本発明は、少なくとも一つの脂質、及び包膜ウイルスの包膜蛋白質を備えるウイロソーム膜と、ウイロソームの内側及び外側に位置し、前記包膜蛋白質に付着した前記包膜ウイルスのヌクレオカプシド粒子を備えるウイロソームを提供する。本発明は、本発明のウイロソームを備えるワクチンと、本発明のウイロソームを産生する方法を提供する。本発明は、本発明のウイロソームを、例えばHBV感染に関連した疾患の予防又は緩和のためのワクチンを調製するために使用する方法、及び被験者にワクチンを接種する方法を提供する。本発明は、少なくとも一つの脂質及び包膜ウイルスの包膜蛋白質を備えるウイロソーム膜、及びウイロソームの内側及び外側に位置し、前記包膜蛋白質に付着した前記包膜ウイルスのヌクレオカプシド粒子を備えるウイロソームに関する。本発明は、本発明のウイロソームを備えるワクチン、及び本発明のウイロソームの生成のための方法に関する。本発明は、本発明のウイロソームをワクチンの調製のために、例えばHBV感染に関連した疾患の予防又は緩和のために使用する方法、及び被験者にワクチンを接種する方法に関する。本願明細書のテキスト全般を通じていくつかの文献が引用されている。新規であり、安全性がより高いワクチンの開発には、特性がよく知られた抗原、特に高度に精製された組み換え蛋白質又は合成ペプチドが頻繁に利用されている。いくつかの成果に関わらず、そのような抗原は単独で投与されたときには免疫原性が低いことが多いという事実により、このアプローチは妨げられる。この事実により、所定の抗原の免疫原性を促進する能力を有している適切なアジュバント及びキャリアシステムの開発が余儀なくさせる。一つの可能なアプローチは抗原を、例えばウイルス様の粒子など、より高度な構造中に組み込むことである。単一の粒子中で全てのワクチン成分が物理的に結合することは、それらが個々の免疫細胞と同時に相互作用することを保証し、そしてそれによって、相乗的な潜在力が最大に利用される。これは、免疫刺激性又は免疫調節性の成分(アジュバント)が調製物に含まれている場合には特に関連する。粒子構造それ自身が免疫刺激性の効果を有すことができ、そして、個々の成分の安定性及び免疫原性の両者を増加させることができる。【0004】そこで問題は関連する抗原を産業上利用可能な調整物中に混ぜる適切なアプローチを見出すということであり、それは効率的な予防及び/又は治療上の適用へ至る。宿主細胞中でウイルスが複製する間にウイルスゲノムのコピー作られ、細胞内の設備基盤を利用しながらウイルス蛋白質が会合して成熟したビリオンとなるが、その前にウイルス蛋白質が発現してプロセスされる。共通の基礎は、ウイルスの複製と子孫の会合には、生きている宿主細胞の環境、および、ウイルスの核酸、ウイルスと宿主細胞の蛋白質と脂質膜の間の、順序が決まった一連の特異的な相互作用が必要であるということであり、それによって高分子のビリオン構造の分別と会合へと至る。多数の異なった分子が必用とされ、加えて、関連している細胞構造は、いずれのビリオンの会合も非常に複雑であることを示す。異なったウイルスクラス、特に包膜ウイルスと非包膜ウイルスの間には大きな差がある。全ての包膜ウイルスに共通しているのは、ウイルスの蛋白質が組み込まれた脂質膜からなるウイルスの外部殻、および、その結果としての、成熟した包膜ウイルスが会合するための、膜に結合し可溶性のウイルス蛋白質又は蛋白質に基づいた構造(例えばヌクレオカプシド)の間の必用な相互作用である。非包膜ウイルスは脂質に基づいた膜を欠き、蛋白質及び核酸分子のみから組みたてられている。【0006】インビトロとインビボでウイルス粒子を再構成しようとする数多くのアプロ−チが文献中に述べられており、異なったカテゴリーに区分けできる。【0007】(a)ウイルス包膜のインビトロ再構成ウイルス由来の又は組み換えられた包膜蛋白質を精製し、追加の脂質の存在下又は非存在下でプロテオリポソームへ調製される。この純粋なインビトロのアプローチにより、包膜ウイルスの外殻、包膜の生成を達成できるが、これはウイルスの核、ヌクレオカプシドを含んでいない。異なったウイルス由来の包膜蛋白質を組み込んだ、キメラのウイロソーム構造の例がある。再構成されたウイルス包膜も、遺伝子(DNA又はRNA)の移入に成功裏に使用されているが、これらの方法は機能を有し、蛋白質に基づいたヌクレオカプシドのパッケージングには依存しておらず、むしろ、核酸と再構成された包膜との直接的な結合に依存している。HPV(酵母、バキュロ)、HCV(バキュロ)、HBs抗原(酵母、CHO)、HBc(大腸菌)となることができる。これらのアプロ−チの全てに共通することとして、自己会合は異種の細胞発現システム中で起こり、引き続いてウイルス様の粒子が精製される。そこで会合はインビトロでは起こらないが、細胞システムを頼りにする。【0009】(c)インビトロでの非包膜(20面体の)ウイルス又はウイルス様粒子の再構成このアプローチは、別々に精製された成分に基づいている。脂質膜に基づいた包膜が存在しないために、非包膜ウイルスは構造においてより単純であり、もし全ての必要な成分が正しい化学量論で存在していれば、インビトロである条件下において自己会合することができる。多くの異なった型のウイルスからヌクレオカプシドが抽出され単離され、それらの組成の特性解析が行われてきた。ウイルスのレスキューを目的として、これらの調製物を感染しやすい細胞のトランスフェクションのために使用することもできる。成功裏のウイルスレスキューは、機能を有するヌクレオカプシドが単離され、宿主細胞の細胞質へ運ばれることを意味する。これは、機能を有する包膜ウイルスの再構成の成功を示すものではない。機能を有する包膜に依存する天然の感染経路は形質転換体の使用によってバイパスされ、後者は宿主細胞の細胞質へヌクレオカプシドを直接的に運搬することを仲介している。【0011】(e)細胞培養システム中における包膜ウイルス及びウイルスベクターの偽タイピングこのインビボのアプローチは、実験室規模のキメラウイルス又はベクター(例えば、レトロウイルス、レンチウイルス、及びAAV)の産生において、広範かつ成功裏に使用されている。偽タイピングされたウイルスの産生の鍵となる要素は、ビリオン中へ組み込まれるべき全ての蛋白質を共発現し、ビリオンの組み立てを仲介するヘルパーウイルスである。【0012】ウイルス様の粒子の特異的な型として、ウイロソームは臨床的に証明されたワクチン担体/アジュバントシステムであり、ヒトにおいて素晴らしい安全性と耐性プロファイルを有している。ウイロソ−ム担体が、外来性及び内在性の経路の両者を通じて抗原プロセシングを仲介する能力により、このシステムは治療用ワクチンのための良い候補となっている。【0013】ウイロソームの基本的な概念はインビトロでの空のウイルス包膜の、あるいはより一般的には、球状の脂質二重層中へ組み込まれたウイルスの、包膜蛋白質の再構成を備える。