダムに見えたようでした。これは嬉しい!明日は一応チェスターのポケモンgoイベントに行く予定なんですが、起きれるかな、、、。鶏の卵エンリケは昨日の夕方の時点で、私の書いたドラフトの続きにすら気付いていませんでした。例のクリニシャン用のプロトコール集のカエル章。yolk?と聞いてきたので、そう、スーパーで買ってきた鶏の卵の黄身❗と返答。一応メールには、これは最終稿じゃないから、レファレンスも足さないといけないし、ってあんた。レファレンスの数も規定数越えてるから、減らす方だっちゅーの。愚痴ります!カエル担当テクニシャンのボブが(噂によると)セクハラで左遷されて(でもセクハラを訴えたのは、いかにもやばそうなイギリスには珍しい超でぶ女)、新しく担当になったエマ、仕事しなさそうな人だなーと思ったらやはり。10月末に先に書いた通り、カエルをストックセンターから購入したのですが、10月頭のミーティングでエマを前にして、直接ポーツマスに連絡とって、購入するかもしれないと言っておいたんです。その時彼女は何も言わず。マットが日曜日に来てくれることになり、6日前にポーツマスのシニアテクから見積書が届いたので、エマに添付して、どう注文したら良いか尋ねたのに返事なし。迫った木曜日か金曜日に、実際にカエル部屋で働いているトムくんに日曜日にカエルが来るんだけど、どうしたらいいか直接聞いたら、彼はデリバリーノートだけきちんと渡してくれたらいい、とのことだったので、彼にエマに渡してくれるようにカエルが来た翌日月曜日に渡した。ちなみにボブだったら、いつもきちんと手続きをしてくれていた。ところが、大学のwebシステムで注文しろというので、がしかし、今回は他のカエルラボのグラントも使って支払いするので、私はそれにアクセスできないので、またもやどうしたらいいか聞いたのに返事がこず、最終的に彼女の上の人と思われる人から、今後は彼らを通して注文と配達を手配しろ、今回はあなたたちで直接支払うように、とのメール。offでクレカの使用を申請して、それが通ってwebからクレカ使用して支払い)、今度は毎月カエルの維持費の請求書が来るんですが、なぜかうちのグラントだけオーバーチャージされてるんですよ!すごい大きな分かりやすい文字で各グラントコードをそれぞれのタンクに貼っているので、それを数えるだけなのに。おいおい、そもそも先月の請求書は間違っていなかったし、新しく増えたグラントはきちんと請求されているんですが???もう、嫌すぎる。今朝7時に起きてアプリを起動させたら、いつもはアバターの左前方に出てくるポケモンが背後に出現!もしかして変更きたのか、と日本のフォーラム見るとやはり変更プラス時間がランダムになった可能性も議論されておりました。ぽけマップ完全死亡、、、。ちなみに7時半に起動したらいつもの位置にタッツー。今8時になったので起動したら、背後にプリン出現。ポケソースが変わっただけかな?ランダムになると探すのきつくなるよねー。シティセンターなんて固定時間でも湧く数が半端ないので探すの大変だけど。いえばハロウィン終わってからイーブイがバンバン出るので(うちにも2、3匹来てくれた)、シャワーズのハイドロポンプとアクアテール両方やっと2000超まで強化できました。ギャラドスもポンプ、波動ともに2000まで強化。いえばピカデリー駅で電車を待っていたら、タマタマ出現。久しぶりにナッシーも少し強化できました。書いているうちに8時25分になってタッツーの出現場所にポニータ!やっぱり一時間に一回みたい。今まで同じ時間に2匹ゲットできていたので楽でしたが、完全に違う時間で一時間に2匹か。外出や手の外せない作業で同時に2匹のがす機会は減るのか。原稿の管理をきちんとできないうちのボス。いうわけで、今週末と多分来週はスクラッチから原稿書き。いい機会だとは思います。カエル外の分野から来たポスドクとか最近くる学生はやたら、プロトコールくれ!と言うわけです。うちらにとっちゃカエ注とかインジェクションとか日常なので、きちんと書かれたプロトコールなんてないわけです。普通のインジェクションに高価なficollとか必要ないですから!システインもいちいちpHメーターで計るとかそんな面倒な!試験紙でオッケー。そもそも書かれたプロトコールにこだわる姿勢は嫌い。必要だけど、今のネット時代どこからでも手に入れられる。大事なのは、上手な人の、プロトコールに書かれていないテクニックを見て学ぶことだと思う。minutesまあこの季節に卵の質を期待しちゃいかんな。今日の受精率は50%以下。