(バイオコース・動物看護コース)の公式ブログ。授業や学校行事の様子をご紹介します。07:302年生の遺伝子工学実習でサザンハイブリダイゼーションを行いました。制限酵素で切断したDNA断片などを分子量マーカーと一緒にアガロースゲル電気泳動します。泳動後、ゲルを染色して写真を撮ります。ゲルを変性液→中和液につけてDNAを一本鎖の状態にします。20×SSCの入った容器にガラス板を橋のようにのせます。20×SSCに湿らせた濾紙を渡してその上にゲルをのせます。ゲルの周りにラップを置きます。ゲルの上にニトロセルロース膜を空気が入らないように慎重にのせます。ゲルと同じ大きさの濾紙、ペーパータオル、500g程度の重り。一晩置いて、膜へDNAを移します。メンブレンにゲルの大きさとサンプル溝の印をつけます。メンブレンをSSCで洗浄し、乾燥後、80°CでBacking。その後、コロニーハイブリダイゼーションのメンブレンと同様にプレハイブリダイゼーション、ハイブリダイゼーション、検出を行いました。上が電気泳動、下が検出後のメンブレンです。発色しているバンドには標識プローブと同じ塩基配列が存在することがわかりました。