nucleaseなどによるゲノム編集によって、ゲノムDNAに導入された挿入や欠失などの配列を確認するためのサンプルを調製するキットである。キットには、ターゲット部位の増幅、クローニング、シーケンス用サンプルの調製に必要な試薬が全て含まれており、迅速で信頼性の高い結果を得ることができる。Mixを用いており、DNA抽出を行うことなく、細胞や細胞ライセートから直接ターゲットDNA配列を増幅することができる。pUC19ベクターにクローニングする。Cellsを用いた形質転換後、得られた複数のコロニーよりコロニーPCRを行い、ターゲット領域を増幅、精製し、シーケンス確認用サンプルを調製する。シーケンス解析により、ターゲットとなるゲノム部位への挿入欠損配列を確認することができる。増幅産物には個々の細胞のゲノム編集部位がプールされる。pUC19ベクターにPCR産物を直接クローニングする。形質転換後、コロニーPCRによりプラスミドのインサート部分を増幅する。DNAシーケンス解析を行い、ターゲットゲノムサイト上に生じた個々の挿入、欠失の配列を確認する。図2.CRISPR/Cas9によるゲノム編集後のCD81遺伝子の挿入、欠失配列の確認Cas9をコードするプラスミドとCD81遺伝子をターゲットとしたsgRNAをHeLa細胞にトランスフェクションした。Kitを用いてCD81ターゲット領域のシーケンス確認用サンプルを調製し、配列確認を行った。6クローンのシーケンスデータと元の配列とのアライメントを行って、CD81遺伝子上に導入された変異配列を確認した。:-70°Cその他のコンポーネント:-20°Cこの製品を見た人は、こんな製品も見ています。取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。