濃度によりリング状にブルー色を呈する)。Lを先端から吸収、発色。綿棒におけるメチレンブルー反応において、クロマトグラフィー原理に基づいた夾雑物質を展開して除去するには、十分な溶液の浸透が必要となる。綿棒の吸水量には限度がある。そこで、綿棒の軸側に吸収体として筒状の濾紙を追加した。それを補助濾紙管と名付けた。綿棒による発色過程において、「固定液」の添加効果は濾紙片と同様に認められた。綿棒の吸水容量は濾紙片に比して小さいため、その効果は十分でなかった。そのため、補助濾紙の装着を試みた。表2に示すように鮮明且つ安定したメチレンブルー色素を検出することができると共に、生成反応で使用した発色試薬や反応夾雑物をペーパークロマトグラフィーの理論により固層反応相から補助濾紙へと移動させ、発色場所から除外することができ、バックグランドを鮮明にすることができた。このように補助濾紙の役割は、給水容量を増加させて、ペーパークロマトグラフィーの原理の昂進であり、濾紙でなくとも水分を速やかに吸収できる物質、すなわち綿や紙、シリカゲルなどの入手しやすい素材を用いても同様の効果が得られる。綿棒先端から吸収させる。綿棒先端から吸収させる。綿棒先端から吸収し、補助濾紙管を装着して5分間、室温に放置する。先端から吸収し、発色させる。簡易型分光色差計を用いてA660で測定した。中綿棒を用いた反応後の写真を示した(図18)。綿棒の頭の部分は反応で生成したメチレンブルーが鮮明な青を示し、綿棒の軸の方に位置する前述の補助濾紙は、未反応の試薬や夾雑物質をクロマトの原理で移動させて赤褐色に変化している(明細書ではカラー写真が使えないのでグレースケールで示した)。実施例2より得られた方法に基づいて綿棒における硫化水素量とメチレンブルー量の関係を求めたところ、中綿棒を用いても(図19)、小綿棒の場合でも(図20)、いずれもほぼ直線関係が得られた。従って、綿棒を用いてメチレンブルー量から硫化水素量を計測することができる。中綿棒と小綿棒とサイズの異なった綿棒を用いて、種々の濃度の硫化水素を与えた後、発色液で反応させ、生成したメチレンブルーの発色をA660で測定した。mlに溶解し、発色原液として低温室で保存した。チオグリセロール各溶液はチオグリセロール(和光純薬)をエタノール(和光純薬)に溶解して調製した。溶液は保存時間と共に酸化変色し、メチレンブルー生成反応が低下した。溶液の酸化変色を抑制した。溶解し、発色原液として低温室で保存した。溶解し、発色原液として低温室で保存した。硫化水素の発生源として口臭の一因であると報告した(非特許文献1)。らは舌苔において硫化水素を産生する細菌数と口臭が相関すると報告した(非特許文献8)。これらの事実からPG菌数と硫化水素の発生量の関係について調べた。時間培養し、発生する硫化水素量は実施例2に従いメチレンブルー量を測定した。硫化水素を産生することがわかった(図21)。口臭外来患者における舌苔の硫化水素量とオーラルクロマで測定した口臭との関係を調べた。口臭の原因物質である硫化水素は主に口腔内細菌が脱落上皮細胞や白血球を分解して産生され、また舌背に付着する舌苔がその産生部位の一つであると考えられている。らは舌苔において硫化水素を産生する細菌数と口臭が相関することを報告している(非特許文献8)。これらの事実から実施例3に従い口臭外来患者の舌苔について、メチレンブルー量より硫化水素を測定し、舌苔の硫化水素量とオーラルクロマで測定した口臭との関係について調べた。口臭外来患者の舌苔は綿棒を用いて、舌背中央部を縦に10回擦過して採取した。35ng相当量であることが判った。一般に口臭の産生部位は、口腔内細菌が存在する歯肉溝や歯苔と考えられているが、歯苔より直接サンプリングして硫化水素を定量する方法は未だに報告されていない。従って、本願の方法は、口臭患者の硫化水素発生部位を直接的に特定できる初めての方法である。表4においては、オーラロクロマトで測定した硫化水素量は、患者1と2では、ほぼ似た値であるが、本願の方法では、大きく値は異なった。オーラロクロマトでは、口腔内の全体の気相の分析しかできないが、本願の方法では、口腔内の特定の位置の硫化水素量を定量できることを意味している。新規な特徴を持った方法であるといえる。COと同様にガス状バイオファクター(gasotransmitter)として注目されている(非特許文献9、10)。情報伝達ガス分子として生理的に重要な機能を有していることが明らかにされつつある。その定量法については既にガスクロマトグラフィーをはじめ比色法など確立されているが、高価な機器の必要性やその操作の煩雑さから必ずしも十分に実用化されていない。このような背景から安価で、かつ簡便で目視できるような測定法の開発が待たれる。本願の方法を用いれば、より簡単にかつ安価に口臭の程度を定量でき、歯周病や虫歯の発見や治療に利用することができる。塩酸酸性化において塩化第2鉄を触媒として、硫化水素イオンと反応してメチレンブルーを生成する。この反応は、硫化水素イオン量に対して定量的に進行する。Advantec,No.526;東洋濾紙会社)。Na2S溶液0.1ml、次いで容器壁に3.4M塩酸0.1mlを加え、濾紙片を挿入後、容器のキャップを閉めた。(w/v%)の硫酸亜鉛溶液を含有する濾紙片に捕捉、固定させた。