¥115,000¥92,0002019/11/25~2020/03/31※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。Kitを用いると、組換えレンチウイルスの力価(RNAタイター)を極めて迅速、簡便かつ正確に測定できる。qRT-PCRとインターカレーター法を組み合わせて、添付の校正用RNAを用いて作成した検量線からウイルスゲノム量を測定する(図1)。感染性を基にした標準的な力価測定法には、蛍光マーカー、薬剤耐性、または細胞染色を用いた方法があるが、終了までに2~10日間を要する。これらの中で、最も迅速なフローサイトメトリーによる測定でさえ、48時間未満では力価を正確に得ることができない。このような長時間を要する力価測定法では、凍結解凍の繰り返しや長期のウイルス保管を余儀なくされ、その間にウイルスストックの感染性が低下してしまう。その低下の程度は測定できない。多くの場合、何日も経った推定力価をやむなく感染性とMOIの算出に使用することになる。形質導入による力価測定法は、終了までに最長10日間を要する。Kitの所要時間はわずか4時間で、ウイルスの回収、力価測定、および標的細胞への感染全てを同日中に実施できる。ClontechのqRT-PCRタイター測定法ではわずか4時間で結果が得られる。qRT-PCR法を用いることでタイター測定に要する時間、すなわちウイルス回収後、感染を行うまでのインターバルを短縮でき、ウイルス回収を行ったその日のうちに感染までを行うことが可能になる。力価測定に時間を要してウイルス力価の低下を招くことがなくなるため、意図した通りのMOIで感染を行い再現性の高い結果を得ることができる。qRT-PCR力価測定法Lenti-Xタイター測定キットには、ウイルスサンプルまたはキットに同梱のコントロールRNAを用いるqRT-PCR反応200回分の試薬が含まれている。本キットはすべてのHIV-1ベースのレンチウイルスベクターに使用できる。発現カセット(cDNA、shRNA)やウイルスバックボーンに左右されることなく、正確な力価が得られるため、複数のウイルス試料の同時測定が可能である。I処理ステップがあるため、一過性トランスフェクションで産生したウイルス中にプラスミドDNAが残留していても、安定産生株から産生したウイルスと同様、少量のサンプルで正確な力価測定が行える(3)。Templateを検出した際の増幅曲線。テンプレート無し(No-Template-Control:NTC)のバックグラウンドが低く、測定領域が6桁以上に及ぶことがわかる。パネルB:パネルAの増幅曲線から得られた検量線。広い範囲のRNAコピー数に対し、高い直線性を示す。精製したレンチウイルスゲノムの10倍段階希釈液を用いた力価測定結果の例。Systemを用いて一過性トランスフェクションにより産生した。3日後、レンチウイルス上清を回収し、qRT-PCRによる力価測定まで-80°Cで保管した。Kitは、RNAタイターの測定に最適である。ウイルスストックの生物学的タイター(IFU/ml)を独立した他の方法で決定し、RNAタイター(copies/ml)との相関値(copies/IFU)をあらかじめ求めておけば、短時間で得られるRNAタイターから生物学的タイターを推定して、MOIを決定することも可能である。(10回用)*ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用します。LSRをご使用ください。Kit:室温その他のコンポーネント:-20°Cこの製品を見た人は、こんな製品も見ています。取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。