0:03:43標的とする抗原が未同定のモノクローナル抗体をもっている研究者から以下のような相談がありました。「がん細胞に高発現している抗原に対するモノクローナル抗体をもっています。あたりのバンドが染まります。抗体が結合するバンドを質量分析計などを利用して同定したいと考えています。具体的にどのような実験をすれば良いか教えて下さい。あたりの移動度には幾つものバンドが見えて、どのバンドが抗体で染まっているかは判断が難しいです。位置にうっすらと染まるバンドがあります」いかがでしょうか。分離することは難しいですよね。付近をさらに分画するとか、なんでも結構です。アイデアを書き込んでいただくと幸いです。関連した実験操作に関する質問も歓迎します。代わりに二次元電気泳動(等電点電気泳動+SDS-PAGE)というのもやってみる価値はありますね。CBB染色と一致してくれればしめたものです。14:26そうですね。イムノプロットでチェックしてみます。染色(たんぱく質染色)と抗体染色のバンドが一致していればゲル内消化/質量分析をやってみるというのもよいかもしれません。14:25このモノクローナル抗体で免疫沈降がうまくかどうかは大事なポイントですね。これと関連しますがもうひとつ、抗原がどのようなたんぱく質かを知ることも重要です。がん細胞の表面抗原に対する抗体ならば、抗原は膜たんぱく質の可能性が高いです。膜たんぱく質を抽出して分散させてから免疫沈降の実験をすることになります。抗原が細胞内可溶性たんぱく質ならば、がん細胞を破砕して遠心操作の上清を用いて免疫沈降をすることになります。21:52免沈できる抗体であればそれが一番ですが、二次元電気泳動で展開すればスポットから質量分析にいけるかもしれません。7:19まずはその抗体で免沈でしょうか。60kそのものと60kに結合していたものと夾雑物とが、どのような程度で認められるかで次を考えます。10:50酸性でなくても、塩濃度とかで解離させることが可能であればそのほうが容易かもしれません。10:48共沈させ、酸性下で抗原と解離。分子ふるいで100K以下くらいにして質量分析。サンプル調製と保存、いかに抗原性を保つか28生きている樹木ってすごいよ。(おおうみしのぶ)です。かかわる話題を提供することになりました。意識したのは1970年代後半で大学院生の頃です。教科書や辞典で調べると例外なく、外来抗原に対して産生される抗原結合たんぱく質というように説明があります。何に結合するのでしょうか。つくりたいと思うとどうしてもここへ行き着くようです。よって1975年に報告された画期的方法です。作るときは、免疫原としてそのたんぱく質が必要です。は?今夏2015の暑さは異常と言ってもいいほどで外を歩くのが怖かったですね。猛暑日にエンジニアが駆け込む場所はサーバールームという記事を見て大学在職時の実験室を思い出しました。)」はもともと、顕微鏡観察用の標本を作成する際に形態を保持するために加熱、凍結、薬品などで処理することをいいます。売ってもらう場合、論文を引用できることが必須条件だそうです。(2015-8-31)抗体のパクリはありうるかこのごろ商標デザインをはじめ各分野での盗用を耳にします。前には研究のスキャンダルが一般社会へ漏れ出て大騒ぎになりましたね。なじみがおありかもしれません。皆さんにとってサプライズでしたか。私はこういう評価も当然ありと考えます。のどの部分に結合するかを知りたいものです。する意味がありません。通勤や仕事で外出する際にはカバンをお持ちになることが多いかと思います。好みにも依りますが、ゆったりした大きめのカバンで中身が少ないときは自立しなくてヘナヘナと倒れてしまうことがありますね。できているか見極める評価法をどのようにされますか。異なった材料を評価に用いるのがよろしいです。出会ったのは大学院博士課程に在学していた1970年代後半の頃でした。