×この技術を簡単クリック査定この機能をご利用いただくには、会員登録(無料)が必要です。出願した特許の牽制数、引用された数などを知る事ができます。気になる技術や特許をブックマークしておけば、いつでも後から読むことができます。後で印刷するために、公報をPDFでダウンロードできます。会員登録してastamuseを使えば、もっと簡単に便利にお使いいただけます。会員登録(無料)「astamuse」は世界中の挑戦したい社会課題に挑戦し、未来を創る人のプラットフォームです。※この項目の情報は公開日時点(2016年9月1日)のものです。殺虫性タンパク質をコードするDNAを含むトランスジェニック植物の提供。解決手段フォールアーミーワーム昆虫を防除するため、昆虫による抵抗性の発達を遅らせるか阻止するためのトランスジェニック植物であり、Cry1Da殺虫性タンパク質およびCry1Be殺虫性タンパク質をコードするDNAを含む、ならびにCry1Fa、Vip3Ab、Cry1CaおよびCry1Eからなる群から選択される第三のコア毒素含有タンパク質をコードするDNAをさらに含む。人は、食物用途およびエネルギー用途のためにトウモロコシを栽培する。人は、ダイズおよびワタを含む他の多くの作物も栽培する。昆虫は、植物を食べて損害を与え、それによってこれらの人の努力を台無しにする。部の領域である重要な役割を演じている。Bt殺虫性タンパク質遺伝子による形質転換を通して昆虫抵抗性植物を作出する能力により現代農業が革新されて、殺虫性タンパク質およびその遺伝子の重要性および価値が高まっている。製するために、数種のBtタンパク質が用いられてきた。このBtタンパク質としては、トウモロコシのCry1Ab、Cry1Ac、Cry1FおよびCry3Bb、ワタのCry1AcおよびCry2Ab、ならびにジャガイモのCry3Aが挙げられる。これらのタンパク質を発現する市販製品は、2種のタンパク質の組合せ殺虫スペクトルが所望される場合(例えば、それぞれ鱗翅目害虫およびルートワームへの抵抗性を付与するために組み合わされた、トウモロコシのCry1AbおよびCry3Bb)、または2種のタンパク質のそれぞれ独立した作用により、これらのタンパク質が感受性昆虫集団での抵抗性の発達を遅らせるための手段として有用となる場合(例えば、オオタバコガのための抵抗対応を付与するために組み合わされた、ワタのCry1AcおよびCry2Ab)を除いて、単一のタンパク質しか発現しない。2009/0313717号も参照されたい。2008/0311096号は、Cry1F抵抗性のECBを防除するためのCry1Abに一部関する。抗性を有害生物集団が発達させるという懸念も生む。16:144-146)。集団が「タンパク質B」に感受性である場合、そこには交差抵抗性がなく、タンパク質Aおよびタンパク質Bの組合せがタンパク質A単独に対する抵抗性を遅らせるのに有効であろうと結論付けられるであろう。抵抗性な昆虫集団が存在しない場合、作用機構および交差抵抗性能力に関連すると推測される他の特性に基づいて評価を行うことができる。この手法に特有の交差抵抗性の欠如の重要な予測因子は、殺虫性タンパク質が感受性昆虫種の受容体をめぐって競合しないことである。変異して毒素の1つがその受容体にもはや結合せず、よって昆虫に対してもはや殺虫性でないならば、昆虫は別の毒素(同じ受容体に競合的に結合する)にも抵抗性になる場合もあり得る。昆虫は両方のBt毒素に交差抵抗性であると言われる。2つの毒素が2つの異なる受容体に結合する場合には、これは昆虫がそれら2つの毒素に同時に抵抗性にならないことを示す指標であろう。saccharalis))に対する活性を有する。事象TC1507を含むトランスジェニックトウモロコシ植物で生成されるようなCry1Faタンパク質は、FAW防除のための業界をリードする昆虫抵抗性形質を担う。標)製品でさらに利用されている。的な技術がCry1Faタンパク質の殺虫活性を不活性化するので、Cry1Faタンパク質を用いる(競合的または相同的)受容体結合性試験を行う能力は制限される。lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/)に記載されている。要群の「Cry」毒素(Cry1〜Cry59)が現在あり、さらなるCyt毒素およびVIP毒素などがある。数字で表した各群の多くは大文字のサブグループを有し、大文字のサブグループは小文字のサブサブグループを有する。(例えば、Cry1はA〜Lを有し、Cry1Aはa〜iを有する)。殺虫性タンパク質をコードするDNAを含むトランスジェニック植物の提供。フォールアーミーワーム昆虫を防除するため、昆虫による抵抗性の発達を遅らせるか阻止するためのトランスジェニック植物であり、Cry1Da殺虫性タンパク質およびCry1Be殺虫性タンパク質をコードするDNAを含む、ならびにCry1Fa、Vip3Ab、Cry1CaおよびCry1Eからなる群から選択される第三のコア毒素含有タンパク質をコードするDNAをさらに含む。請求項1Cry1Da殺虫性タンパク質をコードするDNAおよびCry1Be殺虫性タンパク質をコードするDNAを含むトランスジェニック植物。請求項2Cry1Fa、Vip3Ab、Cry1CaおよびCry1Eからなる群から選択される第三のコア毒素含有タンパク質をコードするDNAをさらに含む、請求項1に記載のトランスジェニック植物。請求項3Cry1Faタンパク質をコードするDNAと、Cry2A、Cry1I、DIG−3およびCry1Abからなる群から選択される第四のタンパク質をコードするDNAとをさらに含む、請求項2に記載のトランスジェニック植物。請求項4請求項1から3のいずれかに記載の植物の種子。請求項5非Bt緩衝帯植物および請求項1〜3のいずれかに記載の複数の植物を備える植物の圃場であって、前記緩衝帯植物は前記圃場の全ての作物植物の40%未満を構成する、圃場。請求項6前記緩衝帯植物が前記圃場の全ての作物植物の30%未満を構成する、請求項5に記載の植物の圃場。請求項7前記緩衝帯植物が前記圃場の全ての作物植物の20%未満を構成する、請求項5に記載の植物の圃場。請求項8前記緩衝帯植物が前記圃場の全ての作物植物の10%未満を構成する、請求項5に記載の植物の圃場。請求項9前記緩衝帯植物が前記圃場の全ての作物植物の5%未満を構成する、請求項5に記載の植物の圃場。請求項10前記緩衝帯植物がブロックまたは帯状地にある、請求項5に記載の植物の圃場。16種子を播いて請求項5に記載の植物の圃場を作製することを含む、昆虫によるCry毒素への抵抗性の発達に対応する方法。請求項17前記植物が10エーカーよりも多くを占める、請求項1から3のいずれかに記載の圃場。請求項18トウモロコシ、ダイズおよびワタからなる群から選択される、請求項1から3のいずれかに記載の植物。請求項19メイズ植物である、請求項18に記載の植物。請求項20前記植物細胞が、前記Cry1Be殺虫性タンパク質をコードするDNAおよび前記Cry1Da殺虫性タンパク質をコードするDNAを含み、前記Cry1Be殺虫性タンパク質が配列番号1と少なくとも99%同一であり、前記Cry1Da殺虫性タンパク質が配列番号2と少なくとも99%同一である、請求項1から3のいずれかに記載の植物の植物細胞。請求項21前記Cry1Be殺虫性タンパク質が配列番号1を含み、前記Cry1Da殺虫性タンパク質が配列番号2を含む、請求項1から3のいずれかに記載の植物。請求項22請求項20に記載の植物細胞を生成する方法。0001人は、食物用途およびエネルギー用途のためにトウモロコシを栽培する。人は、ダイズおよびワタを含む他の多くの作物も栽培する。昆虫は、植物を食べて損害を与え、それによってこれらの人の努力を台無しにする。部の領域である重要な役割を演じている。Bt殺虫性タンパク質遺伝子による形質転換を通して昆虫抵抗性植物を作出する能力により現代農業が革新されて、殺虫性タンパク質およびその遺伝子の重要性および価値が高まっている。製するために、数種のBtタンパク質が用いられてきた。このBtタンパク質としては、トウモロコシのCry1Ab、Cry1Ac、Cry1FおよびCry3Bb、ワタのCry1AcおよびCry2Ab、ならびにジャガイモのCry3Aが挙げられる。0003これらのタンパク質を発現する市販製品は、2種のタンパク質の組合せ殺虫スペクトルが所望される場合(例えば、それぞれ鱗翅目害虫およびルートワームへの抵抗性を付与するために組み合わされた、トウモロコシのCry1AbおよびCry3Bb)、または2種のタンパク質のそれぞれ独立した作用により、これらのタンパク質が感受性昆虫集団での抵抗性の発達を遅らせるための手段として有用となる場合(例えば、オオタバコガのための抵抗対応を付与するために組み合わされた、ワタのCry1AcおよびCry2Ab)を除いて、単一のタンパク質しか発現しない。2009/0313717号も参照されたい。2008/0311096号は、Cry1F抵抗性のECBを防除するためのCry1Abに一部関する。抗性を有害生物集団が発達させるという懸念も生む。16:144-146)。集団が「タンパク質B」に感受性である場合、そこには交差抵抗性がなく、タンパク質Aおよびタンパク質Bの組合せがタンパク質A単独に対する抵抗性を遅らせるのに有効であろうと結論付けられるであろう。0006抵抗性な昆虫集団が存在しない場合、作用機構および交差抵抗性能力に関連すると推測される他の特性に基づいて評価を行うことができる。この手法に特有の交差抵抗性の欠如の重要な予測因子は、殺虫性タンパク質が感受性昆虫種の受容体をめぐって競合しないことである。変異して毒素の1つがその受容体にもはや結合せず、よって昆虫に対してもはや殺虫性でないならば、昆虫は別の毒素(同じ受容体に競合的に結合する)にも抵抗性になる場合もあり得る。昆虫は両方のBt毒素に交差抵抗性であると言われる。2つの毒素が2つの異なる受容体に結合する場合には、これは昆虫がそれら2つの毒素に同時に抵抗性にならないことを示す指標であろう。saccharalis))に対する活性を有する。事象TC1507を含むトランスジェニックトウモロコシ植物で生成されるようなCry1Faタンパク質は、FAW防除のための業界をリードする昆虫抵抗性形質を担う。標)製品でさらに利用されている。的な技術がCry1Faタンパク質の殺虫活性を不活性化するので、Cry1Faタンパク質を用いる(競合的または相同的)受容体結合性試験を行う能力は制限される。lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/)に記載されている。要群の「Cry」毒素(Cry1〜Cry59)が現在あり、さらなるCyt毒素およびVIP毒素などがある。数字で表した各群の多くは大文字のサブグループを有し、大文字のサブグループは小文字のサブサブグループを有する。(例えば、Cry1はA〜Lを有し、Cry1Aはa〜iを有する)。関して競合しないという意外な発見に一部関する。識するであろうが、これらのタンパク質(完全長タンパク質の殺虫性部分を含む)の両方とも生成する植物は、これらの殺虫性タンパク質のいずれか単独に対する抵抗性の発達を遅らせるか阻止することができる。トウモロコシおよびダイズが一部の好ましい植物である。0012したがって、本発明は、Cry1Beタンパク質と組み合わせたCry1Daタンパク質の使用に一部関する。これらのタンパク質の両方とも生成する植物(およびそのような植物を植える土地)は、本発明の範囲内に含まれる。0013本発明はまた、3つ(以上)の毒素の三重スタックまたは「ピラミッド」に一部関し、Cry1DaおよびCry1Beが基礎となる組である。施形態では、選択される毒素の組合せは、FAWに対して3つの作用部位を提供する。部の好ましい「3つの作用部位」のピラミッドの組合せは、対象のタンパク質の基礎となる組に加えて、FAWを標的にするための第三タンパク質としてCry1Fa、Vip3AbまたはCry1Eを含む。本発明によるこれらの特定の三重スタックは、FAWに対して3つの作用部位を有利に意外なほどに提供する。これは、緩衝帯地所の要件を低減または除去するのを助けることができる。0014さらなる毒素/遺伝子を本発明によって加えることもできる。用部位を提供するであろう。この追加タンパク質(第四のタンパク質)は、Cry2A、Cry1I、D1G−3およびCry1Abからなる群から選択され得る。これは、2つの昆虫(ECBおよびFAW)に対して3つの作用部位を有する4タンパク質スタックをもたらすであろう。Cry1Be(0.5nM)の特異的結合の百分率を示す。Cry1Da(0.5nM)の特異的結合の百分率を示す。frugiperda))の腸において、結合に関して互いに競合しないという意外な発見に一部関する。したがって、これらのタンパク質のいずれか単独への抵抗性をFAWが発達させることを遅らせるか阻止するために、Cry1Daタンパク質は、トランスジェニックトウモロコシ(および他の植物、例えばワタおよびダイズ)でCry1Beタンパク質と組み合わせて用いることができる。plant)および/またはダイズ植物など)を保護することにおいて、対象のタンパク質の組は効果的であり得る。本発明の1つの用途は、Cry1DaまたはCry1Beへの抵抗性を発達させるかもしれないフォールアーミーワーム集団に起因する損害および収量減からトウモロコシおよび他の経済的に重要な植物種を保護することである。対応(IRM)スタックを教示する。0018本発明は、Cry1Da殺虫性タンパク質およびCry1Be殺虫性タンパク質を生成する細胞を含む、鱗翅目害虫を防除するための組成物を提供する。0019本発明は、Cry1Da殺虫性タンパク質およびCry1Be殺虫性タンパク質の両方を生成するように形質転換された、微生物または植物細胞である宿主をさらに含む。対象ポリヌクレオチド(複数可)は、好ましくは非バチルス・チューリンゲンシス(Bacillusthuringiensis)プロモーター(複数可)の制御下の遺伝子構築物中にある。対象ポリヌクレオチドは、植物での強化された発現のためのコドン使用頻度を含むことができる。有タンパク質を含む組成物の有効量と接触させることを含む方法を提供することがさらに意図される。能な遺伝子を含むメイズ植物、およびそのような植物の種子を含む。現が可能な遺伝子が遺伝子移入されたメイズ植物、およびそのような植物の種子を含む。Cry1Daが結合するFAW組織においてCry1Beタンパク質が結合に関して競合しないことを示す。これらの結果は、Cry1DaおよびCry1Beタンパク質の組合せが、これらのタンパク質のいずれかに対するFAW集団での抵抗性の発達を軽減する効果的な手段になることができることも示す。成するために用いることができると考えられる。0024他のタンパク質をこの組に加えることができる。素の三重スタックまたは「ピラミッド」にも一部関し、Cry1DaおよびCry1Beが基礎となる組である。一部の好ましいピラミッドの実施形態では、選択される毒素は、FAWに対して3つの別々の作用部位を有する。一部の好ましい「3つの作用部位」のピラミッドの組合せは、対象のタンパク質の基礎となる組に加えて、FAWを標的にするための第三のタンパク質としてCry1Fa、Vip3AbまたはCry1Eを含む。明によるこれらの特定の三重スタックは、FAWに対して3つの作用部位を有利に、および意外なほど提供する。これは、緩衝帯の必要を低減または除去するのを助けることができる。「別々の作用部位」は、所与のタンパク質のいずれも互いに交差抵抗性を引き起こさないことを意味する。0025さらなる毒素/遺伝子を、本発明によって加えることもできる。Cry1Faが対象のタンパク質の組と一緒にスタックされる場合(Cry1FaおよびCry1Beの両方はFAWおよびユーロピアンコーンボーラー(ECB)の両方に対して活性である)、その第四の追加タンパク質はECBを標的にする1つの追加のタンパク質をこの三重スタックに加えることは、FAWに対する3つの作用部位、およびECBに対する3つの作用部位を提供する。0311096)からなる群から選択することができる。これは、2つの昆虫(ECBおよびFAW)に対して3つの作用部位を有する4タンパク質スタックをもたらす。減するためにこの三重スタックを用いることである。したがって、本発明は、3つ(以上)の毒素の三重スタックまたは「ピラミッド」にも一部関する。一部の好ましいピラミッドの実施形態では、選択される毒素は、FAWに対して3つの別々の作用部位を有する。0027本発明の利用選択肢には、FAWが抵抗性集団を発達させることができる作物栽培地域で、対象タンパク質の2つ、3つまたはそれ以上のタンパク質を用いることが含まれる。抗性のFAWに対して活性であることを示す米国特許出願シリアル番号61/284,252(2009年12月16日に出願された)を参照。この出願は、Cry1DがFAW膜調製物における結合に関してCry1Fと競合しないことを示す。INSECTS」という題名の同時係属して出願された出願を参照されたい。明により、FAWに対する3つの作用部位を有利に意外なほどに提供するであろう。これは、緩衝帯の要件を低減または除去するのを助けることができる。0028Cry1Faは、Herculex(登録商標)、SmartStax(商標)およびWideStrike(商標)製品で利用されている。対象の遺伝子の組(Cry1DaおよびCry1Be)は、例えばHerculex(登録商標)、SmartStax(商標)およびWideStrike(商標)などのCry1Fa製品に組み込むことができる。汰圧を有意に低減できる。したがって、対象のタンパク質の組は、トウモロコシおよび他の植物(例えばワタおよびダイズ)のための3遺伝子組合せの場合のように用いることができる。0029上記のように本発明にしたがって、さらなる毒素/遺伝子を追加できる。ECBを標的にするために、Cry2A、Cry1Iおよび/またはDIG−3を用いることができる。米国特許出願シリアル番号61/284,278(2009年12月16日に出願された)を参照されたい。2008/0311096号を参照されたい。FAWを防除するためのCry1Eの使用については、米国特許出願シリアル番号61/284,278(2009年12月16日に出願された)を参照されたい。0030対象のタンパク質の組合せのいずれかを生成する植物(およびそのような植物を植える土地)は、本発明の範囲内に含まれる。上記の特定のスタックは、FAWおよび/またはECBに対する複数の作用部位を有利に、および意外なほど提供する。これは、緩衝帯地所の要件を低減または除去するのを助けることができる。したがって、10エーカー以上のこのように植えられる圃場は、本発明に含まれる。0031本明細書で議論される遺伝子およびタンパク質のいずれかの配列を得るために、GENBANKを用いることもできる。下の付録Aを参照されたい。米国特許第5,188,960号および米国特許第5,827,514号は、本発明の実施で使用するために適するCry1Faコア毒素含有タンパク質を記載する。米国特許第6,218,188号は、本発明で使用するために適するCry1Faコア毒素含有タンパク質をコードする植物最適化DNA配列を記載する。0032本明細書に記載されるタンパク質の組合せは、鱗翅目害虫を防除するために用いることができる。