ならびにカルセイン標識が観察された。c-fos-/-マウスの骨リモデリング部位では、扁平なALPase弱陽性骨芽細胞は存在したが、カルセイン標識を認めなかった。モデリング部位では、endomucin陽性骨特異的血管がEphB4を有しており、また、その周囲に局在する骨芽細胞はephrinB2陽性を示したことから、EphB4/ephrinB2による骨・血管連関が示唆された。従って、モデリング部位では破骨細胞ではなく骨特異的血管が骨芽細胞を活性化することが示唆された。Tissues-膵がんの発症には、慢性膵炎に加え、アルコールの消費や肥満などの環境要因も危険因子として関係している。歯周病と膵がんの関係を示す疫学研究があるものの、その分子機構は明らかにされていない。gingivalisのLPS(PG-LPS)の全身投与がマウス膵臓に与える影響を網羅的に解析し、またヒト膵がん組織中の細菌叢解析を行なった。実験に際し動物実験センターの承認と倫理委員会の承認を得た。3G(Reg3G)遺伝子が認められた。Control群と比較してPG-LPS群ではReg3Gの発現が73倍であった。免疫染色でPG-LPS群のランゲルハンス島のα細胞部にReg3G陽性が認められた。ヒト膵臓がん組織の細菌叢解析から、種々の歯周病原細菌が検出された。これらの結果から、Reg3Gが歯周病関連膵がんに関与し、歯周病細菌が膵がん患者の血流を介して膵臓に達する可能性が考えられる。歯周病が膵がんの危険因子になり得ることが推察された。Tissues細菌には、赤血球を分解する溶血活性を有する菌種が存在し、重篤なヒト感染症との関連性が数多く報告されている。液中の溶血性細菌の特性は、ほとんど明らかになっていない。本研究の目的は、溶血性細菌の特性を調べ、歯周疾患との関連性を明らかにすることである。唾液を血液寒天培地に塗布し、溶血帯の数を解析したところ、歯周病患者だけでなく健常者からも多くの強い溶血性を持つ細菌が分離された。有意に高い割合で存在していることが示された。生育を直接的に阻害することが明らかとなった。haemolysansは口腔内環境を正常(健康)に保つための重要な細菌種であることが示唆された。Diseaseビスホスホネート製剤や抗RANKL抗体製剤(デノスマブ)などの骨吸収抑制薬は妊婦に禁忌とされているが、小児に対して制限はなく、骨軟化症治療などに用いられている。一般に小児は成人よりも薬物に対する反応が強く身体的変化が進行しているため、副作用や後遺症のリスクが高い。小児に対する骨吸収抑制薬の薬理作用の詳細は不明であり、これは臨床上重大な問題である。そこで我々は、若齢マウスを用いて骨吸収抑制薬が成長や免疫に及ぼす影響について解明することを目的とした。1週齢時にゾレドロネートを投与したマウスでは、7週後(8週齢時)に身長と体重の減少が認められ、2週後(3週齢時)に歯根伸長阻害による歯の萌出障害と骨髄におけるB細胞(B220陽性細胞)の減少が認められた。抗RANKL抗体を投与したマウスでは身長と体重に異常はなく、胸腺におけるCD4陽性細胞(T細胞)数の減少が認められた。以上の結果は、ゾレドロネートを小児に投与すると、身長・体重の抑制、歯の発生異常、および免疫異常が誘発される可能性があることを示している。抗RANKL抗体も免疫系に影響を及ぼす可能性があることが示唆された。胎生期の骨発生における過去の研究の多くは骨芽細胞の役割に焦点を置いており、骨基質を吸収する破骨細胞に着目した研究は少なく、骨発生過程における破骨細胞の形態やその出現時期については未だ不明である。そこで本研究では、胎生13日~18日齢(E13d~E18d)のマウスを用いて、下顎骨発生における石灰化開始時期と破骨細胞の出現時期、さらに破骨細胞の核数や形態について検討した。Kossa染色により下顎骨の石灰化開始はE15dであることが明らかになった。骨が石灰化する前の時期であるE14dでは、小型のTRAP陽性細胞が認められた。E16d以降は、石灰化した骨の周囲に大型で多核のTRAP陽性細胞が見られた。E14dで検出されたTRAP陽性細胞のほどんどが単核であったが、E15dになると単核の細胞が減少し、多核の細胞が増加した。E17dでは、単核の細胞がさらに減少して、多核の細胞が大部分を占めた。本研究により、マウスの下顎骨発生における破骨細胞の出現は下顎骨の石灰化開始時期より早く、骨形成が進むにつれて小型で単核の破骨細胞の割合が減少し、大型で多核の破骨細胞の割合が増加することが示唆された。骨肉腫においてRunx3はTGFβシグナルの下流で機能する「がん遺伝子」である骨肉腫は間葉系細胞由来の悪性腫瘍で、若年層に多く発症が認められる。その発症機序はほとんど明らかになっていない。そこで我々は、骨芽細胞特異的p53遺伝子欠損マウスの解析から、骨肉腫の発症と進展は、p53非存在下で発現が亢進したRunx3によるc-Mycの過剰な発現誘導に起因することを見出したが、その発端となるRunx3の発現亢進メカニズムは不明のままであった。腫瘍微小環境において、TGFβは悪性化因子として機能する。本研究で、骨肉腫細胞においてTGFβによってRunx3の発現が誘導され、その結果c-Mycの発現が亢進されることが明らかになった。Runx3転写開始地点から122kb上流にRunx3とSmad2/3の高い集積が認められ、ゲノム編集によりそこに変異を加えると、Runx3とc-Mycの発現亢進が抑制され、さらに骨肉腫細胞の造腫瘍能も抑えられた。以上の結果は、骨肉腫においてRunx3はTGFβシグナルの下流で腫瘍化促進因子として機能することを明確に示している。承認を得て実行した(承認番号:1603151292-7)。支援・要介護の主要な原因である。治療することは超高齢社会のわが国にとって重要な課題である。パーファミリーに属するサイトカインである。Smad2/3シグナルを活性化する。筋分化を負に制御すると考えられるが、骨格筋代謝におけるGDF10の作用は全く不明である。今回、骨格筋の組織幹細胞であるサテライト細胞の分化におけるGDF10の作用を検討した。レギュレーターであるMyoDの発現には影響を与えなかった。ターアッセイを用いてMyoDの転写活性への作用を検討したところGDF10は活性を抑制した。GDF10はMyoDの転写活性を制御することでサテライト細胞の分化を抑制すると考えられる。抑制は骨格筋再生の重要な戦略になる可能性がある。細胞の成長と代謝を司るTORC1はセリン合成を直接制御する細胞は栄養素をTORC1により厳密に感知している。合成)を亢進することで細胞成長を促す。した栄養源に応じた増殖と成長の制御因子としての機能は真核生物において進化的に保存されている。一方で、栄養素がどのようにTORC1を活性化するのか、TORC1が何をリン酸化して細胞増殖と成長を促すのか、という最も重要な課題が残っている。上記背景をもとに、生化学的解析と細胞生物学的解析を組み合わせることにより酵母TORC1相互作用因子を探索した。経路の最も初期段階を触媒する酵素を同定した。この機能欠損はTORC1活性に影響がないこと、TORC1によりリン酸化されることから下流因子であると結論した。TORC1阻害剤であるラパマイシンに感受性を示し、この感受性は培地にセリンを添加することで抑圧されたことからTORC1の阻害により増殖に必要な細胞内のセリン濃度を維持できないと考えられる。本研究により既知のタンパク質、脂質、核酸に加え、TORC1がアミノ酸の生合成を直接制御していることが明らかとなった。高濃度カルシウム含有水のアルジネート印象材への適用を検証する海外では炭酸を豊富に含んでいる水、あるいは高濃度ミネラル含有水(硬水)のような水を日常で使用している地域がある。本研究ではアルジネート印象材に対する硬水の影響について検討した。5種類(A-D)の硬水を選び、コントロールには水道水および純水を用いた。アルジネート印象材は硬化が変色で判断できる製品を選び実験に供した。メーカー指示に従い、硬化時間、弾性ひずみ、永久ひずみを測定した。A-Dはコントロールに比べて脱色効果が早期に発現され、硬化を促進する作用があることが認められた。練和初期より着色が認められない練和水もあった。弾性ひずみの測定結果ではいずれの水も規格値である5-20%以内の値を示した。Ca濃度が高いA,BではCont.1,2と比較して有意に値が大きかった。一方で、永久ひずみではISO規格で定められている95%以内の弾性回復に届かないものもあった。高濃度ミネラル含有の硬水を市販アルジネート印象材の練和液として検討した結果、軟水に比べて硬化が早まる傾向であること、弾性ひずみ、永久ひずみに影響を及ぼす可能性が高いことが示唆された。歯科治療において、ミダゾラム(MDZ)は主に麻酔導入・鎮静薬として用いられている。本研究では、近年創薬戦略として注目されているドラッグ・リポジショニングにおけるMDZの新規効用を見出すため、歯髄細胞に対するMDZの効果について調べた。Kossa染色とカルシウム定量から比較した。各種細胞分化マーカー遺伝子に対する定量PCR解析と石灰化沈着物中のタンパク質の電気泳動からどの細胞に分化傾向があるかを検討した。PPU-7細胞に対するALP活性およびカルシウム量はMDZ単独群が顕著であった。石灰化沈着物中から象牙質リンタンパク質が検出された。MDZ単独で7日間培養したPPU-7細胞の遺伝子発現は、象牙芽細胞の遺伝子マーカーが、骨芽細胞および軟骨細胞の遺伝子マーカーより優位に上昇した。以上のことより、PPU-7細胞に対してMDZは象牙芽細胞分化を促進することが示唆された。【問題点】ヒト口腔扁平上皮癌(hOSCC)細胞の上皮間葉転換(EMT)や間葉上皮転換(MET)を制御する分子メカニズムの詳細は明らかとされていない。【仮説】hOSCC細胞以外の癌細胞では転写因子Sox9がEMTの誘導に深く関わることが知られている。経路がEMTの誘導に深く関わることが知られている。そこで我々は、EMT関連転写因子としてのSox9やHippo経路エフェクターとしてのYAPならびにTAZがhOSCC細胞のEMTを正に調節するものと仮説を立て、その実証を試みた。細胞としてHSC-4細胞株を用いた。mRNAの発現はRT-qPCR法、タンパク質の発現はウェスタンブロット法及び免疫蛍光法により解析した。【結果】HSC-4細胞ではSox9、YAPならびにTAZの遺伝子ノックダウンにより、EMTマーカーであるN-カドヘリンの発現が減少し、METマーカーであるE-カドヘリンの発現が増加した。【結論】hOSCC細胞のEMT誘導では、EMT関連転写因子Sox9の発現やHippo経路の活性化が重要な役割を担っていることが示唆された。現在、Hippo経路の活性化がSox9の発現誘導に関わるかどうかについて調査中である。(GPX4)の役割ヒト口腔扁平上皮癌の臨床的な治療成果は徐々に改善しているが、患者の5年生存率はその開発に寄与した分子事象とこの疾患の病因の解明における限界に反して未だ落胆させられる。予後を改善するかもしれない。組織再構築に関係している。ここで、GPX4の発現抑制は腫瘍細胞増殖による癌の進展を抑制することが報告されている。ヒト口腔癌におけるGPX4の影響は未だ明らかでない。そこで、本研究ではヒト口腔扁平上皮癌におけるGPX4の役割について検索した。この結果から、GPX4が口腔癌の増殖と進展に重大な役割を担っており、GPX4がヒト口腔扁平上皮癌において、将来性のある治療標的として役立つかもしれないことが示唆された。(OSCC)の少数の細胞群は、自己複製能をもつ未分化な癌幹細胞様細胞(CSCs)に酷似する。スフェアー形成試験は、幹細胞の自己複製能を利用したもので、CSCsの検出方法である。そこで、本研究は、OSCC細胞からの癌スフェアー形成をオートファジーが制御しているかを検討した。低接着性プレートに培養したOSCC細胞は、球状のスフェアーを形成した。beclin-1およびAtg5の発現がOSCCスフェアーで亢進した。autophagosomeの形成阻害剤である3-MAおよびCQ添加により、スフェアー形成は抑制された。STA3ノックダウンはスフェアー形成に関与するオートファジー経路への関連性は認められなかった。それに対して、pAMPKおよびpULK1発現がOSCCスフェアー形成では亢進し、さらにULK1ノックダウンによりスフェアー形成が抑制された。以上の結果から、自己複製能によるOSCCスフェアーの形成は、STAT3非依存性のオートファジーにより制御される。AMPK/ULK1経路がオートファジー誘導性の癌スフェアー形成に関与する可能性が示唆された。歯周炎の発症に関わるのみならず他臓器の疾患に関わり全身の健康に影響を及ぼすことが示されている。感染症の病原体に対しては通常抗菌薬が使われるが、歯周炎の様な長期経過をとる慢性疾患においては耐性菌の出現等の問題により使用に困難な点がある。本研究では、ビルベリー果実から歯周病原性菌を駆除する物質の抽出・精製を試みた。gingivalisへの増殖阻害活性を測定した。gingivalisに対する増殖阻害活性とヒト歯肉ガン由来の細胞Ca9-22に対する細胞毒性を検討した。82μg/mLであった。これらの事からビルベリー抽出物には歯周病原性菌を駆除する化合物が含まれる事が示唆された。細胞毒性測定までの流れについて発表する。歯科では顎骨において侵襲的な手術が行われているが、下顎骨における神経分布を組織学的に研究した報告はない。peptide)抗体による染色で、それぞれ、全神経と知覚神経の下顎骨における分布を測定することが可能となる。動物から組織を摘出して組織標本を作成した後、歯槽頂から下顎管までの標本を数か所の部位に分けた。PGP陽性神経とCGRP陽性神経における神経分布密度を顕微鏡下に計測した。統計処理にはカイ二乗検定を用い、危険率5%未満を有意差ありとした。PGP陽性神経およびCGRP陽性神経の両者において、垂直的には歯槽頂から下顎管に向かって神経数は増加し、水平的には骨膜側から歯根膜側に向かって神経数は増加した。外科的侵襲が下顎管や歯根膜に向かって深くなるにつれて、痛みは増加するものと思われる。したがって、十分な局所麻酔薬の浸潤が必要であるとともに、必要に応じて伝達麻酔や歯根膜麻酔の併用が求められる。組織幹細胞は再生医療研究には重要な素材であるが、長期培養によりその分化多能性が低下する。HDDPCs培養細胞の長期維持に有効かを検討した。搭載したPBベクターを作製した。細胞の持続的維持のために、ヒトパピローマウイルスの初期遺伝子(E7)を配したPBベクターを作製した。培養維持し、生存した細胞を株化した。C処理により細胞分裂を止めヒトfeeder細胞とし、この細胞上に別患者から採取した初代培養細胞を播種した。長期培養HDDPCsと比較してヒトfeeder細胞上でのHDDPCsは増加が早く、また、長期培養後の分化多能性も維持されていた。本研究で樹立したヒトfeeder細胞は、初代HDDPCs培養細胞以外にも他組織由来の幹細胞などの培養維持にも有用と考えられ、今後の幹細胞研究に大いに寄与すると考えられる。利点を有し、近年提唱されている齲蝕への生物学的アプローチに必要不可欠な材料である。金属やコンポジットレジンと比較して機械的強度が劣る。そこで我々は、軽くて強く、低い熱膨張性、高い透明性および生体親和性を有するセルロースナノファイバー(CNF)をGICの補強材とすることに着目した。CNFをGICに均一に分散させて添加できるか否かも不明であった。そこで本研究は、まずCNFをGICに添加できるか否かを検討し、次にCNFはGICの利点を損なうことなく機械的強度を向上できるかを検証した。その結果、従来型GICガラス粉末に対して約5%に相当するCNFを添加したGICの作製が可能であった。そのCNF添加GICは、CNFを添加しなかった従来型GICと比較して、曲げ強さのみならず圧縮強さも有意に向上し、さらにGICの利点であるフッ化物イオン溶出能を低下させないことが明らかとなった。以上の結果より、CNFは従来型GICの補強材として有効であることが示唆された。歯科診療所が治療用器具を患者に使いまわしをしているとして院内感染の可能性が指摘された。歯科治療におけるB型肝炎ウイルス感染と考えられる症例数を証明する資料はほとんどなかった。そこで、以下の方法で急性B型肝炎患者のうち、歯科治療を受けたことが感染の原因の一つとして考えられる症例がどのくらい存在するかを調べるとともに、抽出された症例について時・場所・人の要素を中心に記述疫学的にまとめた。結果を用いて歯科治療による感染の可能性がある症例を抽出した。急性B型肝炎として診断された患者のうち、キーワード検索「歯」を行い、受診病院名に「歯」が含まれる症例、明らかに歯科とは関係のない症例を除き、残ったものを歯科治療がB型肝炎と関連する可能性がある症例として抽出した。抽出した結果、症例数は10例に及び、うち1例は歯科衛生士が職場で感染した可能性があった。男女比、年齢がB型肝炎患者全体の平均よりも高齢かつ女性の比率が高く、歯科受診者の傾向に似ていることが分かった。以上より、歯科診療はB型肝炎に関連している可能性があると考えらえる症例が見つかった。CAD/CAM冠が2014年に健康保険に適用された。CAM材料に比べて劣ることが知られている。そのため、レジン系CAD/CAM材料はさらなる開発と調査が必要となる。ファイバー強化材は補強効果があるため、曲げ試験により得られたGFRPの曲げ特性は、CAD/CAM冠用の一般的なハイブリッドレジンの特性(文献値)に比べて大きかった。有限要素解析によるコンピューターシミュレーションの結果は、CAD/CAMハイブリットレジン冠は他のCAD/CAM材料(GFRP、セラミック)に比べて、支台歯において高いフォンミーゼス応力を引き起こすことを示した。矯正歯科治療において側面頭部X線規格写真における計測点の精度は正確な診断を立てる上で重要で、歯学部生においても歯科矯正学の授業や実習のカリキュラムの一環としてセファロ分析が組み込まれている。これまで歯科矯正学の専門教育を受けたものがセファロ分析の精度の検証の対象者であることが多く、専門教育を受けていない学生が対象となる研究は少なく、セファロ分析において教育に左右されず誤差が出やすい計測項目は調べられていない。本研究では専門教育を受けていない学生がセファロ分析を行うことで、セファロ分析の精度向上や効率的な教育方法の考案への寄与を目的とした。歯科矯正学を学んでいない学生30人により、5症例のセファロ分析を行い20種類の計測項目の計測者間誤差を求めた。選択した10人が行った従来の方法による分析をアナログ群、セファロ分析ソフトによる分析をデジタル群とし、各群の計測者間誤差を統計学的に比較した。骨格系より歯系の計測項目が統計学的に優位に大きい計測者間誤差を示すとともに、デジタル群にて誤差が小さく、専門教育を受けていない歯学部生におけるセファロ分析ソフトを使用した教育の有効性が示唆された。よる骨芽細胞分化誘導に重要な役割を果たす骨形成因子(BMPs)は強い骨再生促進作用を有するサイトカインファミリーであり、歯周病に対する歯槽骨再生や骨折治癒の促進のための骨再生療法への臨床応用が期待されている。有することが報告されているが、その作用分子機構の詳細には未だに不明な点が多い。分化誘導を行うことによりEgr-1の発現量は一過性に増加することを示した。作成したEgr-1特異的なsiRNAのMC3T3-E1細胞への形質導入により、BMP-9によるEgr-1タンパクの発現誘導は著明に抑制され、同時にBMP-9刺激によって誘導される骨芽細胞分化マーカーの発現レベルは著しく減少した。この結果から、Egr-1の発現誘導はBMP-9の骨芽細胞分化作用において重要な役割を果たすことが明らかになった。Egr-1の発現量の経時的な変化により骨芽細胞分化能を調節することができれば、新たな骨再生療法の開発に有用となる可能性がある。酸素産生が必要である関節リウマチ(RA)は関節の骨吸収と強い痛みを伴う自己免疫疾患である。歯周疾患が本疾患発症に関与している可能性が示唆されているにも関わらず、その分子的・生物学的な説明は殆どされていない。脂肪酸のうち4種が歯肉上皮細胞の細胞死を誘導し、それに伴いRA誘導因子が放出されることがわかっている。この細胞死が起こるメカニズムは不明である。活性酸素種が重要であると考えた。そこで本研究では、短鎖脂肪酸誘導の細胞死とRA誘導因子の放出には活性酸素種が重要である可能性を検討した。脂肪酸は活性酸素種の産生を増強し、産生された活性酸素の消去は短鎖脂肪酸誘導の細胞死およびRA誘導因子の細胞外放出を抑制することが分かった。上のことから、歯垢細菌の産生する短鎖脂肪酸による細胞死およびRA誘導因子の放出には活性酸素種の産生が重要であることが示された。この結果により、歯周疾患が関連するRA発症の予防には活性酸素の消去が重要である可能性が示唆された。赤外線サーモグラフィーにより唾液腺マッサージの効果を評価できるか?口腔乾燥の対策として、唾液腺マッサージが有効とされ介護予防教室などで指導されるようになってきた。そのマッサージ効果を評価する方法は確立されていない状況にあり、客観的かつ簡便にマッサージ効果を評価できる方法があれば、高齢者自身も効果を実感しやすいと考えられた。解しやすい赤外線サーモグラフィーに着目し、事前に頬部冷却を実施した後に、赤外線サーモグラフィーと携帯型NIRS(近赤外線組織酸素モニタ)で測定を行い、それがマッサージ効果の評価方法として活用できる可能性について検証した。画像の観察結果からは、冷却による変化域中央に温度変化中心点が存在し、同部が血行改善に向けてマッサージを実施する場合のターゲットになると推察された。温度回復時間の平均値は、対象者全員でマッサージ実施の方が非実施より短縮していた。NIRSによる深部測定結果とも類似した傾向が確認できた。これら結果から、今回試みた方法により唾液腺マッサージ効果を評価できる可能性を確認できた。糖尿病モデル動物では唾液腺房細胞でのSGLT1(ナトリウム-グルコース共輸送体1)の発現が減少することが報告されている。そこで、SGLT1が唾液分泌減少に関与しているのではないかと考えた。コラゲナーゼ処理により単離したマウス顎下腺腺房細胞にグラミシジン穿孔パッチクランプを行いCl-電流の記録を行った。グラミシジン穿孔後に副交感神経作動薬のカルバコールで刺激を行い、その後ブメタニド(Na+/K+/2Cl-共輸送体阻害剤)もしくはフロリジン(SGLT1阻害剤)を投与し、カルバコール刺激により誘発されるCl-電流に対するブメタニドやフロリジンの効果を調べた。結果としてカルバコールで誘発された振動性のCl-電流はブメタニドの添加により抑制された。カルバコールによる刺激時には振動性のCl-電流が見られたが、その後のフロリジン+カルバコール刺激ではCl-電流の反応が消失した。以上より、SGLT1により細胞内に取り込まれるグルコースがNa+/K+/2Cl-共輸送体を通して細胞内に流入しCa2+依存性Cl-チャネルを通して流出するCl-の流れに何らかの関与をすると考えられた。下顎前突症などの顎変形症患者に対しては、通常顎矯正手術が適応となる。その形態評価は軟組織を中心に行うのが望ましいが、軟組織の正確な形態評価は困難であり、さらに顔貌全体の評価法は確立していないのが現状である。術前後の評価にはCTがよく用いられるが、被曝を伴うという問題点があった。そこで、以下の仮説を立て検証を行った。(A)3D画像撮影解析装置(以下3Dカメラ)で採取した顔貌3次元データは、同一人物のCT画像の顔貌データの代用となるのではないか。対象は下顎前突症の患者5名とした。支援ソフトにて各対象患者のCTの顔貌データと3Dカメラの顔貌データの面間距離を測定し、同一被検者内での誤差が少なかった12点間の距離を測定した。顔貌データ全体の面間距離の5つの平均値は0.856mm±0.211mmであり、12点の距離はほとんどの部位で2mm未満であったことから、CT画像の表面データと比較することは可能であると考えられた。(B)相同モデル化した顔貌データでの統計的解析により顎変形症の治療評価に応用できる新たな軟組織評価が確立できるのではないか。対象は健常者10名と下顎前突症の女性患者10名とした。相同モデル化した顔貌データを用いて健常者と術前患者、健常者と術後患者で統計解析ソフトによる主成分分析を行った。健常者と術前患者では第1主成分と第2主成分に有意差(p<0.05)が見られた。術後患者では概ね健常者の顔貌に近づいており、顎変形症の治療評価にも有用であることが示唆された。5年生オンデマンド剥離可能なスマート歯科用セメントの開発-イオン液体の種類が接着特性に与える影響-近年、歯科用セメントの接着力向上により被着物の脱離リスクが減少した反面、再治療時の被着物除去の際に、健全歯質の削合量増大や歯根破折のリスク増大が懸念される。この相反の解決には、強固な接着力を示しつつ、オンデマンドで接着力が大きく減少するスマートなセメントが必要である。本研究ではこれまで、歯科用グラスアイオノマーセメント(GIC)にイオン液体を添加すると、通電によって接着力の減少が可能となることを明らかにしてきた。今回は、異なるイオン液体をレジン添加型GICに添加したセメントを3種類試作し、その接着力と通電特性を調べた。その結果、イオン液体の種類によって試作セメントの電気伝導特性に差異が生じるため、接着力低下に必要なイオン液体濃度が異なることがわかった。高いイオン液体が開発されれば、それを用いたスマート歯科用セメントの実用化が可能と期待される。骨形成を終えた骨芽細胞は多くがアポトーシスにより死に至るが、一部は骨細胞やライニング細胞へと分化する。加齢や骨粗鬆症等の病態に伴い脂肪細胞へと分化転換する例も報告されている。これらの分子基盤は殆ど解明されていない。そこで、以下の方法で骨芽細胞の遺伝子発現レベルを単一細胞レベルでプロファイリングするとともに、脂肪細胞への分化転換能について検討を加えた。Seqを行い、そのうち90細胞のトランスクリプトーム解析を行なった。vitroで確認した。細胞は大きく2つの集団に分類され、一方はさらに複数に分類された。PPARgをはじめとする脂肪細胞分化に関与する遺伝子群も多数発現しており、PPARγの合成リガンドを負荷すると、Venus+細胞の一部は脂肪細胞へ分化した。以上より、今回、単一細胞レベルにおいて骨芽細胞の多様性が初めて明らかとなった。一部の骨芽細胞集団は脂肪細胞分化能を持つものと考えられた。歯周炎の進行に伴い歯槽骨の吸収が起こるが、その程度は患者の口腔衛生状態や年齢も関与する。歯肉溝滲出液(GCF)には歯周炎の病変を反映する様々な分子が含まれるため、GCFを解析することで歯槽骨吸収の進行を予測することが期待されているが、詳細については十分検討されていない。そこで本研究では、20~70代の歯周炎患者を年代別、男女別にグループ分けし、ソフトウェアによる骨吸収程度、X線写真及びGCF中のストレスシグナリング分子と歯槽骨吸収状態との関連性を比較検討した。2活性に影響を与え、歯槽骨吸収を促進する可能性があることがわかった。2のGCF中分子は、臨床現場において歯槽骨吸収の早期発見と治療のための予測指標となり得る可能性が示唆された。4年生オートファジー誘導にはカリウム流入を抑制するホスファターゼが必須であるオートファジーは主に飢餓によって誘導され、細胞質成分を分解し栄養源やエネルギー源を供給している。細胞内に侵入した細菌をオートファジーによって除去する機構も知られている。これまでにオートファジー制御において、複数のリン酸化酵素の関与が明らかとなっている一方、脱リン酸化酵素は知見がない。そこで新規オートファジー関連ホスファターゼの単離および機能解析を行った。出芽酵母全ホスファターゼ40種のスクリーニングの結果、過剰発現により通常オートファジーがみられない富栄養条件でオートファジーを誘導し、機能欠失により飢餓条件でオートファジー不全を呈するPpz1とそのパラログのPpz2を同定した。二重欠損株で種々のオートファジー関連タンパク質(Atg)への影響を検討し、Ppz1,2はオートファジー誘導経路の最上流因子であるAtg1の活性化に必須であることが分かった。Ppz1,2はカリウムトランスポーターTrk1,2を負に制御していることが明らかになっており、Ppz1,2に加えTrk1,2の四重破壊株ではオートファジー活性は野生株同等に回復した。このことから、オートファジーの誘導にはPpz1,2がTrk1,2を負に制御し、細胞内カリウム流入を抑制することが必要であると考えられる。5年生フッ化物微量拡散法による乳児一日フッ化物摂取量評価フッ化物応用の齲蝕予防効果は多くの疫学研究から示されている。DFI)を確認することが必須である。本研究では成人よりも体内へのフッ化物の吸収率が高く、少量で過剰摂取による影響が出やすい乳児期の食事を想定し、離乳食、粉ミルクおよび飲料水から摂取されるフッ化物含有量を測定した。その総和から乳児期のDFIを推定し、目安量との比較を行った。検討の結果、乳児期の離乳食、粉ミルク、飲料水を合算し、推定されたDFIは5か月齢で185.34μg/day、7か月齢で181.16μg/day、9か月齢で174.59μg/day、12か月齢で179.19μg/dayであることが明らかになった。本結果のDFIは全ての月齢において欧米目安量の約1/3~2/3ほどの低値を示しており、近年の食の多様化と欧米化に伴って日本人のDFIが減少傾向であるという我々の仮説は支持された。本データはフッ化物応用の安全性指標として有用であり、食生活の変化に伴う乳児期DFIの変移を把握するために、今後も継続的な検討の必要性があると考えられる。4年生fMRIを用いた高齢者のタッピング時の脳活動研究fMRIなどの非侵襲的手法の発達により、ヒトでの顎運動の脳回路解析が可能となった。本研究では、歯のタッピングに関与する脳部位とその機能的役割を明らかにする目的で、80歳以上の高齢有歯顎者(20本以上の歯を持つ)、無歯顎者および義歯装着した無歯顎者を被験者に、タッピング動作を行わせ、MRI画像を取得した。介して前頭連合野DLPFCに伝わり、随意運動開始のトリガーとなりうること。2)小脳は、末梢からのフィードバック(小脳ループ)を介して円滑な運動遂行に、大脳基底核は、大脳基底核ループを介してリズミックな運動の開始、遂行に関与しうることが明らかになった。単純な歯のタッピング運動において、末梢からの感覚入力は、反射の調節だけでなく、皮質運動野や咀嚼野からの出力系を介する随意運動の制御にも重要な役割を果たしていることが示唆される。がん患者の予後不良の大きな原因である。化学療法後に生き残っている腫瘍細胞は、様々なメカニズムで薬剤耐性能を獲得しており、その一つに薬剤排出トランスポーターの発現亢進がある。比べて多剤耐性遺伝子MDR1の発現が高いこと、MDR1遺伝子がコードする薬剤排出トランスポーターABCB1を介して、抗がん剤パクリタキセルへの薬剤耐性を示すことを報告した。薬剤耐性を誘導している可能性があるのではと仮説を立て、抗癌剤治療による腫瘍血管内皮細胞のMDR1/ABCB1発現変化を検討することを目的とした。MDR1/ABCB1発現が亢進していた。そのメカニズムの一つとして、抗癌剤が誘導する腫瘍細胞のサイトカインXに着目した。MDR1/ABCB1を亢進させた。薬剤耐性を誘導していることが示唆された。新たな浸潤促進因子としてのPeriostinスプライシングバリアントの同定Periostinは癌細胞のみならず、正常組織や腫瘍間質中の線維芽細胞から分泌される細胞外マトリックスであり、その発現と悪性度との相関が報告されている。我々は、これまでに口腔扁平上皮癌の浸潤に関わる新規因子としてPeriostinを同定し、癌細胞の浸潤、血管・リンパ管新生を介して転移に関与することを報告してきた。おいてPeriostinが高発現していることを見出した。Periostinの発現を有さない細胞株においてもTGFβ刺激により、その発現が誘導されることを明らかにした。Periostinには9つのスプライシングバリアント(Isoforms)が存在することが最近明らかにされたが、その役割はほとんど報告されていない。6が特異的に発現することを見出した。3とは異なる作用機序を介して浸潤能を亢進させる可能性が示唆された。Periostinを起点とした癌細胞の浸潤制御機構の解明が新たな癌治療の開発に貢献できるものと考えられる。wiggsiaeは、最近の研究で重度の早期小児齲蝕や青年期における白斑齲蝕病変から検出されており新たな齲蝕関連細菌として注目されている。shunt)という独自の糖代謝経路を有しており、他の齲蝕関連細菌とは糖代謝の性質が異なる可能性がある。mutansとの比較検討を行った。shuntを主要な代謝機構として利用することが明らかになった。mutansよりも高かった。wiggsiaeの高いフッ化物耐性はフッ化物の利用に際し考慮が必要であると考えられた。wiggsiaeは乳酸産生菌とは異なる機序で齲蝕を誘発・促進することが予想される。wiggsiaeのような酢酸産生性でフッ化物耐性の高い細菌のコントロール法の開発が望まれる。薬局で販売されているOTC医薬品の口腔機能改善効果を判断するためには、適切な基準薬を選択し、基準薬との相対的な強さを測定することが必要であるが、これまでの研究ではこの点の配慮がなされていなかった。第3類薬品に属するポビドンヨード液(以下PIと略)は、高い抗菌性と抗ウイルス性を有するため、多くの人が使用しており、基準薬として妥当である。細胞傷害性を定量化できればOTCの効果を客観的に測定できるという仮説を立てた。それぞれ、ブレストロン、細菌カウンタ、MTT法で測定した。PIは強力な細胞傷害活性を示した。PIの傷害性は血清の存在で弱くなることから、非特異的にタンパク質に結合することが示唆された。PIの含漱により、舌、特に、頬粘膜の細菌数が顕著に減少した。PI単体ではVSC値を高めることはないが、PIで含漱すると、瞬間的に高いVSC値を示した。PIが何らかの生体反応を引き起こす可能性が考えられた。頬粘膜における細菌数の減少と口腔粘膜細胞に対する傷害性との比率の算出は、OTC薬の口腔機能改善作用の評価に有用と思われた。低フッ素濃度の過飽和溶液によるエナメル質再石灰化の促進本発表では、低濃度のフッ化物を含むリン酸カルシウム過飽和水溶液をエナメル質上で乾燥することで、迅速に再石灰化させる新しい方法を提案した。この方法は、数日から数週間連続的にエナメル質を過飽和溶液中に暴露してアパタイトを析出させるというこれまでに提案された再石灰化法と比較して、より短時間での再石灰化を目指したものである。本発表の結果を発展させて、さらに迅速かつ危険性の低い再石灰化処置法を確立することで、一般の患者はもとより、特に在宅医療などで治療環境に制限がある患者や、超高齢社会を迎えて急増する高齢者のう蝕マネージメントの簡便化が期待できる。6年生ケラチン75が及ぼす抜け毛と齲蝕の関連性解明のための基礎研究ケラチン75(KRT75)遺伝子の突然変異は、抜け毛のみならず齲蝕など歯に対しても様々な問題を引き起こす可能性があり、エナメル質にも存在することが報告されているが、その動態については不明である。本研究では形成過程にあるブタエナメル質中のKRT75について免疫組織化学(IHC)、遺伝子およびタンパク実験を行うことを目的とした。IHC実験は、生後5日齢および11日齢のマウス下顎臼歯切片を作製してKRT75抗体を用いた免疫染色を行った。RNAを調製してKRT75の遺伝子発現を定量PCRにて分析した。タンパク実験は、同齢のブタ永久第二大臼歯の幼若エナメル質よりKRT75の分離精製を行い、質量分析を行った。生後5日および11日齢マウスにおいてKRT75は中間層に主に局在していた。その遺伝子発現はエナメル質形成過程の全ステージで確認されたが、移行期で特に発現が高かった。タンパク実験では、KRT75が、幼若および成熟エナメル質で検出され、LC-MS/MS分析によりKRT75であることが同定された。以上、KRT75はエナメル質形成過程において他のエナメルタンパク質とは異なる動態を示していることが考えられた。4年生マウス歯胚への局所照射法は歯根発生における放射線の直接的影響を考察させる過去にマウスの歯根形成期にエックス線の頭部照射を行い、ヘルトヴィッヒ上皮鞘とその周囲の細胞動態に異常が生じ歯根形成障害を引き起こすことを明らかにした。頭部照射の照射野には歯胚発生に関わる内分泌器等が含まれるため、放射線が直接的に歯胚にダメージを与えた影響を観察しているとはいえない。そのため、鉛ガラスを用いてマウスの下顎第一臼歯歯胚のみにエックス線を局所照射できる方法を確立した。頭部照射マウスのGH、PTHの血中濃度は非照射マウスに比べて約1/2に減少しているのに対し、局所照射マウスでは非照射マウスと同程度であった。局所照射マウスの歯根長は非照射マウスと比べ有意に短く、頭部照射マウスと同程度であった。組織観察において、局所照射マウスは頭部照射マウスと同様の結果を示した。内分泌器に障害は生じておらず、一方で歯根は頭部照射マウスと同様の組織学的形態異常が観察されたことより、頭部照射により生じた歯根形成障害は放射線の歯胚への直接的なダメージが関与していると考えられた。して水酸化カルシウム製剤を用いた直接覆髄法が広く行われている。長期間の水酸化カルシウム製剤の使用は歯髄壊死や病的石灰化を誘発することがある。被蓋象牙質の質や形成に要する期間などを考慮すると、改善が必要である。ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤(HDACi)は、悪性腫瘍に対する分子標的薬剤として近年用いられている。一般的に、HDACiはヒストンのアセチル化亢進を介して、遺伝子の発現を促進させる薬剤である。近年、HDACiが種々の細胞の増殖や分化に影響を与えることが報告されている。HDACiは骨芽細胞の骨形成を促進し、破骨細胞の分化を著しく阻害することが報告されている。我々は、HDACiは象牙芽細胞の分化の促進に関与していると仮定した。本研究では、HDACiによる歯質の硬組織分化誘導について検証した。HDACiは、象牙芽細胞の分化を促進し、歯髄の石灰化を誘導することが示唆された。したがってHDACiは、歯髄保存療法に有用な可能性がある。接触アレルギーはT細胞による遅延型過敏応答であり、皮膚や粘膜へのアレルゲン暴露により誘導される。臨床的アレルギー症状は、皮膚と口腔粘膜では大きく異なるが、その免疫病理学的違いは明らかでない。本研究では、ハプテン感作後に、頬粘膜で惹起する接触過敏モデルを樹立し、頬粘膜と耳介皮膚間での応答の違いについて検討した。T細胞の浸潤による急速で激しい組織炎症を呈したが、この炎症は急激に回復した。T細胞は、炎症性サイトカインIFN-γ発現は低く、免疫チェックポイントPD-1発現が高く、増殖マーカーKi-67発現は皮膚と変わらなかったことから、増殖はしているが、最終エフェクターT細胞に分化できずに疲弊細胞に転ずる細胞であることが示された。これが、頬粘膜の激しい炎症が急速に回復する原因と思われた。ピーク炎症時の頬粘膜上皮では、PD-1リガンドであるB7-H1の強い発現が認められ、B7-H1の欠如は過敏応答を加速させたことから、PD-1:B7-H1経路による制御が局所で存在している可能性が示された。本結果は、口腔接触アレルギーの特性の理解に役立ち、接触アレルギー制御の新規戦略を生み出す一助になると思われた。多くの人に利用される。歯科診療においては治療器具や検査器具の消毒、滅菌が重視され、前述のような部位の汚染は軽視されやすい。汚染されていることが予想されていても汚染の程度が不明なため、効果的な対策が立てづらい。そこで、私たちはまずATP拭き取り検査キットと微粒子カウンター、フードスタンプを用いて歯科診療環境の汚染状況を可視化することを試みた。次に測定部位に応じた対応策を実施し、その効果を検討した。その結果、汚染はスピットンやパソコンのキーボードに集中しており、画一的な清拭では汚染状況が改善されなかった。以上のことから歯科診療環境の衛生状況を良好に保つために画一的な消毒だけではなく、各器具や装置の形状や材質を考慮した衛生管理を行わなければならないと言える。歯科診療環境が必ずしも無菌的ではないという認識を患者、医療従事者の両者が持つべきであると考えられる。他の癌細胞と同様に、口腔扁平上皮癌(OSCC)の治療抵抗性は解糖系経路(Warburg効果)の最終段階を制御する筋肉型ピルビン酸キナーゼ(PKM2)/還元グルタチオン(GSH)経路に依存している。最近の研究報告は、グルコース供給阻害による解糖系の抑制をオートファジーが補い、PKM2/GSH経路を保持する可能性を示唆している。本研究は、無グルコース培養OSCC細胞における誘導オートファジーによる治療抵抗性の促進について検討した。高グルコース培養OSCC細胞は200μMシスプラチン(Cis)添加により生存率が顕著に減少した。無グルコース培養細胞ではCis添加による生存率の減少はみられず、治療抵抗性を示した。Cis添加の無グルコース培養細胞では、治療誘導性オートファジーが促進し、PKM2および細胞内GSHの発現が亢進した。以上の結果から、OSCC細胞はグルコース途絶状態においてもオートファジー誘導を介してWwarburg効果を活性化した。OSCC細胞の治療抵抗性は治療誘導性オートファジーにより活性化されたPKM2/GSH経路により促進することが示唆された。赤ワインやコーヒー、紅茶などの食品に含まれる色素は、歯の表面のペリクルに付着して着色の原因となる。歯面上のペリクルに着色物質が吸着してすぐにペリクルを切断することができれば、着色原因物質が歯の表面から離れ、着色を抑制できると考えられる。そこで、特異性の低いタンパク質分解酵素で植物由来のパパインに着目し、パパインがペリクルの主成分である糖タンパク質を切断することで歯面への着色を予防できるか調べた。その結果、ヒドロキシアパタイト(Hap)ディスクに唾液をつけると経時的に着色が促進した。これらの着色をパパインがペリクルを切断することにより抑制すると考えたが、抑制しなかった。HA粉末を使うことにより、一旦、切断したタンパク質の再付着を防ぐようにしたが、同様に着色は抑制しなかった。パパインがHApに結合したタンパク質を分解することは電気泳動により証明されていたのにもかかわらず、着色が抑制できなかったのは、着色物質が歯面における再石灰化とともにエナメル質内部に取り込まれることによって、強固なステインが形成されていく以外に、エナメル質が直接着色するメカニズムがあると考えられる。phosphate(MDP)を酸性モノマーとするワンステップボンディング材は臨床において広く使用されている。これは、MDPがボンディングレジンの接着性に影響を及ぼすためである。MDP含有ワンステップボンディング材の歯質接着性は製品間で異なるのが現状である。本研究の目的は、4種の市販ボンディング材と1種の試作ボンディング材を用いて、MDPのカルシウム(MDP-Ca)塩の生成量がエナメル質および象牙質接着性に及ぼす影響を検討することである。NMRスペクトルを測定した。NMRスペクトルを波形分離し、MDP-Ca塩の生成量を求めた。次に市販および試作ボンディング材について接着強さの測定を行った。エナメル質および象牙質アパタイトの脱灰過程を通して生成されるMDP-Ca塩の生成量は、歯質アパタイトの脱灰の程度を表し、MDP含有ワンステップボンディング材のエナメル質および象牙質接着性を表す有用な指標であることが判明した。象牙質接着はエナメル質接着と異なり、MDP-Ca塩の生成量との間に負の相関を示した。これは、レジンの接着機構がエナメル質と象牙質とでは異なるためと考えられる。骨格筋の萎縮は、要支援・要介護の主要な原因である。疫学研究から骨格筋量が多いと様々な疾病に対する罹患率が低下し、健康長寿であることが明らかであるため、骨格筋の萎縮を予防・治療することは超高齢社会のわが国にとって重要な課題である。おけるNF-κBの役割を明らかにする目的で、1骨格筋線維の分解・減少、2骨格筋幹細胞の増殖、3分化・融合過程におけるNF-κBの動態とその作用を検討した。分化・融合過程ではNF-κBシグナルは低下した。TNFα処理で誘導したNF-κBは筋線維の幅径を減少させた。NF-κBは骨格筋幹細胞の増殖を誘導したが、分化と融合を抑制した。NF-κBの制御が必要と思われた。頭頸部がん患者における放射線性顎骨壊死の主な原因の一つに放射線治療(RT)後の進行性う蝕が考えられている。この研究の目的は、放射線性の進行性う蝕の予防法を確立するために、RT後のう蝕発生に関するリスク因子を調査することである。RTを受けた31名の患者(RT群)と手術単独を受けた25名の患者(対照群)について、治療後1年または2年後のう蝕を調べた。次にさまざまな因子とう蝕の関連について一元配置分散分析および重回帰分析により検討を行った。RT群のう蝕増加数は対照群よりも有意に多かった。単変量解析では照射野に唾液腺や歯が含まれるとう蝕の増加数は有意に高くなった。多変量解析では照射野に含まれる歯数のみがう蝕増加と有意に関連していた。これらの所見から、RT後の進行性う蝕の発症機序として、RTによる唾液性障害に起因する唾液減少とならんで、RTによる歯への直接障害が考えられた。ligand(RANKL)発現を介し骨吸収を制御する。生理的な骨吸収は主に骨細胞由来のRANKLによって制御される。交感神経細胞と骨細胞との機能的な繋がり、およびそのシグナル経路はなお十分には解明されていない。本研究ではマウス骨細胞様細胞、MLO-Y4細胞に交感神経α1B受容体が発現していることを確認した後、ノルアドレナリンとα1受容体作動薬フェニレフリンによりα1B受容体経由でRANKLの発現が増加することを明らかにした。直接的なシグナル伝達の存在を確認した。α1受容体作動薬フェニレフリンにより細胞内カルシウムが増加し、NFATc1の核内移行が増加した。これはα1受容体拮抗薬プラゾシンによりブロックされた。以上の結果から、交感神経細胞と骨細胞とが直接機能的に繋がり、RANKLの発現が増加することが明らかとなった。よる咬合回復の状態を脳機能の面から評価する手法は未だない。spectroscopy:近赤外分光分析法)を用いた高齢者の義歯装着による咬合回復が水嚥下時の前頭前野における脳活動に及ぼす影響について検討した。“0”に対して、未装着時の水嚥下時のVASは”72′′で、義歯未装着は強い水嚥下困難感を感じていた。その時の脳活動の比較において、義歯未装着時と装着時の酸化ヘモグロビン量(Oxy-Hb)に有意な差が認められた。義歯未装着時の安静時と水嚥下時の酸化ヘモグロビン量(Oxy-Hb)においても有意な差が認められた。咬合支持を喪失した片顎以上の無歯顎者に対する可撤性有床義歯による咬合回復は、義歯未装着時に比較して、嚥下状態を脳活動に反映していることが明確になった。これは、高齢者における欠損補綴の意義を脳活動の面から”見える化”を具現化する可能性を示唆している。若齢期の歯の喪失が海馬の細胞新生に及ぼす影響これまでに老化促進モデルマウス(SAMP8)において、上顎臼歯を喪失すると、加齢にともない、マウスの寿命の短縮、血中のコルチコステロン濃度の上昇、空間認知能の低下が起こり、老化促進することが明らかになっている。最近の研究により海馬における細胞新生は海馬機能維持に極めて重大な役割を担っており、この細胞新生はストレスの影響を受けやすいことがわかっている。新生細胞から分化するオリゴデンドロサイトは、中枢において髄鞘形成により跳躍電動を誘導し活動電位の伝導速度を速める役割を担っており、ストレスの影響を受けやすいことがわかっている。若齢期の歯の喪失による空間認知能低下と海馬における細胞新生およびオリゴデンドロサイトとの関連は明らかにされていない。若齢期の歯の喪失は慢性的なストレスとして作用し、血中コルチコステロン濃度を上昇させ、海馬における細胞新生が抑制され、オリゴデンドロサイトも減少した結果、空間認知能の低下が生じると考えられるため検証を行った。-メダカを用いた加重力実験-私達は常に重力のもとで生活しており、骨はその影響を受けやすい組織の1つとして知られる。歯や歯周組織が重力の影響を受けるか否かは不明である。私は、歯の生える方向は重力方向と平行であることから、歯や歯周組織の発生や維持に重力が関係するのではないかと考えた。応用し、破骨細胞が蛍光タンパク質で標識された遺伝子改変メダカに地上の5倍の重力(5G)を負荷しながら飼育することで、重力がメダカの咽頭歯骨や他の組織に及ぼす影響について解析した。その結果、5Gの重力下で飼育したメダカの咽頭歯骨では、その周辺の破骨細胞数とカルシウム沈着量が減少していた。骨代謝に必須のAP-1遺伝子の発現レベルも低下していた。これは、咽頭歯骨を維持する破骨細胞と骨芽細胞の骨代謝回転が加重力により低下したことを示唆する。咽頭歯骨以外では、平衡感覚を司る耳石の形成異常と、脊椎骨の背側への湾曲も認められた。以上のことから、重力は遺伝子発現制御を介して歯や歯周組織の骨芽細胞と破骨細胞による骨代謝回転や、耳石や脊椎骨の恒常性を調節することが示唆された。よる検討-インプラント治療の事故原因は様々であるが、その中にインプラント体の破折も含まれている。インプラント体の破折はアバットメントの動揺によりを引き起こされることから、緩まないアバットメントスクリューの開発が急務である。緩みは、咬合力によりスクリューピンが回転することによって生じる。スクリューピンをより大きなトルクで締結すれば回転を防止できるが、骨と結合しているインプラント体をも回転させてしまい、大きなトルクを掛けることは出来ない。スクリューピンの材料を既存のチタン合金から超弾性合金(Ni-Ti)に変更すれば、温度変化によって締結力を増加させ得ることや、塑性変形による緩みを防止できる可能性がある。そこで、まずNi-Ti合金の機械的性質を引張試験より求めた。得られた物性値を用いて、既存のインプラント体について有限要素法により検討した。その結果、既存の構造においては十分な効果を発揮し得ないことが判明した。このため超弾性効果が発揮できるよう、スクリューピンならびにインプラント体を再設計して解析したところ、緩みの発生しないスクリューピンを作成することができることが判明した。有し、口腔領域を含めた骨再生療法への応用が期待されている。私達の研究室では、BMP9が骨芽細胞におけるHes1の発現を増加させることを最近明らかにした。Hes1は転写調節因子であり、Notchシグナルのエフェクター分子として知られる。マウス骨芽細胞株であるMC3T3-E1細胞、およびマウス初代培養骨芽細胞をBMP9で刺激し、Hes1のmRNAとタンパク発現量を調べると、周期的な発現パターンが誘導された。Notchの上流シグナル阻害剤およびBFAによる前処置は、BMP9によるHes1発現誘導に有意な影響を与えなかったことにより、BMP9は、Notchやその固有リガンドの発現誘導を介さずに、Hes1の発現を直接的に骨芽細胞内に誘導することが明らかになった。骨芽細胞の分化段階は、BMP9によるHes1の誘導に著明な影響を与えなかった。次に、siRNAを用いたHes1のノックダウン実験によって、骨芽細胞のBMP9反応性におけるHes1発現の機能的役割を解析した。頭頸部のリンパ節転移に対して頸部郭清術を行うが、その術中、頸神経ワナの保護は術者によって異なっていた。そこで今回、頸神経ワナ保護のために周囲構造物との位置関係の測定を行った。測定方法は胸鎖乳突筋を利用する方法(1)、舌骨体中心部の高さと頸神経ワナのループ下端の距離、舌骨体から鎖骨と内頚静脈との交点の距離の割合を測定する方法(2)、総頚動脈の外頚動脈と内頚動脈との分岐点を利用して測定する方法(3)の3つとした。(1)では胸鎖乳突筋の上端から52~66%の範囲に交点が集中していた。これは胸鎖乳突筋切断時に上端から2/3より下方で切断すれば、損傷のリスクの低減が可能であると考えられる。(2)では舌骨体中心の位置から下方に約35mmの地点、距離の割合で52.0±10.8%に頸神経ワナの下端が存在することを示した。これも切断リスクの低下に役立つと考えられる。(3)は頸神経ワナの位置を触診で推定できる利点があり、分岐点の下方、約40~64mmの範囲に頸神経ワナのループの下端が存在していた。これらの結果を併用することで、頸部郭清時の頸神経ワナ切断のリスクを低下させ、患者のQOL向上に役立つと考えられる。