NaCl生理食塩水で至適濃度に希釈し、腹腔内に投与する。24時間後、ヒト臍帯血由来CD34+造血幹細胞を5x104個、尾静脈より移植する。移植後、8週、12週、16週間後に、採血し、蛍光標識抗ヒト抗体で染色した後、フローサイトメトリーで解析を行う。Busulfan投与群では、一時的に体重増加が停滞した後、徐々に体重の増加が認められる。Busulfan投与群は、体重の減少が認められ、3週間以内に全個体が死亡した。Busulfan投与を至適投与量とした。8週・12週・16週目にイソフルラン麻酔下で採血し、抗ヒトCD45抗体を用いてヒト白血球を染色後、フローサイトメトリーにて解析した。Busulfan投与群ともに、同程度のヒト白血球の生着が認められた。8週・12週・16週目にイソフルラン麻酔下で採血し、各種抗ヒト抗体を用いてヒト細胞を染色後、フローサイトメトリーにて解析した。Myeloid細胞の分化が認められた。細胞は、X線照射に比べて緩やかに分化し、一方でヒトB細胞の割合が亢進した。従来のX線照射による骨髄抑制方法と同様に、Busulfan処置によってもヒト造血幹細胞が同等に生着し、各種ヒト免疫細胞分化が認められた。X線照射に比べ、T細胞分化の遅延とB細胞分化の亢進が認められた。31(2):253-64)とほぼ同様であった。以上の結果から、Busulfan処置がX線照射の代替法としてヒト化マウス作製に利用できることが明らかとなった。