AbstractHLA-DRB1の直系遺伝子であるCaja-DRBを含むCaja遺伝子にて、次世代シークエンシング(NGS)によるDNAタイピング法を開発し、Caja領域におけるハプロタイプ(Hp)構造を明らかにしつつある。具体的には、45個体のRNAサンプルを用い、Caja遺伝子の翻訳領域におけるRT-PCR、PCR産物のサブクローニング・サンガーシークエンシング(サブクローニング)法により、Cajaアリル配列を得た。用PCRプライマーを再設計した。systemを用いたアンプリコンシークエンシング法により塩基配列を決定し、サブクローニング法による結果と比較することによりNGS法の有用性を評価した。サブクローニング法では1個体あたり5~15種類のCajaクラスI配列が検出されたのに対して、NGS法では1個体あたり11~17種類が検出された。Hpが推定され、ハプロイドあたり2~7個の発現Caja-G遺伝子が検出された。以上の結果より、本研究にて開発したDNAタイピング法は、移植研究の際のドナーとレシピエントの選抜やMHC情報付加マーモセットの系統化などに有用であると考えられた。野生型の母親に形成されたGFPトランスジェニック・コモンマーモセット胎盤をGFPの発現を指標に解析したところ、母体と胎仔の組織を識別可能である事が明らかとなった。この方法を用いてマイクロキメリズムの程度を推定可能であるとともに、胎盤における発現解析も可能となると考えられる。Activity今後は10家系、計40個体の多型解析を行い、これまでに得られた血縁個体や非血縁個体を含む計45個体を含めて各MHC遺伝子の多型性やMHCハプロタイプ構造を明らかにする。(MLC)を行い、MHCハプロタイプ間の相違を見いだす。解析を行い、これら遺伝子の機能を明らかにすることを目指す。